《临床免疫检查》PPT课件.ppt

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1、 临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查n免疫功能检测免疫功能检测 血清免疫球蛋白血清免疫球蛋白 血清补体血清补体 细胞免疫细胞免疫 n自身抗体自身抗体 n肿瘤标志物检测肿瘤标志物检测n病毒性肝炎病原标志物检测病毒性肝炎病原标志物检测及其他病原体及其他病原体感染免疫检测感染免疫检测检测方法检测方法n间接免疫荧光法(IIF)n酶联免疫吸附法(ELISA)n放射免疫法(RIA)n被动血凝法(PHA)n颗粒凝集法(PA)n对流免疫电泳法(CIE)n免疫双扩散法(ID)n流式细胞术(FCM)一、一、免疫功能检测免疫功能检测（一）血清免疫球蛋白（一）血清免疫球蛋白 体液

2、免疫体液免疫 (immunoglobulin,Ig)n由浆细胞合成分泌由浆细胞合成分泌n具有抗体活性的一组球蛋白具有抗体活性的一组球蛋白n存在于血液、体液、外分泌液、细胞膜存在于血液、体液、外分泌液、细胞膜n据功能和理化性质不同分五大类据功能和理化性质不同分五大类 IgG IgA IgM IgD IgE免疫球蛋白免疫球蛋白-体液免疫体液免疫nIgG IgG 含量最多，含量最多，占占70-80%70-80%，唯一能通过胎盘，唯一能通过胎盘 再次免疫应答的标志再次免疫应答的标志nIgAIgA 分两型分两型:血清型，分泌型血清型，分泌型 分泌型机体分泌型机体局部免疫局部免疫（呼吸道、消化道、（呼吸道

3、、消化道、泌尿道感染）起更重要作用泌尿道感染）起更重要作用nIgMIgM 分子量最大分子量最大 占占5 510%10%。初次免疫初次免疫应答的应答的IgIg，最早出现的最早出现的IgIgnIgE IgE 与与型型变态反应有关变态反应有关 ，血清中含量最少约，血清中含量最少约 0.002%0.002%与过敏原测定相关与过敏原测定相关 免疫球蛋白免疫球蛋白n临床意义临床意义1.1.IgG IgM IgA IgG IgM IgA 均升高均升高：见于慢性感染、慢性：见于慢性感染、慢性肝病、肝硬化、肝病、肝硬化、淋巴瘤和自身免疫性疾病淋巴瘤和自身免疫性疾病 IgEIgE升高升高与过敏性疾病、寄生虫感染相

4、关与过敏性疾病、寄生虫感染相关 2.2.单一免疫球蛋白增高单一免疫球蛋白增高：见于免疫增殖性疾病：见于免疫增殖性疾病如多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症如多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症3.3.免疫球蛋白降低免疫球蛋白降低 各类先天性免疫缺陷病、各类先天性免疫缺陷病、获得性先天性免疫缺陷病、联合免疫缺陷病、获得性先天性免疫缺陷病、联合免疫缺陷病、长期应用免疫抑制剂的病人长期应用免疫抑制剂的病人血清血清M M蛋白蛋白单克隆单克隆IgIgn由单克隆由单克隆B B细胞增殖产生细胞增殖产生n临床意义临床意义 提示单克隆提示单克隆IgIg增殖性疾病，见于增殖性疾病，见于 多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤(MM)(

5、MM)巨球蛋白血症巨球蛋白血症 恶性淋巴瘤等恶性淋巴瘤等（二）补体（二）补体(complement,C)检测检测n补体是一组具酶原活性的糖蛋白补体是一组具酶原活性的糖蛋白n九种成分九种成分C C1 1-C-C9 9n参与抗感染及免疫调节，也介导病理性反应参与抗感染及免疫调节，也介导病理性反应n补体功能下降、补体功能下降、成分减少成分减少可用于疾病诊断和可用于疾病诊断和疗效评估疗效评估 n总补体溶血活性总补体溶血活性(CH(CH5050)检测检测 反映补体传统途径活化的活性程度反映补体传统途径活化的活性程度n补体补体C C3 3 含量最多含量最多 是经典和旁路途径被激活是经典和旁路途径被激活 的

