第10章生物碱类药物的分析ppt课件.ppt

《第10章生物碱类药物的分析ppt课件.ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《第10章生物碱类药物的分析ppt课件.ppt（110页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、第第10章生物碱类药物的分析章生物碱类药物的分析TheAnalysisofalkaloidsl生生物物碱碱（alkaloid）是是存存在在于于自自然然界界（主主要要为为植植物物，但但有有的的也也存存在在于于动动物物）中中的的一一类类含含氮氮的的碱碱性性有有机机化化合合物物。大大多多数数有有复复杂杂的的环环状状结结构构，氮氮元元素素多多包包含含在在环环内内，有有显显著著的的生生物物活活性性，是是中中草草药药中中重要的有效成分之一。重要的有效成分之一。概述概述本章重点介绍本章重点介绍l苯烃胺类苯烃胺类l托烷类托烷类l喹啉类喹啉类l异喹啉类异喹啉类l吲哚类吲哚类l黄嘌呤类黄嘌呤类第一节第一节喹啉类喹

2、啉类一一.喹啉类喹啉类二二.具有喹啉环具有喹啉环三三.（一）代表药物（一）代表药物硫酸奎宁、硫酸奎尼丁同分异构体，H2SO4,2H2O喹核碱喹核碱喹啉环喹啉环奎宁（奎宁（9R)奎尼丁（奎尼丁（9S)l生物碱碱性强弱一般规律是：生物碱碱性强弱一般规律是：l季季铵铵碱碱类类脂脂肪肪胺胺类类NH3芳芳胺胺、N-芳杂环酰胺类芳杂环酰胺类（二）性质（二）性质1.对于奎宁，喹核碱上对于奎宁，喹核碱上N，碱性强，碱性强，pKb15.1，与与H2SO4成盐；喹啉环上成盐；喹啉环上N，碱性弱，碱性弱，pKb29.7，不与不与H2SO4成盐；成盐；2.奎宁丁奎宁丁pKb15.4,pKb210.0，3.具有具有4个

3、个N，强碱强碱2N，弱减弱减2N。4.4.具有手性具有手性C，有旋光性，硫酸奎宁左旋有旋光性，硫酸奎宁左旋体，硫酸奎宁丁为右旋体。体，硫酸奎宁丁为右旋体。二二.鉴别反应鉴别反应（一）绿奎宁反应（一）绿奎宁反应（Thalleioquin）硫酸奎宁硫酸奎宁硫酸奎尼丁硫酸奎尼丁Br2T.SNH3T.S翠绿色翠绿色（二）荧光特征（二）荧光特征硫酸奎宁硫酸奎宁硫酸奎尼丁硫酸奎尼丁H2O溶解溶解稀稀H2SO4蓝色荧光蓝色荧光蓝色荧光蓝色荧光三三.含量测定含量测定非水溶液滴定法（非水碱量法）非水溶液滴定法（非水碱量法）本本类类药药物物在在水水中中碱碱性性较较弱弱，不不能能顺顺利利地地进进行行中中和和滴滴定定

4、（滴滴定定突突跃跃不不明明显显，难难以以判断滴定终点）。判断滴定终点）。在酸性非水介质中（如冰醋酸中），则在酸性非水介质中（如冰醋酸中），则能显示出较强的碱性，滴定突跃增大，能显示出较强的碱性，滴定突跃增大，可以顺利地进行中和滴定。可以顺利地进行中和滴定。1.基本原理基本原理2.少数碱性药物以游离状态存在，多少数碱性药物以游离状态存在，多数以盐形式存在。数以盐形式存在。置换反应置换反应，即用强酸（即用强酸（HClO4）置换出与生物碱结合的弱酸（置换出与生物碱结合的弱酸（HA）.HA不同，对滴定反应的影响也不同。不同，对滴定反应的影响也不同。HA弱酸弱酸有机酸：马来酸有机酸：马来酸无机酸：无机酸

5、：HCl、H2SO4、HNO3、H3PO4、HBrHClO4、HBr、HCl、H2SO4、HNO3在在水中酸强度相等。水中酸强度相等。在冰醋酸中酸强度不相同在冰醋酸中酸强度不相同.HClO4HBrH2SO4HClHNO3其它弱酸其它弱酸2.基本方法基本方法半微量分析方法：半微量分析方法：v消耗消耗HClO4（0.1mol/L）约约8ml；v用用10ml滴定管，常量消耗滴定管，常量消耗2025mlv空白试验消耗：空白试验消耗：13D，20D1ml1D0.05v只有在只有在10ml滴定管方能读出，误差小。滴定管方能读出，误差小。1)适用适用Kb10 C重新配制标定重新配制标定 t1-t0 2 C直

