双抗配置方法.pdf
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细胞培养用青霉素-链霉素Penicillin-Streptomycin for Cell Culture为粉剂,是最常用的细胞培养用抗生素即通常所谓的双抗;在细胞培养液中推荐的青霉素的工作浓度为 100U/ml,链霉素的工作浓度为0.1mg/ml;一个包装的细胞培养用青霉素-链霉素可以配制 80L 细胞培养液;对一般细胞 0.25%胰酶胰蛋白酶,Trypsin配方：100ml PBS,0.25g 胰酶步骤：1 先配 100mlPBS1000mlPBS:8.0gNaCl,3.4785gPO4HNa212H2O/2.9gPO4HNa2,0.2gKCl,0.2gPO4H2K 溶于 1000ml 蒸馏水2 称胰酶 0.25g3 加入 PBS 中,低速搅拌 4h 冰浴中,或者 4过夜低速搅拌 0.5h 冰浴中4 调 PH7.45 仍在冰浴中6 过滤,分装,-20保存,4短期内用完tip:低速很重要,机械搅拌对酶是一种冲击,如果起沫,酶就变性了;低温,防止酶失活对难消化的细胞：在上述配方中,加入 0.02g 的 EDTA0.02%tip:因为 EDTA 可以络合 Ca2+,增加消化效力
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