微生物课件(微生物生长).ppt
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1、第七章第七章微生物的生长微生物的生长 典型细菌生长曲线的特点和意义典型细菌生长曲线的特点和意义 理化因素对微生物生长的影响理化因素对微生物生长的影响 控制微生物生长的理化方法控制微生物生长的理化方法教学重点教学重点微生物生长微生物生长生长、繁殖的概念生长、繁殖的概念个体生长个体生长个体生长个体生长微生物生长微生物生长 平衡生长平衡生长平衡生长平衡生长 个体繁殖个体繁殖个体繁殖个体繁殖(数量增加)(数量增加)(数量增加)(数量增加)群体生长群体生长群体生长群体生长体体积积数数量量大大小小体体积积浓浓度度重重量量 浓浓度度 重重量量第一节微生物纯培养的生长 一、微生物的个体生长一、微生物的个体生长
2、 单细胞微生物个体的生长表现为细胞物质的合成单细胞微生物个体的生长表现为细胞物质的合成单细胞微生物个体的生长表现为细胞物质的合成单细胞微生物个体的生长表现为细胞物质的合成和细胞体积的增加,生长到一定时期就分裂为两个细和细胞体积的增加,生长到一定时期就分裂为两个细和细胞体积的增加,生长到一定时期就分裂为两个细和细胞体积的增加,生长到一定时期就分裂为两个细胞。多细胞微生物的个体生长反映在细胞数目和细胞胞。多细胞微生物的个体生长反映在细胞数目和细胞胞。多细胞微生物的个体生长反映在细胞数目和细胞胞。多细胞微生物的个体生长反映在细胞数目和细胞内物质含量的增加。内物质含量的增加。内物质含量的增加。内物质含
3、量的增加。微生物生长微生物生长复制基因复制基因复制基因复制基因5533细胞膜细胞膜细胞膜细胞膜间体间体间体间体A A5533B B5533C CDNADNA运动运动运动运动 的方向的方向的方向的方向55335533D D33555533图图图图6-56-5滚环复制模型滚环复制模型滚环复制模型滚环复制模型(一一一一)细菌细胞的生长细菌细胞的生长细菌细胞的生长细菌细胞的生长:细胞体积增大、原生质量增加、细胞结构组建。细胞体积增大、原生质量增加、细胞结构组建。细胞体积增大、原生质量增加、细胞结构组建。细胞体积增大、原生质量增加、细胞结构组建。1.1.细菌染色体的复制细菌染色体的复制细菌染色体的复制细
4、菌染色体的复制微生物生长微生物生长A A新合成的细胞壁新合成的细胞壁新合成的细胞壁新合成的细胞壁B B新合成的细胞壁新合成的细胞壁新合成的细胞壁新合成的细胞壁细菌细胞壁的扩增细菌细胞壁的扩增细菌细胞壁的扩增细菌细胞壁的扩增A.A.革兰氏阳性细菌细胞壁的生长革兰氏阳性细菌细胞壁的生长革兰氏阳性细菌细胞壁的生长革兰氏阳性细菌细胞壁的生长B.B.革兰氏阴性细菌细胞壁的生长革兰氏阴性细菌细胞壁的生长革兰氏阴性细菌细胞壁的生长革兰氏阴性细菌细胞壁的生长2.2.细胞壁和细胞膜的扩增细胞壁和细胞膜的扩增细胞壁和细胞膜的扩增细胞壁和细胞膜的扩增微生物生长微生物生长 4.4.细胞分裂细胞分裂细胞分裂细胞分裂 细
5、菌细胞生长到一定程度,细细菌细胞生长到一定程度,细细菌细胞生长到一定程度,细细菌细胞生长到一定程度,细胞中间部位细胞膜和壁出现凹陷,横隔壁向心生胞中间部位细胞膜和壁出现凹陷,横隔壁向心生胞中间部位细胞膜和壁出现凹陷,横隔壁向心生胞中间部位细胞膜和壁出现凹陷,横隔壁向心生长,最终在中心会合,形成两个子细胞,完成一长,最终在中心会合,形成两个子细胞,完成一长,最终在中心会合,形成两个子细胞,完成一长,最终在中心会合,形成两个子细胞,完成一次分裂。次分裂。次分裂。次分裂。3.3.核糖体的建成核糖体的建成核糖体的建成核糖体的建成 核糖体重建包括核糖体重建包括核糖体重建包括核糖体重建包括rRNArRNA
