仪器分析ppt课件-3紫外.ppt

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1、青岛农业大学青岛农业大学第三章第三章 紫外可见光谱法紫外可见光谱法 基于物质对基于物质对200-800nm200-800nm光谱区辐射的吸收特性光谱区辐射的吸收特性而建立起来的分析测定方法称为紫外而建立起来的分析测定方法称为紫外-可见吸收光可见吸收光谱法（谱法（UV-VisUV-Vis）或紫外）或紫外-可见分光光度法。它属于可见分光光度法。它属于分子光谱法，是由于分子内电子跃迁而产生的光谱。分子光谱法，是由于分子内电子跃迁而产生的光谱。特点：特点：1 1）灵敏度高）灵敏度高 2 2）准确度较高）准确度较高 3 3）仪器价格较低，操作简便、快速）仪器价格较低，操作简便、快速 4 4）应用范围广）

2、应用范围广青岛农业大学第一节第一节 紫外可见光谱法的基本原理紫外可见光谱法的基本原理一、紫外-可见吸收光谱由分子中价电子能级跃迁产生。分子具有三种不同能级：电子能级、由分子中价电子能级跃迁产生。分子具有三种不同能级：电子能级、振动能级和转动能级。三种能级都是量子化的，且各自具有相应的振动能级和转动能级。三种能级都是量子化的，且各自具有相应的能量。价能量。价电子跃迁的同时，伴随着核振动、分子自身转动能级的跃电子跃迁的同时，伴随着核振动、分子自身转动能级的跃迁（迁（带状光谱带状光谱）。）。波长范围：波长范围：100800nm.(1)远紫外光区远紫外光区:100200nm(2)近紫外光区近紫外光区:

3、200400nm(3)可见光区可见光区:400800nm250300350400nm1234A可用于可用于结构鉴定结构鉴定和和定量分析定量分析。青岛农业大学物质对光的选择性吸收及吸收曲线物质对光的选择性吸收及吸收曲线M +热M +荧光或磷光 E=E2E1=h 量子化；选择性吸收用不同波长的单色光照射，测吸光度；以A 作图，可得吸收曲线。M+h M*基态基态激发态激发态 E1（E）E2青岛农业大学吸收曲线的讨论：吸收曲线的讨论：同一种物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最大处同一种物质对不同波长光的吸光度不同。吸光度最大处对应的波长称为对应的波长称为最大吸收波长最大吸收波长max同一种物质的不同

4、浓度，其吸收曲线同一种物质的不同浓度，其吸收曲线形状相同形状相同max不变。不变。在在maxmax处吸光度随浓度变化的幅度最大，所以测定最灵敏。处吸光度随浓度变化的幅度最大，所以测定最灵敏。吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重要依据。吸收曲线是定量分析中选择入射光波长的重要依据。而对于而对于不同物质不同物质，它们的吸收曲线形状和，它们的吸收曲线形状和max则不同。则不同。青岛农业大学相邻两峰的最低点吸收最大的峰吸收次于最大吸收峰青岛农业大学青岛农业大学青岛农业大学二、紫外二、紫外-可见吸收光谱与分子结构的关系可见吸收光谱与分子结构的关系v由电子对组成的共价键可分为由电子对组成的共价键可分为键

5、键和和键，一个成键轨道一定有一个键，一个成键轨道一定有一个相应的具有较高能量的反键轨道。相应的具有较高能量的反键轨道。分子中没有参加成键的电子处于分子中没有参加成键的电子处于n n非键轨道中。非键轨道中。有机化合物的紫外有机化合物的紫外-可见吸收光谱取决于分子中价电子分布和结可见吸收光谱取决于分子中价电子分布和结合情况。合情况。1 1、有机化合物的紫外可见吸收光谱、有机化合物的紫外可见吸收光谱 基态有机化合物的价电子：电子、电子、n 电子COHn H分子轨道理论分子轨道理论：成键轨道反键轨道青岛农业大学有机分子能级跃迁有机分子能级跃迁可能的跃迁类型可能的跃迁类型有机分子包括有机分子包括:成键轨