6、关键物质的关键物质 n补体补体C C4 4 功能较多功能较多 经传统途径活化经传统途径活化 促进吞噬促进吞噬 中和病毒中和病毒 防止免疫复合物沉着防止免疫复合物沉着 n总补体溶血活性总补体溶血活性(CH(CH5050)、补体、补体C C3 3 C C4 4 临床意义临床意义 增高增高:急性炎症急性炎症 急性组织损伤急性组织损伤 恶性肿瘤恶性肿瘤 急性传染病等急性传染病等减低减低:各种免疫复合物性疾病各种免疫复合物性疾病 如肾小球肾炎如肾小球肾炎 SLE SLE、RARA等自身免疫病等自身免疫病 慢性肝病、肝硬化、肝坏死、慢性肝病、肝硬化、肝坏死、AIDS AIDS、重度营养不良症、遗传性补体缺

7、乏症、重度营养不良症、遗传性补体缺乏症 n补体补体C1qC1q检测检测 意义意义 增高增高:骨髓炎、痛风等骨髓炎、痛风等 减低减低:SLESLE、MCTDMCTD、重度营养不良等、重度营养不良等 （三）细胞免疫检测（三）细胞免疫检测nT T细胞亚群细胞亚群 T T细胞花结形成试验细胞花结形成试验(测定测定T T细胞数量细胞数量)T T细胞转化试验细胞转化试验(体外测定体外测定T T细胞的生物学功能细胞的生物学功能)T T细胞分化抗原测定细胞分化抗原测定 CD CD3 3、CDCD4 4 (T(TH H)、CDCD8 8 (T(TS S)、CDCD4 4 /CD/CD8 8（FCM):FCM):

8、检测检测AIDSAIDS、血液肿、血液肿瘤分型、自身免疫疾病瘤分型、自身免疫疾病（三）细胞免疫检测（三）细胞免疫检测临床意义临床意义CDCD3 3（总（总T T细胞）降低：细胞）降低：自身免疫性疾病自身免疫性疾病:SLE RA:SLE RACDCD3 3/CD/CD4 4 (T(TH H)降低：降低：恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷症、艾滋病、用免疫抑制剂者症、艾滋病、用免疫抑制剂者CDCD3 3/CD/CD8 8 (T(TS S)降低：降低：自身免疫病、变态反应疾病自身免疫病、变态反应疾病CDCD4 4 /CD/CD8 8 比值增高：比值增高：自身免疫性疾病、变态反应、自身免

9、疫性疾病、变态反应、病毒性感染病毒性感染CDCD4 4 /CD/CD8 8 比值降低：比值降低：艾滋病、恶性肿瘤复发艾滋病、恶性肿瘤复发（三）细胞免疫检测（三）细胞免疫检测nB B细胞细胞 浆细胞浆细胞 体内唯一能产生抗体（体内唯一能产生抗体（IgIg分子）的细胞分子）的细胞 CD CD1919等单克隆抗体测定等单克隆抗体测定B B细胞数细胞数 升高升高 见于急性白血病见于急性白血病 降低降低 无丙种球蛋白血症、化疗和免疫抑制剂后无丙种球蛋白血症、化疗和免疫抑制剂后 n自然杀伤细胞（自然杀伤细胞（NKNK细胞）活性测定细胞）活性测定 判断机体抗肿瘤、抗病毒的指标判断机体抗肿瘤、抗病毒的指标（四

10、）细胞因子（四）细胞因子(cytokine,CK)检测检测-nCKCK为免疫调节性小分子多肽为免疫调节性小分子多肽n检测方法检测方法 酶联免疫测定酶联免疫测定ELISAELISA PCR PCR技术技术n白细胞介素白细胞介素2 2活性及受体活性及受体 免疫应答、免疫应答、抗病毒等作用抗病毒等作用n肿瘤坏死因子肿瘤坏死因子 抗感染效应、抗肿瘤作用抗感染效应、抗肿瘤作用n干扰素干扰素 一种非特异性防御因子一种非特异性防御因子 抗病毒、抗肿瘤、调节免疫、控制细胞增殖抗病毒、抗肿瘤、调节免疫、控制细胞增殖二、自身抗体检测二、自身抗体检测风湿性疾病风湿性疾病风湿性疾病常见自身抗体风湿性疾病常见自身抗体n

11、抗核抗体抗核抗体n类风湿关节炎类风湿关节炎早期血清学自身抗体早期血清学自身抗体n抗中性粒细胞胞浆抗体抗中性粒细胞胞浆抗体、抗抗 核核 抗抗 体体（Anti-nuclear antibody ANAAnti-nuclear antibody ANA）结结 缔缔 组组 织织 病病(1)抗核抗体ANA定义nANAANA：指抗细胞核成分（：指抗细胞核成分（DNADNA，RNARNA，蛋白质，蛋白质和酶）的抗体。和酶）的抗体。ANA ANA是是结缔组织病结缔组织病的的筛选筛选试验。试验。nANA谱谱:针对不同成分针对不同成分,构成抗核抗体谱构成抗核抗体谱（Anti-nuclear antibodies,

