动物实验技术与方法优秀课件.ppt
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1、动物实验技术与方法第1页,本讲稿共95页 在在医医学学教教学学、科科研研和和医医疗疗工工作作中中,不不论论是是从从事事基基础础医医学学还还是是临临床床医医学学或或预预防防医医学学,都都需需要要用用实实验验动动物物来来进进行行各各种种实实验验。通通过过对对动动物物实实验验的的观观察察、分分析析,来来研研究究需需要要解解决决的的问问题题,动动物物实实验验方方法法已已成成为为研研究究工工作作中中必必不不可可少少的的重重要要手段。手段。动物实验动物实验第2页,本讲稿共95页F动物实验前的准备动物实验前的准备F实验动物的抓取和固定实验动物的抓取和固定F实验动物的麻醉实验动物的麻醉F实验动物给药方法实验动
2、物给药方法F各种检验标本的采集方法各种检验标本的采集方法F实验动物的安乐死及无害化处理实验动物的安乐死及无害化处理第3页,本讲稿共95页F动物的购入动物的购入F动物外观健康检查动物外观健康检查F动物编号标记动物编号标记F动物被毛的去除动物被毛的去除动物实验前的准备动物实验前的准备第4页,本讲稿共95页动物的购入动物的购入 购购购购入入入入或或或或领领领领取取取取实实实实验验验验动动动动物物物物时时时时,应应应应向向向向供供供供应应应应部部部部门门门门索索索索取取取取所所所所用用用用动动动动物物物物相相相相应应应应等等等等级级级级的的的的质质质质量量量量合合合合格格格格证证证证书书书书,若若若若
3、是是是是购购购购入入入入或或或或领领领领取取取取清清清清洁洁洁洁级级级级以以以以上上上上实实实实验验验验动动动动物物物物,应应应应采采采采用用用用带带带带有有有有空空空空气气气气过过过过滤滤滤滤膜膜膜膜的的的的无无无无菌菌菌菌运运运运输输输输罐罐罐罐或或或或带带带带过过过过滤滤滤滤帽帽帽帽的笼盒运输,并严格检查其密封状况。的笼盒运输,并严格检查其密封状况。的笼盒运输,并严格检查其密封状况。的笼盒运输,并严格检查其密封状况。第5页,本讲稿共95页F皮毛:有无光泽、出血、干燥;皮毛:有无光泽、出血、干燥;F眼:有无眼屎、流泪、白内障、角膜损伤眼:有无眼屎、流泪、白内障、角膜损伤等;等;F耳:有无外
4、伤、耳壳曲折、中耳炎等;耳:有无外伤、耳壳曲折、中耳炎等;F四肢:有无弯曲、脱臼、外伤、关节炎;四肢:有无弯曲、脱臼、外伤、关节炎;F肛门:有无下痢、血便、脱肛等。肛门:有无下痢、血便、脱肛等。动物外观健康检查动物外观健康检查第6页,本讲稿共95页编号标记编号标记 目的:为了分组目的:为了分组目的:为了分组目的:为了分组要求:清晰、耐久、简便、适用要求:清晰、耐久、简便、适用要求:清晰、耐久、简便、适用要求:清晰、耐久、简便、适用颜料标记颜料标记颜料标记颜料标记 颜料标记适应于较大量的大、小鼠等小动物的编号。颜料标记适应于较大量的大、小鼠等小动物的编号。颜料标记适应于较大量的大、小鼠等小动物的
5、编号。颜料标记适应于较大量的大、小鼠等小动物的编号。常用的颜料有常用的颜料有常用的颜料有常用的颜料有5%5%5%5%苦味酸溶液苦味酸溶液苦味酸溶液苦味酸溶液(黄色黄色黄色黄色)、2%2%2%2%硝酸银溶液硝酸银溶液硝酸银溶液硝酸银溶液(咖啡色咖啡色咖啡色咖啡色)、0.5%0.5%0.5%0.5%中性品红溶液中性品红溶液中性品红溶液中性品红溶液(红色红色红色红色)、煤焦油的酒精溶液、煤焦油的酒精溶液、煤焦油的酒精溶液、煤焦油的酒精溶液(黑色黑色黑色黑色)。颜料号。颜料号。颜料号。颜料号的原则是先左后右,从上而下。的原则是先左后右,从上而下。的原则是先左后右,从上而下。的原则是先左后右,从上而下。
