科技探索之路　基础理论和技术的发展催生了基因工程 (2)(精品).ppt

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1、基因工程基因工程重组重组DNADNA分子的模拟操作分子的模拟操作一、基一、基因工程的基本工具因工程的基本工具二、限二、限制酶有什么特点？制酶有什么特点？磷酸二酯键磷酸二酯键三、限三、限制酶切割制酶切割DNADNA分子后，分子后，形成了什么结果？形成了什么结果？限制酶切割限制酶切割DNADNA分子后所形成的分子后所形成的两个黏性末端有什么特点？两个黏性末端有什么特点？相同且互补相同且互补一个一个DNADNA分子被切断，形成两个分子被切断，形成两个DNADNA片段。每个片段。每个DNADNA片段有一个黏片段有一个黏性末端或平末端。性末端或平末端。DNA连连接接酶酶能能连连接什么化学接什么化学键键？

2、磷酸二磷酸二酯键酯键四、四、五、载体中最常用的是哪一种？五、载体中最常用的是哪一种？它的化学本质是什么？它的化学本质是什么？质粒质粒小型环状小型环状DNADNA分子分子 重组重组DNADNA分子的模拟操作分子的模拟操作目的要求：目的要求：模拟重组模拟重组DNA分子的分子的 操作过程，说出其基本原理。操作过程，说出其基本原理。材料用具：材料用具：两种颜色的硬纸板，两种颜色的硬纸板，剪刀（代表剪刀（代表EcoR），），透明胶条（代表透明胶条（代表DNA连接酶）连接酶）方法步骤方法步骤1、选选两种两种颜颜色的等色的等宽宽硬硬纸纸板，如板，如绿绿色色和粉和粉红红色色纸纸板。在板。在绿绿硬硬纸纸板上依次

3、等距板上依次等距离写上下列字母（字母要清晰、工整）：离写上下列字母（字母要清晰、工整）：ATAGCATGCTATCCATGAATTCGGCATACTATCGTACGATAGGTACTTAAGCCGTATG在粉在粉红红色硬色硬纸纸板上依次等距离写上下板上依次等距离写上下列字母：列字母：TCCTAGAATTCTCGGTATGAATTCCATACAGGATCTTAAGAGCCATACTTAAGGTATG2、用剪刀（代表、用剪刀（代表EcoRI）进进行行DNA“切割切割”。先分。先分别别从两从两块块硬硬纸纸板上的一条板上的一条DNA链链上找出上找出G-A-A-T-T-C序列，并序列，并选选G-A之之间

4、间作切口作切口进进行行“切割切割”，然后再从另一条，然后再从另一条链链上上互互补补的碱基之的碱基之间寻间寻找找EcoRI相相应应的的切口剪开。切口剪开。方法步骤方法步骤3、待、待绿绿、粉、粉红红两色硬两色硬纸纸板上的切板上的切割位点全部切开后，将粉割位点全部切开后，将粉红红色色纸纸板板上的上的DNA片段，重片段，重组组到到绿绿色硬色硬纸纸板板的切口的切口处处。此。此时时用不干胶（代表用不干胶（代表DNA连连接接酶酶）将切口黏）将切口黏结结起来。起来。这这样样你就完成了一个重你就完成了一个重组组DNA分子的分子的模模拟拟制作。制作。方法步骤方法步骤思考与讨论思考与讨论请请按真按真实实操作操作过过

5、程思考一下：程思考一下：1、你模、你模拟拟插入的插入的DNA片段能称得上片段能称得上一个基因一个基因吗吗？2、如果你操作失、如果你操作失误误，碱基不能配，碱基不能配对对，可能是什么原因造成的？可能是什么原因造成的？不能。因为基因一般有上千个不能。因为基因一般有上千个碱基对。碱基对。可能是剪切位点或连接位点选得可能是剪切位点或连接位点选得不对。不对。进进一步模一步模拟拟操作操作如果你有如果你有兴兴趣，可自制有趣，可自制有SmaI切割位点的切割位点的纸纸板，然后按上述板，然后按上述步步骤骤剪切和剪切和连连接，制成一个新接，制成一个新的重的重组组DNA分子。分子。思考与探究思考与探究1、限制、限制酶酶在在DNA的任何部位都能将的任何部位都能将DNA切开切开吗吗？以下是四中不同限制？以下是四中不同限制酶酶切割形成切割形成的的DNA片段：片段：你能用你能用DNA连连接接酶酶将它将它们连们连接起来接起来吗吗？和能和能连连接形成接形成；和能和能连连接形成；接形成；和能和能连连接形成；接形成；和能和能连连接形成；接形成；(1)(5)(2)(7)(3)(6)(4)(8)CTGCAGGACGTCACGTTGCAGCGCCGCGGAATTCCTTAAG就到这里！就到这里！谢谢大家！谢谢大家！下课啦！下课啦！休息！休息！休息！休息！