大孔吸附树脂在中药新药研发和生产中的应用课件.ppt

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1、大孔吸附树脂在中药新药研发大孔吸附树脂在中药新药研发和生产中的应用和生产中的应用屠鹏飞屠鹏飞（北京大学药学院）（北京大学药学院）目录目录 概述概述第一章第一章 大孔吸附树脂研究与应用进展大孔吸附树脂研究与应用进展第二章第二章 大孔吸附树脂的预处理方法研究大孔吸附树脂的预处理方法研究第三章第三章 大孔吸附树脂有机残留物的检测方法研大孔吸附树脂有机残留物的检测方法研究究 第四章第四章 大孔吸附树脂对中药化学成分的吸附性大孔吸附树脂对中药化学成分的吸附性能研究能研究第五章第五章 大孔吸附树脂的再生方法研究大孔吸附树脂的再生方法研究概概述述中药有效成分的不断阐明中药有效成分的不断阐明中药现代化的要求中

2、药现代化的要求当前用于中药纯化的主要技术：当前用于中药纯化的主要技术：溶剂法：溶剂法：沉淀法：沉淀法：色谱法：色谱法：大孔吸附树脂、离子交换树脂、大孔吸附树脂、离子交换树脂、聚酰胺、聚酰胺、葡聚糖凝胶等葡聚糖凝胶等超临界流体萃取法：超临界流体萃取法：结晶法：结晶法：分子蒸馏：分子蒸馏：超滤法：超滤法：膜分离：膜分离：第一章第一章 大孔吸附树脂的研究与大孔吸附树脂的研究与应用进展应用进展 一、大孔吸附树脂简介一、大孔吸附树脂简介1、大孔吸附树脂的合成与基本骨架、大孔吸附树脂的合成与基本骨架2、国产树脂的主要类型、国产树脂的主要类型骨架结构：骨架结构：苯乙烯、丙烯酸酯、丙烯腈、异丁烯等苯乙烯、丙烯

3、酸酯、丙烯腈、异丁烯等交联剂：交联剂：二乙烯苯等二乙烯苯等 致孔剂：致孔剂：甲苯、石蜡、汽油、煤油、碳醇、聚乙烯醇等甲苯、石蜡、汽油、煤油、碳醇、聚乙烯醇等分散剂：分散剂：明胶等明胶等3、三菱化成的大孔吸附树脂、三菱化成的大孔吸附树脂聚苯乙烯系列合成树脂：聚苯乙烯系列合成树脂：Diaion:HP20,HP21Sepabeads:SP825,SP850Sepabeads:SP70,SP700修饰的聚苯乙烯系列合成树修饰的聚苯乙烯系列合成树脂脂:Sepabeads:SP207异丁烯系列合成树脂异丁烯系列合成树脂:Diaion:HP2MG3、主要理化性质、主要理化性质大孔吸附树脂是一种具有大孔网状结

4、构大孔吸附树脂是一种具有大孔网状结构的高分子吸附剂。的高分子吸附剂。性状：性状：白色、乳白色至微黄色颗粒白色、乳白色至微黄色颗粒粒度：粒度：2060目。目。稳定性：稳定性：不溶于水、酸、碱及有机溶剂，不溶于水、酸、碱及有机溶剂，加热不溶，可在加热不溶，可在150以下使用。以下使用。含水量：含水量：4075%。4、大孔吸附树脂的主要特点、大孔吸附树脂的主要特点1、对对有有机机物物的的选选择择性性良良好好，无无机机盐盐存存在在非非但但不不干干扰吸附反而有利于吸附。扰吸附反而有利于吸附。2、吸吸附附剂剂的的物物理理、化化学学稳稳定定性性高高，机机械械强强度度好好，经久耐用。经久耐用。3、再再生生容容

5、易易，一一般般用用水水、稀稀酸酸、稀稀碱碱加加低低碳碳醇醇、酮等有机溶剂洗脱即可。酮等有机溶剂洗脱即可。4、根根据据不不同同要要求求，选选择择不不同同树树脂脂品品种种，可可适适用用多多种化合物。种化合物。5、一般系小球状，液体阻力较小，使用方便。、一般系小球状，液体阻力较小，使用方便。6、树脂脱色能力强，效果接近活性炭。、树脂脱色能力强，效果接近活性炭。5、国产大孔吸附树脂的主要型号及生产企业、国产大孔吸附树脂的主要型号及生产企业型号型号生产企业生产企业树脂骨架树脂骨架极性极性比表面积比表面积（m2/g）孔径孔径HPD100沧州宝恩化工沧州宝恩化工有限公司有限公司苯乙烯苯乙烯非极性非极性550

