RD血型鉴定操作规程.pdf

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1、R R D D 血血型型鉴鉴定定操操作作规规程程集团标准化工作小组#Q8QGGQT-GX8G08Q8-GNQGJ8-MHHGN#对象：全院职工医疗药事制度编写日期：文件名称：Rh（D）血型鉴定修订日期：执行日期：注：本文件仅供本院人员使用，未经同意，不得翻印本文件最终解释权归输血科注：本文件仅供本院人员使用，未经同意，不得翻印本文件最终解释权归输血科RhRh（D D）血型鉴定）血型鉴定【原理】【原理】Rh 血型系统是输血医学中仅次于 ABO 系统的第二大血型系统。Rh 血型系统常见的抗原有D 和 C、c、E、e 五种，分别由 RHD 基因和 RHCE 基因编码，RhD 和 RhCE 蛋白均是反

2、复穿膜的蛋白质。使用相应的抗 D、抗 C、抗 c、抗 E、抗 e 五种血型试剂可以鉴定这些抗原。临床上，D 抗原是 Rh抗原中免疫原性最强的抗原，也是最具有临床意义的抗原，一般只做 D 抗原鉴定，凡带有 D 抗原者称为Rh 阳性，不带 D 抗原者称为 Rh 阴性。1.试管法【样本】【样本】抗凝或不抗凝的样本均可用于 Rh 鉴定试验。红细胞可悬浮在自身血清、血浆或盐水中，也可以洗涤后悬浮于盐水中。【试剂】【试剂】（1）IgM 抗 D 试剂（2）Rh 对照试剂【操作】【操作】（1）加 1 滴抗 D 到一洁净试管，并做好标记（2）加 1 滴 Rh 对照试剂到第二个洁净试管中，并做好标记（3）分别加

3、1 滴 2%5%红细胞悬液到每支试管中（4）轻轻混匀，通常（900100）g 离心 15 秒（5）轻轻重悬细胞扣，检查凝集（6）评价反应强度，记录试验管和对照管得试验结果【结果判定】【结果判定】（1）抗 D 管凝集，对照管不凝集表明红细胞是RhD 阳性（2）对照管和抗 D 管均阴性，说明待测红细胞是RhD 阴性结果（3）对照管凝集则试验无效 2.玻片法【样本】【样本】用玻片法进行 RhD 定型时，待检红细胞悬液的浓度是40%50%【试剂】【试剂】适合用于玻片法的低蛋白抗D 试剂【操作】【操作】（1）加 1 滴抗 D 到一洁净的玻璃片或白瓷板凹孔中，并做好标记（2）加 1 滴适合的对照试剂到另一

4、洁净的玻璃片或白瓷板凹孔中，并做好标记（3）向以上玻片或白瓷板凹孔中的每一种试剂中分别加1 滴混匀的 40%50%待检红细胞悬液（4）充分混合抗体试剂和细胞，用搅拌棒将混合物均匀分散（5）不断地从一边到另一边轻轻倾斜转动玻片或白瓷板，持续大概2 分钟（6）读取，解释并记录所有玻片或白瓷板凹孔中的结果【结果判定】【结果判定】（1）抗 D 试剂与红细胞反应表现凝集，而对照为阴性反应，表明待检红细胞为RhD 阳性（2）抗 D 试剂与对照均为阴性反应，表明待检红细胞为RhD 阴性（3）对照管凝集则试验无效【注意事项】【注意事项】玻片法可能存在感染性标本暴露的风险，需要注意防范；玻片法不适用于检测弱 D 表型3.柱凝集法【样本】同玻片法和试管法【试剂】已加入抗 D 试剂的柱凝集血型卡【操作】【操作】（1）配制好的检测样本的红细胞悬液和试剂红细胞悬液.通常配制为%浓度。（2）在专用微柱凝集卡的RhD 检测管中加入样本红细胞悬液50ul（3）在专用血型血清学用离心机内离心（4）判读并记录凝集反应结果【结果判定】【结果判定】根据红细胞在凝胶柱内的反应情况解释凝集强度。出现凝集和（或）溶血为阳性，不凝集为阴性【参考文献】【参考文献】中华人民共和国卫生部医政司编，全国临床检验操作规程（第四版）