封闭抗体与免疫治疗的临床意义及应用优秀课件.ppt

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1、封闭抗体与免疫治疗的临床意义封闭抗体与免疫治疗的临床意义及应用及应用第1页，本讲稿共38页封闭抗体与免疫治疗的封闭抗体与免疫治疗的临床意义及应用临床意义及应用 深圳博爱医院深圳博爱医院 妇科妇科 钭妙莺钭妙莺第2页，本讲稿共38页最新情况最新情况w20102010年年6 6月月1212、1313日中山大学孙逸仙纪念医院举办日中山大学孙逸仙纪念医院举办全国女性全国女性生殖免疫最新进展学习班生殖免疫最新进展学习班，共有，共有1616个省个省100100多家医院派出医生多家医院派出医生到场学习到场学习w20122012年年1212月月15151616日深圳市举办的日深圳市举办的妇科内分泌学术会妇科内

2、分泌学术会，张，张建平及刘庆芝分别对建平及刘庆芝分别对复发性流产的淋巴免疫治疗复发性流产的淋巴免疫治疗进行了进行了精彩的演讲。精彩的演讲。w生殖医学及免疫治疗已经成为时下国内医疗界最热门的话题。生殖医学及免疫治疗已经成为时下国内医疗界最热门的话题。w深圳各大医院及民营医院在复发性自然流产的免疫治疗深圳各大医院及民营医院在复发性自然流产的免疫治疗（LITLIT）领域目前已逐渐开展，其中包括深圳博爱医院。）领域目前已逐渐开展，其中包括深圳博爱医院。第3页，本讲稿共38页概概 况况wRSARSA发病率：发病率：自然流产率自然流产率5%5%2 2次自然流产率次自然流产率1%-5%1%-5%，平均，平均

3、 2.3%2.3%3 3次自然流产率次自然流产率0.34%0.34%隐性流产隐性流产30%30%40%40%总的自然流产率为总的自然流产率为50%50%60%60%50%50%原因不明，其中原因不明，其中80%80%与免疫有关与免疫有关 复发率：随着流产次数的增加而上升复发率：随着流产次数的增加而上升第4页，本讲稿共38页流产的病因流产的病因w遗传因素遗传因素w内分泌因素内分泌因素w解剖因素解剖因素w感染因素感染因素w血栓前状态血栓前状态w精神、心理因素精神、心理因素w免疫因素免疫因素第5页，本讲稿共38页遗传因素遗传因素w流产胚胎绒毛染色体核型分析流产胚胎绒毛染色体核型分析w夫妇染色体核型分

4、析夫妇染色体核型分析w夫妇双方珠蛋白生成障碍性贫血夫妇双方珠蛋白生成障碍性贫血wG6PDG6PD缺乏的筛查及基因检测缺乏的筛查及基因检测第6页，本讲稿共38页内分泌因素内分泌因素w黄体功能不全黄体功能不全w多囊卵巢缩合征多囊卵巢缩合征w高泌乳血症高泌乳血症w甲状腺疾病甲状腺疾病w糖尿病糖尿病w检测项目有：性激素检测项目有：性激素6 6项、甲状腺功能、胰岛素功能项、甲状腺功能、胰岛素功能第7页，本讲稿共38页解剖因素解剖因素w子宫畸形：纵膈子宫、单角子宫、鞍状子宫、双角子宫子宫畸形：纵膈子宫、单角子宫、鞍状子宫、双角子宫w子宫动脉阻抗增高子宫动脉阻抗增高w宫腔粘连宫腔粘连w子宫肌瘤、子宫腺肌病子

5、宫肌瘤、子宫腺肌病w宫颈机能不全宫颈机能不全w检测方法：超声波、造影、宫腔镜、腹腔镜检查检测方法：超声波、造影、宫腔镜、腹腔镜检查第8页，本讲稿共38页感染因素感染因素w女性生殖道局部感染包括解脲支原体（女性生殖道局部感染包括解脲支原体（UUUU）、衣原体（）、衣原体（CT)CT)、加、加得纳菌（得纳菌（BVBV）、梅毒螺旋体（）、梅毒螺旋体（TPTP）、外周血病毒感染等均）、外周血病毒感染等均可造成流产可造成流产w检测项目：检测项目：UUUU、CTCT、BVBV、TORCH TORCH、TPTP等等等等第9页，本讲稿共38页血栓前状态血栓前状态w多种因素引起的凝血、抗凝和纤溶系统功能失调或障