6、道成键轨道、；反键轨道反键轨道*、*非键轨道非键轨道n例如例如 H2O分子的轨道：分子的轨道：CHHOoooo=o=n青岛农业大学当外层电子吸收紫外或可见辐射后，就从基态向激发态（反键轨道）跃迁。主要涉及两种类型的电子跃迁：1）成键轨道和反键轨道间的跃迁；2)非键电子激发到反键轨道的跃迁。*n E可能的跃迁类型：可能的跃迁类型：-*；-*；-*；n-*；-*；n-*各轨道能级高低顺序：各轨道能级高低顺序：n*（分子轨道理论计算结果）；（分子轨道理论计算结果）；青岛农业大学 跃迁跃迁所需能量最大；所需能量最大；电子只有吸收远紫外光电子只有吸收远紫外光的能量才能发生跃迁；饱和烷烃的分子吸收光谱出现

7、在远的能量才能发生跃迁；饱和烷烃的分子吸收光谱出现在远紫外区；吸收波长紫外区；吸收波长200 nm200 nm；例如例如甲烷的甲烷的maxmax125 125 nmnm，乙烷的，乙烷的maxmax135nm135nm。只能被真空紫外分光光度计检。只能被真空紫外分光光度计检测到，因此常作为溶剂用。测到，因此常作为溶剂用。在紫外在紫外-可见吸收光谱分析中，有机化合物的吸收光谱主可见吸收光谱分析中，有机化合物的吸收光谱主要由要由n n ，及电荷转移跃迁产生。及电荷转移跃迁产生。-*和和-*跃迁：尽管所需能量比上述跃迁：尽管所需能量比上述-*跃迁能量小，跃迁能量小，但波长仍处于真空紫外区；但波长仍处于

8、真空紫外区；跃迁跃迁跃迁类型跃迁类型青岛农业大学 n跃迁跃迁所需能量较大。吸收波长为所需能量较大。吸收波长为150260nm，大部分大部分在远紫外区，近紫外区仍不易观察到。在远紫外区，近紫外区仍不易观察到。含非键电子的饱和烃衍生物（含含非键电子的饱和烃衍生物（含N、O、S和卤素和卤素等杂原子）均呈现等杂原子）均呈现n*跃迁。跃迁。600215CH3NH2365258CH3I200173CH3Cl150184CH3OH1480167H2O max max（nm）化合物青岛农业大学跃迁跃迁 它需要的能量低于它需要的能量低于*跃迁，吸收峰一般处于近紫外光跃迁，吸收峰一般处于近紫外光区，在区，在200

9、nm左右，其特征是摩尔吸光系数大，一般左右，其特征是摩尔吸光系数大，一般 max 104，为强吸收带。如乙烯（蒸气）的最大吸收波长，为强吸收带。如乙烯（蒸气）的最大吸收波长 max为为162nm。含有。含有电子的基团，如双键、叁键、羰基等电子的基团，如双键、叁键、羰基等都可发生都可发生跃迁。跃迁。n跃迁跃迁 这类跃迁发生在近紫外光区。它是简单的生色团如羰基、这类跃迁发生在近紫外光区。它是简单的生色团如羰基、硝基等中的孤对电子向反键轨道跃迁。其特点是谱带强度弱，硝基等中的孤对电子向反键轨道跃迁。其特点是谱带强度弱，摩尔吸光系数小，通常小于摩尔吸光系数小，通常小于100。青岛农业大学电荷转移跃迁电

