临床微生物标本采集方法及运送课件.ppt

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1、临床微生物标本的采集与运送临床微生物标本的采集与运送院感科检验科n细菌的耐药性不断增强：同一种细菌对抗生素的耐药性可以完全不同，甚至出现同时耐多种抗生素的“多重耐药”细菌，往往使临床医师的“经验性”治疗或所谓的常规治疗根本无效。现代感染性疾病的新特点现代感染性疾病的新特点 微生物标本送检的重要性微生物标本送检的重要性 2013年全国抗菌药物临床应用专项整治活动方案中（八）加强临床微生物标本检测和细菌耐药监测。医疗机构要采取综合措施，努力提高微生物标本质量，提高血液及其他无菌部位标本送检比例，保障检测结果的准确性。微生物标本送检的意义微生物标本送检的意义 1、明确诊断真正致病菌 2、指导病情追踪

2、 3、制定治疗措施 抗菌药物选择 抗菌药物更换 4、预后推测 5、减少细菌耐药性我们应该追求：我们应该追求：“准确的病原学诊断准确的病原学诊断”“针对性病原学治疗针对性病原学治疗”正确的微生物标本采集和运送，正确的微生物标本采集和运送，是准确的病原学诊断的前提！是准确的病原学诊断的前提！微生物让人类步步为营，微生物让人类步步为营，检验误差发生率哪个阶段最高检验误差发生率哪个阶段最高60%以上实验误差发生在分析前以上实验误差发生在分析前 1997年，一位意大利著名检验专家就对急诊检验误差发生的种类和发生率进行了统计。结果显示，约有68.2%的检验误差发生在检验前期，而来自于检验中期和检验后期的误

3、差率分别为13.3%和18.5%。2007年，这位检验专家又进行了类似统计，结果显示，检验前期的误差发生率仍高达61.9%。摘自：摘自：分析前质量控制获得准确结果的重要环节获得准确结果的重要环节基本原则基本原则1.1.及时采集微生物标本作病原学检查及时采集微生物标本作病原学检查2.2.在抗菌药物使用前采集标本在抗菌药物使用前采集标本3.3.采样时严格执行无菌操作采样时严格执行无菌操作4.4.采样后立即送检采样后立即送检5.5.标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂6.6.送检标本应注明来源和检验目的送检标本应注明来源和检验目的如何提高细菌阳性检出率？如何提高细

4、菌阳性检出率？n标本采集时机标本采集时机n标本采集方法标本采集方法n标本的质与量标本的质与量n标本的运送与保存标本的运送与保存n镜检筛选合格标本（退检制度）镜检筛选合格标本（退检制度）n高质量、多种分离培养基高质量、多种分离培养基n培养环境培养环境常见不合格标本主要有以下问题：常见不合格标本主要有以下问题：q 标本采集时间错误标本采集时间错误q 容器错误容器错误q 标本量不足标本量不足q 标本采集延误标本采集延误q 标本未及时正确运送标本未及时正确运送q 以及暂存条件错误以及暂存条件错误 q 。微生物标本送检的种类微生物标本送检的种类导管导管导管导管血液、体液血液、体液血液、体液血液、体液尿、

5、粪尿、粪尿、粪尿、粪拭拭拭拭子子子子采采采采样样样样呼吸道标本呼吸道标本呼吸道标本呼吸道标本组织块组织块组织块组织块标本标本标本标本临床意义低的标本：临床意义低的标本：临床意义低的标本：临床意义低的标本：痰、咽拭子（肺泡灌痰、咽拭子（肺泡灌痰、咽拭子（肺泡灌痰、咽拭子（肺泡灌洗和纤支镜取痰除外）、洗和纤支镜取痰除外）、洗和纤支镜取痰除外）、洗和纤支镜取痰除外）、粪便、肛拭子。粪便、肛拭子。粪便、肛拭子。粪便、肛拭子。临床意义中等的标本：临床意义中等的标本：临床意义中等的标本：临床意义中等的标本：尿、脓、伤口分泌物尿、脓、伤口分泌物尿、脓、伤口分泌物尿、脓、伤口分泌物临床意义大的标本：临床意义大