12、ANAAnti-nuclear antibodies,ANAS S)。有助。有助于于CTDCTD的诊断、鉴别诊断、分型、判断疗效的诊断、鉴别诊断、分型、判断疗效及预后。及预后。()按抗按抗不同靶抗原成分不同靶抗原成分抗体分类抗体分类抗单链抗单链DNA抗体抗体抗双链抗双链DNA抗体抗体 抗非组蛋白抗体抗非组蛋白抗体抗抗Sm抗体抗体抗抗RNP抗体抗体抗抗SSA 抗体抗体抗抗SSB抗体抗体抗抗Scl70 抗体抗体抗抗Jo1 抗体抗体抗其它细胞成分抗体抗其它细胞成分抗体抗核仁抗体抗核仁抗体抗着丝点抗体抗着丝点抗体抗抗DNA抗体抗体ANAS分分类类抗组蛋白抗体抗组蛋白抗体抗抗ENA抗体抗体(3)抗核抗体

13、检测原理+复合物抗原抗体底物（抗原）被检血清（抗体）+第二抗(4)(4)检测方法及荧光图谱：检测方法及荧光图谱：间间接接免免疫疫荧荧光光法法IIF IIF Hep-2Hep-2细细胞胞(人人喉喉癌癌细细胞胞)作作抗抗原底物原底物,目前国内外通用的方法目前国内外通用的方法 是金标准是金标准均均 质质 型型又称弥散型，染色质均匀一致又称弥散型，染色质均匀一致,此型与抗此型与抗ds-DNA ds-DNA、抗组蛋白抗体和核小体抗体有关。可见于多种自身抗组蛋白抗体和核小体抗体有关。可见于多种自身免疫性疾病。免疫性疾病。斑点型斑点型又称颗粒型，核质染色呈斑点状、斑块状，此型又称颗粒型，核质染色呈斑点状、斑

14、块状，此型与可溶性核抗原抗体有关。与可溶性核抗原抗体有关。膜膜 型型又称周边型，荧光染色在核周围，此型与抗纤层蛋白又称周边型，荧光染色在核周围，此型与抗纤层蛋白和抗和抗ds-DNAds-DNA抗体有关，多见于抗体有关，多见于SLESLE，特别是狼疮肾炎，特别是狼疮肾炎患者。患者。核核 仁仁 型型仅核仁着染荧光，此型与针对核仁内的仅核仁着染荧光，此型与针对核仁内的RNARNA多聚酶抗多聚酶抗体、抗体、抗Scl-70Scl-70和和PM-SclPM-Scl抗体有关。多见于抗体有关。多见于SLESLE、SSCSSC患患者。者。(5)ANA(5)ANA临床意义临床意义：筛选实验筛选实验A A 出出现现

15、于于各各种种结结缔缔组组织织病病中中 SLE SLE 9595、SS SS 20-20-60%60%、RA RA 20-50%20-50%、SSc SSc 30%30%、PM/DM PM/DM 20-30%20-30%、MCTD 99MCTD 99 B B 出出现现于于其其它它恶恶性性疾疾病病中中，往往往往是是低低滴滴度度阳阳性性，如淋巴瘤、淋巴细胞白血病等。如淋巴瘤、淋巴细胞白血病等。C C 核核型型的的意意义义：均均质质型型和和膜膜型型提提示示抗抗ds-DNAds-DNA阳阳性，斑点型提示抗性，斑点型提示抗ENAENA阳性。阳性。表表 ANAANA在某些在某些CTDCTD中的阳性率中的阳性

16、率系统性红斑狼疮（系统性红斑狼疮（SLESLE）活动期活动期 95-100%95-100%非活动期非活动期 80-100%80-100%药物性狼疮（药物性狼疮（DLEDLE）95-100%95-100%混合性结缔组织病（混合性结缔组织病（MCTDMCTD）95-100%95-100%硬皮病（硬皮病（SScSSc）70-90%70-90%干燥综合征（干燥综合征（SSSS）60-80%60-80%多发性肌炎多发性肌炎/皮肌炎（皮肌炎（PM/DMPM/DM）40-60%40-60%类风湿关节炎（类风湿关节炎（RARA）30-50%30-50%幼年型类风湿关节炎（幼年型类风湿关节炎（JRAJRA）20