10、荷转移跃迁某些分子同时具有电子给予体和电子接受体，它们在外来某些分子同时具有电子给予体和电子接受体，它们在外来辐射的照射下会强烈吸收紫外光或可见光，使电子给予体辐射的照射下会强烈吸收紫外光或可见光，使电子给予体轨道向接受体轨道跃迁，这种跃迁称为电荷转移跃迁。轨道向接受体轨道跃迁，这种跃迁称为电荷转移跃迁。电荷转移跃迁产生的吸收光谱称电荷转移吸收光谱。电荷转移跃迁产生的吸收光谱称电荷转移吸收光谱。电荷转移吸收带的特点是谱带较宽，吸收强度大，摩尔吸电荷转移吸收带的特点是谱带较宽，吸收强度大，摩尔吸光系数可大于光系数可大于104Lmol-1com-1。青岛农业大学2 2、常用术语、常用术语生色团：生

11、色团：最有用的紫外可见光谱是由最有用的紫外可见光谱是由和和n跃迁产生的。这跃迁产生的。这两种跃迁均要求有机物分子中含有不饱和基团。两种跃迁均要求有机物分子中含有不饱和基团。这类可以吸这类可以吸收光子而产生跃迁的原子基团称为生色团收光子而产生跃迁的原子基团称为生色团。简单的生色团由。简单的生色团由双键或叁键体系组成，如乙烯基、偶氮基双键或叁键体系组成，如乙烯基、偶氮基NN、羰基、羰基、乙炔基、腈基乙炔基、腈基CN等。等。助色团：助色团：有一些含有一些含有n电子的基团电子的基团(如如OH、OR、NH、X等等),它们本身没有生色功能，但当它们与生色团相连时，就会它们本身没有生色功能，但当它们与生色团

12、相连时，就会发生发生n共轭作用，共轭作用，增强生色团的生色能力增强生色团的生色能力(最大吸收波长最大吸收波长向长波方向移动，且吸收强度增加向长波方向移动，且吸收强度增加)，这样的基团称为助色团。，这样的基团称为助色团。青岛农业大学R带带:R带相当于带相当于n*跃迁所产生的吸收带。含有跃迁所产生的吸收带。含有杂原子的不饱和基团，如杂原子的不饱和基团，如-C=O、-N=N-、-NO、-NO2特点：特点：（1）吸收较弱；）吸收较弱；（2）波长较长，）波长较长，200-400nm。K带带:由于共轭双键中由于共轭双键中*跃迁所产生的吸收带跃迁所产生的吸收带称为称为K带。带。特点：特点：（1）吸收强度大，

13、摩尔吸光系数大（）吸收强度大，摩尔吸光系数大（104-105之间）。之间）。（2）波长在）波长在217-280nm之间。之间。（3）利用紫外吸收光谱是否有）利用紫外吸收光谱是否有K吸收带，作为吸收带，作为判断共轭体系的重要依据。判断共轭体系的重要依据。Absorption band 吸收带吸收带青岛农业大学E E带和带和B B带带 -芳香烃及其杂环化合物芳香烃及其杂环化合物的吸收光谱的吸收光谱苯的吸收光谱：苯的吸收光谱：E1带带:180180 184 184 nm nm =4700047000E2带带:200200 204 204 nm nm =70007000苯环上三个共扼双键的苯环上三个共

14、扼双键的 *跃迁特征吸收带；跃迁特征吸收带；有助色团有助色团,E,E2 2向长波移动向长波移动,有生色团有生色团,E E2 2与与 K K合并合并,红移红移B带带:230-270 230-270 nm,nm,=200 200 *与与苯环振动引起苯环振动引起是芳香族化合物的特征吸收，在极性溶剂中消失或变得是芳香族化合物的特征吸收，在极性溶剂中消失或变得不明显不明显 。青岛农业大学红移与蓝移红移与蓝移 有机化合物的吸收谱带常常因引入取代基或改变溶剂使最大吸收波长max和吸收强度发生变化:max向长波方向移动称为红移红移，向短波方向移动称为蓝移蓝移(或紫移)。吸收强度即摩尔吸光系数增大或减小的现象分

