6 动物药、矿物药的(精品).ppt

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1、第六章第六章 动物药、矿物药的分析动物药、矿物药的分析 1、牛牛黄黄及及其其制制剂剂的的分分析析中中，掌掌握握胆胆汁汁酸酸的的化化学学反反应应，胆胆红红素素化化学学反反应应，人人工工牛牛黄黄的的定定性性鉴鉴别别，人人工工牛黄的含量测定牛黄的含量测定，熟悉熟悉含牛黄制剂分析含牛黄制剂分析2、熟熟悉悉麝麝香香、蛇蛇胆胆、蟾蟾酥酥、斑斑蝥蝥、雄雄黄黄、朱朱砂砂及及其制剂的分析的定性鉴别，含量测定其制剂的分析的定性鉴别，含量测定3、熊熊胆胆及及其其制制剂剂的的分分析析，掌掌握握熊熊去去氧氧胆胆酸酸的的定定性性鉴别，熊胆中结合胆汁酸含量测定鉴别，熊胆中结合胆汁酸含量测定4、熟悉其他矿物药的分析、熟悉其他

2、矿物药的分析 第一节第一节 含动物药中药制剂的分析含动物药中药制剂的分析动物药化学成分的结构与分类动物药化学成分的结构与分类1 1、蛋白质、多肽及氨基酸类、蛋白质、多肽及氨基酸类2 2、生物碱类化合物、生物碱类化合物3 3、甾体类化合物、甾体类化合物4 4、酚酮、酸类化合物、酚酮、酸类化合物5 5、萜类化合物、萜类化合物第一部分第一部分 含动物药中药制剂的分析含动物药中药制剂的分析一、牛黄及其制剂的分析一、牛黄及其制剂的分析 天然牛黄，人工牛黄所含成分天然牛黄，人工牛黄所含成分 胆酸胆酸(cholic acid,CA)：mpl98、pK=6.4、溶解度溶解度0.28 g/L(水水)、30.5

3、g/L(乙醇乙醇)、1.22 g/L(乙乙醚醚)、5.0 g/L(氯仿氯仿)、0.36 g/L(苯苯)、28.24 g/L(丙酮丙酮)、胆酸钠盐、胆酸钠盐568.98/L(水水15)。去氧胆酸去氧胆酸(deoxycholic acid,HDCA)：mp 176178、pK=6.58、溶解度、溶解度1:4(冷乙醇冷乙醇)、0.248/L(水水)、0.128/L(苯苯)、10.468/L(丙酮丙酮)、去氧胆酸钠、去氧胆酸钠盐盐333 g/L(水水15)。胆红素胆红素溶溶解解性性：不不溶溶于于水水，溶溶于于苯苯、二二硫硫化化碳碳、氯氯仿仿、碱碱液液、微微溶溶于于乙乙醇醇、乙乙醚醚，其其钠钠盐盐易易溶

4、溶于于水水，不不溶于氯仿，其钙盐、镁盐不溶于水溶于氯仿，其钙盐、镁盐不溶于水性质：在碱溶液中或遇三价铁极不稳定易氧化性质：在碱溶液中或遇三价铁极不稳定易氧化稳定性：天然胆红素在提取过程中，受酸碱的影稳定性：天然胆红素在提取过程中，受酸碱的影响，双吡咯环产生异构化，即胆红素响，双吡咯环产生异构化，即胆红素-a,-a,胆红胆红素素-a,-a,及胆红素及胆红素aa。胆红素胆红素，是天然产，是天然产物的原型物物的原型物(bilirubinbilirubin-。)另含脂类，蛋白质、肽、氨基酸类，无机元素等另含脂类，蛋白质、肽、氨基酸类，无机元素等我国部颁标准中人工牛黄的质量标准我国部颁标准中人工牛黄的质

5、量标准组组成成：胆胆酸酸、胆胆红红素素、胆胆固固醇醇与与无无机机盐盐等配合而成。等配合而成。含含量量：胆胆酸酸：标标示示量量的的90%90%110%110%。总总胆胆酸酸25%25%，胆红素含量，胆红素含量90%90%性状：人工牛黄应为黄色疏松的粉末，性状：人工牛黄应为黄色疏松的粉末，味苦，微甘味苦，微甘(一一)胆汁酸的化学反应胆汁酸的化学反应1.Pettenkofer 1.Pettenkofer 反应反应 蔗糖蔗糖 浓硫酸浓硫酸 羟甲基糠醛羟甲基糠醛+胆汁酸胆汁酸紫色紫色 糠醛糠醛+胆汁酸胆汁酸 浓硫酸浓硫酸红色红色2.Gregory Pascoe 2.Gregory Pascoe 反应反应

6、（可作胆酸定量反应）（可作胆酸定量反应）糠醛糠醛+胆汁酸胆汁酸 浓硫酸浓硫酸 羟甲基羟甲基胆酸溶液显蓝色胆酸溶液显蓝色3.3.HammarstenHammarsten反应反应铬酸铬酸(醋酸醋酸+盐酸盐酸)+)+胆酸类胆酸类胆胆酸酸、阿阿朴朴胆胆酸酸及及33，12-12-二二羟羟基基-胆胆烯烯酸酸呈紫色；呈紫色；去氧胆酸和鹅去氧胆酸呈阴性反应；去氧胆酸和鹅去氧胆酸呈阴性反应；3-3-酮酮基基-7-7，12-12-二二羟羟基基胆胆烷烷酸酸呈呈黄黄色色绿绿色色紫色；紫色；33，12-12-二羟基二羟基-7-7酮基肥烷酸显黄色酮基肥烷酸显黄色(二二)胆红素的化学反应胆红素的化学反应（1 1）重重氮氮化