6、35HPD300沧州宝恩化工沧州宝恩化工有限公司有限公司苯乙烯苯乙烯非极性非极性65027HPD400沧州宝恩化工沧州宝恩化工有限公司有限公司苯乙烯苯乙烯弱极性弱极性55083HPD500沧州宝恩化工沧州宝恩化工有限公司有限公司苯乙烯苯乙烯弱极性弱极性52048HPD600沧州宝恩化工沧州宝恩化工有限公司有限公司苯乙烯苯乙烯极性极性61028型号型号生产企业生产企业树脂骨架树脂骨架极性极性比表面积比表面积（m2/g）孔径孔径D101天津农药厂天津农药厂苯乙烯苯乙烯非极性非极性D201天津农药厂天津农药厂苯乙烯苯乙烯弱极性弱极性D301天津农药厂天津农药厂苯乙烯苯乙烯弱极性弱极性GDX-104天

7、津试剂二厂天津试剂二厂苯乙烯苯乙烯非极性非极性590GDX-401天津试剂二厂天津试剂二厂乙烯、吡啶乙烯、吡啶强极性强极性370GDX-501天津试剂二厂天津试剂二厂含氮含氮极性极性80GDX-601天津试剂二厂天津试剂二厂强极性基团强极性基团强极性强极性90型号型号生产企业生产企业树脂骨架树脂骨架极性极性比表面积比表面积（m2/g）孔径孔径SIP-1100上海医药工业上海医药工业研究院研究院非极性非极性450-55090SIP-1200上海医药工业上海医药工业研究院研究院非极性非极性500-600120SIP-1300上海医药工业上海医药工业研究院研究院非极性非极性550-58060SIP-

8、1400上海医药工业上海医药工业研究院研究院非极性非极性600-65070上试上试101上海试剂厂上海试剂厂苯乙烯苯乙烯非极性非极性上试上试102上海试剂厂上海试剂厂苯乙烯苯乙烯非极性非极性上试上试401上海试剂厂上海试剂厂苯乙烯苯乙烯非极性非极性上试上试402上海试剂厂上海试剂厂苯乙烯苯乙烯非极性非极性型号型号生产企业生产企业树脂骨架树脂骨架极性极性比表面积比表面积（m2/g）孔径孔径南大南大3520南开大学化工厂南开大学化工厂苯乙烯苯乙烯非极性非极性D1南开大学化工厂南开大学化工厂乙基苯乙烯乙基苯乙烯非极性非极性D2南开大学化工厂南开大学化工厂乙基苯乙烯乙基苯乙烯非极性非极性382133D

9、3南开大学化工厂南开大学化工厂乙基苯乙烯乙基苯乙烯非极性非极性D4南开大学化工厂南开大学化工厂乙基苯乙烯乙基苯乙烯非极性非极性D5南开大学化工厂南开大学化工厂乙基苯乙烯乙基苯乙烯非极性非极性D6南开大学化工厂南开大学化工厂乙基苯乙烯乙基苯乙烯非极性非极性46673D8南开大学化工厂南开大学化工厂乙基苯乙烯乙基苯乙烯非极性非极性71266Ds2南开大学化工厂南开大学化工厂苯乙烯苯乙烯非极性非极性64259Ds5南开大学化工厂南开大学化工厂苯乙烯苯乙烯非极性非极性415104型号型号生产企业生产企业树脂骨架树脂骨架极性极性比表面积比表面积（m2/g）孔径孔径Dm2南开大学化工厂南开大学化工厂-甲基

10、甲基苯乙烯苯乙烯非极性非极性26624Dm5南开大学化工厂南开大学化工厂-甲基甲基苯乙烯苯乙烯非极性非极性41332X-5南开大学化工厂南开大学化工厂苯乙烯苯乙烯非极性非极性500-600290D-3520南开大学化工厂南开大学化工厂苯乙烯苯乙烯非极性非极性480-52085-90D-4006南开大学化工厂南开大学化工厂苯乙烯苯乙烯非极性非极性400-44065-75H-107南开大学化工厂南开大学化工厂苯乙烯苯乙烯非极性非极性1000-1300AB-8南开大学化工厂南开大学化工厂苯乙烯苯乙烯弱极性弱极性480-520130-140NKA-9南开大学化工厂南开大学化工厂苯乙烯苯乙烯极性极性25