6、第7页,本讲稿共95页小鼠和大鼠标号示图小鼠和大鼠标号示图第8页,本讲稿共95页q烙印烙印烙印烙印 用号码烙印钳在兔、豚鼠的耳朵烙号,用号码烙印钳在兔、豚鼠的耳朵烙号,用号码烙印钳在兔、豚鼠的耳朵烙号,用号码烙印钳在兔、豚鼠的耳朵烙号,然后在烙印部位涂上溶在酒精中的黑墨或煤粉。然后在烙印部位涂上溶在酒精中的黑墨或煤粉。然后在烙印部位涂上溶在酒精中的黑墨或煤粉。然后在烙印部位涂上溶在酒精中的黑墨或煤粉。猪等大动物也可用此法在臀部皮肤烙号标记。也猪等大动物也可用此法在臀部皮肤烙号标记。也猪等大动物也可用此法在臀部皮肤烙号标记。也猪等大动物也可用此法在臀部皮肤烙号标记。也有将实验分组编号烙在狗脖套的
7、皮带颈圈上。有将实验分组编号烙在狗脖套的皮带颈圈上。有将实验分组编号烙在狗脖套的皮带颈圈上。有将实验分组编号烙在狗脖套的皮带颈圈上。q纹身纹身纹身纹身 用刺数钳在局部皮肤用刺数钳在局部皮肤用刺数钳在局部皮肤用刺数钳在局部皮肤(兔多在耳朵内侧,兔多在耳朵内侧,兔多在耳朵内侧,兔多在耳朵内侧,猴多在前胸皮肤猴多在前胸皮肤猴多在前胸皮肤猴多在前胸皮肤)刺上号码,再用棉签蘸上墨汁刺上号码,再用棉签蘸上墨汁刺上号码,再用棉签蘸上墨汁刺上号码,再用棉签蘸上墨汁酒精涂沫刺号,多用于猴、兔的编号。酒精涂沫刺号,多用于猴、兔的编号。酒精涂沫刺号,多用于猴、兔的编号。酒精涂沫刺号,多用于猴、兔的编号。第9页,本讲
8、稿共95页q号牌号牌 将不锈钢或铝质号牌固定在狗或猴将不锈钢或铝质号牌固定在狗或猴的链条或颈圈上。兔号牌则固定在耳朵上。的链条或颈圈上。兔号牌则固定在耳朵上。少量动物时也可将号牌挂在笼具上,但应防少量动物时也可将号牌挂在笼具上,但应防止抓取操作后将动物放错笼具而混淆编号。止抓取操作后将动物放错笼具而混淆编号。第10页,本讲稿共95页q毛色毛色 利用动物的毛色将其编号,用于少量利用动物的毛色将其编号,用于少量的狗、马、猫、猴等大动物的编号。的狗、马、猫、猴等大动物的编号。q剪毛剪毛 用剪刀在狗背上剪出号码,此方法用剪刀在狗背上剪出号码,此方法简单,字迹清楚、可靠,便于观察。简单,字迹清楚、可靠,
9、便于观察。q打孔打孔 用打孔器在兔耳上打孔或剪口。用打孔器在兔耳上打孔或剪口。第11页,本讲稿共95页 为为了了排排除除动动物物被被毛毛对对实实验验操操作作和和观观察察结结果果的的影影响响,实实验验中中需需要要去去除除或或剪剪短短动动物物的被毛。的被毛。动物被毛的去除动物被毛的去除第12页,本讲稿共95页脱毛剂脱毛剂1)8%NaS NaS 8g+1)8%NaS NaS 8g+1)8%NaS NaS 8g+1)8%NaS NaS 8g+水至水至水至水至100ml100ml100ml100ml;也可用硫化钠;也可用硫化钠;也可用硫化钠;也可用硫化钠8 8 8 8克、淀粉克、淀粉克、淀粉克、淀粉7
10、7 7 7克、甘油克、甘油克、甘油克、甘油4 4 4 4克、硼砂克、硼砂克、硼砂克、硼砂1 1 1 1克,用自来水加克,用自来水加克,用自来水加克,用自来水加至至至至100ml100ml100ml100ml。常用于兔及小鼠等小型动物的脱毛。常用于兔及小鼠等小型动物的脱毛。常用于兔及小鼠等小型动物的脱毛。常用于兔及小鼠等小型动物的脱毛。上述配制好的溶液上述配制好的溶液上述配制好的溶液上述配制好的溶液5 5 5 57ml7ml7ml7ml可用于可用于可用于可用于 1512cm 1512cm 1512cm 1512cm2 2 2 2皮肤皮肤皮肤皮肤的脱毛。的脱毛。的脱毛。的脱毛。2)10%NaS 2