7、化反反应应：胆胆红红素素+重重氮氮化化试试剂剂(对对氨氨基基苯苯磺磺酸酸重重氮盐氮盐)呈色呈色（比色法定量）（比色法定量）（2 2）GmelinGmelin反反应应：+硝硝酸酸 呈呈绿绿、蓝蓝、紫紫、红红、黄黄等等颜颜色环色环(三三)人工牛黄的定性鉴别人工牛黄的定性鉴别（1 1）+硫酸硫酸+过氧化氢过氧化氢绿色；绿色；（2 2）+糠醛糠醛+硫酸硫酸蓝紫色。蓝紫色。（3 3）显微鉴别显微鉴别（4 4）453 2 nm 453 2 nm（5 5）人人工工牛牛黄黄与与天天然然牛牛黄黄的的IRIR吸吸收收光光谱谱有有明明显显差差别别：天天然然牛牛黄黄在在745745755cm755cm-、980980

8、990cm990cm-、124012401250cm1250cm-、156515651570cm1570cm-、162016201630cm1630cm-、165516551665cm1665cm-，处均有明显吸收峰处均有明显吸收峰(4)(4)薄层色谱鉴别：薄层色谱鉴别：胆酸的鉴别：供试液：样品粉末胆酸的鉴别：供试液：样品粉末10mg10mg，加氯仿加氯仿20ml20ml，超声提取超声提取3030分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙醇乙醇1ml1ml使溶解使溶解混合对照液：胆酸、去氧胆酸对照液混合对照液：胆酸、去氧胆酸对照液薄板：硅胶薄板：硅胶G G展开剂：异辛烷展开剂：

9、异辛烷-醋酸乙酯醋酸乙酯-冰醋酸冰醋酸(15:7:5)/(15:7:5)/氯氯仿仿-乙醚乙醚-冰醋酸冰醋酸(15:7:5)(15:7:5)显显色色：10%10%硫硫酸酸乙乙醇醇溶溶液液，105105烘烘约约5 5分分钟钟，UV(365 UV(365 nm)nm)下下检检视视/10%/10%磷磷钼钼酸酸乙乙醇醇液液，于于105105烘烘约约5 5分钟分钟胆红素的鉴别胆红素的鉴别 对照液：胆红素氯仿液对照液：胆红素氯仿液薄板：硅胶薄板：硅胶G G展开剂：甲苯展开剂：甲苯-醋酸乙酯醋酸乙酯-冰醋酸冰醋酸(10:1:0.5)(10:1:0.5)(四四)人工牛黄的含量测定人工牛黄的含量测定1.1.胆酸的

10、含量测定胆酸的含量测定 Gregory Pascoe Gregory Pascoe 反应反应2.2.总胆酸的含量测定总胆酸的含量测定酸碱滴定法酸碱滴定法3.3.胆红素的含量测定胆红素的含量测定重氮化试液显色法重氮化试液显色法 部部颁颁标标准准测测定定法法：在在453 453 士士2nm2nm处处测测定定吸吸收收度度，按按C C3333N N4 4O O6 6的的E E为为10381038计算计算4.HPLC4.HPLC法测定胆红素的含量法测定胆红素的含量 氯氯仿仿-1%-1%盐盐酸酸甲甲醇醇溶溶液液(5:1)(5:1)为为溶溶剂剂：牛牛黄黄中中的的胆胆红红素素以以钙钙盐盐形形式式存存在在，游游

11、离离型型胆胆红红素素不不溶溶于于水水，易溶于氯仿易溶于氯仿超超声声处处理理数数分分钟钟：以以便便游游离离型型和和结结合合型型的的胆胆红红素素均能溶出均能溶出(四四)人工牛黄的含量测定人工牛黄的含量测定(五五)含牛黄制剂的分析含牛黄制剂的分析1.1.牛黄珍珠胶囊中胆红素的测定牛黄珍珠胶囊中胆红素的测定在在453 453 1nm1nm波波长长处处测测定定吸吸收收度度，按按胆胆红红素素C C3333H H3636N N4 4O O6 6吸收系数吸收系数(E)(E)为为10831083计算含量计算含量2.2.牛黄降压丸中胆酸和去氧胆酸的测定牛黄降压丸中胆酸和去氧胆酸的测定薄层扫描法薄层扫描法3.3.六

12、神丸中胆酸、猪去氧胆酸的测定六神丸中胆酸、猪去氧胆酸的测定反相高效液相色谱法反相高效液相色谱法胆胆汁汁酸酸类类成成分分衍衍生生化化法法：胆胆汁汁酸酸结结构构中中缺缺乏乏共共轭轭结结构构，无无近近紫紫外外吸吸收收生生色色基基团团，一一般般高高灵灵敏敏度度的的紫紫外外检检测测器器或或荧荧光光检检测测器器不不能能检检测测。利利用用衍衍生生化化技技术术，使使胆胆汁汁酸酸类类成成分分形形成成对对硝硝基基苯苯甲甲酸酸甲甲基基酯酯，在在254mm254mm波长处检测波长处检测方法：精密吸取胆汁酸适量置反应瓶中，加氢氧方法：精密吸取胆汁酸适量置反应瓶中，加氢氧化钾试液化钾试液100l100l，蒸干，加蒸干，加

