《痰液脱落细胞检查》PPT课件.ppt
《《痰液脱落细胞检查》PPT课件.ppt》由会员分享,可在线阅读,更多相关《《痰液脱落细胞检查》PPT课件.ppt(139页珍藏版)》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。
1、第六章第六章 细胞病理学诊断工作相关技术细胞病理学诊断工作相关技术指南指南第一节第一节 痰液脱落细胞病理学检查痰液脱落细胞病理学检查一、目的 是通过检查痰液中脱落的细胞形态学改变来检是通过检查痰液中脱落的细胞形态学改变来检查呼吸道及肺部病变的一种细胞病理学方法。查呼吸道及肺部病变的一种细胞病理学方法。检查具有非损伤性、非介入性且经济、方便、检查具有非损伤性、非介入性且经济、方便、特异性高等优点,与其它部位的细胞病理学检特异性高等优点,与其它部位的细胞病理学检查不同的是痰液细胞病理学检查主要是检出恶查不同的是痰液细胞病理学检查主要是检出恶性肿瘤细胞(癌细胞),而对癌前病变检查无性肿瘤细胞(癌细胞
2、),而对癌前病变检查无意义。意义。采集痰液的方法和质量直接影响痰检查阳性率,采集痰液的方法和质量直接影响痰检查阳性率,采集痰液分析基本要求是:采集痰液分析基本要求是:痰液必须是从肺部咳出;痰液必须是从肺部咳出;痰液必须新鲜;痰液必须新鲜;对首次痰检查患者,应亲自指导和观察患者对首次痰检查患者,应亲自指导和观察患者咳痰。咳痰。痰液检查痰液检查 v来源:来源:肺泡、支气管、气管所产生的分泌物肺泡、支气管、气管所产生的分泌物v目的目的:辅助诊断:支气管哮喘、支气管扩张辅助诊断:支气管哮喘、支气管扩张 确诊:肺结核、肺癌确诊:肺结核、肺癌 观察疗效和预后判断观察疗效和预后判断对原发肺癌的敏感性可达对原
3、发肺癌的敏感性可达60%-80%,特异性,特异性达到达到100%。二、方法学二、方法学(一)标本准备(一)标本准备1、咳痰、咳痰v建议用晨痰,涮牙、嗽口后进行,深咳。建议用晨痰,涮牙、嗽口后进行,深咳。v有条件者可采用雾化吸入后诱咳采痰。有条件者可采用雾化吸入后诱咳采痰。v纤维支气管镜检后咳取痰液能提高阳性率。纤维支气管镜检后咳取痰液能提高阳性率。2、采集、采集v一次咳痰建议留取一次咳痰建议留取3-5口痰液。口痰液。v存放标本的容器必须是无吸水性的干燥塑料或玻存放标本的容器必须是无吸水性的干燥塑料或玻璃器皿璃器皿,须有盖子密封须有盖子密封,标签明确,标签应记录相关标签明确,标签应记录相关内容内
4、容,包括姓名、门诊号(住院号)、送检时间等。包括姓名、门诊号(住院号)、送检时间等。v二种标准的送检方法:二种标准的送检方法:每日一次,连续三天送检,每天制片。每日一次,连续三天送检,每天制片。每日一次,连续三天,每天收集后先预固定,一次每日一次,连续三天,每天收集后先预固定,一次性提取细胞成份后离心沉渣涂片或制成细胞蜡块性提取细胞成份后离心沉渣涂片或制成细胞蜡块(CB)。)。3、送检:、送检:原则上留取后立即送检,保持标本新原则上留取后立即送检,保持标本新鲜;一般夏天存放时间应鲜;一般夏天存放时间应2小时,冬天小时,冬天4小时,如确有困难或须做沉渣切片则可以预小时,如确有困难或须做沉渣切片则