15、别称为增色效应或减色效应，如图所示。青岛农业大学1.1.饱和有机化合物饱和有机化合物2.2.不饱和烃及共轭烯烃不饱和烃及共轭烯烃3.3.羰基化合物羰基化合物4.4.芳香族化合物芳香族化合物 三、有机化合物的紫外三、有机化合物的紫外-可见吸收光谱可见吸收光谱乙烷乙烷碘乙烷碘乙烷丙酮丙酮丁二烯丁二烯苯乙烯苯乙烯苯乙酮苯乙酮青岛农业大学四、影响紫外四、影响紫外-可见吸收光谱的因素可见吸收光谱的因素1）共轭效应）共轭效应u 共轭效应使各级能量的能级间的能量差减小，跃迁时共轭效应使各级能量的能级间的能量差减小，跃迁时所需能量也相应减小，使吸收波长产生红移，吸收强度所需能量也相应减小，使吸收波长产生红移，

16、吸收强度增加。增加。u 共轭不饱合度越多，红移越明显，吸收强度也随之增强共轭不饱合度越多，红移越明显，吸收强度也随之增强。CH2CH2max165nm15000CH2CHCHCH2max21721000CH2CHCHCHCHCH2max25735000青岛农业大学3）超共轭效应）超共轭效应 烷基上的烷基上的 电子与共轭体系中的电子与共轭体系中的 电子共轭，使吸收峰向电子共轭，使吸收峰向长波方向移动，吸收强度增强，这种长波方向移动，吸收强度增强，这种 键与键与 键共轭引起现键共轭引起现象称为超共轭。超共轭效应的影响比共轭效应小得多。象称为超共轭。超共轭效应的影响比共轭效应小得多。2）助色效应）助

17、色效应 当助色团与发色团相连时，助色团的当助色团与发色团相连时，助色团的n n电子发色团的电子发色团的 电子电子共轭，使吸收峰向长波方向，吸收强度增强共轭，使吸收峰向长波方向，吸收强度增强CH2CHCHCH2 1,3-丁二烯丁二烯max217nm CH3 CHCHCHCH2 1,3-戊二烯戊二烯 max222nm青岛农业大学4）溶剂效应溶剂效应 n*跃迁产生的吸收峰，随溶剂极性增加，形成氢键的能跃迁产生的吸收峰，随溶剂极性增加，形成氢键的能力增加，发生蓝移；力增加，发生蓝移；由由 *跃迁产生的吸收峰，随溶剂极性增加，发生红移。跃迁产生的吸收峰，随溶剂极性增加，发生红移。随溶剂极性增加，吸收光谱

18、变得平滑，精细结构消失。随溶剂极性增加，吸收光谱变得平滑，精细结构消失。1：乙醚2：水12250300苯酰丙酮 青岛农业大学5 5）空间效应）空间效应 由于空间障碍，妨碍两个发色团处于同一个平面，共轭程由于空间障碍，妨碍两个发色团处于同一个平面，共轭程度降低，使吸收峰向短波方向，吸收强度减弱。度降低，使吸收峰向短波方向，吸收强度减弱。二苯乙烯二苯乙烯顺式：顺式：max=280nmmax=280nm；max=10500max=10500反式：反式：max=295.5 nmmax=295.5 nm；max=29000max=29000青岛农业大学第二节第二节 紫外可见光谱仪紫外可见光谱仪青岛农业大

19、学青岛农业大学一、基本构成1.光源光源 在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。可见光区：钨灯作为可见光区：钨灯作为光源，其辐射波长范围光源，其辐射波长范围在在3602500nm。紫外区：氢、氘灯。紫外区：氢、氘灯。发射发射190400nm的连的连续光谱。续光谱。动画动画青岛农业大学 2.单色器单色器 将光源发射的复合光分解成单色光并可从中选出一任将光源发射的复合光分解成单色光并可从中选出一任波长单色光的光学系统。波长单色光的光学系统。入射狭缝：光