6、碍的一多种因素引起的凝血、抗凝和纤溶系统功能失调或障碍的一种病理过程，有易导致血栓形成的多种血液学改变。种病理过程，有易导致血栓形成的多种血液学改变。w常用检没项目有凝血常规四项：血检前状态分子标志物，常用检没项目有凝血常规四项：血检前状态分子标志物，凝血酶原片断（凝血酶原片断（F1+2F1+2），血栓调节蛋白（），血栓调节蛋白（TMTM），凝血酶），凝血酶抗凝血酶复合物（抗凝血酶复合物（TATTAT）、抗凝血酶）、抗凝血酶（ATAT）、血小板）、血小板颗粒糖蛋白颗粒糖蛋白140140（GMP140GMP140）、血栓烷）、血栓烷B2B2（TXB2TXB2）、）、D D二聚体二聚体（D D）、

7、纤溶酶原激活物抑制物（）、纤溶酶原激活物抑制物（PAIPAI）第10页，本讲稿共38页精神心理因素精神心理因素w焦虑、紧张、恐吓等严重精神刺激均可导致流产。焦虑、紧张、恐吓等严重精神刺激均可导致流产。w常期脑力劳动孕妇较强烈的长期或反复的精神紧张、焦常期脑力劳动孕妇较强烈的长期或反复的精神紧张、焦虑、烦躁等情绪变化，使大脑皮质兴奋抑制过程的平衡虑、烦躁等情绪变化，使大脑皮质兴奋抑制过程的平衡失衡，舒缩血管中枢受影响，子宫小动脉痉挛，绒毛缺失衡，舒缩血管中枢受影响，子宫小动脉痉挛，绒毛缺血，胎儿发育障碍。血，胎儿发育障碍。第11页，本讲稿共38页免疫因素免疫因素w一、自身免疫型一、自身免疫型 1

8、 1、抗心磷酯抗体（、抗心磷酯抗体（APLAPL）2 2、抗核抗体（、抗核抗体（ANAANA）3 3、抗精子抗体（、抗精子抗体（ASAASA）4 4、抗子宫内膜抗体（、抗子宫内膜抗体（AEAAEA）5 5、抗卵巢抗体（、抗卵巢抗体（AOAAOA）6 6、抗滋养细胞抗体（、抗滋养细胞抗体（ATAATA）7 7、RHRH血型抗体血型抗体第12页，本讲稿共38页免疫因素免疫因素w二、同种免疫型二、同种免疫型 1 1、保护性抗体缺陷（封闭抗体阴性）、保护性抗体缺陷（封闭抗体阴性）2 2、淋巴细胞紊乱（、淋巴细胞紊乱（NKNK细胞增多）细胞增多）第13页，本讲稿共38页封闭抗体的概念封闭抗体的概念w封闭

9、抗体：在正常孕妇的血清中，存在一种抗配偶淋巴细胞的特异性封闭抗体：在正常孕妇的血清中，存在一种抗配偶淋巴细胞的特异性IgGIgG抗体，它可抑制淋巴细胞反应（抗体，它可抑制淋巴细胞反应（MLRMLR），封闭母体淋巴细胞对培养），封闭母体淋巴细胞对培养的滋养层的细胞毒作用，防止辅助的滋养层的细胞毒作用，防止辅助T T细胞识别胎儿抗原的抑制物，细胞识别胎儿抗原的抑制物，并可阻止母亲免疫系统对胚胎的攻击。封闭同种抗原刺激的淋并可阻止母亲免疫系统对胚胎的攻击。封闭同种抗原刺激的淋巴细胞产生巨噬细胞移动抑制因子（巴细胞产生巨噬细胞移动抑制因子（MIFMIF），故称其为封闭抗体），故称其为封闭抗体（bloc

