基因工程的基本操作程序同步练习==高二下学期生物人教版选择性必修3.docx

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1、基因工程的基本操作程序一、选择题1.在核酸分子杂交技术中,常常使用已知序列的单链核酸片段作为探针(探针是指以放射性同位素、生物素或荧光染料等进行标记的已知核苷酸序列的核酸片段)。为了获得B链作探针,可应用PCR技术进行扩增,应选择的引物种类是()A.引物1与引物2B.引物3与引物4C.引物2与引物3D.引物1与引物42.下列关于利用PCR技术扩增目的基因的叙述,正确的是()A.PCR技术利用DNA半保留复制的原理,使核糖核苷酸序列呈指数方式增加B.在扩增目的基因前,需要设计可与目的基因的碱基序列互补的两种双链引物C.目的基因的扩增依赖于模板、耐高温的DNA聚合酶和原料等物质D.加热至90 以上

2、的目的是使目的基因的磷酸二酯键断裂3.关于基因表达载体的说法不正确的是()A.基因表达载体的构建是基因工程的核心步骤B.基因表达载体包含启动子、目的基因、终止子和标记基因等C.启动子位于目的基因的上游,能够启动翻译D.不同的目的基因所需的启动子不一定相同4.受体细胞不同,将目的基因导入受体细胞的方法也不完全相同,下列受体细胞与导入方法匹配错误的一项是()5.目的基因导入受体细胞后,需要检测目的基因是否可以稳定维持和表达其遗传特性。下列关于目的基因的检测和鉴定的叙述,错误的是()A.抗虫、抗病特性鉴定可用于确定转基因生物是否具备相关性状B.采用PCR技术检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目

3、的基因C.目的基因是否转录和翻译的检测方法是DNA分子杂交技术D.可从转基因生物中提取蛋白质来检测目的基因是否翻译成相应蛋白质6.下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述,正确的是()A.表达载体中的人胰岛素基因可通过胰岛A细胞的mRNA反转录获得B.表达载体的复制和人胰岛素基因的表达均启动于复制原点C.借助标记基因筛选出的受体细胞不一定含有目的基因D.起始密码子和终止密码子均在人胰岛素基因的转录中起作用7.如图是利用基因工程技术培育转基因植物,生产可食用疫苗的部分过程示意图,其中Pst、Sma、EcoR、Apa为四种限制性内切核酸酶。下列说法错误的是()A.图示对质粒和目的基因切割用到了两种限制酶

4、B.抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来C.表达载体构建时需要用到限制酶SmaD.除图示组成外,表达载体中还应该含有启动子和终止子等结构8.(不定项)利用PCR技术将某小段DNA分子扩增n次,有关该过程的相关说法正确的是()A.测定DNA分子两端的核苷酸序列,以便设计引物对B.共有(2n-1)对引物参与子代DNA分子的合成C.向反应体系中加入解旋酶、DNA聚合酶等D.保持反应体系温度恒定,确保扩增的正常进行9.利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内DNA复制类似(如图所示)。图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。下列叙述错误的是()A.延伸的温度必须大于复性温

5、度,而小于变性温度B.设计引物时需要避免引物之间碱基互补配对而造成引物自连C.复性温度过高可能导致PCR反应得不到任何扩增产物D.第四轮循环产物中同时含有引物A和引物B的DNA片段所占的比例为15/16二、非选择题 1.据图回答有关基因工程的问题:(1)如图为基因表达载体,其构建时所需的工具酶有和。(2)基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建,其目的是 。(3)启动子是一段有特殊序列结构的DNA片段,位于基因的上游,它是识别与结合的位点。(4)如果要将此表达载体导入大肠杆菌细胞中,通常要用对大肠杆菌进行处理,使细胞处于一种的生理状态。2.农杆菌是一种在土壤中生活的微生物,能在自然条件下侵染植物