11、0-290155-165NKA-南开大学化工厂南开大学化工厂苯乙烯苯乙烯极性极性S-8南开大学化工厂南开大学化工厂苯乙烯苯乙烯极性极性100-120280-3006 6、大孔吸附树脂对有机成分的分离、大孔吸附树脂对有机成分的分离、纯化原理纯化原理 分分离离原原理理：主主要要为为吸吸附附作作用用；其其次次为为分分子子筛筛作作用。用。不不同同极极性性、不不同同孔孔径径的的树树脂脂对对不不同同种种类类的的化化合合物的选择性不同物的选择性不同对对于于分分子子量量相相似似的的化化合合物物：极极性性越越小小，吸吸附附能能力力越越强强，则则越越难难洗洗脱脱下下来来；极极性性越越大大，吸吸附附能能力越弱，则越

12、易洗脱下来。力越弱，则越易洗脱下来。对对于于极极性性相相似似的的化化合合物物：分分子子量量越越大大，越越易易洗洗脱下来。脱下来。7 7、当前国产树脂存在的主要问题、当前国产树脂存在的主要问题(1)商品树脂的有机残留物高，预处理难度大；商品树脂的有机残留物高，预处理难度大；(2)树脂强度差，使用过程中破碎严重，使用寿命树脂强度差，使用过程中破碎严重，使用寿命短；短；(3)树脂粒径分布广，分离效果差；树脂粒径分布广，分离效果差；(4)同一生产企业生产的同一型号树脂，各批之间同一生产企业生产的同一型号树脂，各批之间比表面积和功能基团含量差别大，在中药成分比表面积和功能基团含量差别大，在中药成分纯化中

13、重现性差。纯化中重现性差。二、大孔吸附树脂的预处理、再生及有二、大孔吸附树脂的预处理、再生及有机残留物的检测机残留物的检测 1 1、树脂的预处理、树脂的预处理预处理的方法：预处理的方法：回流法、回流法、渗漉法渗漉法和水蒸和水蒸气蒸馏法等气蒸馏法等预处理溶剂：预处理溶剂：乙醇乙醇、甲醇、甲醇、丙酮丙酮、异丙异丙醇醇及及稀酸、稀碱稀酸、稀碱溶液溶液 传统渗漉法：传统渗漉法：有机溶剂浸泡有机溶剂浸泡12小时小时洗脱洗脱23倍柱体积倍柱体积（BV）浸泡浸泡35小时，洗脱小时，洗脱浸泡，洗脱浸泡，洗脱加加25%盐酸浸泡，洗脱盐酸浸泡，洗脱水洗至水洗至PH值中性值中性加加25%氢氧化钠浸泡，洗脱氢氧化钠浸

14、泡，洗脱水洗至水洗至PH值中值中性。性。缺点：缺点：溶剂用量大：溶剂用量大：20203030BVBV树脂预处理时间长：树脂预处理时间长：2 23 3天天环境污染较大环境污染较大：2、大孔吸附树脂的再生、大孔吸附树脂的再生简单再生：简单再生：用不同浓度的溶剂按极性从用不同浓度的溶剂按极性从大到小梯度洗脱，再用大到小梯度洗脱，再用23BV的稀酸和的稀酸和稀碱溶液浸泡洗脱，水洗稀碱溶液浸泡洗脱，水洗至至pH值中性即值中性即可使用。可使用。强化再生：强化再生：先用不同浓度的有机溶剂洗先用不同浓度的有机溶剂洗脱后，再反复用大体积稀酸、稀碱溶液脱后，再反复用大体积稀酸、稀碱溶液交替强化洗脱后水洗至交替强化

15、洗脱后水洗至pH值中性，即可值中性，即可使用。使用。3、大孔吸附树脂有机残留物的检测、大孔吸附树脂有机残留物的检测检测方法：检测方法：GC、UV限量标准：限量标准：SDA规定苯乙烯骨架型大孔规定苯乙烯骨架型大孔吸附树脂残留物检查项目暂定为：吸附树脂残留物检查项目暂定为：苯不苯不得超过得超过2ppm、甲苯、二甲苯、苯乙烯、甲苯、二甲苯、苯乙烯、烷烃类、二乙基苯类（二乙烯基）等不烷烃类、二乙基苯类（二乙烯基）等不得超过得超过20ppm。三、大孔树脂在三、大孔树脂在医药领域中的应用医药领域中的应用食品工业：食品工业：番茄红素、紫草色素、甜菊糖等番茄红素、紫草色素、甜菊糖等抗生素类生产：抗生素类生产：

