第15章 甾体激素类药物的分析(精品).ppt

《第15章 甾体激素类药物的分析(精品).ppt》由会员分享，可在线阅读，更多相关《第15章 甾体激素类药物的分析(精品).ppt（74页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、第十五章第十五章甾体激素类药物的甾体激素类药物的分析分析基本结构：环戊烷骈多氢菲基本结构：环戊烷骈多氢菲ABCD12345678910111213141516171819分类：分类：甾体激素甾体激素肾上腺皮质激素肾上腺皮质激素性激素性激素雄性激素及蛋雄性激素及蛋白同化激素白同化激素孕激素孕激素雌激素雌激素肾上腺皮质激素肾上腺皮质激素氢化可的松氢化可的松肾上腺皮质激素肾上腺皮质激素醋酸地塞米松醋酸地塞米松雄性激素雄性激素丙酸睾酮丙酸睾酮蛋白同化激素蛋白同化激素苯丙酸诺龙苯丙酸诺龙孕激素孕激素黄体酮黄体酮雌激素雌激素炔雌醇炔雌醇一、结构与性质一、结构与性质1.肾上腺皮质激素肾上腺皮质激素主要活性基

2、团主要活性基团性性 质质4 3 酮酮UV、与羰基试与羰基试剂反应剂反应 C17 醇酮醇酮基基还还 原原 性性 常见药物有氢化可的松、醋酸泼尼松、醋酸氟轻松、倍他常见药物有氢化可的松、醋酸泼尼松、醋酸氟轻松、倍他米松等。米松等。2.雄性激素及蛋白同化激素雄性激素及蛋白同化激素主要活性基团主要活性基团性性 质质4 3 酮酮UV、与羰基试与羰基试剂反应剂反应 C17 羟基羟基可成酯可成酯 常见药物有丙酸睾酮、甲睾酮、苯丙酸诺龙等。常见药物有丙酸睾酮、甲睾酮、苯丙酸诺龙等。3.孕激素孕激素主要活性基团主要活性基团性性 质质4 3 酮酮UV、与羰基试剂反应与羰基试剂反应C17 甲酮基甲酮基与与亚硝基铁氰

3、化纳反亚硝基铁氰化纳反应应C17 乙炔基乙炔基与与AgNO3反应反应 常见药物有黄体酮、炔孕酮、炔诺酮、炔诺孕酮等。常见药物有黄体酮、炔孕酮、炔诺酮、炔诺孕酮等。4.雌激素雌激素主要活性基团主要活性基团性性 质质A环为环为3OH 苯环苯环UV、与重氮苯磺酸与重氮苯磺酸盐反应盐反应C17 乙炔基乙炔基与与AgNO3反应反应C17 羟基羟基可成酯可成酯 常见药物有炔雌醇、炔雌醚、雌二醇、苯甲酸雌二醇等。常见药物有炔雌醇、炔雌醚、雌二醇、苯甲酸雌二醇等。二、鉴别试验二、鉴别试验（一）呈色反应（一）呈色反应甾体激素甾体激素类药物类药物呈色呈色H2SO4 H3PO4 HClO4 HCl1.与强酸的呈色反

4、应与强酸的呈色反应与硫酸显色反应与硫酸显色反应 显显 色色 荧光荧光 加水稀释加水稀释泼尼松龙泼尼松龙 深红深红 絮状絮状灰灰泼尼松泼尼松 橙橙 黄黄蓝绿蓝绿炔雌醚炔雌醚 橙红橙红 黄绿黄绿 红色红色 炔雌醇炔雌醇 橙红橙红 黄绿黄绿 絮状絮状玫红玫红醋酸可的松醋酸可的松 黄或微黄或微 褪色并澄褪色并澄 带橙带橙 清清2.官能团的呈色反应官能团的呈色反应甾酮激素甾酮激素类药物类药物呈色呈色羰基试剂羰基试剂（1）C3酮基和酮基和C20酮基酮基常用的羰基试剂：常用的羰基试剂：2,4-二硝基苯肼、异烟肼、硫酸苯肼二硝基苯肼、异烟肼、硫酸苯肼异烟腙（黄色）异烟腙（黄色）睾酮睾酮肾上腺皮肾上腺皮质激素药

