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1、实验二叶绿体中色素的提取和分离第1页,本讲稿共15页绿绿叶叶中色素的提取和分离中色素的提取和分离 新鲜的菠菜叶新鲜的菠菜叶实验目的实验目的 掌握绿叶中色素提取和分离的方法,探究绿叶中色素的种类。掌握绿叶中色素提取和分离的方法,探究绿叶中色素的种类。实验材料实验材料第2页,本讲稿共15页绿绿叶叶中色素的提取和分离中色素的提取和分离实验药品实验药品无水乙醇、二氧化硅、碳酸钙、层析液(由20份在60-90下分馏出来的石油醚、2份丙酮和1份苯混合而成。)实验器材实验器材干燥的定性滤纸、试管、棉塞、试管架、研钵、玻璃漏斗、干燥的定性滤纸、试管、棉塞、试管架、研钵、玻璃漏斗、纱布、毛细吸管、剪刀、药勺、纱
2、布、毛细吸管、剪刀、药勺、10ml10ml量筒、小烧杯、培养量筒、小烧杯、培养皿、天平、铅笔皿、天平、铅笔。第3页,本讲稿共15页实验原理 绿叶中的色素能溶解在有机溶剂无水乙醇中,所以用无绿叶中的色素能溶解在有机溶剂无水乙醇中,所以用无水乙醇提取绿叶中的色素。水乙醇提取绿叶中的色素。绿叶中不只一种色素,它们都能溶解在层析液中。绿叶中不只一种色素,它们都能溶解在层析液中。层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂,绿层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂,绿叶叶内的色素在层内的色素在层析液中的溶解度各不相同,溶解度越高,在滤纸上的扩散速度越析液中的溶解度各不相同,溶解度越高,在滤纸上的扩散速度越快,反之则慢,可
3、以将绿叶中的色素分离开来。因此采用纸层析快,反之则慢,可以将绿叶中的色素分离开来。因此采用纸层析法进行分离。法进行分离。绿叶中色素的提取和分离绿叶中色素的提取和分离第4页,本讲稿共15页取材取材加入药品加入药品过滤过滤得到滤液得到滤液实验步骤实验步骤绿叶中色素的提取和分离绿叶中色素的提取和分离提取滤液:提取滤液:第5页,本讲稿共15页1.11.1取材取材:称取5g的绿叶,剪碎,放入研钵中。第6页,本讲稿共15页1.2加入药品 向研钵中加入少许二氧化硅和碳酸钙,再加入向研钵中加入少许二氧化硅和碳酸钙,再加入10ml10ml无水无水乙醇,进行迅速,充分的研磨。乙醇,进行迅速,充分的研磨。二氧化硅:
4、为二氧化硅:为了使研磨充分;了使研磨充分;碳酸钙:保护碳酸钙:保护色素免受破坏;色素免受破坏;无水乙醇:色无水乙醇:色素的溶剂。素的溶剂。第7页,本讲稿共15页1.3过滤 将研磨液迅速倒到玻璃漏斗中(漏斗的基部放三至四层纱布)将研磨液迅速倒到玻璃漏斗中(漏斗的基部放三至四层纱布)中进行过滤。将滤液收集到试管中,及时用棉塞将试管口塞严。中进行过滤。将滤液收集到试管中,及时用棉塞将试管口塞严。注意:收集好的研磨液及时用注意:收集好的研磨液及时用棉塞塞紧以防色素挥发。棉塞塞紧以防色素挥发。第8页,本讲稿共15页制备滤纸条制备滤纸条画滤液细线画滤液细线取层析液分离色素取层析液分离色素绿叶中色素的提取和
5、分离绿叶中色素的提取和分离实验步骤实验步骤分离:分离:第9页,本讲稿共15页2.1制备滤纸条铅笔线铅笔线将干燥的定性滤纸剪成宽将干燥的定性滤纸剪成宽2-3cm长长8-10cm的长方形滤纸条,的长方形滤纸条,将一端减去两角,并在距这一端将一端减去两角,并在距这一端1厘米处用铅笔画一条厘米处用铅笔画一条细线。细线。第10页,本讲稿共15页2.2画滤液细线滤液细线滤液细线用毛细吸管吸取少量滤液,沿铅笔线均匀划出一条细线,要求:细、齐、直。要求:细、齐、直。待滤液干后,重复1-2次。第11页,本讲稿共15页2.3层析液分离色素插滤纸条插滤纸条层析液层析液培养皿培养皿注意:滤液细线不能触及层注意:滤液细线不能触及层析液,以防止色素溶解于层析液,以防止色素溶解于层析液中而无法分离。析液中而无法分离。取适量层析液倒入烧杯中,将滤纸条轻插入层析液中用培养皿盖住防止层析液挥发。第12页,本讲稿共15页绿叶中色素的提取和分离绿叶中色素的提取和分离实验结果实验结果第13页,本讲稿共15页叶绿体中色素的提取和分离叶绿体中色素的提取和分离叶绿体中叶绿体中的色素的色素第14页,本讲稿共15页第15页,本讲稿共15页
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