17、-40%20-40%CTDCTD疾病疾病ANAANA阳性率阳性率2.2.抗抗ds-DNAds-DNA对对SLESLE高度特异高度特异与疾病活动性相关与疾病活动性相关特异性达特异性达9595，敏感性仅，敏感性仅7070 与与疾病活动疾病活动 性性及预后及预后相关相关 提示提示肾脏损害肾脏损害3.3.抗抗SmSm抗体抗体 SLE SLE标记抗体标记抗体n特异性达特异性达9999，敏感性仅，敏感性仅2525n可作为回顾诊断可作为回顾诊断n与活动无关与活动无关、类风湿因子类风湿因子（rheumatoid factor,RF)nRFRF是变性是变性IgGIgG刺激机体产生的一种自身刺激机体产生的一种自身

18、抗体。是抗人抗体。是抗人IgG FcIgG Fc段的自身抗体。段的自身抗体。n分型：分型：IgM;IgG;IgA;IgD;IgEIgM;IgG;IgA;IgD;IgE型型类风湿因子类风湿因子（rheumatoid factor,RF)类风湿因子临床意义类风湿因子临床意义n主要出现于类风湿关节炎患者的血清和关节液中，主要出现于类风湿关节炎患者的血清和关节液中，敏感性敏感性70%70%，特异性，特异性60%60%。n高滴度病情活动，有关节外表现时滴度高高滴度病情活动，有关节外表现时滴度高n可出现于多种自身免疫性疾病中，如干燥综合征，可出现于多种自身免疫性疾病中，如干燥综合征，系统性红斑狼疮，皮肌炎

19、等。某些感染性疾病和系统性红斑狼疮，皮肌炎等。某些感染性疾病和老年人也可呈阳性。老年人也可呈阳性。RF RF对类风湿关节炎（对类风湿关节炎（RARA）不特异）不特异类风湿关节炎类风湿关节炎早期血清学自身抗体早期血清学自身抗体n nRF(RF(类风湿因子类风湿因子)n nAPF(APF(抗核周因子抗核周因子)n nAKA(AKA(抗角蛋白抗体抗角蛋白抗体)n n抗抗CCP(CCP(环瓜氨酸肽环瓜氨酸肽)抗体抗体5.抗中性粒细胞胞浆抗体抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）-小血管炎小血管炎n胞浆型cANCA（cytoplasmic pattern）n核周型pANCA（perinuclear patte

20、rn）ANCAANCA主要靶抗原主要靶抗原ncANCAcANCA （cytoplasmic patterncytoplasmic pattern）蛋白酶蛋白酶3 3 （Proteinase 3 Proteinase 3，PR3)PR3)npANCApANCA（perinuclear pattern)perinuclear pattern)髓过氧化物酶髓过氧化物酶 （myeloperoxidase myeloperoxidase，MPOMPO）ANCAANCA临床意义临床意义n诊断系统性血管炎诊断系统性血管炎nC-ANCAC-ANCA对对WGWG高度特异高度特异（95%95%），且和），且和活动

21、相关活动相关 抗抗PR3PR3抗体抗体nP-ANCAP-ANCA可见于多种疾病：可见于多种疾病：MPAMPA、CSSCSS等血管炎和其他继发性血管炎等等血管炎和其他继发性血管炎等 抗抗MPOMPO抗体抗体6、其他组织和细胞抗体、其他组织和细胞抗体n抗线粒体抗体抗线粒体抗体AMA AMA-M2 PBCn抗心磷脂抗体抗心磷脂抗体 ACL 抗磷脂综合征抗磷脂综合征n抗甲状腺球蛋白抗体抗甲状腺球蛋白抗体甲状腺疾病甲状腺疾病n抗甲状腺微粒体抗体抗甲状腺微粒体抗体甲状腺疾病甲状腺疾病n抗乙酰胆碱受体抗体抗乙酰胆碱受体抗体重症肌无力重症肌无力n抗平滑肌抗体抗平滑肌抗体自身免疫性肝炎自身免疫性肝炎三、肿瘤标志

22、物三、肿瘤标志物(tumor marker)(tumor marker)检测检测n肿瘤标志物肿瘤标志物(tumor marker,TM)是由肿瘤是由肿瘤细胞本身合成、释放或者是由机体对肿瘤细胞本身合成、释放或者是由机体对肿瘤细胞反应而产生的一类物质。细胞反应而产生的一类物质。n有助于：肿瘤诊断、疗效、监测复发、预有助于：肿瘤诊断、疗效、监测复发、预后评估后评估、甲种胎儿球蛋白、甲种胎儿球蛋白（alpha fetoprotein,AFP)alpha fetoprotein,AFP)n甲胎蛋白甲胎蛋白是在胎儿早期由肝脏合成的一种是在胎儿早期由肝脏合成的一种糖蛋白，胎儿血浆中糖蛋白，胎儿血浆中AFP