6、接使用直接使用iii.2 C t1-t0 10 C公式校正公式校正5)空白试验空白试验消除试剂对终点的影响消除试剂对终点的影响6)注意事项注意事项a.仪器干净，干燥无水；仪器干净，干燥无水；b.10ml滴定管，三角烧瓶滴定管，三角烧瓶50mlc.HAC、HClO4腐蚀性，易损伤皮肤腐蚀性，易损伤皮肤三三.原料药测定原料药测定1.游离生物碱测定咖啡因咖啡因0.15g醋酐醋酐-冰醋酸冰醋酸5：1CV1DHClO4(0.1mol/L）黄色黄色2.生物碱盐的测定生物碱盐的测定1）氢卤酸盐的测定）氢卤酸盐的测定氢卤酸在氢卤酸在gHAc中酸性较强，使滴定反应中酸性较强，使滴定反应不能进行到底。不能进行到底

7、。BHX+HClO4BHClO4+HX排除方法：排除方法：加入过量的加入过量的HgAc2/gHAc试液试液盐酸麻黄碱盐酸麻黄碱冰醋酸冰醋酸10mlHg(AC)24ml结晶紫结晶紫1DHClO4(0.1mol/L）翠绿色翠绿色由于醋酸汞毒性较大，由于醋酸汞毒性较大，Ch.P(2010)大多数大多数生物碱氢卤酸盐的测定取消醋酸汞，改为生物碱氢卤酸盐的测定取消醋酸汞，改为电位法指示终点。电位法指示终点。2)硝酸盐的测定硝酸盐的测定HNO3在在gHAc中中为为弱弱酸酸，不不影影响滴定突跃。响滴定突跃。HNO3具具有有氧氧化化性性，使使指指示示剂剂变变黄黄，不不能能使使用用指指示示剂剂，应应采采用用电电

8、位位法法指指示示终终点点或或将将HNO3破破坏分解后再进行测定。坏分解后再进行测定。3)磷酸盐及有机酸盐的测定磷酸盐及有机酸盐的测定磷酸、有机酸为弱酸，不干扰滴定。磷酸、有机酸为弱酸，不干扰滴定。4)硫酸盐的测定硫酸盐的测定（以硫酸奎宁的测定为例（以硫酸奎宁的测定为例）直接滴定法直接滴定法注注意意硫硫酸酸盐盐的的结结构构，正正确确判判断断反反应应的摩尔比。的摩尔比。分子中有四个分子中有四个N原子原子l二个喹啉二个喹啉N，属于芳环族属于芳环族N，碱性较弱碱性较弱l二个喹核二个喹核N，属于脂环族属于脂环族N，碱性较强碱性较强在在水水中中硫硫酸酸是是二二元元酸酸，能能够够解解离离出出两两个个氢离子，

9、即氢离子，即l在冰醋酸中硫酸是一元酸，能够解离出在冰醋酸中硫酸是一元酸，能够解离出一个氢离子，即一个氢离子，即奎奎宁宁与与硫硫酸酸结结合合时时，一一分分子子的的硫硫酸酸能与两分子的奎宁结合，即：能与两分子的奎宁结合，即：滴定反应如下：滴定反应如下：+3HClO4+l用用HClO4直接滴定硫酸喹宁时，摩尔比是直接滴定硫酸喹宁时，摩尔比是1 3l用用HClO4直接滴定硫酸阿托品直接滴定硫酸阿托品硫酸阿托品（莨菪碱）的结构如下：硫酸阿托品（莨菪碱）的结构如下：反应的摩尔比是反应的摩尔比是1 1练习题练习题：硫酸奎宁的测定：硫酸奎宁的测定称称取取样样品品适适量量，加加gHAc7ml，醋醋酐酐3ml与与