16、内酰胺类、大环内酯类、林可内酰胺类、大环内酯类、林可霉素类、氨基糖苷类、肽类、博莱霉素类、含霉素类、氨基糖苷类、肽类、博莱霉素类、含氮杂环类及其它新抗生素的分离、提纯氮杂环类及其它新抗生素的分离、提纯中药新药研发：中药新药研发：丹参总酚酸丹参总酚酸、红花总黄色素、红花总黄色素、管花肉苁蓉总苯乙醇苷等管花肉苁蓉总苯乙醇苷等中药和天然药物生产：中药和天然药物生产：人参总皂苷、三七总皂人参总皂苷、三七总皂苷、银杏叶总黄酮、喜树碱、苦参碱等苷、银杏叶总黄酮、喜树碱、苦参碱等第二章第二章大孔吸附树脂的预处理大孔吸附树脂的预处理方法研究方法研究一、九种大孔吸附树脂有机残留物的定性分析一、九种大孔吸附树脂有

17、机残留物的定性分析1 1、大孔吸附树脂型号：、大孔吸附树脂型号：D101、D201、D301、HPD100、HPD400、HPD500、HPD600、AB-8、NKA-92、实验方法：实验方法：树脂装柱，树脂装柱，95%乙醇洗脱，洗脱液乙醇洗脱，洗脱液GC-MSGC-MS分析分析3 3、分析结果：分析结果：D101：甲苯、二乙苯、萘、甲苯、二乙苯、萘、二乙烯苯二乙烯苯D201：二乙苯、萘二乙苯、萘D301：二乙苯、萘二乙苯、萘HPD100：甲苯、二乙苯、萘、甲苯、二乙苯、萘、二甲苯、苯乙烯、二乙烯苯二甲苯、苯乙烯、二乙烯苯HPD400：甲苯、二乙苯、萘、甲苯、二乙苯、萘、二甲苯、二乙烯苯二甲苯

18、、二乙烯苯HPD500：甲苯、二乙苯、萘、甲苯、二乙苯、萘、二甲苯二甲苯HPD600：甲苯、二乙苯、萘、癸烷、十一烷、甲苯、二乙苯、萘、癸烷、十一烷、二甲苯、苯乙烯、二二甲苯、苯乙烯、二乙烯苯、三甲苯、三乙苯、十七烷等乙烯苯、三甲苯、三乙苯、十七烷等AB-8：甲苯、二乙苯、萘、癸烷、十一烷、十二烷、甲苯、二乙苯、萘、癸烷、十一烷、十二烷、二甲苯、苯乙二甲苯、苯乙烯、二乙烯苯、三甲苯、三乙苯及大量烷烃烯、二乙烯苯、三甲苯、三乙苯及大量烷烃NKA-9：甲苯、二乙苯、萘、癸烷、十一烷、十二烷、甲苯、二乙苯、萘、癸烷、十一烷、十二烷、二甲苯、苯乙二甲苯、苯乙烯、二乙烯苯、三甲苯、三乙苯及大量烷烃烯、二

19、乙烯苯、三甲苯、三乙苯及大量烷烃二、树脂预处理工艺研究二、树脂预处理工艺研究1、不同有机溶剂对树脂不同有机溶剂对树脂D101的洗脱效果的洗脱效果 2、酸碱洗脱后乙醇对树脂酸碱洗脱后乙醇对树脂D101的洗脱效果比较的洗脱效果比较 3、用碱洗脱和未用碱洗脱乙醇对、用碱洗脱和未用碱洗脱乙醇对D101树脂的洗脱效果比较树脂的洗脱效果比较4、回流法对树脂回流法对树脂D101的预处理效果的预处理效果 1：回流提取液回流提取液2、3、4、5：为树脂连续回流为树脂连续回流10小时后乙醇洗脱液的最大紫外吸收小时后乙醇洗脱液的最大紫外吸收值，说明还残留有较大量的有机残留物；值，说明还残留有较大量的有机残留物；6、

20、7、8、9、10：碱洗脱液的最大紫外吸收值碱洗脱液的最大紫外吸收值11：酸洗脱液的最大紫外吸收值。酸洗脱液的最大紫外吸收值。表明经长时间连续回流后，树脂中仍然残留有大量的有机残留物；表明经长时间连续回流后，树脂中仍然残留有大量的有机残留物；但经碱液和酸液洗脱后树脂中的有机残留物可基本除去。但经碱液和酸液洗脱后树脂中的有机残留物可基本除去。5、温浸渗漉法预处理大孔吸附树脂温浸渗漉法预处理大孔吸附树脂 表表正交设计因子、水平表正交设计因子、水平表因子因子水平水平ABCD溶剂溶剂洗脱温度洗脱温度洗脱流速洗脱流速mL/min乙醇浸泡乙醇浸泡时间时间(h)1甲醇甲醇602.002异丙醇异丙醇401.66