5、可以预固定后放置冰箱内冷藏,但不宜固定后放置冰箱内冷藏,但不宜5天。天。4、接收:、接收:核对送检单与样本盒(瓶)上的相关核对送检单与样本盒(瓶)上的相关信息,一致后签收标本,若信息不一致则需信息,一致后签收标本,若信息不一致则需重新与相关人员、科室核对,标本的签收制重新与相关人员、科室核对,标本的签收制度必须严格按规定执行。度必须严格按规定执行。注意事项:注意事项:l留痰:先漱口,取深部痰液。留痰:先漱口,取深部痰液。l查查24小时痰量和分层检查:无色广口瓶。小时痰量和分层检查:无色广口瓶。细菌学检查:无菌容器,及时送检。细菌学检查:无菌容器,及时送检。细胞学检查:细胞学检查:3-5口(约口
6、(约5ml),或上午或上午9-10时新鲜痰液。时新鲜痰液。无痰或痰少患者:化痰药无痰或痰少患者:化痰药(雾化吸入法雾化吸入法)。昏迷患者:清理口腔,负压吸引法吸痰。昏迷患者:清理口腔,负压吸引法吸痰。幼儿:棉拭刺激喉部,棉拭刮取。幼儿:棉拭刺激喉部,棉拭刮取。纤维支气管镜检查:直接病灶采集。纤维支气管镜检查:直接病灶采集。l痰标本应尽快涂片,在室温下,可以保存痰标本应尽快涂片,在室温下,可以保存24小时,在冰箱内可保存两天;痰液量一般以小时,在冰箱内可保存两天;痰液量一般以3ml-5ml(3-5口痰口痰)为宜;为宜;l采痰时应采用内面涂蜡的痰盒,可防止痰液采痰时应采用内面涂蜡的痰盒,可防止痰液
7、被吸收而难于挑痰制片;被吸收而难于挑痰制片;l采集痰标本没有禁忌证,但如果病人在行支采集痰标本没有禁忌证,但如果病人在行支气管镜检查之后,立即进行痰细胞学检查,气管镜检查之后,立即进行痰细胞学检查,往往会混有一些嗜酸性的细胞碎片和炎性细往往会混有一些嗜酸性的细胞碎片和炎性细胞,而误认为高分化鳞癌。最好在支气管镜胞,而误认为高分化鳞癌。最好在支气管镜检查检查510天后再行痰细胞学检查。天后再行痰细胞学检查。(二)制片(二)制片1、标本取样、标本取样(1)大体观察:)大体观察:量:量:无或少量,呼吸道粘膜和肺泡受刺激时增多。无或少量,呼吸道粘膜和肺泡受刺激时增多。颜色颜色:正常:无色或灰白色,正常
8、:无色或灰白色,病理情况有以下变化:病理情况有以下变化:水样痰:黏液少,呈水样,常有泡沫。水样痰:黏液少,呈水样,常有泡沫。灰白色黏液痰:黏液丰富,胶样。灰白色黏液痰:黏液丰富,胶样。红色或棕红色:含血液或血红蛋白红色或棕红色:含血液或血红蛋白 血性痰血性痰:血液量多,肺癌、肺结核、支气管扩张血液量多,肺癌、肺结核、支气管扩张 粉红色泡沫样粉红色泡沫样:急性肺水肿急性肺水肿 铁锈色铁锈色:大叶性肺炎大叶性肺炎,肺梗死肺梗死 黄色脓痰黄色脓痰:呼吸道化脓性感染,化脓性支气管炎呼吸道化脓性感染,化脓性支气管炎,肺结核肺结核;黄绿色黄绿色:绿脓杆菌绿脓杆菌,干酪性肺炎干酪性肺炎 烂桃样灰黄色烂桃样灰