13、18-18-冠醚冠醚-6-6-试液和试液和1-1-溴乙酰基对硝基苯溴乙酰基对硝基苯(l-l-bromoacetylnitrobenzenebromoacetylnitrobenzene)()(简称简称BANB)BANB)衍生试衍生试液各液各100l100l，密塞，立即放入已恒温至密塞，立即放入已恒温至6060的烘的烘箱中，加热箱中，加热4040分钟，取出冷却至室温，即可进样分钟，取出冷却至室温，即可进样 二、麝香及其制剂的分析二、麝香及其制剂的分析具有抗炎、强心、雄性激素样等作用具有抗炎、强心、雄性激素样等作用主要成分：主要成分：麝香酮麝香酮(muscone，2%4%)，11 种雄种雄甾烷，甾

14、烷，22 种种C14C33脂肪酸的胆固醇脂，脂肪酸的胆固醇脂，10种种C20C29脂肪酸的胆固醇脂，肽类，蛋白质，氨脂肪酸的胆固醇脂，肽类，蛋白质，氨基酸以及麝香吡啶等基酸以及麝香吡啶等商品麝香分壳麝香商品麝香分壳麝香(整麝香整麝香)和麝香仁和麝香仁(散麝香散麝香)两种两种规格，其商品标准如下：规格，其商品标准如下：外形：不得有显著氨臭，虫蛀、霉菌及染色。在显外形：不得有显著氨臭，虫蛀、霉菌及染色。在显微镜下观察，不得有淀粉、肝类、肉类等伪品。壳微镜下观察，不得有淀粉、肝类、肉类等伪品。壳麝香：每麝香：每500g不得超过不得超过22 只只麝香仁：麝香仁：灰分灰分8%8%水分：水分：15%25%

15、25%，麝香仁麝香仁5%5%醇醇(90%)(90%)浸出物：壳麝香浸出物：壳麝香30%30%，麝香仁麝香仁10%10%二、麝香及其制剂的分析二、麝香及其制剂的分析(一一)定性鉴别定性鉴别（1 1）冒槽）冒槽（2 2）搓搓之之成成团团，再再用用手手指指轻轻揉揉即即散散，不不应应粘粘手手、染手、顶指或结块染手、顶指或结块（3 3）灼烧法）灼烧法（4 4）镜检）镜检(二二)含量测定含量测定1.1.麝香中麝香酮的含量测定麝香中麝香酮的含量测定气相色谱方法气相色谱方法 TLCSTLCS2.2.麝香风湿膏中麝香酮的测定麝香风湿膏中麝香酮的测定原理：原理：麝香酮为麝香的主要有效成分，与麝香酮为麝香的主要有效

16、成分，与2 2，4-4-二硝基苯肼反应生成的麝香酮苯腙，利用薄层二硝基苯肼反应生成的麝香酮苯腙，利用薄层扫描方法测定其含量扫描方法测定其含量 三、熊胆及其制剂的分析三、熊胆及其制剂的分析具具清清热热利利胆胆、平平肝肝明明目目、镇痛、健胃等功效镇痛、健胃等功效成分：成分：胆汁酸胆汁酸 牛磺熊牛磺熊去氧胆酸去氧胆酸(TUDCA)(TUDCA)碱水碱水解解熊去氧胆酸熊去氧胆酸(UDCA)(UDCA)及少量的鹅去氧胆酸、及少量的鹅去氧胆酸、去氧胆酸和胆酸（结合去氧胆酸和胆酸（结合形式存在）形式存在）(一一)熊胆中熊去氧胆酸的定性熊胆中熊去氧胆酸的定性鉴别鉴别光谱鉴别光谱鉴别273nm273nm薄薄层层

17、色色谱谱法法供供试试品品溶溶液液：胆胆仁仁甲甲醇醇溶溶解解，挥挥干干，碱碱水水解解，加加酸呈明酸呈明显显酸性酸性(pH2(pH23)3)，乙酸乙乙酸乙酯酯萃取萃取对对照照品品溶溶液液：胆胆酸酸(CA)(CA)、熊熊去去氧氧胆胆酸酸(UDCA)(UDCA)、猪猪去去氧氧胆胆酸酸(HDCA)(HDCA)、鹅鹅去去氧氧胆胆酸酸(CDCA)(CDCA)、去去氧氧胆酸胆酸(DCA)(DCA)混合甲醇液混合甲醇液显显色色：30%30%硫硫酸酸液液，于于100100105105烘烘5 51010分分钟钟，取取出出，立立即即观观察察并并记记录录斑斑点点位位置置及及显显色色情情况况，1010分分钟钟后于紫外光灯

18、后于紫外光灯(365 nm)(365 nm)下下观观察察 注意：注意：(1)(1)需需用用新新鲜鲜活活化化的的薄薄层层板板及及新新鲜鲜配配制制的的展展开开剂剂(2)(2)展展开开剂剂中中异异戊戊醚醚可可用用乙乙醚醚代代替替，但但展展开开时时温度宜在温度宜在2020以下以下(3)(3)严格掌握显色过程，方可得到稳定结果严格掌握显色过程，方可得到稳定结果 (4)(4)5 5种种对对照照品品均均不不可可缺缺少少，互互相相参参照照这这5 5种种对对照照品品的的薄薄层层图图谱谱的的相相对对比比移移值值，才才有有助助于于较较准准确确地判断熊去氧胆酸地判断熊去氧胆酸 因为熊去氧胆酸与猪去氧胆酸斑点位置很接近