20、源的光由此进入单色器；入射狭缝：光源的光由此进入单色器；准光装置：透镜或返射镜使入射光成为平行光束；准光装置：透镜或返射镜使入射光成为平行光束；色散元件：将复合光分解成单色光；色散元件：将复合光分解成单色光；棱镜或光栅棱镜或光栅；聚焦装置：透镜或凹面反聚焦装置：透镜或凹面反射镜，将分光后所得单色光射镜，将分光后所得单色光聚焦至出射狭缝；聚焦至出射狭缝；出射狭缝。出射狭缝。青岛农业大学3.样品室样品室样品室放置各种类型的吸收池（比色皿）和相应的池架附件。吸收池主要有石英池和玻璃池两种。在紫紫外区须采用石英池外区须采用石英池，可见光区一般可见光区一般用玻璃池。用玻璃池。4.检测器检测器 利用光电效

21、应将透过吸收池的光信号变成可测的电信号，常用的有光电池、光电管或光电倍增管。5.结果显示记录系统结果显示记录系统 检流计、数字显示、微机进行仪器自动控制和结果处理青岛农业大学二、二、紫外紫外-可见光谱仪的类型可见光谱仪的类型1.1.单波长单光束光谱仪单波长单光束光谱仪 简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光度，简单，价廉，适于在给定波长处测量吸光度或透光度，一般不能作全波段光谱扫描，要求光源和检测器具有很高一般不能作全波段光谱扫描，要求光源和检测器具有很高的稳定性。的稳定性。（动画演示动画演示）2.2.单波长双光束光谱仪单波长双光束光谱仪 自动记录，快速全波段自动记录，快速全波段扫描。可

22、消除光源不稳定、扫描。可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的检测器灵敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析。影响，特别适合于结构分析。仪器复杂，价格较高。仪器复杂，价格较高。动画演示动画演示青岛农业大学3.3.双波长光谱仪双波长光谱仪 将不同波长的两束单色光将不同波长的两束单色光(1、2)快束交替通过同一吸收快束交替通过同一吸收池而后到达检测器，得到两次吸光度差值，无需参比池。池而后到达检测器，得到两次吸光度差值，无需参比池。=12nm。两波长同时扫描即可获得导数光谱。两波长同时扫描即可获得导数光谱。动画演示动画演示采用双波长分光光采用双波长分光光度计进行分析时，度计进行分析时，可以通过

23、波长的选可以通过波长的选择方便地校正背景择方便地校正背景吸收，消除吸收光吸收，消除吸收光谱重叠的干扰，因谱重叠的干扰，因而适用于混浊液和而适用于混浊液和多组分混合物的定多组分混合物的定量分析。量分析。青岛农业大学4.4.多通道紫外多通道紫外-可见光谱仪可见光谱仪 利用光电二极管阵列检测器，可在瞬间给出整个光谱的全部信息。利用光电二极管阵列检测器，可在瞬间给出整个光谱的全部信息。青岛农业大学第三节紫外第三节紫外-可见光谱分析法可见光谱分析法一、有机化合物结构鉴定中的应用一、有机化合物结构鉴定中的应用1）比较法：比较法：制作试样的吸收曲线并与标准紫外光谱对制作试样的吸收曲线并与标准紫外光谱对照比较

24、吸收光谱曲线的形状、吸收峰的数目及最大吸照比较吸收光谱曲线的形状、吸收峰的数目及最大吸收波长的位置及相应的摩尔吸光系数。标准谱图库：收波长的位置及相应的摩尔吸光系数。标准谱图库：4600046000种化合物紫外光谱的标准谱图。种化合物紫外光谱的标准谱图。动画动画2）利用利用Woodward-Fieser Woodward-Fieser 和和ScottScott经验规则求最大吸收经验规则求最大吸收波长：即当通过其它方法获得一系列可能的分子结构波长：即当通过其它方法获得一系列可能的分子结构式后，可通过此类规则估算最大吸收波长并与实测值式后，可通过此类规则估算最大吸收波长并与实测值对比。对比。青岛农