23、AFP值可达值可达30003000g/L,g/L,周岁婴儿浓度接近成人水平，周岁婴儿浓度接近成人水平，一般健康成一般健康成人血浆人血浆AFPAFP浓度低于浓度低于20 20 g/Lg/L。n甲胎蛋白甲胎蛋白AFPAFP临床意义临床意义（1 1）原发性肝细胞癌原发性肝细胞癌 AFP AFP 300 g/Lg/L（2 2）生殖腺胚胎癌，胃癌，胰腺癌）生殖腺胚胎癌，胃癌，胰腺癌AFPAFP也可升高也可升高（3 3）病毒性肝炎，肝硬化）病毒性肝炎，肝硬化 300 g/Lg/L（4 4）妇女妊娠）妇女妊娠3 3个月后开始升高，个月后开始升高，7-87-8个月达到高个月达到高峰，分娩后峰，分娩后3 3周恢

24、复正常。周恢复正常。、癌胚抗原、癌胚抗原（carcinoembryonic antigen,CEA)n癌胚抗原癌胚抗原是由胎儿早期的消化管及某些组是由胎儿早期的消化管及某些组织合成的一种富含多糖的蛋白复合物。是织合成的一种富含多糖的蛋白复合物。是一种一种广谱肿瘤标志物广谱肿瘤标志物。n临床意义：临床意义：结肠癌、直肠癌、胰腺癌结肠癌、直肠癌、胰腺癌、胃癌、肺胃癌、肺癌、乳腺癌等。癌、乳腺癌等。连续随访检测连续随访检测。结肠炎、胰腺炎、肝脏疾病和肺部疾结肠炎、胰腺炎、肝脏疾病和肺部疾病轻度升高。病轻度升高。吸烟者及肾功异常者。吸烟者及肾功异常者。、其他肿瘤标志物、其他肿瘤标志物n前列腺特异抗原测

25、定前列腺特异抗原测定 前列腺癌前列腺癌（prostate specific antigen,PSA)prostate specific antigen,PSA)n糖链抗原糖链抗原19-919-9胰腺癌胰腺癌（carbohydrate antigen 19-9,CA19-9)carbohydrate antigen 19-9,CA19-9)n癌抗原癌抗原125 CA125 125 CA125 卵巢癌卵巢癌n癌抗原癌抗原242 CA242 242 CA242 胰腺癌、结肠癌、胃癌胰腺癌、结肠癌、胃癌 四、四、病毒性肝炎病毒性肝炎病原标志物病原标志物检测检测及其他病原体感染免疫检测及其他病原体感染免

26、疫检测A病毒性肝炎病毒性肝炎Hepatitis Virus肠道传播肠道传播肠道外传播肠道外传播F,TTV?其它其它ENANBNANBBDC病毒性肝炎病毒性肝炎-背景背景G病毒性肝炎病毒性肝炎病原体病原体 肝炎病毒肝炎病毒(Hepatitis Virus)主要主要7型型n甲型肝炎病毒(HAV)n乙型肝炎病毒(HBV)n丙型肝炎病毒(HCV)n丁型肝炎病毒(HDV)n戊型肝炎病毒(HEV)n庚型肝炎病毒(HGV)n输血传播肝炎病毒（TTV)传染源传染源粪便粪便血液/血源性物质/体液血液/血源性物质/体液血液/血源性物质/体液粪便传播途径传播途径粪-口经皮肤/经粘膜经皮肤/经粘膜经皮肤/经粘膜粪-口

27、慢性感染慢性感染否是是是否病毒性肝炎类型病毒性肝炎类型ABCDE基因组类型 ssRNA dsDNA ssRNA ssRNA ssRNA（一）甲型病毒性肝炎（一）甲型病毒性肝炎n甲肝是一种急性传染病甲肝是一种急性传染病n经粪经粪-口传播，可爆发流行，病后免疫巩口传播，可爆发流行，病后免疫巩固。固。n不转变为慢性不转变为慢性甲型肝炎病毒标志物检测甲型肝炎病毒标志物检测n1 1 甲型肝炎病毒抗原和甲型肝炎病毒抗原和HAV-RNAHAV-RNA测定测定 与发病前两周即可于血中和粪便中检与发病前两周即可于血中和粪便中检测，对早期诊断具有特异性。测，对早期诊断具有特异性。n2 2 甲型肝炎病毒抗体甲型肝炎