10、结结晶晶紫紫指指示示液液1滴滴，用用HClO4滴滴定定液液（0.1mol/L）液液滴滴定定至至终终点点，并并将将滴滴定定结果用空白试验校正。结果用空白试验校正。已已知知：HClO4滴滴定定液液（1ml0.1mol/L）相当于相当于24.90mg的硫酸奎宁。的硫酸奎宁。求：硫酸奎宁的分子量。求：硫酸奎宁的分子量。II.碱处理后测定法碱处理后测定法以硫酸奎宁片含量测定为例，经过处理排除以硫酸奎宁片含量测定为例，经过处理排除辅料对测定的影响辅料对测定的影响方法：方法：10#去糖衣去糖衣称总重称总重研细研细精密称取精密称取W（相当于硫酸奎宁相当于硫酸奎宁0.3g）加加0.1mol/LNaOH10mlC

11、HCl3液液HClO4（0.1mol/L）滴定滴定CHCl3提取提取醋酐醋酐除水除水原理：原理：中和中和游离碱游离碱HClO4二甲二甲基黄基黄玫瑰红玫瑰红醋酐醋酐Mol比：比：标示百分含量标示百分含量%=100%（V-V0）TFW标示量标示量第二节第二节托烷类药物托烷类药物一一.结构与性质结构与性质1.代表药物代表药物硫酸阿托品硫酸阿托品氢溴酸东莨菪碱氢溴酸东莨菪碱，H2SO4，H2O硫酸阿托品硫酸阿托品-外消旋体外消旋体脂环脂环N，HBr，3H2O氢溴酸东莨菪碱氢溴酸东莨菪碱酯易水解酯易水解手性手性C2)性质性质v具有酯的结构，易水解；具有酯的结构，易水解；v脂环上脂环上N原子，有碱性，阿托

12、品的原子，有碱性，阿托品的pKb4.35；v具有手性具有手性C原子，有旋光性，但阿原子，有旋光性，但阿托品为外消旋体，无旋光性。托品为外消旋体，无旋光性。vUV吸收，具有苯环。吸收，具有苯环。二二.特征鉴别反应特征鉴别反应Witaili反应硫酸阿托品，氢溴酸东莨菪碱硫酸阿托品，氢溴酸东莨菪碱酯键水解生成莨菪酸，与发烟硝酸共酯键水解生成莨菪酸，与发烟硝酸共热生成黄色的三硝基衍生物，与氢氧热生成黄色的三硝基衍生物，与氢氧化钾乙醇转变成醌类产物，呈深紫色。化钾乙醇转变成醌类产物，呈深紫色。二二.含量测定含量测定l硫酸阿托品硫酸阿托品l氢溴酸东莨菪碱氢溴酸东莨菪碱l原料是非水碱量法原料是非水碱量法l制

13、剂是酸性染料比色法制剂是酸性染料比色法l(二二)酸性染料比色法酸性染料比色法l1原理原理:l在在适适当当pH溶溶液液中中,有有机机碱碱（B）可可以以与与氢氢离离子子结结合合成成阳阳离离子子（BH+）,酸酸性性染染料料（HIn）可可解解离离成成阴阴离离子子（In-）,上上述述的的阳阳离离子子与与阴阴离离定定量量地地结结合合成成有有色色离离子子对对（BH+In-），可可以以定定量量地地被被有有机机溶溶剂剂提提取取，在在一一定定波波长长处处测测定定该该溶溶液液有有色色离离子子对对的的吸吸收度，即可以计算出碱性药物的含量。收度，即可以计算出碱性药物的含量。游离游离生物碱阳离子生物碱阳离子有色有色A定量

14、定量2.方法方法a.定量分取呈色有机相定量分取呈色有机相测定测定A()b.定量分取呈色有机相定量分取呈色有机相测定测定A()c.定量分取呈色有机相定量分取呈色有机相测定测定A()脱水脱水脱水脱水脱水脱水碱化碱化酸化酸化水相水相有机相有机相通常选用通常选用a种方法种方法3.实验条件选择实验条件选择成败关键：定量生成离子对，全部提取到有机成败关键：定量生成离子对，全部提取到有机相，提取常数大，提取完全。相，提取常数大，提取完全。E提取常数提取常数D分配比，与所用酸性染料阴离子种类、分配比，与所用酸性染料阴离子种类、溶剂有关。溶剂有关。a.酸性染料选择酸性染料选择要求：要求：.能与有机碱定量结合；能