10、king antibodiesblocking antibodies，BABA），或称为），或称为（Antipaternallymphocyte anti bodyAntipaternallymphocyte anti body，APLA)APLA)第14页，本讲稿共38页淋巴细胞免疫治疗的概念淋巴细胞免疫治疗的概念w淋巴细胞免疫治疗（淋巴细胞免疫治疗（LITLIT）：）：BeerBeer和和TayorTayor于二十世纪七十年代创立，并于于二十世纪七十年代创立，并于19781978年开始应用年开始应用于于RSARSA的一种免疫疗法。对同种免疫型的一种免疫疗法。对同种免疫型RSARSA患者彩用

11、丈夫或他患者彩用丈夫或他人淋巴细胞进行同种致敏治疗，抑制母胎间的细胞性免疫性人淋巴细胞进行同种致敏治疗，抑制母胎间的细胞性免疫性排斥反应，减少流产率。排斥反应，减少流产率。w对于封闭抗体和抗独特型抗体缺乏者，主要采用配偶淋巴细对于封闭抗体和抗独特型抗体缺乏者，主要采用配偶淋巴细胞免疫疗法，等到患者体内抗体水平升高时进行受孕，妊娠胞免疫疗法，等到患者体内抗体水平升高时进行受孕，妊娠的成功率可达到的成功率可达到90%90%。第15页，本讲稿共38页免疫性自然流产分类免疫性自然流产分类w类：同种免疫型类：同种免疫型wHLAHLA相容性升高，封闭抗体缺乏相容性升高，封闭抗体缺乏 1 1、正常妊娠：父源

12、性、正常妊娠：父源性HLAHLA抗原刺激母体，产生封闭抗体。抗原刺激母体，产生封闭抗体。母胎耐受，妊娠成功母胎耐受，妊娠成功 2 2、复发性流产、复发性流产 夫妇夫妇HLAHLADQADQA（DQAIDQAI）相容性过大，封闭抗体不产生。）相容性过大，封闭抗体不产生。免疫攻击，自然流产免疫攻击，自然流产 3 3、特性：缺少封闭抗体，多次流产后可诱发、特性：缺少封闭抗体，多次流产后可诱发、类免疫异常的流产类免疫异常的流产 4 4、淋巴细胞免疫治疗（、淋巴细胞免疫治疗（LITLIT）是最理想的治疗方法）是最理想的治疗方法第16页，本讲稿共38页免疫性自然流产分类免疫性自然流产分类w类：抗磷脂抗体类

13、：抗磷脂抗体APLAPL（+）w抗磷脂自身抗体包括：抗磷脂自身抗体包括：抗心磷脂抗体（抗心磷脂抗体（ACLACL）、抗磷脂乙醇胺抗体）、抗磷脂乙醇胺抗体（APEAAPEA）、狼疮抗凝血因子（）、狼疮抗凝血因子（CACCAC）、抗磷脂酰肌醇抗体（）、抗磷脂酰肌醇抗体（APILAPIL）、）、和抗磷酸抗体（和抗磷酸抗体（APAAAPAA）。）。RSARSA患者患者APLAPL（+）22%22%，每流产一次发生率，每流产一次发生率增加增加15%15%。w特征：强烈的凝血活性、直接造成血管内皮细胞损伤、抑制滋养特征：强烈的凝血活性、直接造成血管内皮细胞损伤、抑制滋养细胞的功能细胞的功能w治疗：阿司匹林

14、治疗：阿司匹林+肝素治疗肝素治疗第17页，本讲稿共38页免疫性自然流产分类免疫性自然流产分类w类：抗核抗体阳性类：抗核抗体阳性ADAADA（+）和抗）和抗DNADNA抗体（抗体（+）。占）。占RSARSA妇女妇女的的22%22%，在不孕或，在不孕或IVFIVF失败的妇女中占失败的妇女中占50%50%。w有自身免疫性疾病的妇女有自身免疫性疾病的妇女关节炎和器管炎症及无自身免疫关节炎和器管炎症及无自身免疫性疾病的妇女性疾病的妇女种植时胚胎周围发炎，种植后胎盘发炎。种植时胚胎周围发炎，种植后胎盘发炎。w特征：对抗胎儿和胎盘特征：对抗胎儿和胎盘DNADNAw治疗：强的松治疗，继发于关节炎或治疗：强的松

