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1、第二章血液一般检验第1页,本讲稿共25页第2页,本讲稿共25页第3页,本讲稿共25页抗凝血系统抗凝血系统抗凝血系统抗凝血系统纤溶系统纤溶系统纤溶系统纤溶系统凝血系统凝血系统凝血系统凝血系统抗凝抗凝抗凝抗凝凝血凝血凝血凝血纤溶纤溶第4页,本讲稿共25页第5页,本讲稿共25页 第三节第三节 血小板检查血小板检查 概述概述 血小板(血小板(platelet)是由骨髓中成熟的巨核细胞的胞)是由骨髓中成熟的巨核细胞的胞质分割而生成。其生成受质分割而生成。其生成受血小板生成素血小板生成素(thrombopoietin,TPO)的调节。)的调节。血小板具有血小板具有维持血管内皮完整性的功能、聚集、释维持血管
2、内皮完整性的功能、聚集、释放、促凝和血块收缩功能。放、促凝和血块收缩功能。第6页,本讲稿共25页一、血小板计数一、血小板计数 血小板计数血小板计数(platelet count,PLT)是测)是测定全血中血小板的浓度,定全血中血小板的浓度,是止血凝血检是止血凝血检查最常见的试验之一。查最常见的试验之一。第7页,本讲稿共25页血小板计数的适应证为:血小板计数的适应证为:不明原因的出血。不明原因的出血。排除出血性疾病。排除出血性疾病。化疗和放疗病人的监测。化疗和放疗病人的监测。疑为骨髓造血系统疾病。疑为骨髓造血系统疾病。疑为血小板疑为血小板生成减少生成减少、血小板、血小板破坏增加破坏增加、血小板、
3、血小板消耗消耗过多过多或或反应性血小板增多。反应性血小板增多。第8页,本讲稿共25页血小板计数检测原理血小板计数检测原理第9页,本讲稿共25页 方法学评价方法学评价第10页,本讲稿共25页第11页,本讲稿共25页第12页,本讲稿共25页草酸铵草酸铵:对红细胞破坏力强,血小板形态清楚。为常对红细胞破坏力强,血小板形态清楚。为常规计数方法,规计数方法,草酸铵为首选稀释液。草酸铵为首选稀释液。复方尿素:复方尿素:尿素可溶解红细胞、甲醛可固定血小板和防尿素可溶解红细胞、甲醛可固定血小板和防腐,稀释后血小板胀大易辨认腐,稀释后血小板胀大易辨认 尿素容易分解,尿素容易分解,试剂容试剂容易失效。尿素不能完全
4、破坏红细胞易失效。尿素不能完全破坏红细胞 。不破坏红细胞稀释法:不破坏红细胞稀释法:复方碘稀释液。红细胞未破坏,复方碘稀释液。红细胞未破坏,试剂试剂 易长菌,干扰计数,已被淘汰易长菌,干扰计数,已被淘汰。第13页,本讲稿共25页 4.流式细胞仪法:流式细胞仪法:特异、准确、但需特殊仪器和试剂。特异、准确、但需特殊仪器和试剂。是目前血小板计数是目前血小板计数参考方法。参考方法。3.相差显微镜直接计数法:相差显微镜直接计数法:准确性高,血小板易准确性高,血小板易于识别,并可于照相后核对计数结果,是手工血于识别,并可于照相后核对计数结果,是手工血小板计数的参考方法。但由于所用仪器昂贵,临小板计数的参
5、考方法。但由于所用仪器昂贵,临床上较少选用。床上较少选用。第14页,本讲稿共25页质量保证质量保证 检测前检测前采血采血抗凝剂抗凝剂储存时间储存时间第15页,本讲稿共25页 检测中检测中器器 材材充池前充池前 摇动血小板悬液摇动血小板悬液2min或或200次以上次以上充充 池池充池后充池后 静置静置15min 采血后采血后1h内完成计数内完成计数计计 数数 光线光线 非血小板非血小板 病理干扰病理干扰 第16页,本讲稿共25页 检测后检测后核准血小板计数的方法:核准血小板计数的方法:用同用同1份血标本制备良好的血涂片,观察血小板数量、份血标本制备良好的血涂片,观察血小板数量、形态和分布情况,进
6、行核对(正常可见形态和分布情况,进行核对(正常可见815个个/油镜视野、油镜视野、无大量大型血小板;无异常增多的红、白细胞碎片)。无大量大型血小板;无异常增多的红、白细胞碎片)。用血小板计数的参考方法核对计数结果。用血小板计数的参考方法核对计数结果。每份标本最好做每份标本最好做2次计数,若次计数,若2次计数误差小于次计数误差小于10%,取其均值报告;若计数误差大于,取其均值报告;若计数误差大于10%,应做第,应做第3次计数,次计数,取取2次相近结果的均值报告。次相近结果的均值报告。第17页,本讲稿共25页生理性改变生理性改变 每天可有每天可有6%10%的变化。的变化。临床意义临床意义增多见于增