5、质激素药物物呈色呈色四氮唑盐四氮唑盐OH（2）C17 醇酮基醇酮基具有甲酮基具有甲酮基或活泼亚甲或活泼亚甲基的甾体激基的甾体激素类药物素类药物呈色呈色 亚硝基铁氰化纳亚硝基铁氰化纳间二硝基酚、芳香醛间二硝基酚、芳香醛（3）甲酮基）甲酮基黄体酮黄体酮蓝紫色蓝紫色亚硝基铁亚硝基铁氰化纳氰化纳其他甾体其他甾体淡橙色淡橙色不显色不显色黄体酮黄体酮蓝紫色蓝紫色有机氟有机氟F有机破坏有机破坏有机氯有机氯Cl（4）有机卤素）有机卤素茜素氟蓝茜素氟蓝 硝酸亚铈硝酸亚铈硝酸硝酸-硝酸银硝酸银AgCl 呈蓝紫色呈蓝紫色 茜素氟蓝茜素氟蓝蓝紫色蓝紫色F-雌激素类雌激素类药物药物红色偶氮红色偶氮染料染料重氮苯磺酸重氮

6、苯磺酸（5）酚羟基）酚羟基肾上腺肾上腺皮质激皮质激素药物素药物Cu2O橙红色橙红色碱性酒石酸铜碱性酒石酸铜（二）（二）沉淀反应沉淀反应Ag黑色黑色氨制硝酸银氨制硝酸银1.C17 醇酮基醇酮基含炔基含炔基的甾体的甾体激素激素银盐沉淀银盐沉淀硝酸银硝酸银2.炔基炔基炔雌醇炔雌醇白白3.与硝酸与硝酸-硝酸银的沉淀反应硝酸银的沉淀反应含有氯取代的甾体激素类药物。含有氯取代的甾体激素类药物。KOH(三三)制备衍生物测定制备衍生物测定m.p.香香（四）水解产物的反应（四）水解产物的反应特臭特臭特臭特臭-3-酮酮 240nm苯环苯环 280nm（五）（五）UV法法33003000cm-130002700cm

7、-119001650cm-116501450cm-11000650cm-1（六）（六）IR法法37503300cm-1醋酸可的松醋酸可的松结构特征：结构特征：43酮、酮、C17 OHC20 酮基、酮基、C11 酮基、醋酸酯酮基、醋酸酯1630cm-13420cm-1亚甲基、角亚甲基、角甲基吸收带甲基吸收带1750cm-11232cm-11052cm-1（七）（七）TLC法法 主要用于甾体激素类药物制剂的主要用于甾体激素类药物制剂的鉴别鉴别 方法：对照品法方法：对照品法 要求供试品溶液所显主斑点的要求供试品溶液所显主斑点的颜颜色色和和位置位置与对照品溶液的主斑点相同。与对照品溶液的主斑点相同。炔

8、诺酮炔诺酮TLC图图（八）（八）HPLC法法 主要用于甾体激素类药物制剂的主要用于甾体激素类药物制剂的鉴别（如：醋酸曲安奈德软膏、醋酸鉴别（如：醋酸曲安奈德软膏、醋酸氟轻松软膏）氟轻松软膏）方法：对照品法方法：对照品法 要求在含量测定项下记录的色谱要求在含量测定项下记录的色谱图中，供试品峰的图中，供试品峰的tR与对照品峰的与对照品峰的tR一致。一致。三、三、杂质检查杂质检查（一）游离磷酸（一）游离磷酸（对照品法）（对照品法）地塞米松磷酸钠地塞米松磷酸钠氢化可的松磷酸钠氢化可的松磷酸钠倍他米松磷酸钠倍他米松磷酸钠氢化泼尼松磷酸钠氢化泼尼松磷酸钠原理：原理：方法：方法：（二）甲醇和丙酮（二）甲醇和