28、病毒抗体测定测定 IgM IgM阳性是早期特异性诊断指标，提示阳性是早期特异性诊断指标，提示甲肝感染期；甲肝感染期；IgG IgG阳性是恢复期指标，终身存在。阳性是恢复期指标，终身存在。（二）（二）Hepatitis B Virus(乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒)n乙型肝炎的病原体乙型肝炎的病原体n在全世界广泛流行，估计全球半数以上人在全世界广泛流行，估计全球半数以上人口已被口已被HBV感染过，感染过，5%的人口为的人口为HBV慢性慢性感染感染n中国：乙肝高发区，人群中国：乙肝高发区，人群HBsAg的检出率的检出率达达9.8%Hepatitis B VirusHBV virionThe infec

29、tious virion is called the DANE particle.Both comprised of HBsAgHBV nomenclaturenHBV:hepatitis B virusnHBsAg:hepatitis B virus surface antigennHBsAb:hepatitis B virus surface antibodynHBcAg:hepatitis B virus core antigennHBcAb:hepatitis B virus core antibodynHBeAg:hepatitis B virus e antigennHBeAb:h

30、epatitis B virus e antibody抗原组成抗原组成1.-1.-HBsAgn位于病毒表面，是一种糖蛋白位于病毒表面，是一种糖蛋白n4种亚型种亚型(adr,adw,ayr,ayw)n欧美国家欧美国家:adwn我国汉族我国汉族:adrn我国少数民族我国少数民族:aywn判断判断HBV感染的指标之一感染的指标之一n刺激机体产生保护性抗体即抗刺激机体产生保护性抗体即抗-HBs抗原组成抗原组成2.-2.-HBcAgn位于位于Dane颗粒核心部分和肝细胞核内，在颗粒核心部分和肝细胞核内，在血清中不易血清中不易检出游离检出游离的的HBcAgnHBcAg判断判断病毒复制活跃的指标病毒复制活跃

31、的指标,血液传染性强血液传染性强,预后差预后差n刺激机体产生刺激机体产生抗抗-HBc(非保护性抗体非保护性抗体)n抗抗-HBc包括包括IgM,IgG,IgAn在乙肝急性期、慢性肝炎、肝癌和在乙肝急性期、慢性肝炎、肝癌和HBsAg携带者中常携带者中常可检出抗可检出抗-HBc总抗体，主要反映总抗体，主要反映抗抗-HBc IgGn抗抗-HBc IgM在感染后最早出现，常提示病毒处于复制常提示病毒处于复制状态状态抗原组成抗原组成3.-3.-HBeAgn位于位于HBV的核心的核心,是一种可溶性蛋白抗原是一种可溶性蛋白抗原nHBeAg和和Dane颗粒出现相平行，且与颗粒出现相平行，且与DNA多聚多聚酶在血

32、中的消长动态相符合酶在血中的消长动态相符合n血中血中HBeAg的的出现可作为出现可作为HBV复制、病情活动复制、病情活动及及较强较强传染性传染性的指标的指标n刺激机体产生抗刺激机体产生抗-HBen抗抗-HBe能与受染肝细胞表面的能与受染肝细胞表面的e抗原结合抗原结合,通过补通过补体介导破坏受染的肝细胞体介导破坏受染的肝细胞,抗抗-HBe的出现是预后良的出现是预后良好的征象好的征象抗原组成抗原组成4.-Pre-S4.-Pre-S抗原抗原n位于位于HBV的外衣壳上，有两种的外衣壳上，有两种Pre-SPre-S1 1，Pre-SPre-S2 2nPre-SPre-S1 1刺激机体产生抗刺激机体产生抗

33、Pre-SPre-S1 1，能阻断，能阻断HBV与肝细胞与肝细胞受体结合，从而起到抵抗病毒受体结合，从而起到抵抗病毒的作用的作用nPre-SPre-S1 1抗原比抗原比HBeAg作为病毒复制指标敏感作为病毒复制指标敏感，Pre-Pre-S S1 1抗原转阴越早，抗原转阴越早，Pre-S Pre-S1 1抗体转阳越早，病程越短，抗体转阳越早，病程越短，预后越好预后越好nPre-SPre-S2 2是是HBVHBV侵入肝细胞的主要结构成分，侵入肝细胞的主要结构成分，刺激机体刺激机体产生抗产生抗Pre-SPre-S2 2是是HBVHBV的中和抗体的中和抗体n抗抗Pre-SPre-S1 1和抗和抗Pre

