PCR技术中的引物的本质和作用是什么.pdf

《PCR技术中的引物的本质和作用是什么.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《PCR技术中的引物的本质和作用是什么.pdf（1页珍藏版）》请在淘文阁 - 分享文档赚钱的网站上搜索。

1、PCRPCR 技术中的引物的本质和作用是什么技术中的引物的本质和作用是什么引物是一小段单链 DNA 或 RNA，引物可以做为 DNA 复制开始时 DNA 聚合酶的结合位点，在细胞外的条件下，只有通过引物，DNA 才可以开始进行复制。引物是人工合成的两段寡核苷酸序列，一个引物与感兴趣区域一端的一条DNA 模板链互补，另一个引物与感兴趣区域另一端的另一条DNA 模板链互补。例如(2011北京理综，31)TDNA 可随机插入植物基因组内，导致被插入基因发生突变。用此方法诱导拟南芥产生突变体的过程如下：种植野生型拟南芥，待植株形成花蕾时，将地上部分浸入农杆菌(其中的 TDNA 上带有抗除草剂基因)悬浮

2、液中以实现转化。在适宜条件下培养，收获种子(称为 T1 代)。(1)为促进植株侧枝发育以形成更多的花蕾，需要去除_，因为后者产生的_会抑制侧芽的生长。(2)为筛选出已转化的个体，需将T1 代播种在含_的培养基上生长，成熟后自交，收获种子(称为 T2 代)。(3)为筛选出具有抗盐性状的突变体，需将 T2 代播种在含_的培养基上，获得所需个体。(4)经过多代种植获得能稳定遗传的抗盐突变体。为确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需将该突变体与_植株进行杂交，再自交_代后统计性状分离比。(5)若上述 TDNA 的插入造成了基因功能丧失，从该突变体的表现型可以推测野生型基因的存在导致植物的抗盐性_。解析(

3、1)为使侧枝发育形成更多的花蕾，要破坏顶端优势，因此，需去除顶芽，因为顶芽产生的生长素在侧芽积累，会抑制侧芽生长。(2)要筛选出抗除草剂的个体，应将T1 代播种在含一定浓度除草剂的培养基上生长。(3)要筛选出抗盐性状的个体，应将 T2 代播种在含一定浓度盐的培养基上生长。(4)要确定抗盐性状是否由单基因突变引起，需将突变体与野生型植株进行杂交，得到 F1，再让 F1 自交，统计 F2 的性状分离比。(5)抗盐突变体的抗盐性强，野生型基因的存在会降低植物的抗盐性。(6)PCR 技术可扩增基因，先应提取突变体 DNA 作目的基因，然后用同一种限制酶处理目的基因和运载体，再用 DNA 连接酶连接成重

4、组 DNA，从图中可看出 A、D 为模板链，B、C 为引物。答案(1)顶芽生长素(2)(一定浓度的)除草剂(3)(一定浓度的)盐(4)野生型1(5)降低(6)突变体DNA 连接酶B、C-启动子和引物两者的区别是什么启动子和引物两者的区别是什么启动子是 DNA 分子上能与 RNA 聚合酶结合并形成转录起始复合体的区域，在许多情况下，还包括促进这一过程的调节蛋白的结合位点，决定RNA 聚合酶转录起始位点的DNA 序列。引物是一小段单链DNA或RNA，引物可以做为DNA复制开始时DNA聚合酶的结合位点，在细胞外的条件下，只有通过引物，DNA 才可以开始进行复制。引物是人工合成的两段寡核苷酸序列，一个引物与感兴趣区域一端的一条DNA 模板链互补，另一个引物与感兴趣区域另一端的另一条 DNA 模板链互补。启动子是位于结构基因前的非编码区对转录起调控作用的一段DNA 序列。引物则是游离于DNA 复制的模板链之外的对DNA 复制起调控作用的一小段单链DNA 或 RNA。