叶绿体色素提取与分离(精品).ppt

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1、叶绿体中色素的提取和分离一、实验原理一、实验原理1、叶绿体中的色素可以溶解在有机溶剂丙酮中，因此可、叶绿体中的色素可以溶解在有机溶剂丙酮中，因此可以用丙酮提取叶绿体中的色素。以用丙酮提取叶绿体中的色素。2、叶绿体中的色素在层析液中溶解度高的随着展层液在、叶绿体中的色素在层析液中溶解度高的随着展层液在滤纸上扩散快，溶解度低的随着展层液在滤纸上扩散滤纸上扩散快，溶解度低的随着展层液在滤纸上扩散慢，不同的色素能通过在滤纸上的扩散速度不同而分慢，不同的色素能通过在滤纸上的扩散速度不同而分离开来。离开来。叶绿体中的色素组成叶绿体中的色素组成二、材料用具l干菠菜叶（取新鲜菠菜叶去叶柄，干菠菜叶（取新鲜菠菜

2、叶去叶柄，50 烘干或阴干）；烘干或阴干）；l研磨过滤器，干燥定性滤纸条研磨过滤器，干燥定性滤纸条(1*8 cm)，展层瓶，点样棒；，展层瓶，点样棒；l丙酮，四氯化碳，无水硫酸钠。丙酮，四氯化碳，无水硫酸钠。三、实验步骤l1、提取、提取 取干菠菜叶取干菠菜叶0.5 g，丙酮丙酮2mL，充分研磨，充分研磨12 min，研磨用力适度。研磨用力适度。l2、点样、点样 蘸取提取液，距滤纸一端蘸取提取液，距滤纸一端1.5 cm点样，可重点样，可重复点样复点样1至至3次次，点样线宽度，点样线宽度2mm为宜。为宜。l3、分离。、分离。将滤纸条放入展层瓶中（已加好展层液和少将滤纸条放入展层瓶中（已加好展层液和

3、少量无水量无水Na2SO4），盖紧展层盖，静止展层。，盖紧展层盖，静止展层。4、结果、结果 滤纸上显示四条色素带（如下图）实验图：1：石油醚：丙酮：苯（20：2：1）2：四氯化碳 实验示意图四、注意事项（一）提取（一）提取1.研磨杆轻提数次，使混合充分。研磨杆轻提数次，使混合充分。2.在桌面上固定研磨，勿直接在手中进行研磨。在桌面上固定研磨，勿直接在手中进行研磨。（二）点样（二）点样 1.手拿滤纸上端两侧，防止污染滤纸。手拿滤纸上端两侧，防止污染滤纸。2.蘸取提取液，在空中停留片刻，有利于色蘸取提取液，在空中停留片刻，有利于色素浓缩。素浓缩。（三）分离（三）分离 滤纸不可贴展层瓶内壁。滤纸不可贴展层瓶内壁。附：研磨过滤器使用方法（一）、提取（一）、提取（二）、展层注意事项(1)使用本品后请及时清洗；使用本品后请及时清洗；(2)如滤布不易清洗，可将研磨头拆下取出滤如滤布不易清洗，可将研磨头拆下取出滤布；布；(3)请勿将有机溶剂溅洒在盒的封面、展层玻请勿将有机溶剂溅洒在盒的封面、展层玻璃与底盘连接部位；璃与底盘连接部位；(4)展层瓶为玻璃与塑料结合物，请轻拿轻放。展层瓶为玻璃与塑料结合物，请轻拿轻放。(5)在桌面上固定研磨，勿直接在手中进行研在桌面上固定研磨，勿直接在手中进行研磨。磨。谢谢！