核酸的结构与功能课件.pptx
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1、第一章第一章核酸的结构与功能核酸的结构与功能 主主要要内内容容:介介绍绍核核酸酸的的分分类类和和化化学学组组成成,重重点点讨讨论论DNADNA和和RNARNA的的结结构构特特征征,初初步步认认识识核核酸酸的的结结构构特特征征与与其其功功能能的的相相关关性性;介介绍绍核核酸酸的的主主要理化性质和核酸研究的一般方法要理化性质和核酸研究的一般方法。思考思考1谢谢观赏2019-6-29核酸的结构与功能核酸的结构与功能第一节第一节 核酸的研究历史和重要性核酸的研究历史和重要性第二节第二节 核酸的分类核酸的分类和和基本结构单位基本结构单位核苷酸核苷酸第三节第三节 DNADNA的分子结构的分子结构第四节第四
2、节 RNARNA的分子结构的分子结构第五节第五节 核酸的某些理化性质及核酸研究常用技术核酸的某些理化性质及核酸研究常用技术第六节第六节 人类基因组计划简介人类基因组计划简介2谢谢观赏2019-6-29 核酸分类和分布核酸分类和分布 脱脱氧氧核核糖糖核核酸酸(deoxyribonucleicacid,DNA):遗遗传传信信息息的的贮贮存存和和携携带带者者,生生物物的的主主要要遗遗传传物物质质。在在真真核核细细胞胞中中,DNA主主要要集集中中在在细细胞胞核核内内,线线粒粒体体和和叶叶绿绿体体中中均均有有各各自自的的DNA。原原核核细细胞胞没没有有明明显显的的细细胞胞核核结结构构,DNA存存在在于于
3、称称为为类类核核的的结结构构区区。每每个个原原核核细细胞胞只只有有一一个个染染色色体体,每每个个染染色色体体含含一一个个双双链链环环状状DNA。核核糖糖核核酸酸(ribonucleicacid,RNA):主主要要参参与与遗遗传传信信息息的的传传递递和和表表达达过过程程,细细胞胞内内的的RNA主主要要存存在在于于细细胞胞质质中中,少少量量存存在在于于细细胞胞核核中中,病病毒毒中中RNA本本身身就就是是遗遗传传信信息息的的储储存存者者。另另外外在在植植物物中中还还发发现现了了一一类类比比病病毒毒还还小小得得多多的的侵侵染染性性致致病病因因子子称称为为类类病病毒毒,它它是是不不含含蛋蛋白白质质的的游
4、游离离的的RNA分分子子,还还发发现现有有些些RNA具生物催化作用(具生物催化作用(ribozyme)。3谢谢观赏2019-6-29核酸的研究历史和重要性核酸的研究历史和重要性1869 Miescher从从脓脓细细胞胞的的细细胞胞核核中中分分离离出出了了一一种种含含磷磷酸酸的的有有机机物物,当当时时称称为为核核素素(nuclein),后后称称为为核酸(核酸(nucleicacid)1944Avery等等通通过过肺肺炎炎球球菌菌转转化化试试验验证证明明DNA是是遗传物质遗传物质1953Watson和和Crick提出提出DNA结构的双螺旋模型结构的双螺旋模型1958Crick提出遗传信息传递的中心
5、法则提出遗传信息传递的中心法则70年代年代建立建立DNA重组技术重组技术80年年代代以以后后分分子子生生物物学学、分分子子遗遗传传学学等等学学科科突突飞飞猛进发展,实施人类基因组计划(猛进发展,实施人类基因组计划(HGP)4谢谢观赏2019-6-29核酸的基本结构单位核酸的基本结构单位核苷酸核苷酸1核酸分子中核苷酸的化学组成与命名核酸分子中核苷酸的化学组成与命名(1)碱基、核苷、核苷酸的概念和关系碱基、核苷、核苷酸的概念和关系(2)常见碱基的结构与命名法常见碱基的结构与命名法(3)常见(脱氧)核苷酸的基本结构与命名常见(脱氧)核苷酸的基本结构与命名(4)稀有核苷酸稀有核苷酸2细胞内游离核苷酸及
6、其衍生物细胞内游离核苷酸及其衍生物5谢谢观赏2019-6-295-磷酸核苷酸的基本结构磷酸核苷酸的基本结构OO(N=A、G、C、U、T)HH(O)H12NOHCH2HH543PO-OOO-6谢谢观赏2019-6-29碱基、核苷、核苷酸的概念和关系碱基、核苷、核苷酸的概念和关系NitrogenousbasePentosesugarHOCH2HOHDoxyribose(inDNA)HOCH2HOOHRibose(inRNA)PhosphatePyrimidinesCytosineThymineUracilCUTPurihesAdenineGuanineAG7谢谢观赏2019-6-29基本碱基结构和