9、丙酮甲醇甲醇 不得出峰不得出峰（灵敏度法）（灵敏度法）检测限检测限=3.1ng丙酮丙酮 5.0%内标法内标法+校正因子校正因子GC法法（三）雌酮（三）雌酮原理：原理：Zimmermann反应反应碱性碱性KOH乙醇乙醇高纯度高纯度来源：合成中用二氧化硒来源：合成中用二氧化硒(SeO(SeO2 2)脱氢脱氢剧毒剧毒原理：原理：S（四）硒（四）硒（五）其他甾体（五）其他甾体1.定义定义 2.与标示药物结构不同的甾体化与标示药物结构不同的甾体化合物都称为合物都称为“其他甾体其他甾体”2.来源来源 原料、中间体、异构体、降解产物原料、中间体、异构体、降解产物3.特点特点 （1）可能存在多个甾体杂质）可能

10、存在多个甾体杂质 （2）结构类似）结构类似4.方法（具有一定分离能力）方法（具有一定分离能力）TLC法（高低浓度对比法）法（高低浓度对比法）HPLC法（类似高低浓度对比法）法（类似高低浓度对比法）四、含量测定四、含量测定（一）（一）UV法法-3-酮：酮：240nm（）肾上腺皮质激素肾上腺皮质激素雄性激素和蛋白同化激素雄性激素和蛋白同化激素孕激素孕激素 苯环：苯环：280nm（）雌激素雌激素（二）反应分光光度法（二）反应分光光度法1.适用于非分光光度活性药物适用于非分光光度活性药物2.使待测组分光谱位移，避免干扰使待测组分光谱位移，避免干扰3.增加测定灵敏度增加测定灵敏度4.增加选择性增加选择性

11、弱、非分光光弱、非分光光度活性药物度活性药物强分光光度强分光光度活性药物活性药物化学反应化学反应 肾上腺皮质激素类肾上腺皮质激素类C17-醇酮基醇酮基强还原性强还原性OH-还原还原1.四氮唑比色法四氮唑比色法（1）原理）原理三苯甲臜三苯甲臜深红深红氯化三苯四氮唑氯化三苯四氮唑（TTC）红四氮唑（红四氮唑（RT）蓝四氮唑蓝四氮唑（BT）双甲臜（暗蓝）双甲臜（暗蓝）ChP TTC（RT）BP TTC（RT）USP BT4045暗暗（2）操作方法操作方法（对照品法）（对照品法）F 基团对反应速度的影响基团对反应速度的影响C11=O C11OHC21OH C21-酯酯C16无论何种取代基无论何种取代基

12、（3）讨论）讨论F 溶剂、水分的影响溶剂、水分的影响含水量含水量5%含水含水10%A10%含水含水30%几无反应几无反应 无醛无水乙醇无醛无水乙醇醛醛 A 无水乙醇无水乙醇F O2与光线的影响与光线的影响反应过程反应过程反应产物反应产物怕光怕光避光、快速避光、快速O2影响颜影响颜色强度和色强度和稳定性稳定性隔绝空气、隔绝空气、快速、充快速、充N2F 碱的种类及加入顺序碱的种类及加入顺序 反应应在强碱性（反应应在强碱性（pH13.75）条件下）条件下进行，以进行，以氢氧化四甲基铵氢氧化四甲基铵的结果最佳。的结果最佳。加入顺序：加入顺序：F 温度与时间温度与时间t、甲臜分解甲臜分解%ChP 25