25、业大学Woodward-Fieser规则规则vWoodward-Woodward-FieserFieser规则用规则用于讲算共轭二于讲算共轭二烯、多烯烃及烯、多烯烃及共轭烯酮类化共轭烯酮类化合物跃迁的最合物跃迁的最大吸收波长。大吸收波长。vScottScott规则用规则用于计算芳香族于计算芳香族羰基衍生物，羰基衍生物，如苯甲醛、苯如苯甲醛、苯甲酸、苯甲酸甲酸、苯甲酸酯等在乙醇中酯等在乙醇中的最大吸收波的最大吸收波长。长。青岛农业大学Woodward-Fieser规则估算最大吸收波长的几个实例：规则估算最大吸收波长的几个实例：四四青岛农业大学结构分析结构分析二苯乙烯二苯乙烯顺反异构顺反异构：顺式

26、：顺式：max=280nm；max=10500反式：反式：max=295.5nm；max=29000互变异构互变异构：酮式：酮式：max=204nm烯醇式：烯醇式：max=243nm 构象判别青岛农业大学a.单组分定量方法单组分定量方法 标准曲线法：标准曲线法：首先首先配制一系列不同含量的标准溶液，以不含目标配制一系列不同含量的标准溶液，以不含目标组分的空白溶液为参比，在相同条件下测定标准溶组分的空白溶液为参比，在相同条件下测定标准溶液的吸光度，绘制吸光度液的吸光度，绘制吸光度浓度曲线即标准曲线。浓度曲线即标准曲线。然后然后在同样的实验条件下测定未知试样的吸光度，在同样的实验条件下测定未知试样

27、的吸光度，从标准曲线上就可以找到与之对应的未知试样的浓从标准曲线上就可以找到与之对应的未知试样的浓度度。动画动画二、定量分析法二、定量分析法青岛农业大学b.多组分定量方法多组分定量方法 根据吸光度具有加和性的特点，在同一试样中可以测定两个根据吸光度具有加和性的特点，在同一试样中可以测定两个以上的组分。假设试样中含有以上的组分。假设试样中含有x x，y y两种组分，将它们转化为两种组分，将它们转化为有色化合物，分别绘制其吸收光谱，会出现以下三种情况有色化合物，分别绘制其吸收光谱，会出现以下三种情况 ：（a）情况时组分情况时组分x和和y互不干扰互不干扰，可以分别在，可以分别在1和和2两个波长两个波

28、长下测定两种物质的含量。下测定两种物质的含量。（b）情况下组分情况下组分x干扰组分干扰组分y的测量。此时对组分的测量。此时对组分y要用解方要用解方程的方法测定。程的方法测定。青岛农业大学（c）情情况况下下组组分分x和和组组分分y相相互互干干扰扰，要要通通过过解解方方程程组组的的方方法法实实现分别测定。具体方法如下：现分别测定。具体方法如下：首先在首先在1 和和2处分别测定混合物吸光度处分别测定混合物吸光度 和和 用用x和和y的纯组分，可以分别测得的纯组分，可以分别测得1 时的时的 和和 以及以及2 时的时的 和和 根据吸光度的加和性原则，可列出根据吸光度的加和性原则，可列出方程式组：方程式组：

29、Cx和和Cy值可通过解联立方程求得。值可通过解联立方程求得。对于更复杂的多组分体系，可用计算机处理测定的结果。对于更复杂的多组分体系，可用计算机处理测定的结果。青岛农业大学例：在某厚度比色皿中，浓度为例：在某厚度比色皿中，浓度为1.010-3molL-1的的K2Cr2O7组分溶液在波长为组分溶液在波长为450nm和和530nm处的吸光度分处的吸光度分别为别为0.200和和0.050；浓度为；浓度为1.010-4molL-1的的KMnO4组分组分的溶液在波长为的溶液在波长为450nm和和530nm处的吸光度分别为处的吸光度分别为0.030和和0.180，现有含这两种组分的混合溶液，放在同样厚度的