19、，因为熊去氧胆酸与猪去氧胆酸斑点位置很接近，如不用二者的对照品同时参比对照，易引起误判如不用二者的对照品同时参比对照，易引起误判(二二)熊胆中熊胆中结结合胆汁酸含量合胆汁酸含量测测定定薄薄层扫层扫描法描法等等 四、蛇胆及其制剂的分析四、蛇胆及其制剂的分析具具有有行行气气化化痰痰，祛祛风风除除湿湿，清清肝肝明明目目，平平肝肝熄熄风风，清热解毒清热解毒成成分分：特特征征性性成成分分胆胆汁汁酸酸（多多数数是是以以与与牛牛磺磺酸酸结结合合的的结结合合型型胆胆甾甾酸酸形形式式存存在在，如如牛牛磺磺胆胆酸酸，牛牛磺磺鹅鹅去去氧氧胆胆酸酸、牛牛磺磺去去氧氧胆胆酸酸及及石石胆胆酸酸，胆胆固固醇醇，游游离离胆胆

20、酸酸等等），微微量量元素元素ZnZn、CuCu、FeFe及及CaCa，MgMg等等保保存存：含含醇醇50%50%以以上上的的白白酒酒中中，蛇蛇胆胆与与酒酒的的比比例例为为1:1(1:1(重重量量比比)衡衡量量蛇蛇胆胆汁汁质质量量优优劣劣的的主主要要标标淮淮：总总固固体体之之和和及及胆胆汁汁灰灰分分所所占占该该总总固固体体的的比比例例，蛇蛇胆胆汁汁的的比比重重(20(20测测定定)应应在在0.96000.96000.99900.9990之之间间，胆胆汁汁总总固固体体为为454577 77 mg/mlmg/ml之之间间，白白酒酒浸浸泡泡液液的的比比重重在在0.95990.95990.98180.9

21、818之之间间(20(20测测定定)，浸浸泡泡液液总总固固体体为为404074.7 74.7 mg/mlmg/ml，胆胆汁汁灰灰分分是是该该胆胆汁汁总总固固体体的的10 10 士士2%2%质量衡量标准：质量衡量标准：胆酸含量加上胆汁比重，总固体胆酸含量加上胆汁比重，总固体含量含量(一一)十种蛇胆胆汁酸成分的薄层色谱十种蛇胆胆汁酸成分的薄层色谱对对照照：胆胆酸酸(CA)(CA)等等甲甲醇醇液液，胆胆固固醇醇(CS)(CS)氯氯仿仿溶液，甘氨酸，牛磺酸水溶液溶液，甘氨酸，牛磺酸水溶液 显色：显色：1.1.结合型胆甾酸结合型胆甾酸 紫外灯下观察荧光紫外灯下观察荧光2.2.结结合合型型胆胆甾甾酸酸水水

22、解解产产物物 胆胆汁汁碱碱水水解解，加加酸酸使使呈呈酸性酸性(PH=2)(PH=2)，乙醚提取，挥干，甲醇溶解乙醚提取，挥干，甲醇溶解30%30%硫硫酸酸溶溶液液(V/V)(V/V)，喷喷后后在在105105烘烘烤烤1010分分钟钟，365nm365nm紫外灯下观察荧光紫外灯下观察荧光(二二)蛇胆川贝液中胆酸的分析蛇胆川贝液中胆酸的分析 薄层扫描法薄层扫描法 五、蟾酥及其制剂的分析五、蟾酥及其制剂的分析成成分分：强强心心作作用用的的蟾蟾酥酥甾甾二二烯烯类类，强强心心甾甾烯烯蟾蟾毒毒类类和和吲吲哚哚碱碱类类，蟾蟾酥酥甾甾二二烯烯类类又又分分为为游游离离型型和和结结合合型型。其其游游离离型型称称蟾

23、蟾毒毒配配基基，其其结结合合型型多多为为脂脂溶溶性性的的蟾蟾酥酥毒毒素素类类，蟾蟾酥酥配配基基类类和和精精氨氨酸酸等等结结合合的的酯酯类类（在在干干燥燥加加工工或或提提取取过过程程中中分分解解为为蟾蟾酥酥配基类）配基类）蟾酥甾二烯类结构特点是蟾酥甾二烯类结构特点是C C1717含有一个含有一个-吡吡喃酮喃酮(-pyrone-pyrone)基，凡具有这种骨架的物质称基，凡具有这种骨架的物质称为蟾酥二烯内酯为蟾酥二烯内酯(又称蟾酥内酯，又称蟾酥内酯，bufadienolidebufadienolide)(一一)定性鉴别定性鉴别 1.1.显色反应显色反应 2.2.纸纸色色谱谱法法以以甲甲酰酰胺胺为为

24、固固定定相相，苯苯-氯氯仿仿(6:4)(6:4)为为流流动动相相或或丙丙二二醇醇-水水(4:1)(4:1)为为固固定定相相展展开开，喷喷20%20%三三氯氯化化锑锑氯氯仿仿溶溶液液，于于75758080加加热热5 5分分钟钟，在在日日光光或或紫紫外外光光下下观观察察，蟾蟾酥酥中中1010个个蟾蟾酥酥二二烯烯内内酯酯成分呈成分呈现现不同的不同的颜颜色斑点。色斑点。3.3.薄薄层层色色谱谱法法 4.4.紫外和紫外和红红外吸收光外吸收光谱谱法法 (1)(1)紫紫 外外 吸吸 收收 光光 谱谱：maxmax295295 300300 nmnm2,2,-内内酯酯引起引起(称乙型称乙型强强心苷元心苷元)(