21、395%乙醇乙醇30(室温室温)1.012表头表头试验号试验号ABCD试验结果（试验结果（ppm）1234甲苯甲苯萘萘111111.56.0212223.144.4313333.747.7421234.88.4522314.725.26231221.830.67313217.643.68321343.652.79332174.274甲苯甲苯K18.323.966.980.4K231.351.482.142.5K3135.499.72652.1R42.425.318.712.7萘萘K198.15889.3105.2K264.2122.3126.8118.6K3170.3152.3116.5108

22、.8R35.431.49.14.5最佳工艺确定最佳工艺确定溶剂和温度是显著因子，洗脱流速对洗溶剂和温度是显著因子，洗脱流速对洗脱效果有一定影响，乙醇浸泡时间作用脱效果有一定影响，乙醇浸泡时间作用不明显，因此，不明显，因此，根据实验结果选定的最根据实验结果选定的最佳洗脱条件是佳洗脱条件是A1B1C3D1。实际生产中树脂的预处理方法：实际生产中树脂的预处理方法：溶剂为溶剂为乙醇、洗脱温度为乙醇、洗脱温度为60、洗脱流速为、洗脱流速为1.0ml/分钟、浸泡时间为分钟、浸泡时间为1小时。小时。新型大孔吸附树脂色谱柱新型大孔吸附树脂色谱柱树树脂脂装装柱柱碱洗液用碱洗液用酸中和酸中和2%NaOH浸浸 泡泡

23、、洗洗脱脱水水洗洗至至pH值中性值中性有机溶剂有机溶剂浸浸 泡泡、洗洗脱脱药用树脂药用树脂气气 相相 或或 紫紫外检测外检测加热加热药用树脂预处理工艺流程图药用树脂预处理工艺流程图三、树脂有机残留物检查中三、树脂有机残留物检查中GC与与UV的相关性考察的相关性考察D-1011BV3.5BVD-2011BV2BVHPD-1001BV4BVHPD4001BV3BVHPD-5001BV 3.5BV第三章第三章 大孔吸附树脂有机残留大孔吸附树脂有机残留物的检测方法研究物的检测方法研究 一、检测方法的建立一、检测方法的建立1、气相色谱柱和溶剂的选择及色谱条件优化气相色谱柱和溶剂的选择及色谱条件优化色谱柱

24、的考察：色谱柱的考察：HP-1、HP-5、DB-WAX、DB-624进样方法的考察：进样方法的考察：分别比较了顶空进样法和分别比较了顶空进样法和溶溶剂法剂法溶剂的考察：溶剂的考察：分别考察了丙酮、氯仿、分别考察了丙酮、氯仿、二氯甲二氯甲烷烷110120140150 甲苯甲苯二二乙乙苯苯萘萘不同温度顶空进样考察色谱图不同温度顶空进样考察色谱图优选色谱条件优选色谱条件色色 谱谱 柱柱：DB-624弹弹 性性 石石 英英 毛毛 细细 管管 柱柱（30m*0.32mm*1.8m）；）；进样口：进样口：温度温度220，不分流；，不分流；程程序序升升温温：40以以14/分分钟钟升升温温至至190190保保

25、持持1 1分钟；分钟；载气：载气：氮气（氮气（99.999%99.999%）,流量：流量：2.52.5mLmL/分钟；分钟；检检测测器器：氢氢火火焰焰离离子子化化检检测测器器（FIDFID）,温温度度：250250；氢氢气气3030mLmL/分分钟钟，空空气气300 300 mLmL/分分钟钟，尾尾吹吹3030mLmL/分钟；分钟；进样方式：进样方式：溶液直接进样；进样量：溶液直接进样；进样量：1 1L。混合对照品色谱图混合对照品色谱图苯苯甲苯甲苯二二甲甲苯苯苯苯乙乙烯烯癸癸烷烷二二乙乙苯苯十十一一烷烷二二乙乙烯烯苯苯十十二二烷烷萘萘2、方法学考察、方法学考察(1)标准曲线与线性范围考察标准曲

26、线与线性范围考察苯：苯：1-5ppm,r=0.9979,Y=26.96X+1.94甲苯：甲苯：2-15ppm,r=0.9990,Y=23.91X-3.43二甲苯：二甲苯：2-15ppm,r=0.9983,Y=13.82X-3.39苯乙烯：苯乙烯：2-15ppm,r=0.9980,Y=30.51X-8.63二乙苯：二乙苯：2-15ppm,r=0.9965,Y=14.70X-5.28二乙烯苯：二乙烯苯：2-15ppm,r=0.9946,Y=5.57X-1.17萘：萘：2-15ppm,r=0.9931,Y=23.97X-14.19十烷：十烷：1.5-30ppm,r=0.9976,Y=29.24X-2

