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1、检测细胞中的检测细胞中的 D D和和 RNARNA一、学习任务分析一、学习任务分析检测细胞中的 DA 与 RNA是浙科版必修 1 第一章第三节中的建议活动,在实验的操作上看,本活动可以锻炼学生使用显微镜的高倍物镜的能力。同时,本活动能使学生增加对核酸的种类和性质的认识,为以后相关内容的学习打下基础。本活动将科学知识同实际操作相结合,突出了所学内容一定程度的实用应用性。二、学习者分析二、学习者分析本活动的授课对象是高二年级的学生。从知识起点上来看,学生通过上节课的学习已经知道了一定程度的关于核酸的知识,他们自然会对“检测细胞中的 DNA 与 RN”的方法、过程以及原理产生兴趣,这正是促成学生进行
2、本节活动的兴奋点。此外,学生通过初中实验已掌握了显微镜的运用方法,这为本活动的开展奠定了知识基础。而从认知思维起点上看,高二学生的思维方式已经开始从具象思维转向抽象思维,具备了一定的理论分析能力和逻辑思维能力。所以本活动应注重学生与教师的双向交流,引导学生积极思考,锻炼他们获取信息、从现象发掘本质、建构知识体系的能力。三、教学重难点三、教学重难点1 1、教学重点:、教学重点:实验原理、显微镜的使用2 2、教学难点:、教学难点:甲基绿使 DNA 呈绿色,派洛宁使 RN呈红色。四、教学目标四、教学目标1 1、知识与技能目标、知识与技能目标:()能够分析说明NA 和 RNA 在结构上的不同点()熟悉
3、显微镜的使用方法2 2、过程与方法目标:、过程与方法目标:(1)掌握制作装片的方法 (2)能够使用试剂对材料进行染色3 3、情感态度和价值观目标、情感态度和价值观目标:在动手能力方面上得到培养,在学习态度上得以提升而变得更加积极、乐观。五、教学过程五、教学过程1 1、实验原理分析、实验原理分析(1)真核细胞的 DNA 主要分布在细胞核内,RN主要分布在细胞质中。(2)甲基绿和派洛宁两种染色剂对DA 和 RNA 的亲和力不同,甲基绿对 DN亲和力强,使 DN显现出绿色,而派洛宁对 RN的亲和力强,使 RA 呈现出红色。用甲基绿、派洛宁的混合染色剂将细胞染色,可同时显示DNA 和NA 在细胞中的分
4、布。(3)盐酸的作用盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂的跨膜运输;盐酸使染色体中的 DNA 与蛋白质分离,便于 DA 与染色剂的结合。、实验材料用具、实验材料用具(1)材料:新鲜动物(蛙)肝脏。(2)用具:恒温水浴,100m的烧杯,00mL 烧杯,量筒,滴管,天平,载玻片,盖玻片,吸水纸,显微镜。(3)试剂及配制方法试剂:1molL 的盐酸,蒸馏水(盛于滴瓶内),派洛宁甲基绿混装粉,乙酸钠,乙酸。如果实验室没有派洛宁甲基绿混装粉,可以分别用甲基绿和派洛宁G,然后按染色剂A液配制中的方法 2 进行配制。染色剂的配制染色剂液的两种配制方法方法 1:取派洛宁甲基绿粉1,加入到100m蒸馏水中溶解,
5、然后用滤纸过滤,将滤液放入棕色瓶中备用。方法 2:取甲基绿 2g 溶于 98mL 蒸馏水中,取派洛宁 g 溶于 95mL 蒸馏水中。取mL甲基绿溶液和 2mL 派洛宁溶液加入到 16mL 蒸馏水中,即为 A 液,放入棕色瓶中备用。染色剂 B 液的配制方法:液是一种缓冲液,由乙酸钠和乙酸混合而成。先取乙酸钠6,用蒸馏水溶解至1000L 备用;再取乙酸2mL,用蒸馏水稀释至 100mL 备用。取配好的乙酸钠溶液 30mL 和稀释的乙酸 2mL,加蒸馏水 50mL,配成H 为 4.8 的 B 液(缓冲液)。染色剂的配制染色剂是由液和B 液混合配制而成的。取液20mL 和液 8mL 混合,就是实验中所
6、用的甲基绿-派洛宁染液。应该注意的是该试剂应现用现配。3 3、实验步骤、实验步骤()涂片取新鲜的动物肝脏切开,将其断面在一干净的载玻片中央涂抹数下,晾干。(2)水解将盛有 60 1m/盐酸溶液的小烧杯,置于 3的恒温水浴中。将晾干的载玻片倾斜着浸没于的盐酸溶液中水解1min(温度适中控制在 301)。(3)漂洗用镊子取出涂血的载玻片,用滴管向稍微倾斜的载玻片上加水,让水从一端缓慢流过血膜,这样反复冲洗 2-3 次。(4)染色用吸水纸吸去血膜周围的水分,再将载玻片放入盛有 60mL 甲基绿-派洛宁染液的烧杯中,冲洗残存的染液,再次用吸水纸吸干血膜周围的水分。()观察低:在低倍物镜下,寻找染色均匀
7、,色泽浅的区域,移至视野中央,将物像调节清晰;高:转到高倍物镜,调节细准焦螺旋,观察细胞核和细胞质的染色情况。在显微镜下,含 RN的区域被染成红色,而含A 的区域被染成蓝绿色或淡绿色。注意RNA、D在细胞中的分布。4 4、注意事项、注意事项(1)材料的选择选用的实验材料既要容易获得,又要便于观察;常用的观察材料:新鲜的动物肝脏(2)取材要点动物肝脏要新鲜。(3)冲洗载玻片时水的流速要尽量慢,切忌直接用水龙头冲洗。()换用高倍镜观察材料时,只能用细准焦螺旋进行调焦,切不可动粗准焦螺旋。5 5、实验相关知识、实验相关知识()加入ol/L 盐酸进行水解的目的是:改变细胞膜通透性,加速染色剂进入细胞;使染色剂中的A 与蛋白质分离;杀死细胞,有利于DA 与染色剂结合。()为什么要进行水解:甲基绿和派洛宁不是活细胞所需要的物质,正常情况下,无法穿过细胞膜进入细胞内,因此实验中使用盐酸破坏细胞膜,增加细胞膜的通透性,以方便染色剂进入细胞。同时,盐酸还能使细胞中染色体中的 DA 和蛋白质分离,有利于 DN与甲基绿染色剂结合。(3)将盛有盐酸和载玻片的小烧杯放在盛有 3温水的大烧杯中保温。水浴加热的目的是使小烧杯受热均匀。六、形成性评价六、形成性评价将对比自己做出来的实验结果和理想中的实验结果,发现其中的差异并分析产生差异的原因。
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