25、2)(2)红红外吸收光外吸收光谱谱：蟾蜍二：蟾蜍二烯烯内内酯类酯类成分在成分在180018001700 cm1700 cm-1-1间间有二个吸收峰有二个吸收峰 (二二)定量分析定量分析 1.1.分分光光光光度度法法和和比比色色法法 9595版版药药典典法法。氯氯仿仿提提取取液液，在在299 nm299 nm处测定，按百分吸收系数计算蟾毒内酯含量处测定，按百分吸收系数计算蟾毒内酯含量 2.2.薄层扫描法薄层扫描法 3.3.气气相相色色谱谱法法 一一般般蟾蟾酥酥及及其其制制剂剂样样品品用用1%1%乙乙醇醇；氯氯仿仿提提取取，中中性性氧氧化化铝铝柱柱分分离离。氯氯仿仿洗洗脱脱，浓浓缩缩后后残残渣渣溶

26、溶于于四四氢氢呋呋哺哺，用用六六甲甲基基二二氯氯硅硅烷烷和和三三甲甲基基氯氯硅硅烷烷甲甲基基化化后后进进行行GCGC分分析析，用用内内标标法法(内内标标物物为为孕孕甾甾酮酮)或或外外标标法法进进行行含量测定含量测定高效液相色谱法：本品按干燥品计算，含华蟾酥毒基高效液相色谱法：本品按干燥品计算，含华蟾酥毒基（C26H34O6C26H34O6）和脂蟾毒配基（）和脂蟾毒配基（C24H32O4C24H32O4）的总量不）的总量不得少于得少于6.06.0。此外，还有正交函数法、紫外分光光度法、二阶导数光谱此外，还有正交函数法、紫外分光光度法、二阶导数光谱法等法等(三三)应用实例应用实例实实例例1 1 喉

27、喉症症丸丸中中蟾蟾酥酥总总蟾蟾毒毒内内酯酯含含量量测测定定 二阶导数光谱法二阶导数光谱法 实实例例2 2 肖肖金金丹丹三三个个蟾蟾毒毒内内酯酯成成分分含含量量测测定定 薄薄层扫层扫描法描法实实例例3 3 六六应应丸丸中中总总蟾蟾毒毒内内酯酯的的含含量量测测定定UVUV法：法：360nm360nm处测处测定定 实实例例4 4梅梅花花点点舌舌丸丸中中三三个个蟾蟾毒毒内内酯酯成成分分的的含量含量测测定定 高效液相色高效液相色谱谱法法 六、斑蝥及其制剂的分析六、斑蝥及其制剂的分析成成分分：斑斑蝥蝥素素，脂脂肪肪，树树脂脂，有有机机酸酸，挥挥发发油，甲壳质，多种无机元素。油，甲壳质，多种无机元素。斑蝥素

28、斑蝥素羟基斑蝥胺羟基斑蝥胺斑蝥素：斑蝥素：很好的抗肿瘤作用很好的抗肿瘤作用羟基斑蝥胺：羟基斑蝥胺：功效与斑蝥素相似，毒性约为功效与斑蝥素相似，毒性约为1/5001/500定性鉴别定性鉴别 1.1.显色反应显色反应 斑蝥素升华物斑蝥素升华物+硫酸硫酸+间苯二酚间苯二酚红色，红色，UVUV灯下绿色荧光灯下绿色荧光 2.2.纸纸色色谱谱法法水水冷冷浸浸液液作作为为供供试试品品溶溶液液鉴鉴别别蛋蛋白白质质 3.3.薄薄层层色色谱谱法法 氯氯仿仿提提取取液液作作为为供供试试品品溶溶液液鉴鉴别别斑蝥素斑蝥素 定量分析定量分析斑斑蝥蝥素素含含量量测测定定法法 酸酸碱碱滴滴定定法法，配配位位滴滴定定法法，非非

29、水滴定法，水滴定法，UVUV法，法，TLCSTLCS法，法，GCGC法法 应用实例应用实例斑蝥素乳膏：斑蝥素乳膏：GCGC法法 第二部分第二部分 矿物药中药制剂的分析矿物药中药制剂的分析 分类：分类：砷砷类类药药(如如雄雄黄黄)；汞汞类类药药(如如朱朱砂砂)；铅铅类类药药(如如密密陀陀僧僧)；铜铜类类药药(如如胆胆矾矾)；铁铁类类药药(如如赭赭石石)；钙钙类类药药(如如石石膏膏)；硅硅类类药药(如如滑滑石石)；硫硫类类药药(如如芒芒硝硝)；氯氯类类药药(如如大大青青盐盐)；其其他他矿矿物物药药(如如白矾、炉甘石、硼砂白矾、炉甘石、硼砂)分分析析基基本本程程序序：取取样样试试样样的的分分解解定定