6、合成、合成、合成、合成、蛋白质合成及蛋白质在蛋白质合成及蛋白质在蛋白质合成及蛋白质在蛋白质合成及蛋白质在rRNArRNA上的装配上的装配上的装配上的装配3 3个过程。个过程。个过程。个过程。目前对大肠杆菌核糖体的建成目前对大肠杆菌核糖体的建成目前对大肠杆菌核糖体的建成目前对大肠杆菌核糖体的建成 了解比较清楚。每了解比较清楚。每了解比较清楚。每了解比较清楚。每个大肠杆菌约含个大肠杆菌约含个大肠杆菌约含个大肠杆菌约含1000010000个核糖体个核糖体个核糖体个核糖体。微生物生长微生物生长0 0101020203030404050506060代时代时代时代时/min/min606050504040
7、3030图图图图6-86-8大肠杆菌染色体复制和细菌分裂之间的关系大肠杆菌染色体复制和细菌分裂之间的关系大肠杆菌染色体复制和细菌分裂之间的关系大肠杆菌染色体复制和细菌分裂之间的关系 1.1.短线代表打开伸直的染色体;短线代表打开伸直的染色体;短线代表打开伸直的染色体;短线代表打开伸直的染色体;2.2.线上圆圈代表复制起点;线上圆圈代表复制起点;线上圆圈代表复制起点;线上圆圈代表复制起点;3.3.线分叉长短代表复制过程线分叉长短代表复制过程线分叉长短代表复制过程线分叉长短代表复制过程微生物生长微生物生长芽殖:不等分裂芽殖:不等分裂芽殖:不等分裂芽殖:不等分裂裂殖:均等分裂裂殖:均等分裂裂殖:均等
8、分裂裂殖:均等分裂 (三)丝状真菌菌丝的生长(三)丝状真菌菌丝的生长(三)丝状真菌菌丝的生长(三)丝状真菌菌丝的生长 丝状真菌营养菌丝的生长主要以极性的顶端丝状真菌营养菌丝的生长主要以极性的顶端丝状真菌营养菌丝的生长主要以极性的顶端丝状真菌营养菌丝的生长主要以极性的顶端生长的方式行。生长的方式行。生长的方式行。生长的方式行。(二)酵母菌细胞的生长(二)酵母菌细胞的生长(二)酵母菌细胞的生长(二)酵母菌细胞的生长微生物生长微生物生长二、微生物的同步生长二、微生物的同步生长二、微生物的同步生长二、微生物的同步生长(一)选择法(一)选择法(一)选择法(一)选择法1.1.离心分离法离心分离法离心分离法
9、离心分离法2.2.过滤分离法过滤分离法过滤分离法过滤分离法3.3.膜洗脱法膜洗脱法膜洗脱法膜洗脱法 同步培养方法同步培养方法同步培养方法同步培养方法A.A.膜洗脱法;膜洗脱法;膜洗脱法;膜洗脱法;B.B.离心分离法离心分离法离心分离法离心分离法将不同步的将不同步的将不同步的将不同步的菌液倒入滤器菌液倒入滤器菌液倒入滤器菌液倒入滤器翻转滤膜倒入翻转滤膜倒入翻转滤膜倒入翻转滤膜倒入新鲜培养基新鲜培养基新鲜培养基新鲜培养基新分裂的新分裂的新分裂的新分裂的细胞被洗脱细胞被洗脱细胞被洗脱细胞被洗脱收集短时期收集短时期收集短时期收集短时期内的洗脱液内的洗脱液内的洗脱液内的洗脱液A A10%10%30%30
10、%蔗糖梯度蔗糖梯度蔗糖梯度蔗糖梯度不同步菌群体不同步菌群体不同步菌群体不同步菌群体离心后离心后离心后离心后收集各部分收集各部分收集各部分收集各部分B B用小细胞接种到用小细胞接种到用小细胞接种到用小细胞接种到新鲜培养基中新鲜培养基中新鲜培养基中新鲜培养基中小细胞沉淀慢小细胞沉淀慢小细胞沉淀慢小细胞沉淀慢微生物生长微生物生长1.1.控制温度控制温度控制温度控制温度2.2.控制培养基成分控制培养基成分控制培养基成分控制培养基成分(三)细菌的同步生长与非同步生长(三)细菌的同步生长与非同步生长(三)细菌的同步生长与非同步生长(三)细菌的同步生长与非同步生长非同步细胞分裂非同步细胞分裂非同步细胞分裂非