11、)10%NaS 2)10%NaS 2)10%NaS 硫化钠硫化钠硫化钠硫化钠10101010克、氧化钙克、氧化钙克、氧化钙克、氧化钙15151515克,自来水克,自来水克,自来水克,自来水加至加至加至加至100ml100ml100ml100ml。常用于狗、猪等较大动物的皮肤。常用于狗、猪等较大动物的皮肤。常用于狗、猪等较大动物的皮肤。常用于狗、猪等较大动物的皮肤第13页,本讲稿共95页动物的抓取与固定方法动物的抓取与固定方法 q目的:限制动物的活动,持安静状态目的:限制动物的活动,持安静状态 以便正确操作和记录以便正确操作和记录q要求:要求:不损伤实验动物不损伤实验动物 不影响观察指标不影响观
12、察指标 实验者不被动物咬伤实验者不被动物咬伤 保证实验顺利进行保证实验顺利进行小心细致、大胆敏捷,切忌粗暴小心细致、大胆敏捷,切忌粗暴。第14页,本讲稿共95页F一、小鼠一、小鼠 用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上,在小鼠向前挣扎爬行时,用左手拇指和食表面上,在小鼠向前挣扎爬行时,用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤,将小鼠置于左手掌心、指捏住其双耳及颈部皮肤,将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部,即可将小鼠完无名指和小指夹其背部皮肤和尾部,即可将小鼠完全固定。全固定。第15页,本讲稿共95页 小鼠的抓取与固定小鼠的抓取与固
13、定第16页,本讲稿共95页小鼠的抓取小鼠的抓取第17页,本讲稿共95页二、大鼠二、大鼠二、大鼠二、大鼠 大鼠的门齿很长。实验者应戴上棉纱手套,右手大鼠的门齿很长。实验者应戴上棉纱手套,右手大鼠的门齿很长。实验者应戴上棉纱手套,右手大鼠的门齿很长。实验者应戴上棉纱手套,右手轻轻抓住大鼠的尾巴向后拉,但要避免抓其尖端,以轻轻抓住大鼠的尾巴向后拉,但要避免抓其尖端,以轻轻抓住大鼠的尾巴向后拉,但要避免抓其尖端,以轻轻抓住大鼠的尾巴向后拉,但要避免抓其尖端,以防尾巴尖端皮肤脱落,左手抓紧鼠两耳和头颈部的皮防尾巴尖端皮肤脱落,左手抓紧鼠两耳和头颈部的皮防尾巴尖端皮肤脱落,左手抓紧鼠两耳和头颈部的皮防尾巴
14、尖端皮肤脱落,左手抓紧鼠两耳和头颈部的皮肤,并将大鼠固定在左手中,右手即可进行操作。肤,并将大鼠固定在左手中,右手即可进行操作。肤,并将大鼠固定在左手中,右手即可进行操作。肤,并将大鼠固定在左手中,右手即可进行操作。第18页,本讲稿共95页大鼠的抓取大鼠的抓取第19页,本讲稿共95页F三、豚鼠三、豚鼠 抓取幼小的豚鼠时,可用双手捧起来;抓取较抓取幼小的豚鼠时,可用双手捧起来;抓取较大的豚鼠时,可先用手掌抠住豚鼠的背部,抓住其大的豚鼠时,可先用手掌抠住豚鼠的背部,抓住其肩胛上方,将右手张开,用手指抓住颈部再慢慢将肩胛上方,将右手张开,用手指抓住颈部再慢慢将其提起其提起第20页,本讲稿共95页豚鼠
15、的抓取豚鼠的抓取第21页,本讲稿共95页四、家兔四、家兔四、家兔四、家兔 一只手抓住兔的颈部皮毛,将兔提起,用另一一只手抓住兔的颈部皮毛,将兔提起,用另一一只手抓住兔的颈部皮毛,将兔提起,用另一一只手抓住兔的颈部皮毛,将兔提起,用另一只手托其臀,或用手抓住背部皮肤提起来。因家只手托其臀,或用手抓住背部皮肤提起来。因家只手托其臀,或用手抓住背部皮肤提起来。因家只手托其臀,或用手抓住背部皮肤提起来。因家兔耳大,故人们常误认为抓其耳可以提起,或有兔耳大,故人们常误认为抓其耳可以提起,或有兔耳大,故人们常误认为抓其耳可以提起,或有兔耳大,故人们常误认为抓其耳可以提起,或有人用手挟住其腰背部提起均为不正