30、性性定量定量分解法：分解法：溶解法溶解法(湿法湿法)和熔融法和熔融法干法，熔干法，熔剂可分为碱性熔剂剂可分为碱性熔剂(如碳酸钠、氢氧化钠如碳酸钠、氢氧化钠)和酸性和酸性熔剂如硫酸氢钾、焦硫酸钾）或氧化性熔剂熔剂如硫酸氢钾、焦硫酸钾）或氧化性熔剂(如如过氧化钠、碳酸钠加硝酸钾过氧化钠、碳酸钠加硝酸钾)和还原性熔剂和还原性熔剂(如碳如碳酸钠加硫酸钠加硫)分析方法分析方法1 化学分析法：化学分析法：（1）容量分析法）容量分析法（2）重量法）重量法2 热分析法热分析法（1）热重法）热重法TGA（2）差热分析法）差热分析法DTA（3）差示扫描量热法）差示扫描量热法DSC3 可见分光光度法可见分光光度法4

31、 原子吸收光谱法原子吸收光谱法一、雄黄及其制剂的分析一、雄黄及其制剂的分析主主含含二二硫硫化化二二砷砷(As2S2)，区区别别雌雌黄黄(As2S3)、砒石砒石(As2O3)一、雄黄及其制剂的分析一、雄黄及其制剂的分析 性质性质：砷化合物具有挥发性，测定砷不应任意的：砷化合物具有挥发性，测定砷不应任意的灼烧，常用硝酸、硫酸等酸性溶剂分解，也可采灼烧，常用硝酸、硫酸等酸性溶剂分解，也可采用碱熔法分解：用碱熔法分解：3As2S2+22HNO3+4H2O 6H3AsO4+6H2SO4+22NOAs2S2+7H2SO4 2H3AsO3+SO2+4H2OAs2S2+11Na2O2+16Na2CO32Na3

32、AsO4+2Na2SO4+22Na2O+16CO2常用分解试剂：常用分解试剂：硫酸硫酸过氧化氢或硫酸过氧化氢或硫酸硝硝酸钾酸钾 2As2S2+9H2SO4+9H2O24H3AsO4+13SO2+12H2OAs2S2+3H2SO4+6KNO3 2H3AsO4+2SO2+6NO+3K2SO4 含含砷砷中中成成药药测测定定法法：加加等等量量的的氢氢氧氧化化钙钙，加加少少量量水水调调成成糊糊状状，先先用用小小火火加加热热使使炭炭化化，再再加加500600灼灼烧烧，使使砷砷转转化化为为砷砷酸酸钙钙，然然后后用用盐盐酸酸提提取。取。(一一)定性鉴别定性鉴别1 检查硫：检查硫：As2S2+2KClO3+3H

33、NO32KAsO3+2H2SO4+Cl2+NO2 H2SO4+BaCL2BaSO4白色白色+2Cl 2、检检查查砷砷：加加热热熔熔融融，继继续续加加热热产产生生白白色色或或黄黄白白色色火火焰焰，并并伴伴有有白白色色浓浓烟烟取取玻玻片片覆覆盖盖后后，有有白白色色冷冷凝凝物物，刮刮取取少少许许置置试试管管内内加加水水煮煮沸沸使使溶溶解解，必必要要时时滤滤过过，溶溶液液加加硫硫化化氢氢试试液液数数滴滴即即显显黄黄色色，加加稀稀盐盐酸酸后后产产生生黄黄色色絮絮状状沉沉淀淀，再加碳酸铵试液后，沉淀复溶解。再加碳酸铵试液后，沉淀复溶解。2As2S2+7O2 2As2O3+O3+SO2 As2O3+3H2O

34、 3H3AsO3 3H3AsO3+3H2S As2S3+6H2O(二二)含量测定含量测定(碘量法碘量法)直接法：硫酸或碱熔分解直接法：硫酸或碱熔分解原原理理：本本法法是是将将雄雄黄黄用用硫硫酸酸加加热热分分解解，使使成成亚亚砷砷酸酸。中中和和后后，加加固固体体碳碳酸酸氢氢钠钠使使pH控控制制在在8左左右右。然然后后以以淀淀粉粉作作指指示示剂剂，用用碘碘标标准准溶溶液液滴滴定定至至溶溶液液显显蓝蓝色色。分分解解试试样样时时，在在硫硫酸酸中中加加入入碱碱金金属属硫硫酸酸盐，可以提高沸点。盐，可以提高沸点。间接法：间接法：As2S2+11H2O2 2H3AsO4+2H2SO4+6H2OH3AsO4+

35、2KI+H2SO4 H3AsO3+K2SO4+I2+H2OI2+2Na2S2O3（滴定液）（滴定液）2NaI+Na2S4O6(三三)牛黄解毒片中雄黄含量测定牛黄解毒片中雄黄含量测定碘量法碘量法(四四)中药雄黄中中药雄黄中As2O3的含量测定的含量测定（杂质测定）（杂质测定）雄黄药材中夹杂有雄黄药材中夹杂有As2O3是剧毒性化合物，是造是剧毒性化合物，是造成雄黄常量应用时的毒性成分成雄黄常量应用时的毒性成分 方法：古蔡法半定量检查（药典法），也可采用方法：古蔡法半定量检查（药典法），也可采用具有简便、快速、回收率好的具有简便、快速、回收率好的Ag-DDC法法 二、含汞矿物药及其制剂的分析二、含汞