30、比，现有含这两种组分的混合溶液，放在同样厚度的比色皿中，在波长为色皿中，在波长为450nm和和530nm处的吸光度分别为处的吸光度分别为0.380和和0.710，试计算混合溶液中这两种组分的浓度，试计算混合溶液中这两种组分的浓度。青岛农业大学、青岛农业大学对对于于组组分分x和和组组分分y相相互互干干扰扰严严重重的的情情况况，还还可可以以通通过过双双波波长长吸收法实现分别测定。具体方法如下：吸收法实现分别测定。具体方法如下：如如下下图图所所示示，当当x、y组组分分共共存存时时，如如要要测测定定组组分分x的的含含量量，组组分分y的的干干扰扰可可以以通通过过选选择择对对y组组分分具具有有等等吸吸收收

31、的的两两个个波波长长1和和2加加以以消消除除。以以2为为参参比比波波长长，1为为测测定定波波长长，对对混混合物进行测定，可得合物进行测定，可得：A1A1xA1yA2A2xA2y青岛农业大学 A1、A2、A1x、A1y、A2x、A2y分别为混合物、分别为混合物、组分组分x和和y在波长在波长1和和2下的吸光度且下的吸光度且A1yA2y 则得到：则得到：AA1A2A1x A2x（1x 2x）b c 对于被测组分对于被测组分x来说，（来说，（1x 2x）b为定值，所以为定值，所以 A与组分与组分x浓度浓度c成正比。成正比。1x、2x可由可由x的标准溶液求出。同理适当选择组分的标准溶液求出。同理适当选择

32、组分x具有等吸收的两个波长，也可以对组分具有等吸收的两个波长，也可以对组分y进行定量测定。进行定量测定。青岛农业大学第四节分析条件的选择第四节分析条件的选择1、仪器测量条件、仪器测量条件（1）波波长长。通通常常按按照照最最大大吸吸收收原原则则即即选选择择最最强强吸吸收收带带的的最最大大吸吸收收波波长长为为入入射射光光的的波波长长，若若在在最最大大吸吸收收波波长长处处有有干扰，则选择吸收最大、干扰最小的原则。干扰，则选择吸收最大、干扰最小的原则。（2）狭狭缝缝宽宽度度。影影响响测测定定灵灵敏敏度度和和标标准准曲曲线线的的线线性性范范围，一般选择狭缝宽度约是吸收峰半宽度的十分之一。围，一般选择狭缝

33、宽度约是吸收峰半宽度的十分之一。（3）吸吸光光度度值值。选选择择适适当当吸吸光光度度围围，在在0.15-1.00之之间间，可减小测量误差。可减小测量误差。青岛农业大学2、反应条件选择反应条件选择 a.a.显色剂的选择原则显色剂的选择原则：使配合物吸收系数使配合物吸收系数 最大、选择最大、选择性好、组成恒定、配合物稳定、显色剂吸收波长与配合性好、组成恒定、配合物稳定、显色剂吸收波长与配合物吸收波长相差大等。物吸收波长相差大等。b.b.显色剂用量显色剂用量：配位数与显色剂用量有关；在形成逐级配位数与显色剂用量有关；在形成逐级配合物，其用量更要严格控制。配合物，其用量更要严格控制。c.c.溶液酸度：