9、黄色:肺吸虫病肺吸虫病;棕褐色棕褐色:阿米巴肺脓肿、慢性充血性心衰肺淤血阿米巴肺脓肿、慢性充血性心衰肺淤血 黑色黑色:煤矿煤矿,锅炉工人或大量吸烟者锅炉工人或大量吸烟者 性状性状:粘液痰:粘液痰:多见于慢性支气管炎的缓解期、支气管哮喘或肺癌病例。痰液多见于慢性支气管炎的缓解期、支气管哮喘或肺癌病例。痰液透明、无色、粘稠,用镊子牵拉时,往往可拉成很长的细丝。如果其中透明、无色、粘稠,用镊子牵拉时,往往可拉成很长的细丝。如果其中有乳白色的颗粒状物,往往提示有肺癌的可能,必须取这部分痰液做涂有乳白色的颗粒状物,往往提示有肺癌的可能,必须取这部分痰液做涂片检查。片检查。粘液脓性痰:粘液脓性痰:是在粘液
10、痰的基础上混有一部分脓液。检查时必须仔细挑是在粘液痰的基础上混有一部分脓液。检查时必须仔细挑选粘液丝的部分做细胞学检查,以提高癌细胞检查的阳性率。选粘液丝的部分做细胞学检查,以提高癌细胞检查的阳性率。脓性痰:脓性痰:为黄色或黄绿色的粘痰,因细菌种类的不同,痰的粘稠度和颜为黄色或黄绿色的粘痰,因细菌种类的不同,痰的粘稠度和颜色可有不同。常见于气管、支气管和肺化脓性感染。其中有大量中性粒色可有不同。常见于气管、支气管和肺化脓性感染。其中有大量中性粒细胞和核碎片。对这种痰最好经抗感染治疗后再送检,以取得较好的结细胞和核碎片。对这种痰最好经抗感染治疗后再送检,以取得较好的结果。果。泡沫痰:泡沫痰:即痰
11、呈泡沫状,此种痰应在除去泡沫后,采取其中的粘液丝做即痰呈泡沫状,此种痰应在除去泡沫后,采取其中的粘液丝做涂片检查。涂片检查。血丝痰:血丝痰:即痰内带有少量的血液,这是支气管黏膜某个局部小血管破裂即痰内带有少量的血液,这是支气管黏膜某个局部小血管破裂出血或肺泡内出血所致。常见于肺癌或支气管结核,有时也见于支气管出血或肺泡内出血所致。常见于肺癌或支气管结核,有时也见于支气管炎。为了明确出血的原因,应将带血丝的及其附近部分的痰全部制成涂炎。为了明确出血的原因,应将带血丝的及其附近部分的痰全部制成涂片,进行检查。片,进行检查。气味气味:正常无特殊气味正常无特殊气味,血腥味血腥味(血性痰血性痰),恶臭恶
12、臭(合并厌氧感染合并厌氧感染),特殊臭味特殊臭味(晚期肺癌晚期肺癌)(2)取样:)取样:选择性取有价值的部分选择性取有价值的部分 用镊子、竹签等无吸水性材料夹取用镊子、竹签等无吸水性材料夹取,不主张不主张用玻璃制品、棉签等取样。用玻璃制品、棉签等取样。原则上优先选取以下部位:原则上优先选取以下部位:含血丝粘液痰。含血丝粘液痰。灰白色豆渣样痰丝(形似白色细线)。灰白色豆渣样痰丝(形似白色细线)。透明粘液丝丰富处。透明粘液丝丰富处。血液与粘液交界处痰液。血液与粘液交界处痰液。黏液丰富的样本与水样样本应注意区别取样黏液丰富的样本与水样样本应注意区别取样的痰液量,一般情况下后者的取样量应多于的痰液量,
13、一般情况下后者的取样量应多于前者。前者。2、制片、制片普通涂片:普通涂片:直接涂片:用镊子或竹签直接涂抹在玻片上,尽直接涂片:用镊子或竹签直接涂抹在玻片上,尽量分开粘液丝及血性部份,做到相对均匀,涂片面量分开粘液丝及血性部份,做到相对均匀,涂片面积应超过玻片空白部位的三分之二,其优点是粘液积应超过玻片空白部位的三分之二,其优点是粘液丝分布明显,病变细胞相对集中,缺点是涂片厚薄丝分布明显,病变细胞相对集中,缺点是涂片厚薄不匀、重叠现象多见而影响观察及封片,一般一次不匀、重叠现象多见而影响观察及封片,一般一次制片二张以上。制片二张以上。压拉涂片:将取样的标本置于一张玻片上后另一压拉涂片:将取样的标