16、确的操作。人用手挟住其腰背部提起均为不正确的操作。人用手挟住其腰背部提起均为不正确的操作。人用手挟住其腰背部提起均为不正确的操作。第22页,本讲稿共95页兔的抓取方法兔的抓取方法第23页,本讲稿共95页猫的抓取与固定方法猫的抓取与固定方法第24页,本讲稿共95页 布制猪固定带布制猪固定带第25页,本讲稿共95页猪的悬吊式固定猪的悬吊式固定第26页,本讲稿共95页 为了观察药物对机体功能、代谢、形态的影响,为了观察药物对机体功能、代谢、形态的影响,为了观察药物对机体功能、代谢、形态的影响,为了观察药物对机体功能、代谢、形态的影响,需要将药物注入实验动物体内。由于实验目的、动物需要将药物注入实验动
17、物体内。由于实验目的、动物需要将药物注入实验动物体内。由于实验目的、动物需要将药物注入实验动物体内。由于实验目的、动物种类、药物剂型不同,给药途径和方法也多种多样。种类、药物剂型不同,给药途径和方法也多种多样。种类、药物剂型不同,给药途径和方法也多种多样。种类、药物剂型不同,给药途径和方法也多种多样。实验动物给药方法实验动物给药方法第27页,本讲稿共95页实验动物的给药剂量实验动物的给药剂量D D2 2=D=D1 1KK2 2/K/K1 1 3 3 W W1 1/W/W2 2 D:D:D:D:药物剂量药物剂量药物剂量药物剂量(g(g(g(g kgkgkgkg-1-1-1-1 d d d d-1
18、-1-1-1)W:W:W:W:动物体重动物体重动物体重动物体重(kg)(kg)(kg)(kg)K:K:K:K:常数常数常数常数第28页,本讲稿共95页不同种类动物的不同种类动物的K K值值名称名称 K K值值 名称名称 K K值值 人人 10.610.6 家兔家兔 10.110.1 猴猴 11.811.8 大鼠大鼠 9.19.1 狗狗 11.211.2 豚鼠豚鼠 9.89.8 猫猫 9.89.8 小鼠小鼠 9.19.1第29页,本讲稿共95页 实验动物的给药途径和方法实验动物的给药途径和方法第30页,本讲稿共95页(一)(一)口服给药口服给药 经口给药剂量准确,对动物安全,是动物实验中经口给药
19、剂量准确,对动物安全,是动物实验中经口给药剂量准确,对动物安全,是动物实验中经口给药剂量准确,对动物安全,是动物实验中常用的给药方法,尤其是移植实验中受体动物的肠常用的给药方法,尤其是移植实验中受体动物的肠常用的给药方法,尤其是移植实验中受体动物的肠常用的给药方法,尤其是移植实验中受体动物的肠道灭菌处理,必须口服肠道不吸收的抗生素。道灭菌处理,必须口服肠道不吸收的抗生素。道灭菌处理,必须口服肠道不吸收的抗生素。道灭菌处理,必须口服肠道不吸收的抗生素。第31页,本讲稿共95页1 1灌胃法灌胃法灌胃法灌胃法 是借灌胃器将药物直接灌到动物胃内的一种是借灌胃器将药物直接灌到动物胃内的一种是借灌胃器将药
20、物直接灌到动物胃内的一种是借灌胃器将药物直接灌到动物胃内的一种常用给药方法,此法给药剂量准确。但是每天强常用给药方法,此法给药剂量准确。但是每天强常用给药方法,此法给药剂量准确。但是每天强常用给药方法,此法给药剂量准确。但是每天强制性操作和定时给药会给动物造成一定程度的机制性操作和定时给药会给动物造成一定程度的机制性操作和定时给药会给动物造成一定程度的机制性操作和定时给药会给动物造成一定程度的机械性损伤和心理上的影响。因此必须充分掌握灌械性损伤和心理上的影响。因此必须充分掌握灌械性损伤和心理上的影响。因此必须充分掌握灌械性损伤和心理上的影响。因此必须充分掌握灌胃技术。胃技术。胃技术。胃技术。第