15、治疗，继发于关节炎或SLASLA者与风湿免疫科一起治疗。者与风湿免疫科一起治疗。第18页，本讲稿共38页免疫性自然流产分类免疫性自然流产分类w类：抗精子抗体类：抗精子抗体ASAASA和和/或或APLAPL等组织特异性抗体阳性。不孕、种等组织特异性抗体阳性。不孕、种植失败和植失败和RSARSA的病人约的病人约10%10%产生产生ASAASA。w特征：受孕困难特征：受孕困难w治疗：肝素治疗：肝素+阿斯匹林阿斯匹林+强的松治疗强的松治疗w下列情况需要检测下列情况需要检测ASAASA：1 1、抗丝氨酸中抗乙醇胺抗体阳性的妇女、抗丝氨酸中抗乙醇胺抗体阳性的妇女 2 2、性交后试验不良的妇女（在宫颈粘液中

16、精子死亡或、性交后试验不良的妇女（在宫颈粘液中精子死亡或 不活动）不活动）3 3、配偶有、配偶有ASAASA阳性阳性第19页，本讲稿共38页免疫性自然流产分类免疫性自然流产分类w类：类：NKNK细胞数量和功能紊乱细胞数量和功能紊乱w特征：特征：CD56+CD56+、CD19+5+CD19+5+细胞数量或细胞数量或/和活性升高，分泌和活性升高，分泌TNFTNF和抗和抗神经转移因子抗体神经转移因子抗体w两类两类NKNK细胞可损伤妊娠细胞可损伤妊娠 CD56+CD56+产生产生TNFTNF、损害蜕膜细胞和滋养细胞、损害蜕膜细胞和滋养细胞 CD19+5+CD19+5+产生抗神经转移因子抗体，破坏滋养细

17、胞产生的激素产生抗神经转移因子抗体，破坏滋养细胞产生的激素（如雌激素、黄体酮和（如雌激素、黄体酮和HCGHCG）w不良结果：不良结果：妨碍种植（多次种植失败）、损伤胎盘细胞、损害孕囊妨碍种植（多次种植失败）、损伤胎盘细胞、损害孕囊（孕囊变形）、绒毛下出血（有时仅（孕囊变形）、绒毛下出血（有时仅B B起发现）、影响卵细胞起发现）、影响卵细胞DNADNA，致胚胎质量不良致胚胎质量不良w治疗治疗 LITLIT、IVIgIVIg、代理妊娠、代理妊娠第20页，本讲稿共38页免疫治疗免疫治疗w淋巴细胞免疫治疗（淋巴细胞免疫治疗（LITLIT）适应症）适应症 1 1、类免疫紊乱（封闭抗体缺乏）类免疫紊乱（封

18、闭抗体缺乏）2 2、不明原因、不明原因RSARSA 3 3、夫妇、夫妇DQDQa a相容性大，或夫妇间有相容性大，或夫妇间有2 2个或个或2 2个以上个以上 相同的相同的 HLAHLA抗原抗原 4 4、无抗父亲淋巴细胞毒抗体、无抗父亲淋巴细胞毒抗体 5 5、微细胞毒交叉试验阴性、微细胞毒交叉试验阴性 6 6、全身免疫状态正常、全身免疫状态正常 7 7、夫妻双方均愿意接受治疗、夫妻双方均愿意接受治疗第21页，本讲稿共38页免疫治疗免疫治疗w淋巴细胞来源淋巴细胞来源 1 1、丈夫淋巴细胞、丈夫淋巴细胞 2 2、无关个体淋巴细胞无关个体淋巴细胞 3 3、血缘亲属淋巴细胞、血缘亲属淋巴细胞 4 4、自