34、-SPre-S2 2出现，表示病情好转，趋向痊愈出现，表示病情好转，趋向痊愈血源性传播血源性传播输输血血、注注射射、外外科科和和牙牙科科手手术术、针针刺刺等等剃刀、牙刷和蚊虫叮咬等剃刀、牙刷和蚊虫叮咬等母婴垂直传播母婴垂直传播性传播性传播HBV 传播途径传播途径5.病原学诊断病原学诊断(1)(1)-抗原抗体检测抗原抗体检测n项目：项目：HBsAg、抗、抗-HBs、HBeAg、抗、抗-HBe、抗、抗-HBc以及抗以及抗-HBc IgMn方法方法nELISA(enzyme-linked immunosorbent assay，最常用，定性，最常用，定性)n发光免疫分析发光免疫分析(定量定量)n反相

35、间接血凝试验反相间接血凝试验(少用少用)5.病原学诊断病原学诊断(2)(2)核酸检测核酸检测n核酸杂交核酸杂交n探针探针nPCRn引物引物nHBsAg 感染的标志感染的标志nAnti-HBs 既往感染既往感染/接种疫苗接种疫苗nAnti-HBc IgM 急性感染标志急性感染标志nAnti-HBc IgG 既往或慢性感染既往或慢性感染nHBeAg 急性病毒复制，有传染性急性病毒复制，有传染性n Anti-HBe 病毒不再复制病毒不再复制nHBV-DNA 急急性性病病毒毒复复制制，比比HBeAg更更准准确确；主要用于监测治疗反应主要用于监测治疗反应血清学检测的临床意义血清学检测的临床意义HBsAg

36、 抗抗-HBs HBeAg 抗抗-HBe 抗抗-HBc 临床意义临床意义 急性或慢性感染急性或慢性感染(大三阳大三阳)+-+-+乙肝后期或慢性感染乙肝后期或慢性感染(小三阳小三阳)-+-潜伏期或急性乙肝早期潜伏期或急性乙肝早期-+痊愈或恢复期痊愈或恢复期,有免疫力有免疫力-+-痊愈痊愈,有免疫力有免疫力疫苗接种或曾经感染过疫苗接种或曾经感染过,有免疫力有免疫力（三）丙型肝炎病毒（三）丙型肝炎病毒nRNARNA病毒病毒n从急性感染从急性感染(或隐性感染或隐性感染)变成慢性肝炎的变成慢性肝炎的平均过程约平均过程约1010年，发展到肝硬变约年，发展到肝硬变约20 20 年年，少数患者恶变为原发性肝细

37、胞性肝癌需少数患者恶变为原发性肝细胞性肝癌需3030年左右年左右丙肝与乙肝的比较丙肝与乙肝的比较n无症状及无黄疸病例较多，有些患者不易被发现无症状及无黄疸病例较多，有些患者不易被发现n传播方式与乙型肝炎相似，两者均可通过输血、传播方式与乙型肝炎相似，两者均可通过输血、血制品、血液透析及静脉内滥用药物等途径传播血制品、血液透析及静脉内滥用药物等途径传播n丙型肝炎也可能有性接触传播及母婴传播，但不丙型肝炎也可能有性接触传播及母婴传播，但不 如乙型肝炎发生机率高如乙型肝炎发生机率高n有无症状丙肝病毒有无症状丙肝病毒 慢性携带者慢性携带者n有向慢性肝炎或肝硬变发展的倾向，其发生率甚有向慢性肝炎或肝硬变

38、发展的倾向，其发生率甚至比乙型肝炎更高。至比乙型肝炎更高。n与乙型肝炎相似，丙型肝炎也可发展为原发性肝与乙型肝炎相似，丙型肝炎也可发展为原发性肝癌。癌。丙型肝炎病毒标志物检测丙型肝炎病毒标志物检测n丙型肝炎病毒丙型肝炎病毒RNARNA测定测定 有助于有助于HCVHCV感染的早期诊断，阳性提示感染的早期诊断，阳性提示复制活跃，传染性强；阴性提示复制受抑，复制活跃，传染性强；阴性提示复制受抑，预后较好。预后较好。n丙型肝炎病毒抗体测定丙型肝炎病毒抗体测定 IgM IgM主要用于早期诊断，持续阳性作主要用于早期诊断，持续阳性作为转成慢性肝炎的标志，或提示病毒持续存为转成慢性肝炎的标志，或提示病毒持续