15、与有机碱定量结合；.形成离子对在有机相中有最大形成离子对在有机相中有最大溶解度，在溶解度，在max处，处，A最大最大.酸性染料不得进入有机相。酸性染料不得进入有机相。l溴麝香草酚蓝溴麝香草酚蓝(BTB)lbromthymolbluelpH6.07.6（黄黄蓝）蓝）常用酸性染料常用酸性染料磺酞类指示剂磺酞类指示剂l溴甲酚绿溴甲酚绿(BCG)lbromcresolgreenlpH3.65.2（黄黄蓝）蓝）l溴酚蓝溴酚蓝(BPB)lbromophenolbluelpH3.84.6（黄黄紫）紫）b.有机溶剂的选择有机溶剂的选择要求：要求：.不与水相互溶（在水中溶解度小）；不与水相互溶（在水中溶解度小）

16、；.生成的离子对在有机相中有最大生成的离子对在有机相中有最大溶解度，提取完全；溶解度，提取完全；.离子对在溶剂中有最大吸收度。离子对在溶剂中有最大吸收度。常用：常用：CHCl3、CH2Cl2、CCl4C水相水相pH值的选择值的选择最主要条件是水相的最主要条件是水相的pH。要求：要求：.测测得得有有机机碱碱（生生物物碱碱）全全部部以以BH+形式存在，指示剂以形式存在，指示剂以In-存在；存在；.在一定在一定pH下下定量生成离子对进入有机相定量生成离子对进入有机相.最佳最佳pH选择选择a).查手册查手册被测药物被测药物查手册查手册被测药物浓度被测药物浓度实验考察实验考察配制：配制：pH12345A

17、12345ApH pH（酸性）BH+，InBH+In-。pH（碱性）In-，BH+BH+In-。d.水分的影响水分的影响I.提取时防止水进入有机层，有机染提取时防止水进入有机层，有机染料影响测定结果料影响测定结果;II.水分使有机层混浊水分使有机层混浊;III.加入脱水剂（无水加入脱水剂（无水Na2SO4)。第一节第一节吡啶类药物吡啶类药物一、结构和性质一、结构和性质l1.结构：本类药物均有吡啶环结构：本类药物均有吡啶环吡啶吡啶异烟肼异烟肼尼可刹米尼可刹米l2.性质：性质：（1）碱性）碱性:吡啶环上氮原子吡啶环上氮原子具有叔胺性质，具有叔胺性质，pKb=8.8（水中），非水滴定；水中），非水滴

18、定；（2）异烟肼：）异烟肼：酰肼基酰肼基有强还原性有强还原性,与芳醛与芳醛缩合缩合,氧化还原滴定或比色测定；氧化还原滴定或比色测定；（3）尼可刹米尼可刹米:酰胺基酰胺基在碱性下可水解在碱性下可水解,放放出出NH(C2H5)2,用于鉴别。用于鉴别。（4）VU吸收吸收二、鉴别试验二、鉴别试验（一）吡啶环开环（一）吡啶环开环适用于吡啶环的适用于吡啶环的、位未取代以及位未取代以及或或位被羧基衍生物取代。位被羧基衍生物取代。异烟肼异烟肼尼克刹米尼克刹米硝苯地平硝苯地平1.戊烯二醛反应（吡啶类的特征反应）戊烯二醛反应（吡啶类的特征反应）尼可刹米尼可刹米CNBr苯胺苯胺戊烯二醛衍生物戊烯二醛衍生物黄色黄色同

19、上条件同上条件黄色黄色黄棕黄棕(Ch.P2005鉴别）鉴别）2.二硝基氯苯反应二硝基氯苯反应二硝基氯苯二硝基氯苯无水无水蒸干蒸干残渣残渣甲醇甲醇紫红色紫红色二硝基氯苯反应碱性溶液碱性溶液红棕色红棕色异烟肼不经处理的反应：异烟肼不经处理的反应：（二）（二）.酰肼基团的反应酰肼基团的反应Ag+被还原生成被还原生成Ag，产生黑色浑浊，在干净产生黑色浑浊，在干净的试管壁发生银的试管壁发生银-镜反应，气泡有氮气生成。镜反应，气泡有氮气生成。1.还原反应：还原反应：(Ch.P2005鉴别）鉴别）2.缩和反应缩和反应异烟肼香草醛异烟肼香草醛异烟腙（异烟腙（黄色结晶黄色结晶）测定测定mp水杨醛、对二甲氨基苯甲

