高中生物DNA和蛋白质技术52多聚酶链式反应扩增DNA片段ppt课件1新人教版选修.ppt
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1、一、基础知识(一)DNA分子的结构一、基础知识1、组成元素(一)DNA分子的结构一、基础知识C、H、O、N、P1、组成元素(一)DNA分子的结构一、基础知识C、H、O、N、P1、组成元素2、基本单位(一)DNA分子的结构一、基础知识C、H、O、N、P1、组成元素脱氧核苷酸2、基本单位(一)DNA分子的结构一、基础知识C、H、O、N、P1、组成元素脱氧核苷酸2、基本单位3、脱氧核苷酸结构(一)DNA分子的结构OOPOHO碱基OOHOOPOHOOH碱基5335碱基脱氧核糖磷酸基团碱基脱氧核糖碱基脱氧核糖53多脱氧核苷酸链结构简图连 接 ATGC连 接 ATGC5 5 端含磷酸基团端含磷酸基团3 3
2、端(含羟基)端(含羟基)连 接 ATGCATGC5 5 端含磷酸基团端含磷酸基团3 3端(含羟基)端(含羟基)连 接 ATGCATGC5 5 端含磷酸基团端含磷酸基团3 3端(含羟基)端(含羟基)3 3端端5 5端端4、DNA分子的双螺旋结构4、DNA分子的双螺旋结构 DNA分子是由两条反向平行的脱氧核苷酸长链(即一条链为35,另一条链为53)盘旋而成的规则双螺旋结构。4、DNA分子的双螺旋结构脱氧核糖与磷酸交替连接,排列在外侧,构成基本骨架;碱基排列在链的内侧。DNA分子是由两条反向平行的脱氧核苷酸长链(即一条链为35,另一条链为53)盘旋而成的规则双螺旋结构。两条链上的碱基通过氢键连接起来
3、,形成碱基对。碱基对的组成有特定的规律:即腺嘌呤一定与胸腺嘧啶配对,鸟嘌呤一定同胞嘧啶配对。4、DNA分子的双螺旋结构(二)DNA的复制2、时期3、场所1、概念2、时期1、概念由一个DNA形成两个完全相同的DNA的过程(二)DNA的复制3、场所2、时期有丝分裂间期、减数第一次分裂前的间期1、概念由一个DNA形成两个完全相同的DNA的过程(二)DNA的复制3、场所2、时期3、场所细胞核(主)、线粒体、叶绿体1、概念由一个DNA形成两个完全相同的DNA的过程(二)DNA的复制有丝分裂间期、减数第一次分裂前的间期5、原料6、基本条件4、模板5、原料6、基本条件4、模板DNA母链5、原料脱氧核苷酸6、
4、基本条件4、模板DNA母链5、原料脱氧核苷酸6、基本条件酶、ATP、原料、模板4、模板DNA母链7、复制过程7、复制过程 DNA的解旋7、复制过程 DNA的解旋亲代DNA分子利用细胞提供的能量在解旋酶的作用下氢键断裂,部分双螺旋链解旋为两条平行的双链DNA聚合酶的特性DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,而只能从3端延伸DNA链。因此,DNA复制需要引物。RNA引物的合成 RNA引物的合成以DNA单链为模板,在引物酶的作用下合成小段的RNA引物 RNA引物的合成 DNA的生成以DNA单链为模板,在引物酶的作用下合成小段的RNA引物 RNA引物的合成以DNA单链为模板,在引物酶的作用下合成小段的R
5、NA引物 DNA的生成以DNA单链为模板,在DNA聚合酶的作用下,在RNA引物的末端由5端3端合成DNA。DNA合成的方向 子链由5 端向 3端延伸思考:DNA复制的前提是什么?体外扩增DNA 如何打开双链?DNA复制的前提是_;用_方法思考:DNA复制的前提是什么?体外扩增DNA 如何打开双链?DNA复制的前提是_;用_方法思考:DNA复制的前提是什么?体外扩增DNA 如何打开双链?双链的解开DNA复制的前提是_;用_方法思考:DNA复制的前提是什么?体外扩增DNA 如何打开双链?双链的解开控制温度DNA 分子的热变性原理:DNA双链单链DNA 分子的热变性原理:DNA双链单链复性(缓慢冷却
6、)DNA 分子的热变性原理:变性(加热80-100)DNA双链单链复性(缓慢冷却)变性的目的:复性的目的:DNA 分子的热变性原理:变性(加热80-100)DNA双链单链复性(缓慢冷却)变性的目的:复性的目的:解开双链有利于引物和引物与两条单链的结合DNA 分子的热变性原理:变性(加热80-100)思考:高温使DNA解旋,但普通DNA聚合酶会失活,_找到耐高温DNA聚合酶。思考:高温使DNA解旋,但普通DNA聚合酶会失活,_找到耐高温DNA聚合酶。托马斯.布鲁克体外DNA复制的条件(PCR 反应的条件)DNA模板;分别与两条模板链相结合的两种引物;四种脱氧核苷酸;耐高温的聚合酶;控制温度,但不
7、需解旋酶。体外DNA复制的条件(PCR 反应的条件)(三)PCR的反应过程1、PCR的反应步骤1、PCR的反应步骤PCR一般经历三十多次循环,每次循环可以分为三个基本步骤变性、复性和延伸(三)PCR的反应过程变性(模板DNA解旋)模板DNA加热至900C以上时,模板DNA双链解离,成为单链。2、循环过程靶序列靶序列靶序列靶序列PCR 循环第一步:加热变性复性(退火)温度下降到50左右,两种引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。PCR 循环第二步:引物与靶序列退火延伸温度上升到72,在TaqDNA聚合酶的作用下,以脱氧核苷酸为原料,以母链为模板,按碱基互补配对的原则,合成一条新的DNA链PCR
8、 循环第三步:引物延伸靶序列靶序列 靶序列靶序列第1个 PCR 循环完成后:得到两个拷贝的靶序列95变性(1)PCR循环变性(1)PCR循环变性95变性95变性(1)PCR循环变性55复性(2)PCR循环复性(3)PCR循环延伸(3)PCR循环延伸(3)PCR循环延伸(3)PCR循环延伸循环循环次数次数DNA数量数量12320303、30次循环后靶序列扩增的数量循环循环次数次数DNA数量数量122438201,048,576301,073,741,8243、30次循环后靶序列扩增的数量4、循环特点:4、循环特点:上一次循环的产物为下一循环的模板结果单链中有最初母链的只两条(无引物存在)其它子代
9、DNA分子都为双引物分子处于两引物之间的DNA序列呈指数增长12N部编本语文,部编本初中语文,部编本小学语文,部编本语文课件,部编本语文试卷,小学语文,小学数学,小学英语,小学试卷小学英语试卷,小学数学试卷,小学英语试卷,初中语文数学化学,政治历史,科学课件,试卷温:语文教材的总主编和主要编写人员是全国申报遴选、教育部聘任的,编写组主要由三部分人组成,一是学科专家,包括一些大学教授、作家和诗人,二是优秀的教研员和教师,三是人教社的编辑。前后参加编写组的有60多人,另外还有外围的各学科的咨询专家、学者,人数就更多了。“部编本”语文教材的编写从2012年3月8日正式启动,到现在4年多了。以往教材编
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