7、命名基本碱基结构和命名嘌呤嘌呤嘧啶嘧啶Adenine(A)Guanine(G)Cytosine(C)Uracil(U)Thymine(T)8谢谢观赏2019-6-29核苷酸的结构和命名核苷酸的结构和命名腺嘌呤核苷酸(腺嘌呤核苷酸(AMP)Adenosinemonophosphate脱氧腺嘌呤核苷酸(脱氧腺嘌呤核苷酸(dAMP)DeoxyadenosinemonophosphateOH鸟嘌呤核苷酸(鸟嘌呤核苷酸(GMP)胞嘧啶核苷酸(胞嘧啶核苷酸(CMP)尿嘧啶核苷酸(尿嘧啶核苷酸(UMP)脱氧鸟嘌呤核苷酸(脱氧鸟嘌呤核苷酸(dGMP)脱氧胞嘧啶核苷酸(脱氧胞嘧啶核苷酸(dCMP)脱氧胸腺嘧啶核
8、苷酸(脱氧胸腺嘧啶核苷酸(dTMP)H9谢谢观赏2019-6-29PPPPPPPP常见(脱氧)核苷酸的结构和命名常见(脱氧)核苷酸的结构和命名鸟嘌呤核苷酸鸟嘌呤核苷酸(GMP)尿嘧啶核苷酸尿嘧啶核苷酸(UMP)胞嘧啶核苷酸胞嘧啶核苷酸(CMP)腺嘌呤核苷酸腺嘌呤核苷酸(AMP)脱氧腺嘌呤核苷酸脱氧腺嘌呤核苷酸(dAMP)脱氧鸟嘌呤核苷酸脱氧鸟嘌呤核苷酸(dGMP)脱氧胞嘧啶核苷酸脱氧胞嘧啶核苷酸(dCMP)脱氧胸腺嘧啶核苷酸脱氧胸腺嘧啶核苷酸(dTMP)10谢谢观赏2019-6-29几种稀有核苷酸几种稀有核苷酸假尿苷(假尿苷()二氢尿嘧啶(二氢尿嘧啶(DHU)AmCH3CH3H3Cm26GHH
9、511谢谢观赏2019-6-29OPOOHOA(G)OOOHCH2HHHHcAMP(cGMP)cAMP(cGMP)的结构的结构Cyclic adenylie(Guanine)acidCyclic adenylie(Guanine)acid12谢谢观赏2019-6-29核糖和脱氧核糖13谢谢观赏2019-6-29细胞内游离核苷酸及其衍生物细胞内游离核苷酸及其衍生物多磷酸核苷酸多磷酸核苷酸环核苷酸环核苷酸辅酶类核苷酸。辅酶类核苷酸。14谢谢观赏2019-6-29 5-NMP5-NDP5-NTPN=A、G、C、U 5-dNMP5-dNDP5-dNTP N=A、G、C、T腺苷酸及其多磷酸化合物腺苷酸及
10、其多磷酸化合物AMPAdenosinemonophosphateADPAdenosinediphosphateATPAdenosinetriphosphate15谢谢观赏2019-6-29第三节第三节DNA的分子结构的分子结构一、一、DNA一级结构一级结构二、二、DNA的二级结构的二级结构三、三、DNA的三级结构的三级结构16谢谢观赏2019-6-29DNA的一级结构的一级结构 DNA分分子子中中各各脱脱氧氧核核苷苷酸酸之之间间的的连连接接方方式式(3-5磷磷酸酸二二酯酯键键)和和排排列列顺顺序序叫叫做做DNA的的一一级级结结构构,简简称称为为碱碱基基序序列列。一一级级结结构构的的走走向向的的
11、规规定定为为53。不不同同的的DNA分分子子具具有有不不同同的的核核苷苷酸酸排排列列顺顺序序,因因此此携携带带有有不不同同的的遗传信息。遗传信息。一级结构的表示一级结构的表示法法结构式,线条式,字母式结构式,线条式,字母式 一级结构测定一级结构测定5317谢谢观赏2019-6-29DNADNA、RNARNA的一级结构的一级结构 DNADNA一级结构一级结构53OHOHOH53RNARNA一级结构一级结构18谢谢观赏2019-6-29DNADNA一级结构的表示法一级结构的表示法53结构式结构式53 p p p pOH3ACTG1线条式线条式5ACTGCATAGCTCGA3字母式字母式19谢谢观赏
12、2019-6-29DNA酶酶法法序序列列分分析析的的原原理理酶酶反反应应电电泳泳方方向向模板模板CCGGTAGCAACT35GG53引物引物dATPdCTPdGTPdTTP+ddATPdATPdCTPdGTPdTTP+ddTTPdATPdCTPdGTPdTTP+ddGTPdATPdCTPdGTPdTTP+ddCTPGGCCAGGCCATCGTTGAGGCGGCCGGCCATCGGCCATCGTTGGGCCATCGGGCCATGGCCATCGTGGCCATCGTTACGTAGTTGCTACC35TCAACGATGG53读出模板读出模板互补序列互补序列读出模板读出模板序列序列20谢谢观赏2019-