13、4045BP 30 1h（4）特点：）特点：缺点缺点 影响因素太多影响因素太多 优点优点 测定结果能指示药品的稳定测定结果能指示药品的稳定性（氧化及降解产物无此反应）性（氧化及降解产物无此反应）2.其他比色法其他比色法l 异烟肼比色法异烟肼比色法l Kober反应比色法反应比色法ChP（2005）、）、USP、BP、JP均采用均采用RP-HPLC（大多内标法）大多内标法）特点：用样量少，灵敏度高，分离效特点：用样量少，灵敏度高，分离效果好，测定速度快果好，测定速度快（三）（三）HPLC法法1甾甾体体激激素素类类药药物物的的结结构构中中能能和和四四氮氮唑唑盐盐发发生生显色反应的基团显色反应的基团

14、 A.酚羟基酚羟基 B.活泼次甲基活泼次甲基 C.甲酮基甲酮基 D.C17-醇酮基醇酮基 E.酮基酮基复 习2.用异烟肼比色法测定甾体激素药物含用异烟肼比色法测定甾体激素药物含量时，其溶液的环境是量时，其溶液的环境是A强酸性强酸性 B中性中性 C强碱性强碱性 D弱碱性弱碱性 E以上都不对以上都不对3.问题（问题（1）（）（5）A维生素维生素B1 B醋酸地塞米松醋酸地塞米松 C两者皆是两者皆是 D两者皆不是两者皆不是 （1）异烟肼比色法异烟肼比色法 （2）硫色素反应）硫色素反应 （3）紫外分光光度法）紫外分光光度法 （4）羟肟酸铁反应）羟肟酸铁反应 （5）绿奎宁（）绿奎宁（Thaciaquin）

15、反应反应BACDD4.可用于氢化可的松鉴别的试剂有可用于氢化可的松鉴别的试剂有 A氨制硝酸银氨制硝酸银 B异烟肼异烟肼 C红四氮唑红四氮唑 D硫酸硫酸 E重氮苯磺酸重氮苯磺酸5.可用于甾体激体类药物的测定方法有可用于甾体激体类药物的测定方法有 A高效液相色谱法高效液相色谱法 B四氮唑盐法四氮唑盐法 C紫外分光光度法紫外分光光度法 D异烟肼比色法异烟肼比色法 EKober反应比色法反应比色法6.能能与与亚亚硝硝基基铁铁氰氰化化钠钠反反应应生生成成蓝蓝紫紫色色的的药药物物是是 A雌二醇雌二醇 B黄体酮黄体酮 C醋酸可的松醋酸可的松 D苯丙酸诺龙苯丙酸诺龙 E以上都不对以上都不对7.各各国国药药典典

16、对对甾甾体体激激素素类类药药物物常常用用HPLC或或GC法测定其含量，主要原因是法测定其含量，主要原因是A.它它们们没没有有特特征征紫紫外外吸吸收收，不不能能用用 紫紫外外分分光光光度法光度法 B.不能用滴定分析法进行测定不能用滴定分析法进行测定 C.由由于于“其其它它甾甾体体”的的存存在在，色色谱谱法法可可消消除除它它们们的干扰的干扰D.色谱法比较简单，精密度好色谱法比较简单，精密度好E.色谱法准确度优于滴定分析法色谱法准确度优于滴定分析法8异烟肼比色法测定甾体激素类药物时，异烟肼比色法测定甾体激素类药物时，药物的呈色基团是药物的呈色基团是 A.酮基酮基 B.酚羟基酚羟基 C.活泼次甲基活泼次甲基 D.炔基炔基 E.甾体母核甾体母核9.四氮唑比色法可用于下列哪个药物四氮唑比色法可用于下列哪个药物的含量测定的含量测定 A.可的松可的松 B.睾丸素睾丸素 C.雌二醇雌二醇 D.炔雌醇炔雌醇 E.黄体酮黄体酮10.黄体酮在酸性溶液中可与下列哪些试黄体酮在酸性溶液中可与下列哪些试剂反应呈色剂反应呈色 A.2,4-二硝基苯肼二硝基苯肼 B.三氯化铁三氯化铁 C.硫酸苯肼硫酸苯肼 D.异烟肼异烟肼 E.四氮唑盐四氮唑盐