20、醛水杨醛、对二甲氨基苯甲醛(Ch.P2005鉴别）鉴别）黄色黄色（三）形成沉淀的反应（三）形成沉淀的反应本类药物具有叔胺性质，可与重金本类药物具有叔胺性质，可与重金属盐类（氯化汞、碘化铋钾、硫酸铜等属盐类（氯化汞、碘化铋钾、硫酸铜等试液）和碘试液等生物碱沉淀剂形成沉试液）和碘试液等生物碱沉淀剂形成沉淀。淀。1.与与HgCl2的反应的反应2.异烟肼异烟肼HgCl23.尼克刹米尼克刹米白色白色2.与与CuSO4反应反应尼克刹米尼克刹米CuSO4NH4SCN草绿色草绿色(Ch.P2005鉴别）鉴别）（四）（四）.分解产物的反应分解产物的反应红色石蕊试纸红色石蕊试纸蓝蓝(Ch.P2005鉴别）鉴别）尼

21、克刹米、异烟肼尼克刹米、异烟肼无水无水NaCO3或或Ca(OH)2共热共热吡啶臭味吡啶臭味尼克刹米尼克刹米NaOH加热加热二乙胺臭味二乙胺臭味三、特殊杂质检查三、特殊杂质检查异烟肼中杂质异烟肼中杂质游离肼（致癌物）游离肼（致癌物）TLC法（杂质对照品法）法（杂质对照品法）来源来源a.原料未反应完全原料未反应完全b.降解产生游离肼降解产生游离肼NH2NH2供试液：供试液：50mg/ml点点10l对照液对照液：(NH2)2H2SO4配制配制（(NH2)250g/ml）点点2l显色剂：对二甲氨基苯甲醛（黄）显色剂：对二甲氨基苯甲醛（黄）判断：在供试品溶液主斑点前方与对照品溶液判断：在供试品溶液主斑点

22、前方与对照品溶液主斑点相应的位置上，不得显黄色斑点。主斑点相应的位置上，不得显黄色斑点。限度限度%=50g/ml2l10-350mg/ml10l100%四、含量测定四、含量测定1、溴酸钾法、溴酸钾法（Ch.P2005）操作：操作：原理：原理：等当点等当点:稍过量的稍过量的Br2红红无无讨论：讨论：a.缓缓缓缓滴滴定定并并充充分分振振摇摇,防防止止局局部部浓度过高终点提前；浓度过高终点提前；b.到到终终点点后后,补补加加一一滴滴指指示示剂剂,如如颜颜色褪去即可色褪去即可,否则未到终点；否则未到终点；c.Ch.P2005均均采采用用本本法法测测定定异异烟烟肼原料及其制剂（片、注射剂）；肼原料及其制

23、剂（片、注射剂）；d.化学计量关系：化学计量关系：3/2T=0.016673/2137.14=3.429mg/ml2.非水滴定法：非水滴定法：利用吡啶环的碱性，进行非水利用吡啶环的碱性，进行非水滴定（尼克刹米，滴定（尼克刹米，Ch.P2005）第四节第四节吩噻嗪类药物分析吩噻嗪类药物分析一、结构与性质一、结构与性质1.代表药物代表药物硫氮杂蒽母核硫氮杂蒽母核R，R取代基不同取代基不同RR盐类盐类药名药名-(CH2)3N(CH3)2-HHCl盐酸丙嗪盐酸丙嗪-(CH2)3N(CH3)2-ClHCl盐酸氯丙嗪盐酸氯丙嗪-CH2CH(CH3)N(CH3)2-HHCl盐酸异丙嗪盐酸异丙嗪2.特点与性质

24、特点与性质1)硫氮杂蒽母核硫氮杂蒽母核2)UV吸收：具有共轭体系，吸收：具有共轭体系，S未被氧化未被氧化3)三个峰（三个峰（205、254、300nm）；）；3)S原子二价，可被氧化；与氧化剂（硫酸、原子二价，可被氧化；与氧化剂（硫酸、硝酸、三氯化铁及过氧化氢等）呈色。硝酸、三氯化铁及过氧化氢等）呈色。O四个峰四个峰S亚砜亚砜砜砜4)S与金属离子反应与金属离子反应S呈色，氧化产物无此反应；呈色，氧化产物无此反应；Pd2+5)10位侧链叔位侧链叔N，弱碱性，非水滴定弱碱性，非水滴定二、鉴别二、鉴别1、特征的紫外吸收：、特征的紫外吸收：具具有有三三个个峰峰值值205nm、254nm和和300nm附