27、1.59十一烷：十一烷：1.5-30ppm,r=0.9980,Y=27.27X-16.94十二烷：十二烷：1.5-30ppm,r=0.9977,Y=25.55X-18.60(2)最低检测限考察最低检测限考察苯：苯：0.01ppm甲苯：甲苯：0.008ppm二甲苯：二甲苯：0.015ppm苯乙烯：苯乙烯：0.007ppm二乙苯：二乙苯：0.015ppm二乙烯苯：二乙烯苯：0.03ppm萘：萘：0.01ppm十烷：十烷：0.01ppm十一烷：十一烷：0.01ppm十二烷：十二烷：0.01ppm(2)精密度考察精密度考察试验号试验号12345RSD%峰峰高高甲苯甲苯46.10345.87146.18

28、542.98743.63.4二甲苯二甲苯31.15130.74532.00229.0729.7113.8苯乙烯苯乙烯55.60654.56156.29452.40853.143.0二乙烯苯二乙烯苯35.71537.62137.51734.22634.6454.4二乙苯二乙苯30.19630.38832.61129.46730.133.9萘萘37.27637.28439.36637.27437.7572.4苯苯20.37620.64020.57120.32220.9811.3十烷十烷22.96722.45122.87622.68923.2851.4十一烷十一烷21.53521.12720.849

29、20.65421.1741.6十二烷十二烷20.16919.80119.118.58218.9753.3(3)树脂样品提取方法树脂样品提取方法溶溶剂剂比比例例试试验验：分分别别称称取取0.2、0.3、0.5g HPD500树脂加树脂加5ml二氯甲烷超声提取二氯甲烷超声提取10分钟，过滤，检测。分钟，过滤，检测。编号编号重量重量（g）甲苯甲苯ppm二乙苯二乙苯ppm萘萘ppm10.2120146.2292.596.720.2955138.7289.398.130.5875130.2271.586.8(4)提取时间选择考察提取时间选择考察称取三份树脂称取三份树脂0.2克加克加5ml二氯甲烷分别超声

30、提取二氯甲烷分别超声提取5min、10min、20min后过滤，检测后过滤，检测编号编号重量重量（g）提取提取时间时间甲苯甲苯ppm二乙苯二乙苯ppm萘萘ppm10.21535137.0288.0102.220.217810135.4282.496.430.223420136.5284.2100.7(5)稳定性试验稳定性试验编号编号进样时进样时间间(h)甲苯甲苯ppm二乙苯二乙苯ppm萘萘ppm10146.2292.596.722146.2292.599.133148.6313.7106.145148.6313.7110.859148.6290.199.1RSD（%）0.94.05.8(6)重

31、现性试验重现性试验分别称取五份分别称取五份HPD500树脂树脂0.2g加加5ml二氯甲烷，二氯甲烷，超声提取超声提取10分钟，滤过，检测。分钟，滤过，检测。编号编号重量重量(g)甲苯甲苯ppm二乙苯二乙苯ppm萘萘ppm10.212146.2292.596.720.2178146.3282.496.430.2955138.7289.398.140.2107144.8284.897.350.2089138.8299.2107.7RSD（%）2.42.34.8(7)回收率试验回收率试验称称取取1克克预预处处理理的的树树脂脂NKA五五份份，分分别别加加70ul500ppm甲甲苯苯和和60ul500p

32、pm萘萘标准溶液，加入标准溶液，加入4.9ml的二氯甲烷超声提取的二氯甲烷超声提取10min，滤过，检测，结果如下：滤过，检测，结果如下：12345AVERSD重量（重量（g）1.03731.01051.06131.00291.0381甲甲苯苯检测量检测量42.539.539.538.039.5回收量回收量39.036.135.934.636.036.3回收率回收率（%）111.35103.04102.5598.83102.77103.714.44萘萘检测量检测量37.037.537.035.537.0回收量回收量32.933.532.831.532.832.7回收率回收率（%）109.511

33、1.53109.18104.96109.49108.932.21二、大孔吸附树脂有机残留物的检测结果二、大孔吸附树脂有机残留物的检测结果苯苯甲苯甲苯二甲二甲苯苯苯乙苯乙烯烯二乙二乙苯苯二乙二乙烯苯烯苯萘萘癸烷癸烷十一十一烷烷十二十二烷烷D101235.5266.442.5189.2D201225.4179.4D301HPD40079.414.28.5124.770.9130.4HPD500143.528735.989.7HPD60033.812.3107.4365.3HPD100199.819261.771.4285.4AB8146186124.21433767.5647.7319447001