14、本置于一张玻片上后另一张玻片正面朝下压拉下一张玻片,多次推拉、挤压张玻片正面朝下压拉下一张玻片,多次推拉、挤压均匀后二边分开得到二张涂片;优点是相对厚薄均均匀后二边分开得到二张涂片;优点是相对厚薄均匀,但可能细胞挤压分散,镜下沿粘液丝查找的线匀,但可能细胞挤压分散,镜下沿粘液丝查找的线索相对不明显。索相对不明显。液基制片:液基制片:是指通过标本的预处理后先把痰液的是指通过标本的预处理后先把痰液的粘液溶解、液化且细胞固定后再通过一定的技术手粘液溶解、液化且细胞固定后再通过一定的技术手段把细胞成分转移到玻片上的制片方法,制作过程段把细胞成分转移到玻片上的制片方法,制作过程等同一般的液基片,然应注意
15、标本预处理中以下方等同一般的液基片,然应注意标本预处理中以下方面。面。v选取的痰液样本量通常为一张普通制片痰液量的选取的痰液样本量通常为一张普通制片痰液量的3-5倍。倍。v在清洗、固定作用的保存液内存放在清洗、固定作用的保存液内存放15分钟以上,保分钟以上,保存液各厂家不尽相同,但主要的成份类似:酒精、存液各厂家不尽相同,但主要的成份类似:酒精、甲醛、甲醇等。甲醛、甲醇等。v1,4-二硫苏糖醇(二硫苏糖醇(DTT)液消化粘液:用清洗液加)液消化粘液:用清洗液加10%的的DTT粉剂配制成粉剂配制成DTT液加入到保存液中液加入到保存液中1-2ml,震荡震荡10分钟以上,即可完全溶解保存液中的粘分钟
16、以上,即可完全溶解保存液中的粘液,使标本完全液体化。液,使标本完全液体化。沉渣涂片或细胞蜡块制作:沉渣涂片或细胞蜡块制作:v需要较大的样本量,通常是用三天的咳痰量需要较大的样本量,通常是用三天的咳痰量混合在一起制作取样,须注意标本的预固定混合在一起制作取样,须注意标本的预固定及适当的保存。及适当的保存。v标本需作液化、离心沉淀预处理(同前)。标本需作液化、离心沉淀预处理(同前)。v沉淀后细胞量少作涂片用,沉淀后细胞量少作涂片用,3-5张;沉淀后细张;沉淀后细胞丰富者作细胞蜡块。胞丰富者作细胞蜡块。v普查、科研等情况下应用较多,因其样本量普查、科研等情况下应用较多,因其样本量大也可进一步应用分子
17、、免疫等新技术。大也可进一步应用分子、免疫等新技术。3、制片的质量控制、制片的质量控制v 样本的选取:直接关系到检查的阳性率,样本的选取:直接关系到检查的阳性率,多次检查多张涂片结果的前后一致性应大于多次检查多张涂片结果的前后一致性应大于80%以上。以上。v 涂片应相对均匀,重叠部份面积涂片应相对均匀,重叠部份面积20%,涂片部分面积应大于玻片面积三分之二以上,涂片部分面积应大于玻片面积三分之二以上,合格涂片比例应合格涂片比例应80%。(三)固定(三)固定 必须采用必须采用湿固定湿固定,即制片后立即固定,一旦固定不,即制片后立即固定,一旦固定不及时,涂片在空气中干燥后,细胞的形态特征将明及时,