25、附近近，两两个个谷谷220nm和和280nm附附近近；若若被被氧氧化化则则有有四四个个吸吸收收峰峰，可可用用于判断样品中有无氧化物于判断样品中有无氧化物。2.显色反应：显色反应：(1)氧化剂：氧化剂：H2SO4、HNO3、FeCl3、H2O2(2)（癸氟奋乃静的鉴别。可用于比色测定）（癸氟奋乃静的鉴别。可用于比色测定）三三.含量测定含量测定1.非水滴定法非水滴定法2.钯离子比色法钯离子比色法3.氧化还原法（铈量法）氧化还原法（铈量法）4.紫外分光光度法紫外分光光度法1、非水碱量法：、非水碱量法：吩噻嗪类药物母核上氮原子碱性极弱吩噻嗪类药物母核上氮原子碱性极弱,不能进行滴定不能进行滴定,10位取

26、代基上位取代基上N原子为原子为碱性碱性,可在非水介质中以高氯酸标准液，可在非水介质中以高氯酸标准液，以以CV为指示剂。为指示剂。2、铈量法：、铈量法：原理原理:适当适当pH下下,用硫酸铈氧化吩噻用硫酸铈氧化吩噻嗪进行测定嗪进行测定开始：开始：药物药物e红色游离基红色游离基终点：终点：药物药物2e红色消失红色消失终点：红色终点：红色无色无色自身指示剂自身指示剂条件：稀硫酸条件：稀硫酸优点：优点：（1）赋赋形形剂剂不不干干扰扰,复复方方制制剂剂中中咖咖啡啡因因、苯苯丙丙胺胺、可可待待因因、巴巴比比妥妥类类药药物物等等不不干干扰扰测定。测定。（2）反反应应为为一一价价还还原原（Ce4+Ce3+）,对

27、对环上取代基无作用；环上取代基无作用；mol比：比：1：2（3）用于原料药，也可用于制剂分析）用于原料药，也可用于制剂分析。3、钯离子比色法：、钯离子比色法：原理：原理：吩吩噻噻嗪嗪类类药药物物可可与与一一些些金金属属离离子子（如如Pd2+）在在适适当当pH值值的的溶溶液液中中形形成成有色的络合物，借以进行比色测定。有色的络合物，借以进行比色测定。讨论：讨论：（1）可可选选择择性性地地应应用用于于未未被被氧氧化化的的吩吩噻噻嗪药物。氧化的硫原子不与钯离子呈色。嗪药物。氧化的硫原子不与钯离子呈色。（2）本法优点：氧化产物不干扰。）本法优点：氧化产物不干扰。4、UV法：法：(1)直接分光光度法：(

28、2)萃取后分光光度法：(3)二阶导数分光光度法：(4)萃取-双波长分光光度法：（一）紫外分光光度法（一）紫外分光光度法1.直接直接UV法法2.例例1盐酸异丙嗪片剂（盐酸异丙嗪片剂（）10去糖衣精称去糖衣精称研细研细W(12.5mg)200ml249nm测定测定A910HCl(91000)2.盐酸异丙嗪注射液（盐酸异丙嗪注射液（）含抗氧剂含抗氧剂Vc，在在249nm有吸收，选有吸收，选299nm精密取精密取2ml100mlHCl（91000）10ml100ml标示量：标示量：1ml:10mg标示量标示量=AD100V取取标示量标示量100注射剂注射剂标示量标示量%=每每ml药液含主药的量药液含主

29、药的量标示量标示量100%2.萃取后萃取后UV法法例：盐酸氯丙嗪注射液（例：盐酸氯丙嗪注射液（法法）盐酸氯丙嗪盐酸氯丙嗪提取液提取液NH3乙醚乙醚提取提取除掉除掉VcHCl萃取萃取萃取液萃取液=254nm测定测定A盐酸氯丙嗪盐酸氯丙嗪3.萃取萃取-双波长分光光度法：双波长分光光度法：-用于校正样品中氧化产物对测定影响用于校正样品中氧化产物对测定影响氯氯丙丙嗪嗪的的最最大大吸吸收收波波长长为为254nm,其其氧氧化化产产物物在在此此波波长长也也有有吸吸收收,同同时时在在277nm处处氧氧化化产产物物也也有有吸吸收收,且且其其吸吸收收度度与与在在254nm处处吸吸收收度度相相等等,而氯丙嗪在此波长

