紫外分光光度计结构与实验技术精品文稿.ppt

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1、紫外分光光度计结构与实验技术第1页，本讲稿共12页 紫外分光光度计主要由光源、单色器、紫外分光光度计主要由光源、单色器、样品池（吸收池）、检测器及放大器和样品池（吸收池）、检测器及放大器和记录显示系统所组成记录显示系统所组成。一、紫外分光光度计结构一、紫外分光光度计结构第2页，本讲稿共12页1、光源、光源、光源、光源钨灯丝和氢灯两种钨灯丝和氢灯两种钨灯丝适宜使用的范围是钨灯丝适宜使用的范围是360nm1000nm；氢灯或氘灯适宜使用的范围是氢灯或氘灯适宜使用的范围是150nm360nm。因为玻璃会吸收紫光，灯泡必须用石英材料因为玻璃会吸收紫光，灯泡必须用石英材料第3页，本讲稿共12页 2 2、

2、单色器（分光系统）、单色器（分光系统）单单色色器器是是指指能能将将来来自自光光源源的的复复色色光光按按波波长长长长短短顺顺序序色色散散为为单单色色光光，并并能能任任意意调调节节波波长长的的装装置置。常常由由棱棱镜镜和和光光栅栅组组成成。经经棱棱镜镜或或光光栅栅色色散散成成一一系系列列由由单单色色光光带带组组成成的的光光谱谱，逐逐个个从从单单色色器器的的出出口口狭缝射出。狭缝射出。第4页，本讲稿共12页3、样品池（参比池）、样品池（参比池）可见光区可使用玻璃制的样品池（玻璃在可见光区可使用玻璃制的样品池（玻璃在波长波长200nm有吸收），紫外区可使用石有吸收），紫外区可使用石英样品池（石英在波长

3、英样品池（石英在波长200nm无吸收）。无吸收）。样品池和参比池需要配对（即完全相同的样品池和参比池需要配对（即完全相同的两个），其厚度（光束通过溶液的路径长两个），其厚度（光束通过溶液的路径长度）一般为度）一般为1mm、2mm、5mm、1cm、2cm、4cm。如在定量测定时，所使用的。如在定量测定时，所使用的一组样品池要完全一致。一组样品池要完全一致。第5页，本讲稿共12页 检检测测器器又又称称接接受受器器，透透过过试试液液的的光光用用光光电电管管来来接接受受。由由单单色色器器的的出出口口狭狭缝缝射射出出的的单单色色光光束束被被旋旋转转折折光光器器分分成成两两束束按按一一定定频频率率交交替替

4、投投射射到到样样品品池池和和参参比比池池上上，如如果果样样品品池池中中样样品品吸吸收收了了部部分分光光辐辐射射能能，则则透透过过样样品品池池和和参参比比池池的的两两光光束束不不再再平平衡衡。光光信信号号经经光光电电倍倍增增管管及及电电子子元元件件组组成成的的检检验验器器、放放大大器器进进行行检检验验、比比较较和和放放大大。放放大大后后的的电电信信号号由由显显示示记记录录系系统统输输出出吸吸光光度度、波长等数据或给出吸收曲线。波长等数据或给出吸收曲线。4、检测器、检测器 第6页，本讲稿共12页 通通常常在在紫紫外外分分光光光光度度计计中中，装装置置有有紫紫外外光光源源-氘氘灯灯及及可可见见光光源

5、源-卤卤钨钨灯灯，只只需需切切换换光光源源，就就可可以以用用来来用用来来测测定定可可见见吸吸收收光光谱谱。因因此此也也称称为为紫紫外外-可可见见分分光光光光度度计。计。一般紫外分光光度计光学系统的结构有两类：一般紫外分光光度计光学系统的结构有两类：一类是单波长分光光度计；一类是单波长分光光度计；一类是双波长分光光度计。一类是双波长分光光度计。第7页，本讲稿共12页二、紫外分光光度计的校正二、紫外分光光度计的校正 1 1、波长校正、波长校正 2、吸光度校正、吸光度校正、吸光度校正、吸光度校正 3、吸收池校正、吸收池校正第8页，本讲稿共12页第9页，本讲稿共12页三、紫外吸收光谱中使用的溶剂三、紫

6、外吸收光谱中使用的溶剂 1、溶剂对样品具有良好的溶解能力；、溶剂对样品具有良好的溶解能力；2、不与样品发生化学反应，、不与样品发生化学反应，溶质与溶剂间的相互作用小；溶质与溶剂间的相互作用小；3、在所测定的波长区域无明显的吸收；在所测定的波长区域无明显的吸收；第10页，本讲稿共12页紫外光谱测量常用溶剂的透明界限紫外光谱测量常用溶剂的透明界限溶剂溶剂透明透明界限界限/nm溶剂溶剂透透明明界界限限/nm溶剂溶剂透明透明界限界限/nm溶剂溶剂透透明明界界限限/nm水水异丙异丙醇醇氯仿氯仿吡啶吡啶205203245305正己正己烷烷乙醇乙醇乙酸乙酸乙酯乙酯丙酮丙酮195205254330环己环己烷烷乙醚乙醚乙酸乙酸甲醇甲醇205210255202乙腈乙腈二氧二氧六环六环苯苯石油石油醚醚190211278297第11页，本讲稿共12页4、样品在该溶剂中具有良好的吸收、样品在该溶剂中具有良好的吸收峰形峰形；5、溶剂的挥发性小、安全、无毒、溶剂的挥发性小、安全、无毒性，价格便宜。性，价格便宜。第12页，本讲稿共12页