11、同步细胞分裂同步细胞分裂同步细胞分裂同步细胞分裂同步细胞分裂时间时间时间时间细胞数的对数细胞数的对数细胞数的对数细胞数的对数 细菌的同步生长与非同步生长细菌的同步生长与非同步生长细菌的同步生长与非同步生长细菌的同步生长与非同步生长(二)诱导法(二)诱导法(二)诱导法(二)诱导法微生物生长微生物生长三、微生物的群体生长三、微生物的群体生长(一)单细胞微生物的群体生长(一)单细胞微生物的群体生长(一)单细胞微生物的群体生长(一)单细胞微生物的群体生长1.1.群体生长的测定方法群体生长的测定方法群体生长的测定方法群体生长的测定方法计繁殖数计繁殖数计繁殖数计繁殖数测生长量测生长量测生长量测生长量直接直
12、接直接直接间接间接间接间接直接直接直接直接间接间接间接间接比例计数法比例计数法比例计数法比例计数法血球计数板法血球计数板法血球计数板法血球计数板法液体稀释法液体稀释法液体稀释法液体稀释法平板菌落计数法平板菌落计数法平板菌落计数法平板菌落计数法测量体积测量体积测量体积测量体积称干重称干重称干重称干重比浊法比浊法比浊法比浊法生理指标法生理指标法生理指标法生理指标法微生物生长微生物生长2.2.细菌群体生长曲线细菌群体生长曲线细菌群体生长曲线细菌群体生长曲线 (1)(1)概念概念概念概念:以细菌数量的对数或生长速率为纵坐标,以生以细菌数量的对数或生长速率为纵坐标,以生以细菌数量的对数或生长速率为纵坐标
13、,以生以细菌数量的对数或生长速率为纵坐标,以生长时长时长时长时 间为横坐标,绘制成的曲线称为细菌的繁殖曲线。单细间为横坐标,绘制成的曲线称为细菌的繁殖曲线。单细间为横坐标,绘制成的曲线称为细菌的繁殖曲线。单细间为横坐标,绘制成的曲线称为细菌的繁殖曲线。单细胞的细菌以菌数增加作为群体生长指标,所以又称生长曲线。胞的细菌以菌数增加作为群体生长指标,所以又称生长曲线。胞的细菌以菌数增加作为群体生长指标,所以又称生长曲线。胞的细菌以菌数增加作为群体生长指标,所以又称生长曲线。菌种:纯种、单细胞少量菌种:纯种、单细胞少量菌种:纯种、单细胞少量菌种:纯种、单细胞少量 培养基:液体、恒容积培养基:液体、恒容
14、积培养基:液体、恒容积培养基:液体、恒容积 其他合适:浓度、温度等其他合适:浓度、温度等其他合适:浓度、温度等其他合适:浓度、温度等 生长曲线生长曲线生长曲线生长曲线 纵坐标:纵坐标:纵坐标:纵坐标:lglg/ml/ml 横坐标:时间横坐标:时间横坐标:时间横坐标:时间形式:一条曲线形式:一条曲线形式:一条曲线形式:一条曲线条件条件条件条件微生物生长微生物生长(2)(2)分期:延迟期、对数期、稳定期、衰亡期分期:延迟期、对数期、稳定期、衰亡期分期:延迟期、对数期、稳定期、衰亡期分期:延迟期、对数期、稳定期、衰亡期 微生物的典型生长曲线微生物的典型生长曲线微生物的典型生长曲线微生物的典型生长曲线
15、.延迟期延迟期延迟期延迟期 .对数期对数期对数期对数期 .稳定期稳定期稳定期稳定期 .衰亡衰亡衰亡衰亡期期期期总菌数总菌数总菌数总菌数活菌数活菌数活菌数活菌数培养时间培养时间培养时间培养时间/h/h1g1g1g1g细胞数细胞数细胞数细胞数/个个个个.mL.mL.mL.mL-1-1-1-1(-)0 (+)(-)0 (+)(-)0 (+)(-)0 (+)生长速度生长速度生长速度生长速度 微生物生长微生物生长延迟期延迟期延迟期延迟期特点特点特点特点a.a.a.a.生长速率为生长速率为生长速率为生长速率为0 0 0 0b.b.b.b.细胞体积增大细胞体积增大细胞体积增大细胞体积增大c.c.c.c.原生