18、涂片在空气中干燥后,细胞的形态特征将明显受损,所以及时的固定非常重要。显受损,所以及时的固定非常重要。一般要求制片后立即固定,通常一般要求制片后立即固定,通常5秒钟。秒钟。固定时间涂片固定时间涂片15分钟,细胞蜡块分钟,细胞蜡块30分钟。分钟。固定液:为常规固定液。固定液:为常规固定液。垂直快速放入或自由落体放入固定液,否则会出现细胞垂直快速放入或自由落体放入固定液,否则会出现细胞堆积而引起皱折现象。堆积而引起皱折现象。必须注意固定液的及时更换。必须注意固定液的及时更换。固定槽内多个样本同时放置要杜绝相互间的交叉污染。固定槽内多个样本同时放置要杜绝相互间的交叉污染。(四)染色(四)染色痰液脱落
19、细胞病理学检查的常规染色方法痰液脱落细胞病理学检查的常规染色方法是是H.E染色和巴氏染色染色和巴氏染色,特殊需要时也可使特殊需要时也可使用抗酸染色,用抗酸染色,(五)透明及封片(五)透明及封片为保存痰液中细胞结构清晰,涂片染色脱为保存痰液中细胞结构清晰,涂片染色脱水后必须经二甲苯透明及中性树胶封固。水后必须经二甲苯透明及中性树胶封固。(六)痰液标本的安全管理与院感控制(六)痰液标本的安全管理与院感控制 痰液样本因常常伴随特异性感染,并且需开放性处痰液样本因常常伴随特异性感染,并且需开放性处理,因此其实验室的安全管理及院感控制必须引起理,因此其实验室的安全管理及院感控制必须引起重视。重视。v必须
20、使用密闭性器皿来存放标本。必须使用密闭性器皿来存放标本。v制片操作人员必须带口罩、帽子等隔离措施。制片操作人员必须带口罩、帽子等隔离措施。v有条件单位对痰液样本在制片前可进行预消毒有条件单位对痰液样本在制片前可进行预消毒固定处理固定处理,常用预固定液为常用预固定液为2%聚乙二醇和聚乙二醇和50%乙醇混合。乙醇混合。v 每日一次空气、环境的紫外线消毒,并记录每日一次空气、环境的紫外线消毒,并记录时间,定期检测紫外灯管的紫外线强度。时间,定期检测紫外灯管的紫外线强度。v残留样本及盛具统一残留样本及盛具统一1%过氧乙酸液消毒处理过氧乙酸液消毒处理,统一存放专用医疗垃圾袋后处理,处理标本过统一存放专用
21、医疗垃圾袋后处理,处理标本过程中产生的相关污染液体经专用医用污水管道程中产生的相关污染液体经专用医用污水管道排放。排放。其配制方法:其配制方法:10g聚乙二醇聚乙二醇(熔点为熔点为43-46)在在50-100的温箱中溶化后倒入的温箱中溶化后倒入500ml 50%乙醇液中混匀乙醇液中混匀成聚乙二醇溶解液备用成聚乙二醇溶解液备用(此液不会凝固此液不会凝固).。1升升2%聚乙二醇和聚乙二醇和50%乙醇溶解混合液组成乙醇溶解混合液组成配方为:配方为:水水 437ml 95%乙醇液乙醇液 526ml 聚乙二醇乙醇液聚乙二醇乙醇液 40ml(七)分子病理学技术在痰液样本中的应用(七)分子病理学技术在痰液样