19、身淋巴细胞、自身淋巴细胞第22页，本讲稿共38页免疫治疗免疫治疗w治疗方法治疗方法 1 1、配制淋巴细胞浓缩液、配制淋巴细胞浓缩液 2 2、淋巴细胞计数为：、淋巴细胞计数为：3 3410 410 7 7/ml/ml 3 3、双侧前臂皮内或皮下多点注射（通常注射、双侧前臂皮内或皮下多点注射（通常注射6 68 8针）针）4 4、每、每2 24 4周一次，每疗程周一次，每疗程4 4次次 5 5、封闭抗体上升，或微细胞毒交叉试验阳性即可受孕，、封闭抗体上升，或微细胞毒交叉试验阳性即可受孕，受孕后继续受孕后继续LITLIT治疗治疗3 35 5周期周期 6 6、妊娠成功率达、妊娠成功率达75%75%85%

20、85%。第23页，本讲稿共38页封闭抗体检测封闭抗体检测w方法：方法：ELISAELISAw原理：用抗原包被微量板孔，制成固相载体，加患者血清到板空中其原理：用抗原包被微量板孔，制成固相载体，加患者血清到板空中其所含的抗体特异性地与固相载体中存在的抗原相结合，形成免疫复合所含的抗体特异性地与固相载体中存在的抗原相结合，形成免疫复合物，除去多余的杂质后，加入辣根过氧化物标记的物，除去多余的杂质后，加入辣根过氧化物标记的IgGIgG抗体，使之与抗体，使之与上述免疫复合物反应。洗板，除去多余的结合物，加入底物，与上述免疫复合物反应。洗板，除去多余的结合物，加入底物，与其酶结合的免疫复合物反应，产生有

21、颜色产物，颜色强度与特异其酶结合的免疫复合物反应，产生有颜色产物，颜色强度与特异性抗体含量成正比。性抗体含量成正比。第24页，本讲稿共38页封闭抗体检测封闭抗体检测w操作步骤：操作步骤：1 1、实验前准备、实验前准备 1.1 1.1 实验记录表上填写待检病人的详细资料，包括姓实验记录表上填写待检病人的详细资料，包括姓 名和编号。名和编号。1.2 1.2 一块干板可同时人测十个样本，如不需检测十个一块干板可同时人测十个样本，如不需检测十个 样本，可用封板膜将无需使和的实难孔及对照孔样本，可用封板膜将无需使和的实难孔及对照孔 封实封实 2 2、实验操作、实验操作 第25页，本讲稿共38页封闭抗体检

22、测封闭抗体检测 2.1 90ulAntibody Diluent 2.1 90ulAntibody Diluent加入加入10Antibody Diluent,10Antibody Diluent,摇匀，加入第一行摇匀，加入第一行C CH H孔，第二行以孔，第二行以C CE E孔，每孔孔，每孔0ul.0ul.2.2 2.2 每份待检血清取每份待检血清取20ul20ul加入加入Antibody DiluentAntibody Diluent摇匀，摇匀，分别加入分别加入3 31212行行A AD D孔（每人一人）每孔孔（每人一人）每孔10ul.10ul.2.3 37 2.3 37孵育孵育4545分

23、钟。分钟。2.4 2.4 配备配备1Wash buffer1Wash buffer：取：取27ml27ml蒸馏水加入蒸馏水加入 3ml10Wash buffer3ml10Wash buffer，摇匀。，摇匀。第26页，本讲稿共38页封闭抗体检测封闭抗体检测w操作步聚：操作步聚：2.5 2.5 孵育孵育4545分钟后将反应板扣干，用分钟后将反应板扣干，用1Wash buffer1Wash buffer 洗板两次，扣干。洗板两次，扣干。2.6 2.6 稀释酶标抗体：取稀释酶标抗体：取594ul Antibody Diluent594ul Antibody Diluent加入加入 6ul Alkal

24、ine Phosphatase Conjugated(6ul Alkaline Phosphatase Conjugated(此为此为1010 人次所需试剂），摇匀。人次所需试剂），摇匀。2.7 2.7 实验孔及对照孔均加入已稀释本科标抗体实验孔及对照孔均加入已稀释本科标抗体10ul10ul，3737孵育孵育3030分钟。分钟。第27页，本讲稿共38页封闭抗体检测封闭抗体检测 2.8 2.8 扣干，用扣干，用1Wash buffer1Wash buffer洗板三次，扣干。洗板三次，扣干。2.9 2.9 各取各取Substrate ASubstrate A、B300ulB300ul，混匀，加入各

25、孔，混匀，加入各孔10ul.10ul.2.10 2.10 避光孵育避光孵育1010分钟（分钟（3737）。加入）。加入5ulStop Reagent5ulStop Reagent 终止反应。终止反应。2.11 2.11 在已经设置好的酶标仪上进行读数，观察记录结果在已经设置好的酶标仪上进行读数，观察记录结果 兰色为阳性，无色为阴性。（或都采用酶标仪读板）。兰色为阳性，无色为阴性。（或都采用酶标仪读板）。第28页，本讲稿共38页小小 结结w在反复性流产患者中，在排除如染色体遗传、内分泌、生理解在反复性流产患者中，在排除如染色体遗传、内分泌、生理解剖、感染、血栓等多种因素外，免疫因素是反复流产发病

26、的重剖、感染、血栓等多种因素外，免疫因素是反复流产发病的重要病因。要病因。w免疫困素分为自身免疫型和同种免疫型，封闭抗体缺乏是导致免疫困素分为自身免疫型和同种免疫型，封闭抗体缺乏是导致免疫性反复流产的主要原因。免疫性反复流产的主要原因。w淋巴细胞免疫治疗在临床应用方面治疗反复性流产取得显著淋巴细胞免疫治疗在临床应用方面治疗反复性流产取得显著成效。成效。第29页，本讲稿共38页我院淋巴细胞主动免疫治疗的介绍和体会我院淋巴细胞主动免疫治疗的介绍和体会w信息资料：信息资料：w取我院取我院20102010年年1212月月-2012-2012年年1212月不明原因早期自然流产（包括月不明原因早期自然流产

27、（包括生化妊娠，生化妊娠，IVF-ETIVF-ET种植失败）及胚胎停育种植失败）及胚胎停育2 2次或次或2 2次以上，且临次以上，且临床筛查确诊为封闭抗体缺乏所致的床筛查确诊为封闭抗体缺乏所致的RSARSA患者共患者共8080例，愿意接例，愿意接受淋巴细胞免疫治疗者受淋巴细胞免疫治疗者4040例列为治疗组，采用淋巴细胞主例列为治疗组，采用淋巴细胞主动免疫进行治疗动免疫进行治疗(LIT)(LIT)。另。另4040例作为对照组，对照组采用传统保例作为对照组，对照组采用传统保胎治疗（黄体酮加胎治疗（黄体酮加HCGHCG）。）。第30页，本讲稿共38页我院淋巴细胞主动免疫治疗的介绍和体会我院淋巴细胞主

28、动免疫治疗的介绍和体会w本研究淋巴细胞免疫治疗应符合下列条件：本研究淋巴细胞免疫治疗应符合下列条件：w（1 1）封闭抗体检查阴性；）封闭抗体检查阴性；w（2 2）生化妊娠及早期（）生化妊娠及早期（12W12W前）自然流产史前）自然流产史2 2次，或胚胎停育次，或胚胎停育2 2次，或自然流产次，或自然流产+胚胎停育胚胎停育2 2次；次；w（3 3）夫妇双方染色体检查正常，无家族遗传病史）夫妇双方染色体检查正常，无家族遗传病史第31页，本讲稿共38页我院淋巴细胞主动免疫治疗的介绍和体会我院淋巴细胞主动免疫治疗的介绍和体会w（4 4）双方行）双方行TORCHTORCH（包括巨细胞病毒、风疹病毒、单纯

29、疱疹病毒和（包括巨细胞病毒、风疹病毒、单纯疱疹病毒和弓形体）、梅毒、弓形体）、梅毒、HIVHIV、乙型肝炎、丙型肝炎检查均为阴性；、乙型肝炎、丙型肝炎检查均为阴性；w（5 5）生殖道衣原体、支原体、淋球菌等检查均为阴性；）生殖道衣原体、支原体、淋球菌等检查均为阴性；w（6 6）内分泌检查、甲状腺功能及空腹血糖正常）内分泌检查、甲状腺功能及空腹血糖正常第32页，本讲稿共38页我院淋巴细胞主动免疫治疗的介绍和体会我院淋巴细胞主动免疫治疗的介绍和体会w（7 7）抗精子抗体、抗子宫内膜抗体、抗卵巢抗体、抗心磷脂）抗精子抗体、抗子宫内膜抗体、抗卵巢抗体、抗心磷脂抗体均为阴性；抗体均为阴性；w（8 8）排

30、除生殖道畸形和形态学异常；）排除生殖道畸形和形态学异常；w（9 9）男方精液分析正常；）男方精液分析正常；w（1010）治疗前）治疗前3 3个月内未使用过调节免疫功能药物，未经任何免个月内未使用过调节免疫功能药物，未经任何免疫治疗。疫治疗。第33页，本讲稿共38页我院淋巴细胞主动免疫治疗的介绍和体会我院淋巴细胞主动免疫治疗的介绍和体会w淋巴免疫的治疗方法：淋巴免疫的治疗方法：w无菌下抽取患者丈夫或血缘亲属或无关自愿健康个体静脉血无菌下抽取患者丈夫或血缘亲属或无关自愿健康个体静脉血20ml20ml，肝素抗凝；，肝素抗凝；w在无菌条件下分离淋巴细胞；在无菌条件下分离淋巴细胞；w将淋巴细胞悬液装于注

31、射器中，给予患者两前臂内侧行多点皮下将淋巴细胞悬液装于注射器中，给予患者两前臂内侧行多点皮下或皮内注射，每侧注射或皮内注射，每侧注射3-43-4点，共点，共6 68 8点。点。第34页，本讲稿共38页我院淋巴细胞主动免疫治疗的介绍和体会我院淋巴细胞主动免疫治疗的介绍和体会w每每2-32-3周治疗周治疗1 1次，次，4-64-6次为一疗程。次为一疗程。w治疗一疗程后复查封闭抗体，若已转为阳性，要求治疗一疗程后复查封闭抗体，若已转为阳性，要求3-53-5个月内尽快个月内尽快妊娠。妊娠。w确诊妊娠后，再加强确诊妊娠后，再加强LITLIT一疗程（一疗程（2-32-3周周1 1次共次共4 4次）至妊娠次

32、）至妊娠14-1614-16周。周。w若转阳后半年内仍未能妊娠，应每隔若转阳后半年内仍未能妊娠，应每隔8-108-10周巩固周巩固1 1次次LITLIT，以使封，以使封闭抗体不转阴。闭抗体不转阴。w部分复查封闭抗体阴性者，再加强部分复查封闭抗体阴性者，再加强LITLIT治疗治疗2 2次次,若仍未转阴也可若仍未转阴也可考虑备孕。考虑备孕。第35页，本讲稿共38页我院淋巴细胞主动免疫治疗的介绍和体会我院淋巴细胞主动免疫治疗的介绍和体会w注意事项：注意事项：w1.1.严格掌握适应证，应全面细致地检查，不可滥用；严格掌握适应证，应全面细致地检查，不可滥用；w2.RSA2.RSA病因复杂，往往是多因素的

33、，在诊治方面应全面考虑综病因复杂，往往是多因素的，在诊治方面应全面考虑综合治疗；合治疗；w3.3.虽然虽然LITLIT疗效成功率高，可达疗效成功率高，可达90%90%，治疗有效，但并非神话，治，治疗有效，但并非神话，治疗后仍然还有一些妊娠失败的病例，与患者知情沟通非常重要，疗后仍然还有一些妊娠失败的病例，与患者知情沟通非常重要，签署知情同意书。签署知情同意书。第36页，本讲稿共38页我院淋巴细胞主动免疫治疗的介绍和体会我院淋巴细胞主动免疫治疗的介绍和体会w4.双方上午空腹抽血，患者避开月经期，有生病情况者，过一周或数周治疗，治疗时避孕，治疗后观察半小时，严密观察有无腹痛、腰痛及阴道流血等，无不适离院；w5.1疗程结束后3周复查封闭抗体，阳性者尽快妊娠，未孕者则每3月后加强治疗1次；w6.一旦妊娠，及早安胎治疗，心理疏导，动态观察检验指标。w7.目前尚未发现不安全因素存在。第37页，本讲稿共38页谢谢 谢！谢！第38页，本讲稿共38页