21、32页,本讲稿共95页 (1)鼠类)鼠类:鼠类的灌胃器由注射器和特殊的灌胃:鼠类的灌胃器由注射器和特殊的灌胃针构成。左手固定鼠,右手持灌胃器,将灌胃针从鼠针构成。左手固定鼠,右手持灌胃器,将灌胃针从鼠的右口角插入口中,沿咽后壁慢慢插入食道,使其前的右口角插入口中,沿咽后壁慢慢插入食道,使其前端到达膈肌位置。灌胃针插入时应无阻力,如有阻力端到达膈肌位置。灌胃针插入时应无阻力,如有阻力或动物挣扎则应退针或将针拔出,以免损伤、穿破食或动物挣扎则应退针或将针拔出,以免损伤、穿破食道或误入气管。道或误入气管。第33页,本讲稿共95页小白鼠灌胃方法小白鼠灌胃方法第34页,本讲稿共95页大白鼠灌胃方法大白鼠
22、灌胃方法第35页,本讲稿共95页(2 2)兔、犬等)兔、犬等)兔、犬等)兔、犬等:灌胃一般要借助于开口器、灌胃管灌胃一般要借助于开口器、灌胃管灌胃一般要借助于开口器、灌胃管灌胃一般要借助于开口器、灌胃管进行。先将动物固定,再将开口器固定于上下门齿之进行。先将动物固定,再将开口器固定于上下门齿之进行。先将动物固定,再将开口器固定于上下门齿之进行。先将动物固定,再将开口器固定于上下门齿之间,然后将灌胃管(常用导尿管代潜)从开口器的小间,然后将灌胃管(常用导尿管代潜)从开口器的小间,然后将灌胃管(常用导尿管代潜)从开口器的小间,然后将灌胃管(常用导尿管代潜)从开口器的小孔插入动物口中,沿咽后壁而进入
23、食道。插入后应检孔插入动物口中,沿咽后壁而进入食道。插入后应检孔插入动物口中,沿咽后壁而进入食道。插入后应检孔插入动物口中,沿咽后壁而进入食道。插入后应检查灌胃管是否确实插入食道。可将灌胃管外开口放入查灌胃管是否确实插入食道。可将灌胃管外开口放入查灌胃管是否确实插入食道。可将灌胃管外开口放入查灌胃管是否确实插入食道。可将灌胃管外开口放入盛水的烧杯中,若无气泡产生,表明灌胃管被正确插盛水的烧杯中,若无气泡产生,表明灌胃管被正确插盛水的烧杯中,若无气泡产生,表明灌胃管被正确插盛水的烧杯中,若无气泡产生,表明灌胃管被正确插入胃中,未误入气管。入胃中,未误入气管。入胃中,未误入气管。入胃中,未误入气管
24、。第36页,本讲稿共95页兔灌胃方法兔灌胃方法第37页,本讲稿共95页狗灌胃方法狗灌胃方法第38页,本讲稿共95页动物种类动物种类插入深度,插入深度,每次灌胃量:每次灌胃量:小白鼠小白鼠3cm3cm1ml1ml大白鼠、豚鼠大白鼠、豚鼠 5cm5cm1-4ml1-4ml兔兔 15cm15cm80-100ml80-100ml犬犬约约20cm20cm200-250ml200-250ml第39页,本讲稿共95页(二)注射给药法(二)注射给药法(二)注射给药法(二)注射给药法 注射给药剂量准确、作用快,是动物实验中注射给药剂量准确、作用快,是动物实验中注射给药剂量准确、作用快,是动物实验中注射给药剂量准
25、确、作用快,是动物实验中常用的给药方法,给药时应注意针头的选择(鼠常用的给药方法,给药时应注意针头的选择(鼠常用的给药方法,给药时应注意针头的选择(鼠常用的给药方法,给药时应注意针头的选择(鼠类用类用类用类用4#4#4#4#针头,兔、猫、犬、猪、猴用针头,兔、猫、犬、猪、猴用针头,兔、猫、犬、猪、猴用针头,兔、猫、犬、猪、猴用6 6 6 68#8#8#8#针头)。针头)。针头)。针头)。第40页,本讲稿共95页1 1皮下注射皮下注射皮下注射皮下注射 皮下注射时用左手拇指和食指轻轻提起运动皮下注射时用左手拇指和食指轻轻提起运动皮下注射时用左手拇指和食指轻轻提起运动皮下注射时用左手拇指和食指轻轻提
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