34、溶液酸度：配位数和水解等与配位数和水解等与 pH pH 有关。有关。d.d.显色时间显色时间、放置时间、放置时间、温度温度等等。青岛农业大学3 3、参比液选择、参比液选择a.a.溶剂参比溶剂参比：试样组成简单、共存组份少（基体干扰少）、：试样组成简单、共存组份少（基体干扰少）、显色剂不吸收时，直接采用溶剂（多为蒸馏水）为参比；显色剂不吸收时，直接采用溶剂（多为蒸馏水）为参比；b.b.试剂参比：试剂参比：当显色剂或其它试剂在测定波长处有吸收时，当显色剂或其它试剂在测定波长处有吸收时，采用试剂作参比（不加待测物）；采用试剂作参比（不加待测物）；c.c.试样参比：试样参比：如试样基体在测定波长处有吸

35、收，但不与显色如试样基体在测定波长处有吸收，但不与显色剂反应时，可以试样作参比（不能加显色剂）。剂反应时，可以试样作参比（不能加显色剂）。参比选择参比选择青岛农业大学4、试样溶液浓度选择、试样溶液浓度选择吸光度在吸光度在0.15-1.000.15-1.00之间，误差最小之间，误差最小。5、干扰消除干扰消除a.控制酸度：控制酸度：配合物稳定性与配合物稳定性与pH有关，可以通过控制酸度提高反有关，可以通过控制酸度提高反应选择性，副反应减少，而主反应进行完全。如在应选择性，副反应减少，而主反应进行完全。如在0.5MH2SO4介介质中，双硫腙与质中，双硫腙与Hg2+生成稳定有色配合物，而与生成稳定有色

36、配合物，而与Pb2+、Cu2+、Ni2+、Cd2+等离子生成的有色物不稳定。等离子生成的有色物不稳定。b.选择掩蔽剂选择掩蔽剂c.合适测量波长合适测量波长d.干扰物分离干扰物分离e.导数光谱及双波长技术导数光谱及双波长技术青岛农业大学练习练习1.指出下列化合物，哪一个化合物能吸收波长较长的辐射指出下列化合物，哪一个化合物能吸收波长较长的辐射()A.CH3(CH2)5CH3C.(CH3)2CH=CHCH2CH=C(CH3)2B.CH2=CH-CH=CH3D.CH2=CH-CH=CH-CH=CH-CH32.在紫外可见分光光度计中，用于紫外波段的光源是（）在紫外可见分光光度计中，用于紫外波段的光源是

37、（）A.钨灯钨灯B.卤钨灯卤钨灯C.氘灯氘灯D.能斯特灯能斯特灯3.某试液用某试液用2.0cm的吸收池测量，的吸收池测量，T=50，若用，若用1.0cm的吸收的吸收池测量，池测量，T为多少？为多少？青岛农业大学4、符合吸收定律的溶液稀释时，其最大吸收峰波长位置（）、符合吸收定律的溶液稀释时，其最大吸收峰波长位置（）A.向长波移动向长波移动B.向短波移动向短波移动C.不移动不移动D.不移动，吸收峰值降低不移动，吸收峰值降低5、光学分析法中、光学分析法中,使用到电磁波谱使用到电磁波谱,其中可见光的波长范其中可见光的波长范围为（）。围为（）。A.10400nm;B.400750nm;C.0.752.

38、5mm;D.0.1100cm6、溶剂对电子光谱的影响较为复杂、溶剂对电子光谱的影响较为复杂,改变溶剂的极性（）。改变溶剂的极性（）。A.不会引起吸收带形状的变化不会引起吸收带形状的变化;B.会使吸收带的最大吸收波长发生变化会使吸收带的最大吸收波长发生变化;C.精细结构并不消失精细结构并不消失;D.对测定影响不大对测定影响不大.青岛农业大学7、紫外、紫外-可见光谱的产生基理可见光谱的产生基理8、名词解释：生色团、助色团、红移、蓝移、增色效应、名词解释：生色团、助色团、红移、蓝移、增色效应、减色效应。减色效应。9、紫外、紫外-可见分光光度计的基本构成。可见分光光度计的基本构成。10、双波长分光光度计与单波长分光光度计的主要区别、双波长分光光度计与单波长分光光度计的主要区别。青岛农业大学