6、的标本：临床意义大的标本：临床意义大的标本：血、脑脊液、胸腹水、血、脑脊液、胸腹水、血、脑脊液、胸腹水、血、脑脊液、胸腹水、无菌体液无菌体液无菌体液无菌体液最有价值的细菌学检测项目最有价值的细菌学检测项目q 血液培养血液培养q 脑脊液培养脑脊液培养q 胆汁培养胆汁培养q 胸腹水培养胸腹水培养q 关节液关节液q 其他无菌体液或分泌液其他无菌体液或分泌液血培养标本血培养标本采集与运送血培养概念血培养概念:n采集患者的血液或无菌体液标本采集患者的血液或无菌体液标本,送至微生物送至微生物实验室培养检测。实验室培养检测。n检测原本无菌的血液及体液中是否有细菌存检测原本无菌的血液及体液中是否有细菌存在。在

7、。n如有细菌如有细菌,则极有可能为致病的细菌。则极有可能为致病的细菌。n进一步进行鉴定进一步进行鉴定/药敏试验。药敏试验。目前血培养的问题目前血培养的问题：n采血时机不合适采血时机不合适n采血套数不够采血套数不够n采血量不足采血量不足n只做需氧培养，不同时做厌氧培养只做需氧培养，不同时做厌氧培养n采血前或采血时正在使用抗菌药物治疗采血前或采血时正在使用抗菌药物治疗“只有在只有在发热时发热时，才需要，才需要进进行血培养。行血培养。”关于血培养指征关于血培养指征想想采采就就采采答答 案：血培养的指征案：血培养的指征n n当怀疑血流感染或脓毒症时，应常规行血培养当怀疑血流感染或脓毒症时，应常规行血培

8、养当怀疑血流感染或脓毒症时，应常规行血培养当怀疑血流感染或脓毒症时，应常规行血培养n n怀疑患者有血流感染的症状有：怀疑患者有血流感染的症状有：怀疑患者有血流感染的症状有：怀疑患者有血流感染的症状有：n n不明原因的发烧不明原因的发烧不明原因的发烧不明原因的发烧(3838)或体温过低或体温过低或体温过低或体温过低(3636)n n白细胞增多（白细胞增多（白细胞增多（白细胞增多（101010109 9L L），粒细胞减少（），粒细胞减少（），粒细胞减少（），粒细胞减少（1 101 109 9L L ）n n休克，寒颤，僵直休克，寒颤，僵直休克，寒颤，僵直休克，寒颤，僵直n n严重的局部感染严重的

9、局部感染严重的局部感染严重的局部感染(脑膜炎，心内膜炎，肺炎，肾盂脑膜炎，心内膜炎，肺炎，肾盂脑膜炎，心内膜炎，肺炎，肾盂脑膜炎，心内膜炎，肺炎，肾盂肾炎，腹部术后感染，肾炎，腹部术后感染，肾炎，腹部术后感染，肾炎，腹部术后感染，)n n心率异常加快心率异常加快心率异常加快心率异常加快n n低血压或高血压低血压或高血压低血压或高血压低血压或高血压n n呼吸频率加快呼吸频率加快呼吸频率加快呼吸频率加快“何何时时采血采血进进行血培养，无特殊行血培养，无特殊时间时间要求。要求。”关于采血时机关于采血时机03060时间(分钟)体温体温血培养采血时机血培养采血时机细菌浓度细菌浓度 答答 案：采集血培养样

10、本的最佳时间案：采集血培养样本的最佳时间n n尽可能在患者寒战或开始发热时采血尽可能在患者寒战或开始发热时采血n n在患者接受抗菌药物治疗在患者接受抗菌药物治疗前前采血采血n n如患者已经应用抗菌药物进行治疗，如患者已经应用抗菌药物进行治疗，应在应在下一次用药之前下一次用药之前采血培养采血培养 “为为减减轻轻患者痛苦，只从一个穿患者痛苦，只从一个穿刺部位采一份血液刺部位采一份血液标标本即可。本即可。”关于采血套数及部位关于采血套数及部位基本概念基本概念n n成人成人“一套一套”血培养应该包括需氧瓶血培养应该包括需氧瓶和厌氧瓶各一个，也叫和厌氧瓶各一个，也叫“一份一份”n n注意：一次穿刺采血，

11、算注意：一次穿刺采血，算“一套一套”，采集第二套应从另一个穿刺点获得。采集第二套应从另一个穿刺点获得。n n儿童一般只做需氧培养，但仍需从多儿童一般只做需氧培养，但仍需从多个部位采集多次。特殊患者才考虑厌个部位采集多次。特殊患者才考虑厌氧培养。氧培养。采血套数采血套数Weinstein et al.Detection of Bloodstream Infections in Adults:How Many Weinstein et al.Detection of Bloodstream Infections in Adults:How Many BloodCulturesBloodCultur

12、es Are Needed J Are Needed J ClinClin MicrobiolMicrobiol.2007;45:3546-3548.2007;45:3546-3548表皮葡萄球菌的临床意义表皮葡萄球菌的临床意义2 23 3套血培养，有助于污染的判断。套血培养，有助于污染的判断。TokarsTokars,JI.,JI.ClinClin Infect Infect DisDis 2004;39:333 2004;39:333 采集采集1套无法判套无法判断是病原菌还断是病原菌还是污染菌。是污染菌。答答 案案：关于血培养套数与采血部位：关于血培养套数与采血部位n n每位患者每次采血最

13、少每位患者每次采血最少2套，套，3套更好套更好n n初发患者，绝不能只采初发患者，绝不能只采1套标本套标本n n多个穿刺部位采血。因多部位同时发生污多个穿刺部位采血。因多部位同时发生污染的几率较小，便于对结果进行判断染的几率较小，便于对结果进行判断 “两套血培养采集两套血培养采集间间隔无特殊要求。隔无特殊要求。”关于采血间隔关于采血间隔 答案：关于标本采集间隔时间答案：关于标本采集间隔时间n n对对对对于于于于非非非非持持持持续续续续性性性性菌菌菌菌血血血血症症症症，同同同同时时时时或或或或短短短短时时时时间间间间内内内内采采采采集集集集2 2 3 3套套套套血血血血培培培培养养养养，因因因因

14、为为为为体体体体内内内内巨巨巨巨噬噬噬噬细细细细胞胞胞胞吞吞吞吞噬噬噬噬系系系系统统统统会会会会在在在在15153030分分分分钟钟钟钟内内内内清清清清除除除除掉掉掉掉进入人体内的细菌。进入人体内的细菌。进入人体内的细菌。进入人体内的细菌。n n可可可可疑疑疑疑急急急急性性性性心心心心内内内内膜膜膜膜炎炎炎炎患患患患者者者者要要要要立立立立即即即即取取取取血血血血作作作作血血血血培培培培养养养养，3030分分分分钟钟钟钟内内内内完完完完成成成成3 3套套套套血血血血培培培培养养养养的的的的采采采采集集集集，采采采采集集集集后后后后立立立立即即即即进进进进行行行行抗抗抗抗菌菌菌菌药药药药物物物物

15、的的的的经经经经验验验验治治治治疗疗疗疗。如果如果如果如果2424小时内报告阴性，则继续采集小时内报告阴性，则继续采集小时内报告阴性，则继续采集小时内报告阴性，则继续采集2 2套血培养。套血培养。套血培养。套血培养。n n可可可可疑疑疑疑的的的的亚亚亚亚急急急急性性性性心心心心内内内内膜膜膜膜炎炎炎炎患患患患者者者者每每每每间间间间隔隔隔隔3030分分分分钟钟钟钟至至至至1 1小小小小时时时时采采采采集集集集1 1 1 1套套套套，连连连连续续续续采采采采集集集集3 3套套套套标标标标本本本本。如如如如果果果果2424小小小小时时时时内内内内报报报报告告告告阴阴阴阴性性性性，则则则则继继继继续

16、续续续采采采采集集集集2 2套血培养。套血培养。套血培养。套血培养。“每瓶采集多少血液无特殊要求。每瓶采集多少血液无特殊要求。”关于采血量关于采血量采血量采血量(ml)与检出率的关系与检出率的关系 Overall血培养物每增加一毫升，真性菌血症血培养物每增加一毫升，真性菌血症成年人微生物的检出率增加成年人微生物的检出率增加3 但并非越多越好，超过一定数量的采血量会稀释培但并非越多越好，超过一定数量的采血量会稀释培养瓶内的肉汤，使肉汤无法有效中和血中的抑制物质养瓶内的肉汤，使肉汤无法有效中和血中的抑制物质（补体、抗体、抗生素）。所以血液与肉汤的最佳比例（补体、抗体、抗生素）。所以血液与肉汤的最佳

17、比例为为1：41：10 答答 案：关于采集血液量案：关于采集血液量n n采血量是影响灵敏度最关键因素。采血量是影响灵敏度最关键因素。n n成成人人一一份份标标本本2个个培培养养瓶瓶（需需氧氧厌厌氧氧），每每瓶瓶810ml，共共20ml；要要求求至至少少采采两份标本，即两份标本，即40ml。n n儿儿童童一一般般只只需需采采集集需需氧氧瓶瓶，在在保保证证采采集集血血量量1总血量下，一般为总血量下，一般为13ml。n n采采血血量量不不足足时时应应优优先先保保证证需需氧氧瓶瓶，因因为为临临床床90以以上上的的感感染染为为需需氧氧菌菌或或兼兼性性需需氧氧菌感染。菌感染。“先采生化、凝血先采生化、凝血

18、标标本，再采血培养本，再采血培养标标本。本。”关于关于各种血液标本的采集顺序各种血液标本的采集顺序n血培养对无菌操作的要求比注射、采集血培养对无菌操作的要求比注射、采集生化、凝血等其它标本要高。生化、凝血等其它标本要高。n所以要最先采集血培养标本。所以要最先采集血培养标本。n污染率的指标是污染率的指标是 3%3%。（100100份标本里只能有不到份标本里只能有不到3 3个标本出现个标本出现污染。）污染。）答案：采各种血液标本的先后顺序答案：采各种血液标本的先后顺序多管采血的顺序：35血液培养血液培养无添无添加剂管加剂管 凝血实验凝血实验血常规血常规其它其它防止凝血因子活化，或者血小板聚集而影响

19、检验结果。“血培养样本采集不建议抽动脉血血培养样本采集不建议抽动脉血。”关于关于采集动脉血采集动脉血 原因n 细菌往往是由静脉入血，网状内细菌往往是由静脉入血，网状内皮系统对于一过性菌血症和间歇皮系统对于一过性菌血症和间歇性菌血症在性菌血症在1530分钟内清除，分钟内清除，故静脉血培养有更高的阳性率。故静脉血培养有更高的阳性率。n动脉穿刺危险性较大。动脉穿刺危险性较大。n动脉穿刺增加了污染的机会。动脉穿刺增加了污染的机会。“消毒的重点是足消毒的重点是足够够量的消毒量的消毒剂剂。”关于皮肤及培养瓶消毒皮肤消毒程序：皮肤消毒程序：推荐使用碘酊、洗必泰或碘伏推荐使用碘酊、洗必泰或碘伏作为皮肤消毒剂。

20、作为皮肤消毒剂。碘酊作用碘酊作用1min。碘伏作用碘伏作用1.5-2min。洗必泰作用时间与碘酊一样。洗必泰作用时间与碘酊一样。（但不能用于（但不能用于2个月婴儿皮肤个月婴儿皮肤消毒）消毒）培养瓶的消毒程序：培养瓶的消毒程序：1.1.去掉培养瓶口的塑料瓶盖。去掉培养瓶口的塑料瓶盖。去掉培养瓶口的塑料瓶盖。去掉培养瓶口的塑料瓶盖。2.2.75%75%75%75%酒精消毒血培养瓶橡皮塞子酒精消毒血培养瓶橡皮塞子酒精消毒血培养瓶橡皮塞子酒精消毒血培养瓶橡皮塞子60606060秒。秒。秒。秒。3.3.自然自然自然自然待干待干待干待干。4.4.将标本注入培养瓶内。将标本注入培养瓶内。将标本注入培养瓶内。

21、将标本注入培养瓶内。5.5.5.5.5.5.颠倒混匀标本与肉汤颠倒混匀标本与肉汤颠倒混匀标本与肉汤颠倒混匀标本与肉汤，以避免血液凝，以避免血液凝，以避免血液凝，以避免血液凝集。集。集。集。“培养瓶未使用时，需要冷藏或冷冻？培养瓶未使用时，需要冷藏或冷冻？”关于培养瓶的储存温度 不需冷藏，更不能冷冻。保存在1525的室温即可，温度过低会导致对温度敏感的耐瑟氏菌等死亡。答案：关于未用培养瓶的储存温度 “加入标本后的培养瓶夜班未能及时送到检加入标本后的培养瓶夜班未能及时送到检验科，可以冷藏或放入验科，可以冷藏或放入35的温箱？的温箱？”关于关于夜班血培养的送检夜班血培养的送检 培养瓶夜班未能及时送到

22、检验科，培养瓶夜班未能及时送到检验科，存在室温即可，不能冷藏也不能放入存在室温即可，不能冷藏也不能放入35 的温箱。的温箱。过夜不会对检测造成影响，过夜不会对检测造成影响，但仍需尽快送检。冷藏可能导致对温度但仍需尽快送检。冷藏可能导致对温度敏感的耐瑟氏菌等死亡。温箱会导致细敏感的耐瑟氏菌等死亡。温箱会导致细菌进入生长对数期，从而错过检测的最菌进入生长对数期，从而错过检测的最佳时期。佳时期。答案：关于夜班血培养的送检答案：关于夜班血培养的送检“患者静脉中插有导管，可直接患者静脉中插有导管，可直接从导管采血。从导管采血。”关于采血部位 不可以不可以，常规血培养不宜从静脉，常规血培养不宜从静脉导管或

23、静脉留置装置中采集，检出污导管或静脉留置装置中采集，检出污染或定植菌的可能性较大。除非怀疑染或定植菌的可能性较大。除非怀疑导管相关性血流感染，请参照导管相导管相关性血流感染，请参照导管相关性血流感染的采血方法。关性血流感染的采血方法。答案：关于从静脉留置装置直接采血答案：关于从静脉留置装置直接采血血培养标本的拒收血培养标本的拒收n瓶子上帖的标签错误或未帖标签。瓶子上帖的标签错误或未帖标签。n血培养瓶打破的、损坏的或渗漏。血培养瓶打破的、损坏的或渗漏。n血液凝固。血液凝固。培养基的选择培养基的选择n推荐使用商品化的培养基推荐使用商品化的培养基n使用添加抗菌药物吸附剂的血培养使用添加抗菌药物吸附剂

24、的血培养瓶有助于提高已接受抗菌药物治疗瓶有助于提高已接受抗菌药物治疗患者血培养的检出率，增加细菌的患者血培养的检出率，增加细菌的分离率和分离速度，但同时也会增分离率和分离速度，但同时也会增加污染菌的检出率。加污染菌的检出率。上呼吸道标本上呼吸道标本上呼吸道感染：上呼吸道感染：n绝大部分呼吸道感染局限于口咽、鼻咽和口咽、鼻咽和鼻腔鼻腔部位。n导致咽痛、鼻涕、常常会发热，感染喉部、中耳、鼻窦炎、结膜炎或角膜炎。n可能与严重疾病百日咳、流行性感冒、麻疹和传染性单核细胞增多症并存。不同的采样拭子不同的采样拭子对标本的检测结果有影响吗对标本的检测结果有影响吗?n大量临床实验表明：与普通无菌棉拭子相比，尼

25、龙植绒拭子有着更好的对临床微生物标本的采集与运送效果。尤其是对于那些不能及时送检、放置时间过长的标本而言更是如此。咽拭子运送培养基咽拭子运送培养基q 可以运送需氧、厌氧、苛养菌可以运送需氧、厌氧、苛养菌q 4或或RT（室温）（室温）q 24或或48小时小时建议用于病原菌建议用于病原菌培养培养而不是涂片的标本送检。而不是涂片的标本送检。n咽拭子标本采集法咽拭子标本采集法痰培养标本痰培养标本采集与运送病原体种类繁多而复杂使下呼吸道感染病原诊断成为难题使下呼吸道感染病原诊断成为难题细菌（包括放线菌与奴卡菌，厌氧菌与细菌（包括放线菌与奴卡菌，厌氧菌与分枝杆菌）分枝杆菌）真菌（包括肺孢子菌）真菌（包括肺

26、孢子菌）病毒病毒支原体、衣原体与立克次体支原体、衣原体与立克次体原虫原虫寄生虫寄生虫咳痰途经口咽部n唾液中口咽部定植菌的浓度可达唾液中口咽部定植菌的浓度可达108-109/ml。n研究显示，国内常规痰标本中约半研究显示，国内常规痰标本中约半数存在唾液严重污染现象。数存在唾液严重污染现象。不可避免地受到污染不可避免地受到污染我国痰细菌培养现状我国痰细菌培养现状n标本送检率低标本送检率低n苛养菌检出率极低苛养菌检出率极低n结果重复性差结果重复性差n报告速度慢报告速度慢n感染菌与污染菌不易区分感染菌与污染菌不易区分n药敏结果与治疗反应存在差距药敏结果与治疗反应存在差距下呼吸道感染病原学诊断注意事项下

27、呼吸道感染病原学诊断注意事项n痰标本的正确采集（包括导痰）痰标本的正确采集（包括导痰）n痰标本及时运送和处理的重要性痰标本及时运送和处理的重要性n痰标本的洗涤与匀化痰标本的洗涤与匀化n痰涂片：质量评估和细菌、真菌初步痰涂片：质量评估和细菌、真菌初步报告报告n接种平板：质量与质控，血、巧克力、接种平板：质量与质控，血、巧克力、麦康凯、沙保弱麦康凯、沙保弱n培养环境：培养环境：CO2CO2n培养时间：培养时间：24h24h，48h48hn菌落观察要点菌落观察要点n结果报告：所有菌种（群），包括结果报告：所有菌种（群），包括半定量半定量n临床意义判定临床意义判定n其他病原体的检测：结核、真菌、其他病

28、原体的检测：结核、真菌、厌氧菌、非典型病原体厌氧菌、非典型病原体下呼吸道感染病原学诊断注意事项下呼吸道感染病原学诊断注意事项咳痰标本的采集咳痰标本的采集n标本采集方法标本采集方法n医师或护士直视下采集标本n病人先漱口，去除表面的菌群n教育病人深咳，收集从下呼吸道咳出的痰液n临床上约半数咳痰标本不合格！临床上约半数咳痰标本不合格！关于咳痰标本关于咳痰标本n在抗菌药物应用前采集痰标本在抗菌药物应用前采集痰标本;n标本采集后标本采集后12h内必须立即进行实验室处理内必须立即进行实验室处理n咳痰标本应用最早且广泛，但也是最受争议的标咳痰标本应用最早且广泛，但也是最受争议的标本本 n取标本前应摘去牙托，

29、清洁口腔如刷牙和漱口取标本前应摘去牙托，清洁口腔如刷牙和漱口n深咳，采集标本过程中要有专业的医务人员指导深咳，采集标本过程中要有专业的医务人员指导n无痰者可用无痰者可用35NaCl 5ml雾吸约雾吸约5min导痰导痰n也可用物理疗法、体位引流、鼻导管抽吸等法取也可用物理疗法、体位引流、鼻导管抽吸等法取痰痰咳痰标本不合格，退检吗？咳痰标本不合格，退检吗？n如果低倍视野下鳞状上皮细胞大于如果低倍视野下鳞状上皮细胞大于25个，个，白细胞小于白细胞小于10个，应不做或仅在特殊要个，应不做或仅在特殊要求时做培养。求时做培养。n如做培养，报告中注明如做培养，报告中注明“镜检结果表明镜检结果表明标本口咽分泌

30、物污染明显标本口咽分泌物污染明显”。几种下呼吸道直接采集的标本几种下呼吸道直接采集的标本n经气管穿刺吸引（经气管穿刺吸引（transtracheal aspiration,TTA）n经胸壁针刺吸引（经胸壁针刺吸引（transthoracic needle aspiration,TNA）n经支气管镜采样经支气管镜采样 支气管肺泡灌洗（支气管肺泡灌洗（bronchoalveolar lavage,BAL）经支气管镜直接吸引经支气管镜直接吸引防污染样本毛刷（防污染样本毛刷（protective specimen brush,PSB）n开胸肺活检（开胸肺活检（open-lung biopsy，OLB）

31、n经人工气道吸引分泌物（经人工气道吸引分泌物（endotracheal aspirates，ETA）痰培养的送检次数痰培养的送检次数n对于普通细菌性肺炎，对于普通细菌性肺炎，痰标本送检每天痰标本送检每天1次，次，连续连续23天。天。不建议不建议24h内多次采集，除非内多次采集，除非痰液外观性状出现改变；痰液外观性状出现改变；n怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨天清晨痰液送检；痰液送检；n怀疑军团菌或深部真菌感染，痰标本理想的怀疑军团菌或深部真菌感染，痰标本理想的送检次数尚无定论。送检次数尚无定论。痰培养的运送和保存痰培养的运送和保存n尽快（尽快（2h）送至实验

32、室。）送至实验室。n如不能及时送达，应将标本暂存于如不能及时送达，应将标本暂存于4，但，但放置时间不可超过放置时间不可超过24h。n厌氧培养标本的最佳运送时间取决于标本量。厌氧培养标本的最佳运送时间取决于标本量。n被口咽部菌群污染的标本如咳痰等不可用于被口咽部菌群污染的标本如咳痰等不可用于厌氧菌培养。厌氧菌培养。痰培养的拒收痰培养的拒收n光学显微镜细胞学检查发现口咽分泌物光学显微镜细胞学检查发现口咽分泌物污染明显。污染明显。n没有标签或贴错标签。没有标签或贴错标签。n运送容器选择不当或有渗漏。运送容器选择不当或有渗漏。n标本采集不符合要求。标本采集不符合要求。n同一天同一试验重复送检同一天同一

33、试验重复送检2次。次。n延时送至实验室的标本。延时送至实验室的标本。n痰标本采集痰标本采集法法尿培养标本尿培养标本采集与运送你知道吗？你知道吗？n尿液通常是无菌的或一过性有少量微生物，但是尿道内或尿液通常是无菌的或一过性有少量微生物，但是尿道内或尿道周围皮肤的菌群会污染尿液标本，从而可能导致错误尿道周围皮肤的菌群会污染尿液标本，从而可能导致错误的培养结果。的培养结果。n诊断症状明显的病人（如尿急、尿频、尿痛），一份标本诊断症状明显的病人（如尿急、尿频、尿痛），一份标本就已足够，治疗就已足够，治疗48-72小时后再采集第二份标本。对于症小时后再采集第二份标本。对于症状不明显的病人，需采集状不明显

34、的病人，需采集2-3份标本。怀疑肾结核时，应份标本。怀疑肾结核时，应连续连续3天采集晨尿。天采集晨尿。n多次收集或多次收集或24小时尿不能用作培养。小时尿不能用作培养。n申请单上必须注明病人症状是否明显，这对于定量培养分申请单上必须注明病人症状是否明显，这对于定量培养分析非常重要，尤其只有少量尿液标本。析非常重要，尤其只有少量尿液标本。n室温都有利于病原菌和污染菌会生长繁殖，因此若室温都有利于病原菌和污染菌会生长繁殖，因此若30minmin内不能及时培养尿液则必须冷藏，但也不能超过内不能及时培养尿液则必须冷藏，但也不能超过24小时。小时。尿培养标本尿培养标本 n清洁中段尿清洁中段尿n导尿导管尿

35、导尿导管尿n经耻骨上皮肤穿刺采集膀胱内尿液经耻骨上皮肤穿刺采集膀胱内尿液n送检标本以晨起第一次尿液为佳送检标本以晨起第一次尿液为佳n不能立即送检者，可暂存不能立即送检者，可暂存4冰箱，但保冰箱，但保存不超过存不超过8h清洁中段尿液清洁中段尿液n尽量取早晨第一次尿液尽量取早晨第一次尿液n弃去开始流出的尿液，以冲刷尿道口的细菌，取弃去开始流出的尿液，以冲刷尿道口的细菌，取能代表膀胱部位病原菌的中段尿能代表膀胱部位病原菌的中段尿n详细告知病人以下操作步骤详细告知病人以下操作步骤n女性病人女性病人收集标本前用清洗液冲洗干净，从前向后仔细收集标本前用清洗液冲洗干净，从前向后仔细擦洗擦洗尿道区域尿道区域分

36、开阴唇，开始排尿分开阴唇，开始排尿排出几毫升后，不停止尿流，采集中段尿排出几毫升后，不停止尿流，采集中段尿n男性病人男性病人回缩包皮并清洗龟头回缩包皮并清洗龟头排出几毫升后，不停止尿流，采集中段尿排出几毫升后，不停止尿流，采集中段尿导尿管尿液导尿管尿液n集尿袋内的尿液不能用作培养；集尿袋内的尿液不能用作培养；n导尿管末端的尿液也不能用于培养，因为很导尿管末端的尿液也不能用于培养，因为很难避免没有尿道菌群污染。难避免没有尿道菌群污染。n留置导管尿液标本常通过专门的采样端口采留置导管尿液标本常通过专门的采样端口采集，不能把导尿管与尿袋拔开后收集尿液。集，不能把导尿管与尿袋拔开后收集尿液。n采样端口