36、矿物药及其制剂的分析汞汞类类药药主主要要有有水水银银、朱朱砂砂、灵灵砂砂、银银朱朱、轻轻粉粉、粉霜等粉霜等 汞类药中的汞既是有效成分，又是有毒成分汞类药中的汞既是有效成分，又是有毒成分 处处理理法法：汞汞类类药药物物一一般般用用酸酸（硝硝酸酸，王王水水，逆逆王水，硫酸和硝酸钾）分解王水，硫酸和硝酸钾）分解 注意防止汞散失：低温加热，冷却回流，勿蒸干注意防止汞散失：低温加热，冷却回流，勿蒸干(一一)汞的定性鉴别汞的定性鉴别1、+氢氧化钠试液氢氧化钠试液黄色沉淀黄色沉淀HgO 2、+碘化钾试液碘化钾试液猩红色沉淀猩红色沉淀HgI2+在在过过量量的的碘碘化化钾钾试试液液溶溶解解+氢氢氧氧化化钠钠碱碱

37、化化+铵铵盐盐红棕色沉淀红棕色沉淀HgI42-3、+硝酸（涂于铜表面）硝酸（涂于铜表面）光亮沉积物光亮沉积物(二二)含量测定含量测定 硫硫氰氰酸酸盐盐法法和和铜铜试试剂剂法法。EDTA容容量量法法应应用用少少：干扰离子较多，另可用分光光度法（干扰离子较多，另可用分光光度法（双硫腙双硫腙）硫氰酸盐法：硫化汞硫氰酸盐法：硫化汞(HgS)不得少于不得少于96.0%原理：样品加硫酸与硝酸钾加热使溶解，并加入原理：样品加硫酸与硝酸钾加热使溶解，并加入1%高锰酸钾至显粉红色，再滴加高锰酸钾至显粉红色，再滴加2%硫酸亚铁溶液硫酸亚铁溶液至红色消失后，以硫酸铁铵或硝酸铁为指示剂，用至红色消失后，以硫酸铁铵或硝

38、酸铁为指示剂，用硫氰酸铵标准液滴定硫氰酸铵标准液滴定(三三)中药制剂及中药材中微量汞的测定中药制剂及中药材中微量汞的测定1.1.双双硫硫腙腙比比色色法法：试试样样用用硝硝酸酸-硫硫酸酸-高高氯氯酸酸消消化化。在在pH1pH12 2的的溶溶液液中中，高高价价汞汞与与双双硫硫腙腙作作用用生生成成橙橙色色，可可用用四四氯氯化化碳碳提提取取后后进进行行比比色色，其其最大吸收在最大吸收在492nm492nm波长处波长处2.2.朱朱砂砂及及含含朱朱砂砂中中药药制制剂剂中中游游离离汞汞的的测测定定：蒸馏冷原子吸收光谱法蒸馏冷原子吸收光谱法3.3.中药制剂中可溶性汞的测定：用人工胃中药制剂中可溶性汞的测定：用

39、人工胃液浸取中成药中的可溶性汞，用冷原子吸收光谱液浸取中成药中的可溶性汞，用冷原子吸收光谱法进行测定法进行测定。三、其他矿物药的分析三、其他矿物药的分析(一一)铜类药（胆矾铜类药（胆矾(CuSO(CuSO4 45H5H2 2O)O)、铜绿铜绿CuCOCuCO3 3Cu(OH)Cu(OH)2 2）的分析的分析1.1.定性鉴别定性鉴别(1)+(1)+氨氨水水蓝蓝色色沉沉淀淀（碱碱式式铜铜盐盐）+过过量量的的氨氨水水溶解溶解深蓝色的铜氨络离子深蓝色的铜氨络离子2Cu2Cu2+2+SO+SO4 42-2-+2NH+2NH3 3HH2 2O=CuO=Cu2 2(OH)(OH)2 2SOSO4 4+2NH

40、+2NH4 4+CuCu2 2(OH)(OH)2 2SOSO4 4+8NH+8NH3 3=2Cu(NH=2Cu(NH3 3)4 42+2+SO+SO4 42-2-+2OH+2OH-(2)(2)中中性性或或酸酸性性溶溶液液+亚亚铁铁氰氰化化钾钾红红棕棕色色沉沉淀淀（亚铁氰化铜）（亚铁氰化铜）+氨水溶解氨水溶解Cu(NHCu(NH3 3)4 42+2+离子离子2Cu2Cu2+2+Fe(CN)+Fe(CN)6 64-4-=Cu=Cu2 2Fe(CN)Fe(CN)6 6 CuFe(CN)CuFe(CN)6 6+4OH+4OH-=2Cu(OH)=2Cu(OH)2 2+Fe(CN)+Fe(CN)6 64-

41、4-2.2.定量分析定量分析 经经典典方方法法：碘碘量量法法，以以碘碘化化钾钾将将铜铜()()还还原原为为铜铜()()的的反反应应为为基基础础的的，还还原原时时析析出出难难溶溶于于烯烯酸酸的的碘碘化化亚亚铜铜和和游游离离碘碘，析析出出的的碘碘用用硫硫代代硫硫酸酸钠钠标准溶液滴定标准溶液滴定酸度：酸度：PH 3.5PH 3.54 4，过大结果偏高（过大结果偏高（I I-离子易离子易被空气氧化而析出被空气氧化而析出I I2 2）；）；酸度过小，酸度过小，CuCu2+2+离子易离子易水解，水解，CuCu2+2+与与I I-的反应缓慢影响滴定，酸化时宜的反应缓慢影响滴定，酸化时宜用硫酸或醋酸用硫酸或醋