16、质嗜碱性提高原生质嗜碱性提高原生质嗜碱性提高原生质嗜碱性提高d.d.d.d.诱导酶活力强诱导酶活力强诱导酶活力强诱导酶活力强e.e.e.e.对不良条件敏感(高温、药物等)对不良条件敏感(高温、药物等)对不良条件敏感(高温、药物等)对不良条件敏感(高温、药物等)影响因素影响因素影响因素影响因素菌种差异菌种差异菌种差异菌种差异种龄种龄种龄种龄接种量接种量接种量接种量培养基性质培养基性质培养基性质培养基性质来自对数期来自对数期来自对数期来自对数期来自延迟期来自延迟期来自延迟期来自延迟期微生物生长微生物生长对数期对数期对数期对数期:几何级数增几何级数增几何级数增几何级数增加加加加 特点特点特点特点a.
17、a.生长速度最大生长速度最大生长速度最大生长速度最大b.b.细胞平衡增长,各成分均匀细胞平衡增长,各成分均匀细胞平衡增长,各成分均匀细胞平衡增长,各成分均匀c.c.酶系活跃,代谢旺盛酶系活跃,代谢旺盛酶系活跃,代谢旺盛酶系活跃,代谢旺盛三个参数:三个参数:三个参数:三个参数:x x2 2=x=x1 1.2 2n n以对数表示以对数表示以对数表示以对数表示:lgxlgx2 2=lgx=lgx1 1+nlg2+nlg2n=n=n=n=lgxlgx2 2-lgx-lgx1 1lg2lg2=3.322(lgx=3.322(lgx2 2-lgx-lgx1 1)(1)(1)繁殖代数(繁殖代数(繁殖代数(繁
18、殖代数(n n)(2)(2)生长速率常数(生长速率常数(生长速率常数(生长速率常数(R R)R=R=n nt t2 2-t-t1 1=3.322(lgx3.322(lgx2 2-lgx-lgx1 1)t t2 2-t-t1 1(3)(3)代时(代时(代时(代时(G G)G=G=1 1R R=3.322(lgx3.322(lgx2 2-lgx-lgx1 1)t t2 2-t-t1 1t t1 1t t2 2培养时间培养时间培养时间培养时间/h/h1g1g1g1g细胞数细胞数细胞数细胞数/个个个个.mLmLmLmL-1-1-1-1x x2 2x x1 1微生物生长微生物生长影响代时的因素影响代时的
19、因素 1.1.菌种菌种菌种菌种 2.2.营养成分营养成分营养成分营养成分 3.3.营养物浓度:可影响生长速率和生长总量。营养物浓度:可影响生长速率和生长总量。营养物浓度:可影响生长速率和生长总量。营养物浓度:可影响生长速率和生长总量。4.4.培养温度培养温度培养温度培养温度 微生物生长微生物生长温度温度温度温度 代时代时代时代时/min/min/min/min 温度温度温度温度代时代时代时代时/min/min/min/min10101010860860860860 35 35 35 35 22 22 22 2215151515120120120120 40 40 40 40 17.5 17.5
20、 17.5 17.52020202090909090 45 45 45 45 20 20 20 202525252540404040 47.5 47.5 47.5 47.5 77 77 77 773030303029292929EcoliEcoli 不同温度下的代时不同温度下的代时稳定期稳定期稳定期稳定期特点特点特点特点a a.生长速率为生长速率为生长速率为生长速率为0 0b.b.细胞产量最高细胞产量最高细胞产量最高细胞产量最高c.c.贮藏物增高贮藏物增高贮藏物增高贮藏物增高d.d.芽孢菌开始形成芽孢芽孢菌开始形成芽孢芽孢菌开始形成芽孢芽孢菌开始形成芽孢e.e.有些菌产生次生代谢产物有些菌产生