34、464NKA689.999.8216.11579.41188.7114339036774864HPD5001211479596.3292.31、九种树脂预处理前有机残留物检测结果、九种树脂预处理前有机残留物检测结果2、九种大孔吸附树脂预处理后有机残留物检测结果、九种大孔吸附树脂预处理后有机残留物检测结果苯苯甲苯甲苯二甲苯二甲苯苯乙烯苯乙烯二乙苯二乙苯二乙烯二乙烯苯苯萘萘溶剂用量溶剂用量溶溶剂剂D1011.63.24.94BV乙乙醇醇D2014.84.92BVD3013BVHPD4003.93BVHPD5001.63.23.5BVHPD6002.16.43BVHPD1006.64.49.9111

35、2.14BVAB87BV丙丙酮酮NKA3.43.01.94.07BVHPD500HPD400D101不同型号药用树脂有机残留物检测结果不同型号药用树脂有机残留物检测结果三、药品中大孔吸附树脂有机残三、药品中大孔吸附树脂有机残留物的限量检测留物的限量检测苁蓉总苷胶囊苁蓉总苷胶囊二氯甲烷溶剂对照二氯甲烷溶剂对照020716020805020818020825020907乙肝清胶囊乙肝清胶囊030301030302030303第四章第四章大孔吸附树脂对中药化学大孔吸附树脂对中药化学成分成分的吸附性能研究的吸附性能研究 概述树脂适用的新药类型树脂适用的新药类型 适用的新药类别有四种：适用的新药类别有四

36、种：(1)中药有效成分的粗分与精制；中药有效成分的粗分与精制；(2)单味中药有效部位的制备；单味中药有效部位的制备；(3)中药复方有效部位的制备；中药复方有效部位的制备；(4)中药复方制剂中除去糖、氨基酸、多中药复方制剂中除去糖、氨基酸、多肽等水溶性杂质，以降低服用剂量或吸肽等水溶性杂质，以降低服用剂量或吸湿性。湿性。使用大孔吸附树脂纯化中药应该注意的问题：使用大孔吸附树脂纯化中药应该注意的问题：(1)中药复方中各味药所含成分性质相似，可中药复方中各味药所含成分性质相似，可混煎后一起纯化；混煎后一起纯化；(2)中药复方中各味药所含成分性质差别较大中药复方中各味药所含成分性质差别较大的，应单独提

37、取后再分别纯化；的，应单独提取后再分别纯化；(3)单味药中含有多类有效成分、且性质差别单味药中含有多类有效成分、且性质差别较大的，各类成分应分别纯化。较大的，各类成分应分别纯化。成分类型与树脂的选择成分类型与树脂的选择 脂溶性成分包括甾体类、二萜、三萜、黄酮、木脂素、脂溶性成分包括甾体类、二萜、三萜、黄酮、木脂素、香豆素、生物碱等香豆素、生物碱等应选择非极性或弱极性树脂，如应选择非极性或弱极性树脂，如D101、AB-8、HPD100等；等；皂苷和生物碱苷类成分皂苷和生物碱苷类成分应选择弱极性或极性树脂，如应选择弱极性或极性树脂，如D201、D301、HPD300、HPD600、AB-8、NKA

38、-9等；等；黄酮苷、蒽醌苷、木脂素苷、香豆素苷等黄酮苷、蒽醌苷、木脂素苷、香豆素苷等应选择合成原应选择合成原料中加有甲基丙烯酸甲酯或丙烯腈的树脂，如料中加有甲基丙烯酸甲酯或丙烯腈的树脂，如D201、D301、HPD600、NKA-9等；等；环烯醚萜苷类成分环烯醚萜苷类成分在树脂上吸附能力较差，应选择极性在树脂上吸附能力较差，应选择极性或弱极性树脂，如或弱极性树脂，如HPD600、AB-8、NKA-9等。等。一、研究方法的建立一、研究方法的建立研究实例：肉苁蓉总苷的分离纯化研究实例：肉苁蓉总苷的分离纯化肉苁蓉的主要成分：肉苁蓉的主要成分：苯乙醇苷类、环烯醚苯乙醇苷类、环烯醚萜及其苷类、木脂素及其

39、苷类、多元醇、萜及其苷类、木脂素及其苷类、多元醇、水溶性生物碱、单糖、双糖、氨基酸等水溶性生物碱、单糖、双糖、氨基酸等1、树脂最大静态吸附量的考察、树脂最大静态吸附量的考察2、分离度与洗脱溶剂考察、分离度与洗脱溶剂考察 3、树脂最大动态吸附量考察（、树脂最大动态吸附量考察（8.91mg/g）4、优选工艺参数的考察、优选工艺参数的考察(正交试验正交试验)编号编号浓度浓度A A吸附流速吸附流速B B（ml/minml/min）洗脱流速洗脱流速C C（ml/minml/min）径高比径高比D D30%醇醇10.5161：636.2420.5241：328.4630.5421：933.2640.125