37、用酒精消毒；必要时，可先夹住导采样端口用酒精消毒；必要时，可先夹住导尿管但不能超过尿管但不能超过30分钟；将注射器针头插入分钟；将注射器针头插入采样端口，抽吸采样端口，抽吸1020ml尿液；注入无菌尿液；注入无菌杯或试管中。杯或试管中。耻骨上穿刺吸取尿液耻骨上穿刺吸取尿液n常用于患儿、泌尿道厌氧菌感染或脊柱损伤病常用于患儿、泌尿道厌氧菌感染或脊柱损伤病人等。人等。n可避免尿道或会阴细菌的污染，但对膀胱内少可避免尿道或会阴细菌的污染，但对膀胱内少量尿液的小儿难以实施。量尿液的小儿难以实施。n方法：消毒自脐以下至尿道之间区域的皮肤，方法：消毒自脐以下至尿道之间区域的皮肤，局麻穿刺点部位；在耻骨联合

38、与脐连线上，高局麻穿刺点部位；在耻骨联合与脐连线上，高于耻骨联合于耻骨联合2cm处进针刺入膀胱；取处进针刺入膀胱；取5-10ml尿液；置于无菌容器中并送往实验室。尿液；置于无菌容器中并送往实验室。n可用于厌氧菌检测可用于厌氧菌检测n尿标本采集、粪便标本采集其他无菌其他无菌体液体液采集与运送 采集方式采集方式n严格无菌皮肤消毒n穿刺针穿刺抽取，采集15ml液体标本，不应用棉拭子沾取液体送检。n无菌试管或针筒直接送检，无菌部位的体液标本可注入血培养瓶送检-同时具增菌功能，缩短TAT,但脑脊液标本怀疑为脑膜炎奈瑟菌感染要用无菌试管15min内送检。n即时送检、不能冷藏n做厌氧培养输送过程严禁接触环境

39、氧无菌体液是危急值报告之一，其中奈瑟菌对环境要求较高，无菌体液是危急值报告之一，其中奈瑟菌对环境要求较高，无菌体液是危急值报告之一，其中奈瑟菌对环境要求较高，无菌体液是危急值报告之一，其中奈瑟菌对环境要求较高，采集后需要尽速送检。细菌培养保存于采集后需要尽速送检。细菌培养保存于采集后需要尽速送检。细菌培养保存于采集后需要尽速送检。细菌培养保存于35353535温箱温箱温箱温箱或室温或室温或室温或室温，因嗜血杆菌及奈瑟氏菌对温度敏感因嗜血杆菌及奈瑟氏菌对温度敏感因嗜血杆菌及奈瑟氏菌对温度敏感因嗜血杆菌及奈瑟氏菌对温度敏感伤伤口、脓疡、脓口、脓疡、脓采集与运送n用无菌生理盐水或70%酒精拭去表面渗

40、出物。n 最好送组织或吸取物（量少可加少量无菌生理盐水）。n 必须用拭子采集，则将拭子深入伤口，在脓肿底部、脓肿壁或新生组织边缘用力擦拭，采集2个，1个做培养，1个做革兰染色。如需厌氧培养，避免接触空气并及时送检，最好床边接种，可直接打入厌氧血培养瓶（增菌效果佳），拭子不能用于厌氧菌培养。n 量少的标本先将拭子用无菌生理盐水蘸湿拭子挤干后，再采集。手术部位感染标本采集及运送手术部位感染标本采集及运送导管尖端培养导管尖端培养n用酒精消毒皮肤后，拔出导管，用无菌剪刀剪下导管前端5cm，置入一带盖的无菌试管后立即送检（15min）。标本送检的注意标本送检的注意n抗菌药物使用前采集标本。n严格无菌操作。n送检时间：要求15min内送检的标本：导管、CSF等。其余都不要超过2小时送检。如何提高标本送检的量如何提高标本送检的量n如果临床送检标本太少,就无法进行流行病学调查和跟踪;如果送检标本比例失衡,就无法获得准确的调查结果!n经验用药：依据以往准确的流行病学数据!谢谢!