30、处无吸收而氯丙嗪在此波长处无吸收.2.方法（以盐酸氯丙嗪注射液为例方法（以盐酸氯丙嗪注射液为例USP24)取样取样V（100mg）500ml0.1mol/L10mlH2ONH3T.S乙醚乙醚4次次/25ml乙醚液乙醚液0.1mol/LHCl4次次/25ml250ml标示量标示量CSDV标示量标示量100第五节第五节苯并二氮杂卓类药物的分析苯并二氮杂卓类药物的分析 一.结构分析 氯氮卓 地西泮 共同点：共同点：（1）二二氮氮杂杂卓卓环环为为七七元元环环，环环上上氮氮原原子子具具有有强强碱碱性性，苯苯基基的的取取代代使使碱碱性性降降低低，可进行非水滴定法测定；可进行非水滴定法测定；（2）UV吸收，

31、用于含量测定；吸收，用于含量测定；（3）环环比比较较稳稳定定，在在强强酸酸性性下下水水解解，形形成成相相应应的的二二苯苯甲甲酮酮衍衍生生物物，可可用用于于鉴鉴别别和和比比色色测测定定。（氯氯氮氮卓卓水水解解生生成成芳芳伯伯胺胺基基；地地西西泮泮水水解解生生成成芳芳仲胺基和甘氨酸）；仲胺基和甘氨酸）；（4）本本类类药药物物多多为为游游离离碱碱，不不溶溶于于水水，而溶于甲醇、乙醇和氯仿中。而溶于甲醇、乙醇和氯仿中。二、鉴别二、鉴别1、芳伯胺基反应：、芳伯胺基反应：氯氯氮氮卓卓水水解解生生成成芳芳伯伯胺胺基基(重重氮氮化化偶偶合合反反应应)2、茚三酮反应：、茚三酮反应：地西泮水解生成甘氨酸（茚三酮反

32、应）地西泮水解生成甘氨酸（茚三酮反应）3、硫酸荧光反应：、硫酸荧光反应：本类药物本类药物加硫酸，在紫外灯下，呈荧光。加硫酸，在紫外灯下，呈荧光。4.分解产物的反应分解产物的反应本类药物是有机氯化合物，采用本类药物是有机氯化合物，采用氧瓶燃烧法破坏，生成氧瓶燃烧法破坏，生成HCl，用用5NaOH吸收，显氯化物反应。吸收，显氯化物反应。Ch.P2005地西泮的鉴别地西泮的鉴别三三.含量测定含量测定1.非水滴定法非水滴定法2.HPLC法法（一）高效液相色谱法：（一）高效液相色谱法：1特点：特点：8090%反反相相色色谱谱分分离离，最最常常用用十十八八烷烷基硅烷键合硅胶（基硅烷键合硅胶（ODS）。）。

33、硅硅胶胶表表面面仅仅有有2550%硅硅醇醇基基可可与与硅硅烷烷化化试试剂剂作作用用，在在分分离离极极性性化化合合物物特特别别是是碱碱性性药药物物和和生生物物碱碱时时，裸裸露露的的硅硅醇醇基基和和碱碱性性药药物物发发生生吸吸附附或或离离子子交交换换作作用用，而而使使色色谱谱峰峰拖拖尾尾，保留时间过长，甚至长期保留在色谱柱上。保留时间过长，甚至长期保留在色谱柱上。解决方法：解决方法：1、加扫尾剂法：以十八烷基硅烷、加扫尾剂法：以十八烷基硅烷（ODS）键合的硅胶为固定相，在流键合的硅胶为固定相，在流动相中加入扫尾剂，以抑制或掩蔽固动相中加入扫尾剂，以抑制或掩蔽固定相表面的游离硅醇基的活性。最常定相表面的游离硅醇基的活性。最常用的扫尾剂是三乙胺（用的扫尾剂是三乙胺（TEA）。）。2、离子对色谱、离子对色谱