2015高中生物专题5课题1DNA的粗提取与鉴定课件新人教版选修1.ppt

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1、课题目标课题目标本课题通过尝试对植物或动物组织中的本课题通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提进行粗提取，了解取，了解DNA的物理化学性质，理解的物理化学性质，理解DNA粗提取以粗提取以及及DNA鉴定的原理。鉴定的原理。课题重点与难点课题重点与难点课题重点：课题重点：DNA的粗提取和鉴定方法。的粗提取和鉴定方法。课题难点：课题难点：DNA的粗提取和鉴定方法。的粗提取和鉴定方法。基础知识基础知识 知识要点：知识要点：1.DNA的物理化学性质，尤其是的物理化学性质，尤其是DNA的溶解性；的溶解性；2.二苯胺法鉴定二苯胺法鉴定DNA的方法和原理。的方法和原理。1为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂？

2、为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂？答：蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体，水分可以大量答：蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体，水分可以大量进入血细胞内，使血细胞胀裂，再加上搅拌的机械作用，就加进入血细胞内，使血细胞胀裂，再加上搅拌的机械作用，就加速了鸡血细胞的破裂速了鸡血细胞的破裂(细胞膜和核膜的破裂细胞膜和核膜的破裂)，从而释放出，从而释放出DNA。2加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么？加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么？答：洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜，有利于答：洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜，有利于DNA的释放；食盐的主要成分是的释放；食盐的主要成分是NaCl，有利于，有利

3、于DNA的溶解。的溶解。3如果研磨不充分，会对实验结果产生怎样的影响？如果研磨不充分，会对实验结果产生怎样的影响？答：研磨不充分会使细胞核内的答：研磨不充分会使细胞核内的DNA释放不完全，提取释放不完全，提取的的DNA量变少，影响实验结果，导致看不到丝状沉淀物、量变少，影响实验结果，导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等。用二苯胺鉴定不显示蓝色等。4此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分？此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分？答：可能含有核蛋白、多糖和答：可能含有核蛋白、多糖和RNA等杂质。等杂质。5为什么反复地溶解与析出为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质？，能够去除杂质？答

4、：用高盐浓度的溶液溶解答：用高盐浓度的溶液溶解DNA，能除去在高盐中不能，能除去在高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使溶解的杂质；用低盐浓度使DNA析出，能除去溶解在低析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此，通过反复溶解与析出盐溶液中的杂质。因此，通过反复溶解与析出DNA，就，就能够除去与能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质。溶解度不同的多种杂质。6方案二与方案三的原理有什么不同？方案二与方案三的原理有什么不同？答：方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白，从而使提取的答：方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白，从而使提取的DNA与蛋白质分开；方案三利用的是与蛋白质分开；方案三利用的是DNA和蛋白质对高温和蛋白

5、质对高温耐受性的不同，从而使蛋白质变性，与耐受性的不同，从而使蛋白质变性，与DNA分离分离 观察你提取的观察你提取的DNA颜色，如果不是白色丝状物，说明颜色，如果不是白色丝状物，说明DNA中中的杂质较多；二苯胺鉴定出现蓝色说明实验基本成功，如果的杂质较多；二苯胺鉴定出现蓝色说明实验基本成功，如果不呈现蓝色，可能所提取的不呈现蓝色，可能所提取的DNA含量低，或是实验操作中出含量低，或是实验操作中出现错误，需要重新制备。现错误，需要重新制备。本实验提取的本实验提取的DNA粗制品有可能仍然含有核蛋白、多糖等杂质。粗制品有可能仍然含有核蛋白、多糖等杂质。对于不同的实验方法，本课题可以采用分组的方对于不

6、同的实验方法，本课题可以采用分组的方法进行研究。首先选取不同的实验材料，其次同法进行研究。首先选取不同的实验材料，其次同种材料还可以采用不同方法，从多方面比较实验种材料还可以采用不同方法，从多方面比较实验结果，如结果，如DNA的纯度、的纯度、DNA的颜色、二苯胺显色的颜色、二苯胺显色的深浅等，看看哪种实验材料、哪种提取方法的的深浅等，看看哪种实验材料、哪种提取方法的效果更好。效果更好。答：提取答：提取DNA的第一步是材料的选取，其目的是的第一步是材料的选取，其目的是一定要选取一定要选取DNA含量较高的生物材料，否则会由含量较高的生物材料，否则会由于实验过程中或多或少的损失而造成检测的困难；于实

7、验过程中或多或少的损失而造成检测的困难；第二步是第二步是DNA的释放和溶解，这一步是实验成功的释放和溶解，这一步是实验成功与否的关键，要尽可能使细胞内的与否的关键，要尽可能使细胞内的DNA全部溶解；全部溶解；第三步是第三步是DNA的纯化，即根据的纯化，即根据DNA的溶解特性、的溶解特性、对酶及高温的耐受性的不同等特性，最大限度地对酶及高温的耐受性的不同等特性，最大限度地将将DNA与杂质分开；最后一步是对与杂质分开；最后一步是对DNA进行鉴定，进行鉴定，这是对整个实验的结果的检测。这是对整个实验的结果的检测。答：提取蛋白质比提取答：提取蛋白质比提取DNA的难度大。这是因为，的难度大。这是因为，与与DNA相比，蛋白质对温度、盐浓度、相比，蛋白质对温度、盐浓度、pH等条件等条件要敏感得多，很容易失活；并且蛋白质的空间结构要敏感得多，很容易失活；并且蛋白质的空间结构多种多样，理化性质各不相同，使得蛋白质的提取多种多样，理化性质各不相同，使得蛋白质的提取没有一种统一的方法，只能根据特定蛋白质的特性没有一种统一的方法，只能根据特定蛋白质的特性摸索提取的条件，设计特定的方法。摸索提取的条件，设计特定的方法。