39、存在并复制。在并复制。IgGIgG表示已有表示已有HCVHCV感染。感染。（四）丁型肝炎（四）丁型肝炎n19841984年在我国首次发现。年在我国首次发现。n丁型肝炎病毒（丁型肝炎病毒（HDVHDV）是）是RNARNA病毒，一种缺陷病毒，一种缺陷病毒。与病毒。与HBVHBV共存感染，故共存感染，故常发生常发生HBVHBV和和HDVHDV联联合感染或重叠感染。合感染或重叠感染。n外壳为外壳为HBsAgHBsAg，核心为，核心为HDVAg HDVAg 和和HDV-RNA HDV-RNA。n主要传播途径：经血或血制品传播。主要传播途径：经血或血制品传播。丁型肝炎病毒标志物检测丁型肝炎病毒标志物检测n

40、丁型肝炎病毒是一种缺陷型病毒，需丁型肝炎病毒是一种缺陷型病毒，需HBVHBV或其他嗜或其他嗜肝病毒的辅助才能复制和传播。肝病毒的辅助才能复制和传播。nHDVAgHDVAg与与HBVAgHBVAg同时阳性，表示丁型和乙型肝炎病同时阳性，表示丁型和乙型肝炎病毒同时感染。毒同时感染。nHDV-IgGHDV-IgG阳性，只能在阳性，只能在HBsAgHBsAg阳性血清中测得，是阳性血清中测得，是诊断丁肝的可靠指标。诊断丁肝的可靠指标。nHDV-IgMHDV-IgM阳性，用于早期诊断阳性，用于早期诊断nHDV-RNAHDV-RNA可明确诊断。可明确诊断。（五）戊型肝炎病毒标志物检测（五）戊型肝炎病毒标志物

41、检测n戊肝的发病率青少年最高戊肝的发病率青少年最高n戊型肝炎的临床表现与甲型肝炎相似而较轻戊型肝炎的临床表现与甲型肝炎相似而较轻nHEVIgMHEVIgM阳性持续时间短，是急性感染的标志。阳性持续时间短，是急性感染的标志。nHEVIgGHEVIgG阳性恢复期效价超过或等于急性期阳性恢复期效价超过或等于急性期4 4倍者，倍者，提示提示HEVHEV新近感染。新近感染。nHEV-RNAHEV-RNA可早期诊断，并判断病人的排毒期限。可早期诊断，并判断病人的排毒期限。（六）庚型肝炎病毒标志物检测（六）庚型肝炎病毒标志物检测n庚肝多与丙肝病毒、乙肝病毒混合感染庚肝多与丙肝病毒、乙肝病毒混合感染nHGVH

42、GV抗体阳性表示曾感染过抗体阳性表示曾感染过HGV,HGV,多见于输血多见于输血后肝炎，或使用血液制品引起后肝炎，或使用血液制品引起HGVHGV合并合并HCVHCV感染的患者。感染的患者。nHGV-RNAHGV-RNA阳性表明病毒存在。阳性表明病毒存在。（七）输血传播病毒（七）输血传播病毒（TTVTTV 病毒）肝炎病毒）肝炎nTTVTTV是一种新是一种新DNADNA病毒。与原因不明的肝硬化及暴发病毒。与原因不明的肝硬化及暴发性肝衰的发病有关。性肝衰的发病有关。n输血输血可能成为传播可能成为传播TTVTTV感染的重要途径之一感染的重要途径之一n在慢性丙型肝炎及慢性乙型肝炎病人中的发病率较在慢性丙

43、型肝炎及慢性乙型肝炎病人中的发病率较高高nTTV-DNATTV-DNA阳性表明有病毒存在。阳性表明有病毒存在。五、五、感染免疫检测感染免疫检测n血清抗链球菌溶血素血清抗链球菌溶血素“O”“O”试验试验 风湿热风湿热n伤寒和副伤寒沙门菌免疫测定伤寒和副伤寒沙门菌免疫测定 肥达反应肥达反应n布氏杆菌病凝集试验布氏杆菌病凝集试验 n结核分枝杆菌抗体和结核分枝杆菌抗体和DNADNA测定测定nC C反应蛋白测定反应蛋白测定 n梅毒螺旋体抗体测定梅毒螺旋体抗体测定 nHIVHIV抗体及抗体及RNARNA测定测定 小小 结结n免疫功能检测免疫功能检测 血清免疫球蛋白血清免疫球蛋白 血清补体血清补体 细胞免疫细胞免疫 n自身抗体自身抗体 n肿瘤标志物检测肿瘤标志物检测n病毒性肝炎病原标志物检测病毒性肝炎病原标志物检测谢谢