13、6-29DNA的二级结构的二级结构(1)DNA的的双螺旋结构双螺旋结构(Watson-Crick模型模型)DNA双螺旋结构双螺旋结构特征特征及及意义意义(2)DNA双螺旋的双螺旋的多态性多态性(3)某些其它)某些其它DNA螺旋结构螺旋结构 DNA回文结构回文结构、三股螺旋三股螺旋21谢谢观赏2019-6-29DNA的双螺旋结构的形成的双螺旋结构的形成53535353磷酸磷酸核糖核糖碱基碱基T-A碱基对碱基对C-G碱基对碱基对22谢谢观赏2019-6-29DNA的双螺旋模型特点的双螺旋模型特点 两两条条反反向向平平行行的的多多聚聚核核苷苷酸酸链链沿沿一一个个假假设设的中心轴右旋相互盘绕而形成。的
14、中心轴右旋相互盘绕而形成。磷磷酸酸和和脱脱氧氧核核糖糖单单位位作作为为不不变变的的骨骨架架组组成成位位于于外外侧侧,作作为为可可变变成成分分的的碱碱基基位位于于内内侧侧,链链间间碱碱基基按按AT,GC配配对对(碱碱基基配配对对原原则,则,Chargaff定律)定律)螺螺旋旋直直径径2nm,相相邻邻碱碱基基平平面面垂垂直直距距离离0.34nm,螺螺旋旋结结构构每每隔隔10个个碱碱基基对对(basepair,bp)重复一次,间隔为重复一次,间隔为3.4nm23谢谢观赏2019-6-29 氢键氢键 碱基堆集力碱基堆集力 磷酸基上负电荷被胞内磷酸基上负电荷被胞内组蛋白或正离子中和组蛋白或正离子中和 碱
15、基处于疏水环境中碱基处于疏水环境中DNA的双螺旋结构稳定因素的双螺旋结构稳定因素24谢谢观赏2019-6-29DNA的双螺旋结构的双螺旋结构的意义的意义该该模模型型揭揭示示了了DNA作作为为遗遗传传物物质质的的稳稳定定性性特特征征,最最有有价价值值的的是是确确认认了了碱碱基基配配对对原原则则,这这是是是是DNA复复制制、转转录录和和反反转转录录的的分分子子基基础础,亦亦是是遗遗传传信信息息传传递递和和表表达达的的分分子子基基础础。该该模模型型的的提提出出是是本本世世纪纪生生命命科科学学的的重重大大突突破破之之一一,它它奠奠定定了了生生物物化化学学和和分分子子生生物物学学乃乃至至整整个个生生命命
16、科科学学飞速发展的基石。飞速发展的基石。25谢谢观赏2019-6-29DNA双螺旋的不同构象双螺旋的不同构象26谢谢观赏2019-6-29三种三种DNA双螺旋构象比较双螺旋构象比较A-DNAZ-DNAB-DNAABZ外型外型粗短粗短适中适中细长细长螺旋方向螺旋方向右手右手右手右手左手左手螺旋直径螺旋直径2.55nm2.37nm1.84nm碱基直升碱基直升0.23nm0.34nm0.38nm碱基夹角碱基夹角32.7034.6060.00每圈碱基数每圈碱基数1110.412轴心与碱轴心与碱基对关系基对关系2.46nm3.32nm4.56nm碱基倾角碱基倾角1901090糖苷键构象糖苷键构象反式反式
17、反式反式C、T反式,反式,G顺式顺式大沟大沟很窄很深很窄很深很宽较深很宽较深平坦平坦小沟小沟很宽、浅很宽、浅窄、深窄、深较窄很深较窄很深27谢谢观赏2019-6-29DNA双螺旋构象的类型双螺旋构象的类型A-DNAZ-DNAB-DNA28谢谢观赏2019-6-29DNA回文序列及几种结构形式回文序列及几种结构形式回文序列回文序列发夹式结构发夹式结构十字形结构十字形结构中心区域中心区域29谢谢观赏2019-6-29DNA二二级级结结构构的的多多样样性性DNA分子中十字形结构的形成分子中十字形结构的形成富于富于AT富于富于ATHolliday结构结构30谢谢观赏2019-6-29Southern印
18、迹法印迹法DNA分子分子限制片段限制片段限制性酶切割限制性酶切割琼脂糖电泳琼脂糖电泳转移至硝酸纤维素膜上转移至硝酸纤维素膜上与放射性标记与放射性标记DNA探针杂交探针杂交放射自显影放射自显影带有带有DNA片片段的凝胶段的凝胶凝胶凝胶滤膜滤膜用缓冲液用缓冲液转移转移DNA吸附有吸附有DNA片段的膜片段的膜31谢谢观赏2019-6-29DNA三链间三链间的碱基配对的碱基配对DNA分子内分子内的三链结构的三链结构多聚嘌呤多聚嘌呤多聚嘧啶多聚嘧啶DNA分子间分子间的三链结构的三链结构32谢谢观赏2019-6-29DNA的三级结构的三级结构 在在细细胞胞内内,由由于于DNA分分子子与与其其它它分分子子(
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