6、,因而在植物基因工程中得到了广泛的运用。如图为农杆菌转化法的示意图,试回答下列问题:(1)一般情况下农杆菌不能侵染的植物是。利用农杆菌自然条件下侵染植物的特点,能实现将目的基因导入植物细胞,具体原理是在农杆菌的上存在T-DNA片段,它具有可转移至受体细胞并整合到受体细胞上的特点,因此只要将携带外源基因的DNA片段插入(部位)即可。(2)根据T-DNA这一转移特点,推测该DNA片段上可能含有控制(酶)合成的基因。(3)若导入的受体细胞为体细胞,要获取能表现出新性状的植株,d过程涉及的生物学技术是。(4)植物基因工程中,将目的基因导入受体细胞除了农杆菌转化法之外,还可采取 法。3.穿梭载体是一类具

7、有两种不同复制原点、能在两种不同的生物体(物种不同)中复制的载体,一般在原核细胞和真核细胞中都能复制和表达,如Ti质粒和哺乳动物表达质粒pMT2。回答下列问题。(1)构建基因表达载体前,需先获取目的基因。PCR技术可用于目的基因的扩增,其原理是。用PCR技术从基因文库中获取并扩增目的基因,需要加入作为引物;PCR反应体系中需加入的原料是。(2)若要构建一个穿梭质粒,使其能够在大肠杆菌中大量复制,且能在哺乳动物细胞中表达,质粒上除启动子、终止子、一个至多个限制酶切割位点和标记基因外,还需要有的复制原点。(3)如图为某种哺乳动物穿梭质粒示意图,现欲使用该质粒表达人生长激素,但人生长激素基因所在的D

8、NA片段上不含图中限制酶识别序列。为使PCR扩增的人生长激素基因定向插入该质粒,扩增的人生长激素基因两端设计的序列应含有(填图中的限制酶名称)的切割位点。(4)将该穿梭质粒、目的基因混合后形成的重组质粒与处于能吸收周围环境中DNA分子的大肠杆菌细胞混合,完成转化过程,再从培养的大肠杆菌细胞中提取质粒,可获得大量该质粒。在含卡那霉素的培养基中能够生长的大肠杆菌细胞中(填“一定”或“不一定”)含有目的基因,原因是。4.基因工程又称基因拼接技术或重组DNA技术,以分子遗传学为理论基础,以分子生物学和微生物学的现代方法为手段。如图是基因工程示意图,回答下列问题:(1)人工合成的目的基因必须拼接后才可能

9、在宿主细胞中得以表达。进行过程时,需用的基本工具是。(2)图中已转化的宿主细胞指的是。若图中宿主细胞为动物受精卵,过程的方法是采用直接将目的基因注入动物受精卵中;若图中宿主细胞为大肠杆菌,一般情况下过程不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是。(3)基因工程的先导是艾弗里等人的工作,艾弗里等人通过肺炎链球菌转化实验证明了(答出两点)。5.为使水稻获得抗除草剂性状,科研人员将除草剂草甘膦抗性基因转入水稻植株,获得抗草甘膦转基因水稻。回答下列问题:注:GUS基因表达产物经染色能从无色变成蓝色。(1)将草甘膦抗性基因作为,与Ti质粒用相同的和DNA连接酶处理构建基因表达载体。(2)用处理农杆菌

10、,将其与基因表达载体混合完成转化后,在添加 的培养基中,经筛选1得到含目的基因表达载体的农杆菌。(3)(不定项)利用PCR技术,可以鉴定被侵染的愈伤组织中是否含有草甘膦抗性基因。草甘膦抗性基因的部分序列如下:5ATGGCTAGGAAC33TACCGATCCTTG5根据上述序列应选择引物(填字母)进行PCR。A.引物:5TACCGA3B.引物:5GTTCCT3C.引物:5AUGGCU3D.引物:5ATGGCT3(4)PCR扩增时需要根据草甘膦抗性基因序列设计种引物,其原因是。(5)除了鉴定愈伤组织中是否含有目的基因以外,还可以利用GUS基因表达产物的鉴定进行图中的筛选2,以确定目的基因是否。两次筛选后得到的转基因愈伤组织经过细胞的过程,获得转基因水稻。学科网（北京）股份有限公司