22、本中的应用 痰液细胞学样本分子病理学检测尽管临床应痰液细胞学样本分子病理学检测尽管临床应用较少,但在科研、专项普查等领域则经常用较少,但在科研、专项普查等领域则经常开展,应用最多的是通过开展,应用最多的是通过PCR或原位杂交技或原位杂交技术检测上皮细胞的以下项目:术检测上皮细胞的以下项目:v端粒及端粒酶检测端粒及端粒酶检测vP16基因甲基化检测基因甲基化检测v异源核糖核蛋白异源核糖核蛋白A2及其异构体及其异构体vP53基因基因vEGFR相关基因等相关基因等痰液检查痰液检查镜检:镜检:观察有形成分的种类、数量、形态变化观察有形成分的种类、数量、形态变化 1、白细胞:正常少量、白细胞:正常少量 2
23、、中性粒细胞、中性粒细胞/脓细胞脓细胞:化脓性炎症或有混合感染:化脓性炎症或有混合感染 3、嗜酸性粒细胞、嗜酸性粒细胞:支气管哮喘、过敏性支气管炎、:支气管哮喘、过敏性支气管炎、肺吸虫病等肺吸虫病等 4、淋巴细胞、淋巴细胞:肺结核病:肺结核病 5、红细胞:正常无、红细胞:正常无 6、呼吸道疾病、出血性疾病(镜检、呼吸道疾病、出血性疾病(镜检/隐血试验)隐血试验)痰液检查痰液检查7、上皮细胞:正常少量、上皮细胞:正常少量 炎症炎症/其它呼吸系统疾病时大量增加其它呼吸系统疾病时大量增加8、肺泡巨噬细胞:、肺泡巨噬细胞:炭末细胞:吞噬炭粒(炭末沉着症及大量烟尘吸入者)炭末细胞:吞噬炭粒(炭末沉着症及
24、大量烟尘吸入者)含铁血黄素细胞含铁血黄素细胞/心力衰竭细胞:吞噬含铁血黄素心力衰竭细胞:吞噬含铁血黄素 心力衰竭引起的肺淤血、肺梗死、肺出血心力衰竭引起的肺淤血、肺梗死、肺出血9、硫磺样颗粒:黄色小颗粒,放线菌病、硫磺样颗粒:黄色小颗粒,放线菌病 压平可见菌丝放射状排列呈菊花形压平可见菌丝放射状排列呈菊花形(放线菌放线菌)10、寄生虫及虫卵、寄生虫及虫卵 肺吸虫卵:肺吸虫病肺吸虫卵:肺吸虫病 溶组织阿米巴滋养体:阿米巴肺脓肿溶组织阿米巴滋养体:阿米巴肺脓肿/阿米巴肝脓肿入肺阿米巴肝脓肿入肺痰液检查痰液检查镜检镜检 染色染色:脱落细胞:肺部咳出,标本新鲜,一小时内固定脱落细胞:肺部咳出,标本新鲜
25、,一小时内固定 巴氏巴氏(papanicolaou)染色、染色、苏木素苏木素-伊红伊红(H-E)染色染色 细菌学涂片检查:细菌学涂片检查:革兰革兰(Gram)染色:检测细菌、真菌染色:检测细菌、真菌 抗酸染色:检测结核杆菌抗酸染色:检测结核杆菌 荧光染色:检测真菌、支原体荧光染色:检测真菌、支原体 镜检前的准备及镜检规范:镜检前的准备及镜检规范:镜检内容镜检内容1、标本满意度评估:、标本满意度评估:在满意标本的前提下检查的样本才具有可信性,才可保证检在满意标本的前提下检查的样本才具有可信性,才可保证检查的敏感性与特异性。查的敏感性与特异性。满意样本的要求:满意样本的要求:合格的申请单,有详细的
- 配套讲稿:
如PPT文件的首页显示word图标,表示该PPT已包含配套word讲稿。双击word图标可打开word文档。
- 特殊限制:
部分文档作品中含有的国旗、国徽等图片,仅作为作品整体效果示例展示,禁止商用。设计者仅对作品中独创性部分享有著作权。
- 关 键 词:
- 痰液脱落细胞检查 脱落 细胞 检查 PPT 课件
限制150内