42、酸(二二)铁类药铁类药 磁石磁石(Fe(Fe3 3O O4 4)，赭石赭石(Fe(Fe2 2O O3 3)，自然铜自然铜(FeS(FeS2 2)等的分析等的分析1.1.定性鉴别定性鉴别亚铁盐的鉴别：亚铁盐的鉴别：(l)(l)FeFe2+2+铁铁氰氰化化钾钾深深蓝蓝色色沉沉淀淀（滕滕氏氏蓝蓝或或邓邓布尔蓝）布尔蓝）(2)Fe(2)Fe2+2+1%+1%邻二氮菲的乙醇溶液数滴邻二氮菲的乙醇溶液数滴粉红色粉红色(二二)铁类药铁类药 磁石磁石(Fe(Fe3 3O O4 4)，赭石赭石(Fe(Fe2 2O O3 3)，自然铜自然铜(FeS(FeS2 2)等的分析等的分析2.2.定量方法定量方法高锰酸钾容

43、量法，硫酸铈容量法、高锰酸钾容量法，硫酸铈容量法、重铬酸钾容量法。以重铬酸钾容量法应用最广重铬酸钾容量法。以重铬酸钾容量法应用最广 原理：原理：在在盐酸盐酸(或硫酸或硫酸)溶液溶液中，用中，用氯化亚锡氯化亚锡将三将三价铁还原为二价铁价铁还原为二价铁 近沸温度近沸温度(105(105以下以下)并保持小并保持小体积和较高的酸度，以增加还原速度体积和较高的酸度，以增加还原速度，过量的氯，过量的氯化亚锡用化亚锡用氯化汞氯化汞除去，然后在硫磷混合酸存在下，除去，然后在硫磷混合酸存在下，以以二苯胺磺酸钠二苯胺磺酸钠为指示剂，用为指示剂，用重铬酸钾标准溶液重铬酸钾标准溶液滴滴定二价铁到出现稳定的蓝紫色即为终

44、点。定二价铁到出现稳定的蓝紫色即为终点。反应式如下反应式如下:2Fe 2Fe2+2+Sn+Sn2+2+6Cl+6Cl-=2Fe=2Fe3+3+SnCl+SnCl6 62-2-Sn Sn2+2+4cl+4cl-+2HgCl+2HgCl2 2=SnCl=SnCl4 42-2-+Hg+Hg2 2ClCl2 2 6Fe 6Fe2+2+Cr+Cr2 2O O7 72-2-+14H+14H+=6Fe=6Fe3+3+2Cr+2Cr3+3+7H+7H2 2O O采采用用三三氯氯化化钛钛代代替替剧剧毒毒的的氯氯化化汞汞的的方方法法，已已被被广广泛应用。泛应用。2Fe2Fe3+3+Sn+Sn2+2+6Cl+6Cl

45、-=2Fe=2Fe3+3+SnCl+SnCl6 62-2-Fe Fe2+2+Ti+Ti3-3-+H+H2 2O=FeO=Fe2+2+TiO+TiO2+2+2H+2H+3.3.磁石中含铁量的测定磁石中含铁量的测定样品处理：样品处理：(1)(1)酸溶法酸溶法(2)(2)碱熔法碱熔法(三三)铝类药铝类药 白矾白矾KAl(SOKAl(SO4 4)2 2 12H 12H2 2OO、枯矾枯矾KAl(SOKAl(SO4 4)2 2的分析的分析测测定定常常量量铝铝：多多用用EDTAEDTA滴滴定定法法，但但铝铝离离子子与与EDTAEDTA的配位反应速度较慢，采用回滴法的配位反应速度较慢，采用回滴法1.1.白巩

46、中铝的测定白巩中铝的测定(EDTA(EDTA 法法)2.2.白矾中铝的测定白矾中铝的测定(二甲酚橙指示剂法二甲酚橙指示剂法)3.3.安胃片中枯巩的成分测定安胃片中枯巩的成分测定(二甲酚橙指示剂法二甲酚橙指示剂法)(四四)硼砂类药的分析硼砂类药的分析 成分：四硼酸二钠成分：四硼酸二钠(Na(Na2 2BB4 4O O5 5(OH)(OH)4 48H8H2 2O/NaO/Na2 2B B4 4O O7 710H10H2 2O)O)测定法：测定法：不含干扰物质不含干扰物质(如碳酸盐，铵盐等非如碳酸盐，铵盐等非中性杂质中性杂质)，可用标准酸直接进行滴定。，可用标准酸直接进行滴定。B B4 4O O7

47、72-2-+2H+2H+5H+5H2 2O=4B(OH)O=4B(OH)3 3 有有干干扰扰物物质质时时，可可加加入入盐盐酸酸、氯氯化化钡钡、氢氢氧氧化化钡钡以以除除去去碳碳酸酸根根离离子子、硫硫酸酸根根离离子子及及铵铵离离子子，然然后后用用盐盐酸酸和和氢氢氧氧化化钠钠调调节节溶溶液液pHpH值值为为5 5，使使所所有有的的硼硼酸酸盐盐均均成成硼硼酸酸形形式式存存在在。加加入入过过量量的的甘甘露露醇醇(或或甘甘油油)。则则与与硼硼酸酸结结合合而而生生成成较较强强之之配配位位酸酸，然然后后用用酚酚酞酞作作指指示示剂剂，用用氢氢氧氧化化钠钠作作标标准准溶溶液液滴滴定定 硼砂的含量测定硼砂的含量测定