《实训抗酸染色》PPT课件.ppt

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1、实训十实训十 结核分支杆菌检验结核分支杆菌检验一、一、实验目的目的 通过学习结核分支杆菌检验方法，为综合实训通过学习结核分支杆菌检验方法，为综合实训奠定基础。奠定基础。二、能力要求二、能力要求 学会结核分支杆菌检验方法，熟练其操作技能。学会结核分支杆菌检验方法，熟练其操作技能。三、三、实训内容内容（一）（一）实训准准备1、菌种、菌种 BCG 模模拟患者痰患者痰标本本2、试剂 40g/L NaOH 萋萋-尼染色液尼染色液3、其他、其他 显微微镜等等（二）步骤和方法（二）步骤和方法1 1、直接厚膜涂片法：挑取经加入、直接厚膜涂片法：挑取经加入40g/L NaOH40g/L NaOH消化的模拟消化的

2、模拟结核患者痰液，直接涂于玻片上，均匀抹结核患者痰液，直接涂于玻片上，均匀抹2.0cm2.5cm2.0cm2.5cm大小的卵圆形痰膜，等痰膜干燥后，再涂一层，制成厚大小的卵圆形痰膜，等痰膜干燥后，再涂一层，制成厚膜涂片。自然干燥，酒精灯外焰固定，经抗酸染色，显膜涂片。自然干燥，酒精灯外焰固定，经抗酸染色，显微镜观察结果微镜观察结果步骤简化：步骤简化：用滴管取12滴模拟标本，直接涂于玻片上涂成 2.0cm2.5cm大小的卵圆形痰膜干燥固定抗酸染色镜检先用低倍镜或高倍镜找到视野加油观察蓝色背景中找红色备注：TB耐酸耐碱，所以标本可用酸或碱处理去除杂菌再涂片镜检；一般取晨痰、即时痰、夜间痰三份痰液标本实际工作中不能用油镜直接接触涂片，以免TB污染镜头，医院检验用玻片为一次性，学校玻片可反复使用，因为实验标本为模拟标本3、染色初染：将已经固定的涂片置于染色架上滴加石炭酸复红在玻片下方以微火加热至出现蒸汽（切勿煮沸烧干，染液将要干时要随时添加如此维持5min）冷却后水洗。脱色：用3%盐酸乙醇脱色至玻片上无红色为止，但不可超过10min，水洗。复染：用吕氏美篮复染1min，水洗待干，镜检。结果观察与报告方式在淡蓝色背景下可见染成红色的细长微弯的杆菌，为抗酸性细菌，其他细菌和细胞被染成蓝色。