21、次生代谢产物有些菌产生次生代谢产物有些菌产生次生代谢产物影响因素影响因素影响因素影响因素a a.养料消耗养料消耗养料消耗养料消耗b.b.要素比例不合适要素比例不合适要素比例不合适要素比例不合适c.c.产生有害代谢产物产生有害代谢产物产生有害代谢产物产生有害代谢产物d d.物化条件不适合物化条件不适合物化条件不适合物化条件不适合微生物生长微生物生长衰亡期衰亡期衰亡期衰亡期特点特点特点特点a.a.生长速率为负值生长速率为负值生长速率为负值生长速率为负值b.b.衰退型细胞增多衰退型细胞增多衰退型细胞增多衰退型细胞增多c c.自溶现象自溶现象自溶现象自溶现象d d.产芽孢菌大量形成芽孢,次生代谢产物增
22、多产芽孢菌大量形成芽孢,次生代谢产物增多产芽孢菌大量形成芽孢,次生代谢产物增多产芽孢菌大量形成芽孢,次生代谢产物增多影响因素影响因素影响因素影响因素:外界环境越来越不利,使细胞内分解代谢外界环境越来越不利,使细胞内分解代谢外界环境越来越不利,使细胞内分解代谢外界环境越来越不利,使细胞内分解代谢 大大超过合成代谢。大大超过合成代谢。大大超过合成代谢。大大超过合成代谢。(3)(3)意义意义意义意义微生物生长微生物生长(二二二二)丝状微生物的群体生长丝状微生物的群体生长丝状微生物的群体生长丝状微生物的群体生长(放线菌,真菌)(放线菌,真菌)(放线菌,真菌)(放线菌,真菌)15015010010050
23、500 01 12 23 34 45 56 67 78 8时间时间/d/d 腐皮镰孢菌通气液体培养的生长曲线腐皮镰孢菌通气液体培养的生长曲线腐皮镰孢菌通气液体培养的生长曲线腐皮镰孢菌通气液体培养的生长曲线微生物生长微生物生长(三)连续培养(三)连续培养(continuous cultivationcontinuous cultivation)概念概念概念概念:在培养容器中不断补充新鲜营养物质,并不断地以同样在培养容器中不断补充新鲜营养物质,并不断地以同样在培养容器中不断补充新鲜营养物质,并不断地以同样在培养容器中不断补充新鲜营养物质,并不断地以同样速度排除培养物(菌体及代谢产物),使培养系统中
24、细速度排除培养物(菌体及代谢产物),使培养系统中细速度排除培养物(菌体及代谢产物),使培养系统中细速度排除培养物(菌体及代谢产物),使培养系统中细胞数量和营养状态保持恒定,这就是连续培养法。胞数量和营养状态保持恒定,这就是连续培养法。胞数量和营养状态保持恒定,这就是连续培养法。胞数量和营养状态保持恒定,这就是连续培养法。溢流管溢流管溢流管溢流管生长室生长室生长室生长室接种口和出气口接种口和出气口接种口和出气口接种口和出气口流速控制阀流速控制阀流速控制阀流速控制阀通入空气以通入空气以通入空气以通入空气以强制通气和搅拌强制通气和搅拌强制通气和搅拌强制通气和搅拌无菌培养液贮器无菌培养液贮器无菌培养液
25、贮器无菌培养液贮器简单的连续培养装置简单的连续培养装置简单的连续培养装置简单的连续培养装置微生物生长微生物生长第二节理化因素对微生物的影响一、物理因素对微生物生长的影响一、物理因素对微生物生长的影响物理因素物理因素物理因素物理因素超声波超声波温度温度辐射辐射紫外线紫外线电离辐射电离辐射氧气氧气氧化还原电位氧化还原电位干燥干燥渗透压渗透压表面活性剂表面活性剂微生物生长微生物生长1.1.温度对微生物生长的影响温度对微生物生长的影响温度对微生物生长的影响温度对微生物生长的影响(一)温度(一)温度(一)温度(一)温度2.2.生长温度三基点生长温度三基点生长温度三基点生长温度三基点最低:最低:最低:最低
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