7、多见于:午后、冬季、高原居民、月经后、妊娠中:午后、冬季、高原居民、月经后、妊娠中晚期运动、饱餐后静脉血。晚期运动、饱餐后静脉血。减少见于:减少见于:早晨、春季、平原居民、月经前、分娩后、早晨、春季、平原居民、月经前、分娩后、休息后、毛细血管血。休息后、毛细血管血。第18页,本讲稿共25页病理性变化病理性变化 减少与增多减少与增多 血小板减少:血小板减少:血小板低于血小板低于100109/L时为时为血小板减少血小板减少(thrombocytopenia),为临床上),为临床上出血主要原因之一出血主要原因之一。当血小板当血小板低于(低于(2050)109/L时,可引起创伤出血或时,可引起创伤出血
8、或手术后出血;手术后出血;血小板低于血小板低于20109/L时有较严重出血。时有较严重出血。输注血小板的指征:输注血小板的指征:血小板血小板低于低于20109/L,有,有出血难止症状。出血难止症状。第19页,本讲稿共25页病理性血小板减少的原因及意义病理性血小板减少的原因及意义 第20页,本讲稿共25页血小板增多:血小板增多:血小板超过血小板超过400109/L时为时为血小板增多血小板增多(thrombocytosis),血小板大于),血小板大于1000109/L常有常有血血栓形成的危险栓形成的危险。在原因未明的血小板增多的病人中,。在原因未明的血小板增多的病人中,约有约有50%为恶性疾病。为
9、恶性疾病。病理性血小板增多的原因及意义病理性血小板增多的原因及意义第21页,本讲稿共25页 二、血小板形态检查二、血小板形态检查 (一)正常血小板形态(一)正常血小板形态 正常静息状态下,血小板为双面微凸的圆盘形,正常静息状态下,血小板为双面微凸的圆盘形,直直径为径为1.53m、平均体积为、平均体积为7.2fl的非细胞结构成分。的非细胞结构成分。染色后镜下可呈散在或成簇分布,圆形、椭圆或不规染色后镜下可呈散在或成簇分布,圆形、椭圆或不规则。则。胞质呈淡蓝色或淡红胞质呈淡蓝色或淡红,内含较多的细小,内含较多的细小紫红色颗粒。紫红色颗粒。血涂片上,为红细胞数的血涂片上,为红细胞数的1/301/20
10、,通常每个通常每个油镜油镜视视野可见野可见725个,个,分散或分散或35成群分布。成群分布。参考值:参考值:(100300)109/L 第22页,本讲稿共25页(二)异常血小板形态(二)异常血小板形态 1.大小异常大小异常 1)大血小板:)大血小板:直径直径7m、常为、常为720m。见于。见于巨大巨大血小板综合征、血小板无力症、血小板综合征、血小板无力症、ITP、MDS等。等。2)小血小板:)小血小板:直径直径1.5m。假冒于缺铁贫、再障。假冒于缺铁贫、再障。2.形态异常:形态异常:超过超过10%才有临床意义。才有临床意义。1)血小板颗粒减少)血小板颗粒减少2)血小板卫星现象血小板卫星现象3)
11、血小板)血小板“黏附黏附”红细胞红细胞第23页,本讲稿共25页 3.聚集性和分布异常聚集性和分布异常 正常抗凝血外周血涂片可见正常抗凝血外周血涂片可见35个聚集成簇或成团,个聚集成簇或成团,聚集与散在血小板比为聚集与散在血小板比为20:11)血小板聚集:)血小板聚集:多为血小板增多,大片聚集。多为血小板增多,大片聚集。见于:特发性血小板增多症、慢粒。见于:特发性血小板增多症、慢粒。2)血小板)血小板成团或聚集减少:多为血小板减少。成团或聚集减少:多为血小板减少。见于再障、见于再障、ITP。3)血小板)血小板散在分布:多为散在分布:多为血小板聚集功能异常。血小板聚集功能异常。见于血小板无力症。见于血小板无力症。第24页,本讲稿共25页三、血小板形态功能检查三、血小板形态功能检查粘附功能粘附功能 血小板血小板GP Ib-经经VWF介导粘附于胶原介导粘附于胶原 血小板血小板GPIIb/IIIa经经Fg介导相互粘附介导相互粘附聚集功能聚集功能释放功能释放功能第25页,本讲稿共25页
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