40、141：943.4850.125261：642.0660.125421：334.9970.0625121：340.0780.0625261：946.6390.0625441：641.88K197.96119.79117.86120.18K2120.53117.15113.82103.52K3128.58110.13115.39123.37R10.23.221.346.67方差分析方差分析方差来源方差来源偏差平方和偏差平方和自由度自由度F值值P值值A167.977260.751*B16.61826.010C2.76521.000D75.750227.396*误差误差2.772方差分析的结果表明，

41、因子方差分析的结果表明，因子A（上样浓度）和上样浓度）和D（树脂柱径树脂柱径高比）影响显著，而因子高比）影响显著，而因子B（上样浓度）和上样浓度）和C（洗脱浓度）洗脱浓度）的影响不明显。的影响不明显。优选工艺为：优选工艺为：A3B0C0D1二、树脂对中药成分的吸附性能研究二、树脂对中药成分的吸附性能研究系统研究了大孔吸附树脂对系统研究了大孔吸附树脂对栀子总苷及其黄色栀子总苷及其黄色素、贯叶金丝桃总黄酮、肉苁蓉总苷、白药子素、贯叶金丝桃总黄酮、肉苁蓉总苷、白药子总生物碱、人参总皂苷、黄芪总皂苷、丹参总总生物碱、人参总皂苷、黄芪总皂苷、丹参总酚酸、红花总黄色素、大黄总蒽醌酚酸、红花总黄色素、大黄总

42、蒽醌的吸附性能。的吸附性能。建立了利用大孔吸附树脂技术纯化建立了利用大孔吸附树脂技术纯化栀子总苷及栀子总苷及其黄色素、贯叶金丝桃总黄酮、肉苁蓉总苷、其黄色素、贯叶金丝桃总黄酮、肉苁蓉总苷、白药子总生物碱、人参总皂苷、黄芪总皂苷及白药子总生物碱、人参总皂苷、黄芪总皂苷及总黄酮、丹参总酚酸、红花总黄色素、大黄总总黄酮、丹参总酚酸、红花总黄色素、大黄总蒽醌蒽醌的生产工艺。的生产工艺。三、树脂对各类成分的吸附性能总结三、树脂对各类成分的吸附性能总结成分成分环烯醚萜环烯醚萜苷和色素苷和色素类类黄酮类黄酮类苯乙醇苯乙醇苷类苷类生物碱生物碱类类皂苷类皂苷类黄酮类黄酮类与皂苷与皂苷类类酚酸类酚酸类蒽醌及蒽醌及

43、其苷类其苷类查耳酮查耳酮苷类苷类比吸附比吸附值较大值较大的树脂的树脂AB-8、SP207、SP825、HPD100D101D101、AB-8AB-8、X-5X-5D3520、D201、AB-8、D101、HPD500、HPD500、D201、D3520、AB-8HPD100、NKA、D301、AB-8、D101HPD600、D301、HPD100、AB-8AB-8、D101、HPD600、NKA、D201D201、D101、D301、AB-8D101D101、NKA-9NKA-9、X-5X-5分离度分离度最好最好AB-8D101D101D3520HPD500HPD100HPD600AB-8D2

44、01D101D101洗脱洗脱溶剂溶剂苷类苷类:30%30%乙醇乙醇;色素色素:70%70%乙醇乙醇40%40%乙醇乙醇40%40%乙醇乙醇50%50%和和70%70%乙醇乙醇60%60%乙醇乙醇60%60%乙醇乙醇40%40%乙醇乙醇70%70%和和95%95%乙醇乙醇5%5%乙醇乙醇第五章第五章大孔吸附树脂的再生研究大孔吸附树脂的再生研究简单再生：简单再生：用不同浓度的溶剂按极性从大用不同浓度的溶剂按极性从大到小梯度洗脱。到小梯度洗脱。强化再生：强化再生：较高的温度下，用稀碱溶液浸较高的温度下，用稀碱溶液浸泡洗脱，再用乙醇溶液浸泡洗脱，然后用稀泡洗脱，再用乙醇溶液浸泡洗脱，然后用稀酸溶液浸泡洗脱。酸溶液浸泡洗脱。谢谢谢！谢！屠鹏飞屠鹏飞100083，北京市学院路，北京市学院路38号号北京大学药学院天然药物学系北京大学药学院天然药物学系电话电话(传真传真)：01062092750email: