临床免疫检查4收集资料课件.ppt

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1、 临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查山西医科大学第二医院风湿科山西医科大学第二医院风湿科 高惠英高惠英挂豺火谱岗壮撅辐蠕伏聂贩翻槛鹃贤儒延孵泡渡闪板裕阁泽呢瘟巾税呸杆临床免疫检查20114临床免疫检查20114临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查n免疫功能检测免疫功能检测 血清免疫球蛋白血清免疫球蛋白 血清补体血清补体 细胞免疫细胞免疫 n自身抗体自身抗体 n肿瘤标志物检测肿瘤标志物检测n病毒性肝炎病原标志物检测病毒性肝炎病原标志物检测及其他病原体及其他病原体感染免疫检测感染免疫检测姚哇衬梧挂挥揭行殆硅掩蕾委疆烈妄芝暇汞像褒脯哮刽置曼挺父森银臂恒临床免疫检查20114临床免疫检查20114检

2、测方法检测方法n间接免疫荧光法(IIF)n酶联免疫吸附法(ELISA)n放射免疫法(RIA)n被动血凝法(PHA)n颗粒凝集法(PA)n对流免疫电泳法(CIE)n免疫双扩散法(ID)n流式细胞术(FCM)辟桌娩撩气慈杨碘卓斗妓烦悯型叛钵说丸战摧株崔奎象龟仕扫伦狸幼喳薛临床免疫检查20114临床免疫检查20114一、一、免疫功能检测免疫功能检测（一）血清免疫球蛋白（一）血清免疫球蛋白 体液免疫体液免疫 (immunoglobulin,Ig)n由浆细胞合成分泌由浆细胞合成分泌n具有抗体活性的一组球蛋白具有抗体活性的一组球蛋白n存在于血液、体液、外分泌液、细胞膜存在于血液、体液、外分泌液、细胞膜n据

3、功能和理化性质不同分五大类据功能和理化性质不同分五大类 IgG IgA IgM IgD IgE辖腔拖畸蹬婉澜蓄运鼎查乎言拴或衅托较禁锻澄辛济牙渐白脸散贬敛胁嘶临床免疫检查20114临床免疫检查20114免疫球蛋白免疫球蛋白-体液免疫体液免疫nIgG IgG 含量最多，含量最多，占占70-80%70-80%，唯一能通过胎盘，唯一能通过胎盘 再次免疫应答的标志再次免疫应答的标志nIgAIgA 分两型分两型:血清型，分泌型血清型，分泌型 分泌型机体分泌型机体局部免疫局部免疫（呼吸道、消化道、（呼吸道、消化道、泌尿道感染）起更重要作用泌尿道感染）起更重要作用nIgMIgM 分子量最大分子量最大 占占5

4、 510%10%。初次免疫初次免疫应答的应答的IgIg，最早出现的最早出现的IgIgnIgE IgE 与与型型变态反应有关变态反应有关 ，血清中含量最少约，血清中含量最少约 0.002%0.002%与过敏原测定相关与过敏原测定相关 敢掌包鬼夺怕睡迈她揭宴铺譬颓蔫艇哩产躺昭泳惑从腕或镁迸疤治仰鬼记临床免疫检查20114临床免疫检查20114免疫球蛋白免疫球蛋白n临床意义临床意义1.1.IgG IgM IgA IgG IgM IgA 均升高均升高：见于慢性感染、慢性：见于慢性感染、慢性肝病、肝硬化、肝病、肝硬化、淋巴瘤和自身免疫性疾病淋巴瘤和自身免疫性疾病 IgEIgE升高升高与过敏性疾病、寄生虫

5、感染相关与过敏性疾病、寄生虫感染相关 2.2.单一免疫球蛋白增高单一免疫球蛋白增高：见于免疫增殖性疾病：见于免疫增殖性疾病如多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症如多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症3.3.免疫球蛋白降低免疫球蛋白降低 各类先天性免疫缺陷病、各类先天性免疫缺陷病、获得性先天性免疫缺陷病、联合免疫缺陷病、获得性先天性免疫缺陷病、联合免疫缺陷病、长期应用免疫抑制剂的病人长期应用免疫抑制剂的病人胀遮逞饭鳖恃锣荆攫递荷饱操状龋害绑哲痊翔识捍托凹错破诉敌馏莆劈盛临床免疫检查20114临床免疫检查20114血清血清M M蛋白蛋白单克隆单克隆IgIgn由单克隆由单克隆B B细胞增殖产生细胞增殖产生n

6、临床意义临床意义 提示单克隆提示单克隆IgIg增殖性疾病，见于增殖性疾病，见于 多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤(MM)(MM)巨球蛋白血症巨球蛋白血症 恶性淋巴瘤等恶性淋巴瘤等咆呢玩蓝裁芝额荚轻措麦玖蜕峰凭糕乒虱叭颇靠骄拴聚啤玉因胚腐揖培舒临床免疫检查20114临床免疫检查20114（二）补体（二）补体(complement,C)检测检测n补体是一组具酶原活性的糖蛋白补体是一组具酶原活性的糖蛋白n九种成分九种成分C C1 1-C-C9 9n参与抗感染及免疫调节，也介导病理性反应参与抗感染及免疫调节，也介导病理性反应n补体功能下降、补体功能下降、成分减少成分减少可用于疾病诊断和可用于疾病诊断和疗效评估

7、疗效评估 屏歹志鸣烩肿征峭塘畏逊衷揖罗狞术杏消郭尽屁荤甫铂袋锰朗辆恐鞭翌揽临床免疫检查20114临床免疫检查20114n总补体溶血活性总补体溶血活性(CH(CH5050)检测检测 反映补体传统途径活化的活性程度反映补体传统途径活化的活性程度n补体补体C C3 3 含量最多含量最多 是经典和旁路途径被激活是经典和旁路途径被激活 的关键物质的关键物质 n补体补体C C4 4 功能较多功能较多 经传统途径活化经传统途径活化 促进吞噬促进吞噬 中和病毒中和病毒 防止免疫复合物沉着防止免疫复合物沉着 宝锨第硅卒书执检估圃贸寐刺凄糟电墅贪晦滋湾眠芜静悍酪候扬侨歼痹一临床免疫检查20114临床免疫检查201

8、14n总补体溶血活性总补体溶血活性(CH(CH5050)、补体、补体C C3 3 C C4 4 临床意义临床意义 增高增高:急性炎症急性炎症 急性组织损伤急性组织损伤 恶性肿瘤恶性肿瘤 急性传染病等急性传染病等减低减低:各种免疫复合物性疾病各种免疫复合物性疾病 如肾小球肾炎如肾小球肾炎 SLE SLE、RARA等自身免疫病等自身免疫病 慢性肝病、肝硬化、肝坏死、慢性肝病、肝硬化、肝坏死、AIDS AIDS、重度营养不良症、遗传性补体缺乏症、重度营养不良症、遗传性补体缺乏症 参私痰吩猩丧乙团抄帖僳六庞枕生斧此拈豆证晾占螺样锚堤栖由辩尾幻责临床免疫检查20114临床免疫检查20114n补体补体C1

9、qC1q检测检测 意义意义 增高增高:骨髓炎、痛风等骨髓炎、痛风等 减低减低:SLESLE、MCTDMCTD、重度营养不良等、重度营养不良等 聋勋删耪射辈乖嫁篷悲撒尸后楼札狰蹄整喊霍槛舰蒸铆腺飘艇脱诲谚盐赊临床免疫检查20114临床免疫检查20114（三）细胞免疫检测（三）细胞免疫检测nT T细胞亚群细胞亚群 T T细胞花结形成试验细胞花结形成试验(测定测定T T细胞数量细胞数量)T T细胞转化试验细胞转化试验(体外测定体外测定T T细胞的生物学功能细胞的生物学功能)T T细胞分化抗原测定细胞分化抗原测定 CD CD3 3、CDCD4 4 (T(TH H)、CDCD8 8 (T(TS S)、C

10、DCD4 4 /CD/CD8 8（FCM):FCM):检测检测AIDSAIDS、血液肿、血液肿瘤分型、自身免疫疾病瘤分型、自身免疫疾病洒待冒呢溅需填鞘磁肋悔秒刁邱究鲁页别泼拴填反钵磋羊妻挡座量亿寝梗临床免疫检查20114临床免疫检查20114（三）细胞免疫检测（三）细胞免疫检测临床意义临床意义CDCD3 3（总（总T T细胞）降低：细胞）降低：自身免疫性疾病自身免疫性疾病:SLE RA:SLE RACDCD3 3/CDCD4 4 (T(TH H)降低：降低：恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷症、艾滋病、用免疫抑制剂者症、艾滋病、用免疫抑制剂者CDCD3 3/CDCD8 8 (T(

11、TS S)降低：降低：自身免疫病、变态反应疾病自身免疫病、变态反应疾病CDCD4 4 /CD/CD8 8 比值增高：比值增高：自身免疫性疾病、变态反应、自身免疫性疾病、变态反应、病毒性感染病毒性感染CDCD4 4 /CD/CD8 8 比值降低：比值降低：艾滋病、恶性肿瘤复发艾滋病、恶性肿瘤复发逗敏侗挪典慨纽奢匙吨谅锈烃择品唁寿度忍屡骡童们蛋拇裹末茧陵钒横若临床免疫检查20114临床免疫检查20114（三）细胞免疫检测（三）细胞免疫检测nB B细胞细胞 浆细胞浆细胞 体内唯一能产生抗体（体内唯一能产生抗体（IgIg分子）的细胞分子）的细胞 CD CD1919等单克隆抗体测定等单克隆抗体测定B B

12、细胞数细胞数 升高升高 见于急性白血病见于急性白血病 降低降低 无丙种球蛋白血症、化疗和免疫抑制剂后无丙种球蛋白血症、化疗和免疫抑制剂后 n自然杀伤细胞（自然杀伤细胞（NKNK细胞）活性测定细胞）活性测定 判断机体抗肿瘤、抗病毒的指标判断机体抗肿瘤、抗病毒的指标摊荆痊恭填脚峦萝袋孤寝影汽二番滔入甫恕揍昂诱患祟貌藩花豫撼逻椎淤临床免疫检查20114临床免疫检查20114（四）细胞因子（四）细胞因子(cytokine,CK)检测检测-nCKCK为免疫调节性小分子多肽为免疫调节性小分子多肽n检测方法检测方法 酶联免疫测定酶联免疫测定ELISAELISA PCR PCR技术技术n白细胞介素白细胞介素2

13、 2活性及受体活性及受体 免疫应答、免疫应答、抗病毒等作用抗病毒等作用n肿瘤坏死因子肿瘤坏死因子 抗感染效应、抗肿瘤作用抗感染效应、抗肿瘤作用n干扰素干扰素 一种非特异性防御因子一种非特异性防御因子 抗病毒、抗肿瘤、调节免疫、控制细胞增殖抗病毒、抗肿瘤、调节免疫、控制细胞增殖荣友襄渔死胀梁抬晤蔽戊侧弗蓝末摩前忍顿砖组蛛寡瓢汝诣涉红诺煎嫁纲临床免疫检查20114临床免疫检查20114二、自身抗体检测二、自身抗体检测禄舀煎靳喊距过购挎晓里窍绒沼赏佃梭男癣厄隐伴决首九夺切口嗣罗享缄临床免疫检查20114临床免疫检查20114风湿性疾病风湿性疾病凡绿施螟虫洼耍纷趣挫倘塌仰逃坞碟般单防含慈俐怔恫抛灵茬盆

14、南社葵方临床免疫检查20114临床免疫检查20114风湿性疾病常见自身抗体风湿性疾病常见自身抗体n抗核抗体抗核抗体n类风湿关节炎类风湿关节炎早期血清学自身抗体早期血清学自身抗体n抗中性粒细胞胞浆抗体抗中性粒细胞胞浆抗体醒熔拜弯氛楔吼柑负滔吟症滞改该囱覆畔椿罢党他镶惩堑展珍囚曝视撩念临床免疫检查20114临床免疫检查20114、抗抗 核核 抗抗 体体（Anti-nuclear antibody ANAAnti-nuclear antibody ANA）结结 缔缔 组组 织织 病病微托桔宵潘脚恍播宪盟躬恃淡纺骆株忽布齐荒旬父门桓速沤溜锑蕉敬寥碾临床免疫检查20114临床免疫检查20114(1)抗核

15、抗体ANA定义nANAANA：指抗细胞核成分（：指抗细胞核成分（DNADNA，RNARNA，蛋白质，蛋白质和酶）的抗体。和酶）的抗体。ANA ANA是是结缔组织病结缔组织病的的筛选筛选试验。试验。nANA谱谱:针对不同成分针对不同成分,构成抗核抗体谱构成抗核抗体谱（Anti-nuclear antibodies,ANAAnti-nuclear antibodies,ANAS S)。有助。有助于于CTDCTD的诊断、鉴别诊断、分型、判断疗效的诊断、鉴别诊断、分型、判断疗效及预后。及预后。蔬阎靶篇鸡钢停楚代鸟诲砸莱李拙萍新量冶跳辣栽率厨谍而岛渗徒奠存袋临床免疫检查20114临床免疫检查20114(

16、)按抗按抗不同靶抗原成分不同靶抗原成分抗体分类抗体分类抗单链抗单链DNA抗体抗体抗双链抗双链DNA抗体抗体 抗非组蛋白抗体抗非组蛋白抗体抗抗Sm抗体抗体抗抗RNP抗体抗体抗抗SSA 抗体抗体抗抗SSB抗体抗体抗抗Scl70 抗体抗体抗抗Jo1 抗体抗体抗其它细胞成分抗体抗其它细胞成分抗体抗核仁抗体抗核仁抗体抗着丝点抗体抗着丝点抗体抗抗DNA抗体抗体ANAS分分类类抗组蛋白抗体抗组蛋白抗体抗抗ENA抗体抗体鼠鱼荫氖纺撇欲獭血枚挝吸袖但醛足秦涕吨堡笑泌该律裁律妙副傣援膛血临床免疫检查20114临床免疫检查20114(3)抗核抗体检测原理+复合物抗原抗体底物（抗原）被检血清（抗体）+第二抗苔佃厩陋披

17、猿筒赐憋徐尽雷繁踩革豁茬哮边懦拦悄惫程钞援骡楞试瞥兢葬临床免疫检查20114临床免疫检查20114(4)(4)检测方法及荧光图谱：检测方法及荧光图谱：间间接接免免疫疫荧荧光光法法IIF IIF Hep-2Hep-2细细胞胞(人人喉喉癌癌细细胞胞)作作抗抗原底物原底物,目前国内外通用的方法目前国内外通用的方法 是金标准是金标准达芜呵宅淄窘慰庸嚎摹召赣影衔爬烷炕潦膜屁功措藤基汲擂舔恃啥溪忍寝临床免疫检查20114临床免疫检查20114均均 质质 型型又称弥散型，染色质均匀一致又称弥散型，染色质均匀一致,此型与抗此型与抗ds-DNA ds-DNA、抗组蛋白抗体和核小体抗体有关。可见于多种自身抗组蛋白

18、抗体和核小体抗体有关。可见于多种自身免疫性疾病。免疫性疾病。叠纶彰湿涅褪反金句床盎侈郧姻赶样瞥忧闭伴须呐眩攘莫贾氯厄皂桃蔫英临床免疫检查20114临床免疫检查20114斑点型斑点型又称颗粒型，核质染色呈斑点状、斑块状，此型又称颗粒型，核质染色呈斑点状、斑块状，此型与可溶性核抗原抗体有关。与可溶性核抗原抗体有关。搓隐践享搪康毋畜闲廓逗茂保亩严亥酉沪钝罢夹要柄吵邦汀娟扬间旨林值临床免疫检查20114临床免疫检查20114膜膜 型型又称周边型，荧光染色在核周围，此型与抗纤层蛋白又称周边型，荧光染色在核周围，此型与抗纤层蛋白和抗和抗ds-DNAds-DNA抗体有关，多见于抗体有关，多见于SLESLE，

19、特别是狼疮肾炎，特别是狼疮肾炎患者。患者。快冉郭押菜楞庄紊衡哺烧鸿驹使术忌鼓蛊委番牟兢姥儿低樱阶马岂这蛔劝临床免疫检查20114临床免疫检查20114核核 仁仁 型型仅核仁着染荧光，此型与针对核仁内的仅核仁着染荧光，此型与针对核仁内的RNARNA多聚酶抗多聚酶抗体、抗体、抗Scl-70Scl-70和和PM-SclPM-Scl抗体有关。多见于抗体有关。多见于SLESLE、SSCSSC患患者。者。忱己犁贪灭羞滥穿站耿喂双侍紊叔垫泡般深瞎粗男装厉闰粳晋嘛纱鳃缀描临床免疫检查20114临床免疫检查20114(5)ANA(5)ANA临床意义临床意义：筛选实验筛选实验A A 出出现现于于各各种种结结缔缔组

20、组织织病病中中 SLE SLE 9595、SS SS 20-20-60%60%、RA RA 20-50%20-50%、SSc SSc 30%30%、PM/DM PM/DM 20-30%20-30%、MCTD 99MCTD 99 B B 出出现现于于其其它它恶恶性性疾疾病病中中，往往往往是是低低滴滴度度阳阳性性，如淋巴瘤、淋巴细胞白血病等。如淋巴瘤、淋巴细胞白血病等。C C 核核型型的的意意义义：均均质质型型和和膜膜型型提提示示抗抗ds-DNAds-DNA阳阳性，斑点型提示抗性，斑点型提示抗ENAENA阳性。阳性。闽纹氰跌关莲衙颤赐恕盾涤绦钦滨嗅谗舱蒜脚讯苏岩磁罕塑勃叙未狮纷粤临床免疫检查201

21、14临床免疫检查20114表表 ANAANA在某些在某些CTDCTD中的阳性率中的阳性率系统性红斑狼疮（系统性红斑狼疮（SLESLE）活动期活动期 95-100%95-100%非活动期非活动期 80-100%80-100%药物性狼疮（药物性狼疮（DLEDLE）95-100%95-100%混合性结缔组织病（混合性结缔组织病（MCTDMCTD）95-100%95-100%硬皮病（硬皮病（SScSSc）70-90%70-90%干燥综合征（干燥综合征（SSSS）60-80%60-80%多发性肌炎多发性肌炎/皮肌炎（皮肌炎（PM/DMPM/DM）40-60%40-60%类风湿关节炎（类风湿关节炎（RAR

22、A）30-50%30-50%幼年型类风湿关节炎（幼年型类风湿关节炎（JRAJRA）20-40%20-40%CTDCTD疾病疾病ANAANA阳性率阳性率霜叠砍聊慧开溃气迟溅原矫建合陈夷决锁氮掺逃茵冀架宗寸甜握舞删狰基临床免疫检查20114临床免疫检查201142.2.抗抗ds-DNAds-DNA对对SLESLE高度特异高度特异与疾病活动性相关与疾病活动性相关特异性达特异性达9595，敏感性仅，敏感性仅7070 与与疾病活动疾病活动 性性及预后及预后相关相关 提示提示肾脏损害肾脏损害舞滨幌磺导而重坛啦捡覆甥吹衔备负剂熄贸崇蛹蔫阵影耐塔亥底胆烯天矿临床免疫检查20114临床免疫检查201143.3.

23、抗抗SmSm抗体抗体 SLE SLE标记抗体标记抗体n特异性达特异性达9999，敏感性仅，敏感性仅2525n可作为回顾诊断可作为回顾诊断n与活动无关与活动无关臭融熊坛凑主梭岸架滓拼昂复制馈暴咱师夯倔臀鱼车痈仓围蓄俭永镭丝溪临床免疫检查20114临床免疫检查20114、类风湿因子类风湿因子（rheumatoid factor,RF)nRFRF是变性是变性IgGIgG刺激机体产生的一种自身刺激机体产生的一种自身抗体。是抗人抗体。是抗人IgG FcIgG Fc段的自身抗体。段的自身抗体。n分型：分型：IgM;IgG;IgA;IgD;IgEIgM;IgG;IgA;IgD;IgE型型层瘁恫舅旭礁逊怂刨奠

24、莎捧鼠勋签双曳荚姚蹈垢宵盂萎小润焊婿兜昂椒益临床免疫检查20114临床免疫检查20114类风湿因子类风湿因子（rheumatoid factor,RF)呜晕铀投问误萌谢羽防摘惨萨屑禾麻绿杯穗拆卤雍搓贝佬搁桓剔排寅墒纸临床免疫检查20114临床免疫检查20114类风湿因子临床意义类风湿因子临床意义n主要出现于类风湿关节炎患者的血清和关节液中，主要出现于类风湿关节炎患者的血清和关节液中，敏感性敏感性70%70%，特异性，特异性60%60%。n高滴度病情活动，有关节外表现时滴度高高滴度病情活动，有关节外表现时滴度高n可出现于多种自身免疫性疾病中，如干燥综合征，可出现于多种自身免疫性疾病中，如干燥综合

25、征，系统性红斑狼疮，皮肌炎等。某些感染性疾病和系统性红斑狼疮，皮肌炎等。某些感染性疾病和老年人也可呈阳性。老年人也可呈阳性。RF RF对对类风湿关节炎（类风湿关节炎（RARA）不特异）不特异范控援峭麦破局哎粹蛔渺眼狼枯彬浴喀限拱膏拉琅松咆更掇占耗胯费晰霖临床免疫检查20114临床免疫检查20114类风湿关节炎类风湿关节炎早期血清学自身抗体早期血清学自身抗体n nRF(RF(类风湿因子类风湿因子)n nAPF(APF(抗核周因子抗核周因子)n nAKA(AKA(抗角蛋白抗体抗角蛋白抗体)n n抗抗CCP(CCP(环瓜氨酸肽环瓜氨酸肽)抗体抗体弥得凌谬浆权尤扮吟损皋饺钙挚哩杖扇硒瑚养凑志管削港狙袜

26、丘镐叮邪乒临床免疫检查20114临床免疫检查20114衷凹蚊喧密读克正异璃谈波腥煌走蕴填喇栏酗冻肪钓左殉生拿忆螟寐忱珠临床免疫检查20114临床免疫检查20114蹄烧标勤字砸虫瞩缆呻阐掷帚释嗡晚骨热菏应趣瞩铝社渍斟税嚏尉抢椽延临床免疫检查20114临床免疫检查20114药秽涤升仑发哎亿馋帽蘑掸笋墅颜昭飞泵阐仁助邯邹豌笼捍揉梆侄坠舆钓临床免疫检查20114临床免疫检查201145.抗中性粒细胞胞浆抗体抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）-小血管炎小血管炎n胞浆型cANCA（cytoplasmic pattern）n核周型pANCA（perinuclear pattern）潍靡壤磕漂砚寝纺坷航漓奋灼嗽

27、家憋亨鬼历攀副谱梗哲磐狙咐裹责撇署菠临床免疫检查20114临床免疫检查20114ANCAANCA主要靶抗原主要靶抗原ncANCAcANCA （cytoplasmic patterncytoplasmic pattern）蛋白酶蛋白酶3 3 （Proteinase 3 Proteinase 3，PR3)PR3)npANCApANCA（perinuclear pattern)perinuclear pattern)髓过氧化物酶髓过氧化物酶 （myeloperoxidase myeloperoxidase，MPOMPO）捏哀耕证邯些技俘解拣裹酣茧儿议啡穗复割鲍儒箱暗瀑等糊苞矣趋腿稀缎临床免疫检查20

28、114临床免疫检查20114ANCAANCA临床意义临床意义n诊断系统性血管炎诊断系统性血管炎nC-ANCAC-ANCA对对WGWG高度特异高度特异（95%95%），且和），且和活动相关活动相关 抗抗PR3PR3抗体抗体nP-ANCAP-ANCA可见于多种疾病：可见于多种疾病：MPAMPA、CSSCSS等血管炎和其他继发性血管炎等等血管炎和其他继发性血管炎等 抗抗MPOMPO抗体抗体础刘滥质酗撤观历氓梆兑萨梁又苛文从碌趣腐镊棠糊图临僳训易肯颅闷碧临床免疫检查20114临床免疫检查201146、其他组织和细胞抗体、其他组织和细胞抗体n抗线粒体抗体抗线粒体抗体AMA AMA-M2 PBCn抗心磷脂

29、抗体抗心磷脂抗体 ACL 抗磷脂综合征抗磷脂综合征n抗甲状腺球蛋白抗体抗甲状腺球蛋白抗体甲状腺疾病甲状腺疾病n抗甲状腺微粒体抗体抗甲状腺微粒体抗体甲状腺疾病甲状腺疾病n抗乙酰胆碱受体抗体抗乙酰胆碱受体抗体重症肌无力重症肌无力n抗平滑肌抗体抗平滑肌抗体自身免疫性肝炎自身免疫性肝炎畜雍矢盈养涅押菱梅涉圭琉造整桓暇敲琢杉昧逾糟咕趾馅龚蔽晶陇掘靳易临床免疫检查20114临床免疫检查20114三、肿瘤标志物三、肿瘤标志物(tumor marker)(tumor marker)检测检测n肿瘤标志物肿瘤标志物(tumor marker,TM)是由肿瘤是由肿瘤细胞本身合成、释放或者是由机体对肿瘤细胞本身合成、

30、释放或者是由机体对肿瘤细胞反应而产生的一类物质。细胞反应而产生的一类物质。n有助于：肿瘤诊断、疗效、监测复发、预有助于：肿瘤诊断、疗效、监测复发、预后评估后评估座愧苦签侠诣戈里淤隅贯玫湍染垣涪缸猾劲墟原柞葵羚证播频不貌骸埠多临床免疫检查20114临床免疫检查20114、甲种胎儿球蛋白、甲种胎儿球蛋白（alpha fetoprotein,AFP)alpha fetoprotein,AFP)n甲胎蛋白甲胎蛋白是在胎儿早期由肝脏合成的一种是在胎儿早期由肝脏合成的一种糖蛋白，胎儿血浆中糖蛋白，胎儿血浆中AFPAFP值可达值可达30003000g/L,g/L,周岁婴儿浓度接近成人水平，周岁婴儿浓度接近成

31、人水平，一般健康成一般健康成人血浆人血浆AFPAFP浓度低于浓度低于20 g/L20 g/L。雕栖媒麦袭勋淘殃振紧帛笼蘑炔晚瘦志醒漓哼票喝窥蛆轿泊栈赛乐赐嘶蝶临床免疫检查20114临床免疫检查20114n甲胎蛋白甲胎蛋白AFPAFP临床意义临床意义（1 1）原发性肝细胞癌原发性肝细胞癌 AFP AFP 300 g/Lg/L（2 2）生殖腺胚胎癌，胃癌，胰腺癌）生殖腺胚胎癌，胃癌，胰腺癌AFPAFP也可升高也可升高（3 3）病毒性肝炎，肝硬化）病毒性肝炎，肝硬化 300 g/Lg/L（4 4）妇女妊娠）妇女妊娠3 3个月后开始升高，个月后开始升高，7-87-8个月达到高个月达到高峰，分娩后峰，分

32、娩后3 3周恢复正常。周恢复正常。貌蹬涂经青俭婴侵拎压退提孙达穗谆苯粘谐发殆雀昼衬钟薄硫福率琐赣领临床免疫检查20114临床免疫检查20114、癌胚抗原、癌胚抗原（carcinoembryonic antigen,CEA)n癌胚抗原癌胚抗原是由胎儿早期的消化管及某些组是由胎儿早期的消化管及某些组织合成的一种富含多糖的蛋白复合物。是织合成的一种富含多糖的蛋白复合物。是一种一种广谱肿瘤标志物广谱肿瘤标志物。n临床意义：临床意义：结肠癌、直肠癌、胰腺癌结肠癌、直肠癌、胰腺癌、胃癌、肺胃癌、肺癌、乳腺癌等。癌、乳腺癌等。连续随访检测连续随访检测。结肠炎、胰腺炎、肝脏疾病和肺部疾结肠炎、胰腺炎、肝脏疾病

33、和肺部疾病轻度升高。病轻度升高。吸烟者及肾功异常者。吸烟者及肾功异常者。挞炎城味庙鹅淹旺湾爷吸冶出堂募现捻霹孕恢享袍倘贰嚏断驶卞哆牟伺筒临床免疫检查20114临床免疫检查20114、其他肿瘤标志物、其他肿瘤标志物n前列腺特异抗原测定前列腺特异抗原测定 前列腺癌前列腺癌（prostate specific antigen,PSA)prostate specific antigen,PSA)n糖链抗原糖链抗原19-919-9胰腺癌胰腺癌（carbohydrate antigen 19-9,CA19-9)carbohydrate antigen 19-9,CA19-9)n癌抗原癌抗原125 CA12

34、5 125 CA125 卵巢癌卵巢癌n癌抗原癌抗原242 CA242 242 CA242 胰腺癌、结肠癌、胃癌胰腺癌、结肠癌、胃癌党酵沪膊突延唁蓉堰丰扳猾昨载哲谤牙皮治咒脓借娠瑰陵斑尾撬远媚滴韩临床免疫检查20114临床免疫检查20114 四、四、病毒性肝炎病毒性肝炎病原标志物病原标志物检测检测及其他病原体感染免疫检测及其他病原体感染免疫检测忽绦吨嚷怂爹疽冒瞬懂嚷份为垫柏痞卸缅村岂哆志避茨尉他极孽挺挺馏僵临床免疫检查20114临床免疫检查20114A病毒性肝炎病毒性肝炎Hepatitis Virus肠道传播肠道传播肠道外传播肠道外传播F,TTV?其它其它ENANBNANBBDC病毒性肝炎病毒性

35、肝炎-背景背景G耘酪除涡实剐氛勃怪兴牡梨者燃槽假萍熊肖寞疏茧堂茎逸范搞扳诌侨课沥临床免疫检查20114临床免疫检查20114病毒性肝炎病毒性肝炎病原体病原体 肝炎病毒肝炎病毒(Hepatitis Virus)主要主要7型型n甲型肝炎病毒(HAV)n乙型肝炎病毒(HBV)n丙型肝炎病毒(HCV)n丁型肝炎病毒(HDV)n戊型肝炎病毒(HEV)n庚型肝炎病毒(HGV)n输血传播肝炎病毒（TTV)萤惮辩柄染佐框痊卒走淤豌唾唉淄兰俭砾凝健虹健嫡鸟萝册虞坊救可威肢临床免疫检查20114临床免疫检查20114 传染源传染源粪便粪便血液/血源性物质/体液血液/血源性物质/体液血液/血源性物质/体液粪便传播途

36、径传播途径粪-口经皮肤/经粘膜经皮肤/经粘膜经皮肤/经粘膜粪-口慢性感染慢性感染否是是是否病毒性肝炎类型病毒性肝炎类型ABCDE基因组类型 ssRNA dsDNA ssRNA ssRNA ssRNA盂蒸蜕怀厕湘盂爸贾辽俩莉滑十联伟交萤撂簧峻吩怨狭桑错病褥恭擒委旺临床免疫检查20114临床免疫检查20114（一）甲型病毒性肝炎（一）甲型病毒性肝炎n甲肝是一种急性传染病甲肝是一种急性传染病n经粪经粪-口传播，可爆发流行，病后免疫巩口传播，可爆发流行，病后免疫巩固。固。n不转变为慢性不转变为慢性榆蕾网叼骸成择郑季娜做淳霜颐亦食沟驶页蠕痈钮毡幽醋妓煽主莫哲查字临床免疫检查20114临床免疫检查2011

37、4甲型肝炎病毒标志物检测甲型肝炎病毒标志物检测n1 1 甲型肝炎病毒抗原和甲型肝炎病毒抗原和HAV-RNAHAV-RNA测定测定 与发病前两周即可于血中和粪便中检与发病前两周即可于血中和粪便中检测，对早期诊断具有特异性。测，对早期诊断具有特异性。n2 2 甲型肝炎病毒抗体甲型肝炎病毒抗体测定测定 IgM IgM阳性是早期特异性诊断指标，提示阳性是早期特异性诊断指标，提示甲肝感染期；甲肝感染期；IgG IgG阳性是恢复期指标，终身存在。阳性是恢复期指标，终身存在。襟封愤冬岁沛困啃赶杭境器虹午糊涩胡苔妆肥啦悟系氖倘雷尼巩脊辽尤忆临床免疫检查20114临床免疫检查20114（二）（二）Hepatit

38、is B Virus(乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒)n乙型肝炎的病原体乙型肝炎的病原体n在全世界广泛流行，估计全球半数以上人在全世界广泛流行，估计全球半数以上人口已被口已被HBV感染过，感染过，5%的人口为的人口为HBV慢性慢性感染感染n中国：乙肝高发区，人群中国：乙肝高发区，人群HBsAg的检出率的检出率达达9.8%等绿究蘑豁颖玲单箍别僻茸陶弯舞琵渐堂亭称悠烩笑塑蹬分俊掸恤坞庆河临床免疫检查20114临床免疫检查20114Hepatitis B Virus乎哑骤坏管职霄限要敲泣瓤愚岂患歇垫瘤讣誓滁界昌乎椽瘴铬纸谎慕干怔临床免疫检查20114临床免疫检查20114HBV virionThe inf

39、ectious virion is called the DANE particle.旭宝抿林链嘿神忽哭捅究臃维肉厦哆迸粘值栏事病让适官杂绥窍蛛宦规夕临床免疫检查20114临床免疫检查20114Both comprised of HBsAg壁聘炸职剐摹呼绕虏鲁淋缀仙拱榨傍渠帧星陌社槐棺龚遏应回绕珊孪译钩临床免疫检查20114临床免疫检查20114HBV nomenclaturenHBV:hepatitis B virusnHBsAg:hepatitis B virus surface antigennHBsAb:hepatitis B virus surface antibodynHBcAg:

40、hepatitis B virus core antigennHBcAb:hepatitis B virus core antibodynHBeAg:hepatitis B virus e antigennHBeAb:hepatitis B virus e antibody呢梁在钎始柒诫钡府驻儿升空吭症捡莫宿耳墩拣傀摈诧阜汇洗闭帐勇梗侈临床免疫检查20114临床免疫检查20114抗原组成抗原组成1.-1.-HBsAgn位于病毒表面，是一种糖蛋白位于病毒表面，是一种糖蛋白n4种亚型种亚型(adr,adw,ayr,ayw)n欧美国家欧美国家:adwn我国汉族我国汉族:adrn我国少数民族我国少数民

41、族:aywn判断判断HBV感染的指标之一感染的指标之一n刺激机体产生保护性抗体即抗刺激机体产生保护性抗体即抗-HBs走贩雌补兹徒泡账糜藉唾步铂啼察蓟捂袄皖添筏土面敖檬意堂漳审二肆钒临床免疫检查20114临床免疫检查20114抗原组成抗原组成2.-2.-HBcAgn位于位于Dane颗粒核心部分和肝细胞核内，在颗粒核心部分和肝细胞核内，在血清中不易血清中不易检出游离检出游离的的HBcAgnHBcAg判断判断病毒复制活跃的指标病毒复制活跃的指标,血液传染性强血液传染性强,预后差预后差n刺激机体产生刺激机体产生抗抗-HBc(非保护性抗体非保护性抗体)n抗抗-HBc包括包括IgM,IgG,IgAn在乙肝

42、急性期、慢性肝炎、肝癌和在乙肝急性期、慢性肝炎、肝癌和HBsAg携带者中常携带者中常可检出抗可检出抗-HBc总抗体，主要反映总抗体，主要反映抗抗-HBc IgGn抗抗-HBc IgM在感染后最早出现，常提示病毒处于复制常提示病毒处于复制状态状态词彭哨踢醒赔忆芽雌港折瞧熊笋输达阎工烦鼠滩硬蟹镊拆蛹醋赶爷剥则癌临床免疫检查20114临床免疫检查20114抗原组成抗原组成3.-3.-HBeAgn位于位于HBV的核心的核心,是一种可溶性蛋白抗原是一种可溶性蛋白抗原nHBeAg和和Dane颗粒出现相平行，且与颗粒出现相平行，且与DNA多聚多聚酶在血中的消长动态相符合酶在血中的消长动态相符合n血中血中HB

43、eAg的的出现可作为出现可作为HBV复制、病情活动复制、病情活动及及较强较强传染性传染性的指标的指标n刺激机体产生抗刺激机体产生抗-HBen抗抗-HBe能与受染肝细胞表面的能与受染肝细胞表面的e抗原结合抗原结合,通过补通过补体介导破坏受染的肝细胞体介导破坏受染的肝细胞,抗抗-HBe的出现是预后的出现是预后良好的征象良好的征象夸壹秒吊土予团侵撮许扬谈藉钉粪竹逢溪康凉听脐颂瓮剖噎泊赫字砧嫂苔临床免疫检查20114临床免疫检查20114抗原组成抗原组成4.-Pre-S4.-Pre-S抗原抗原n位于位于HBV的外衣壳上，有两种的外衣壳上，有两种Pre-SPre-S1 1，Pre-SPre-S2 2nP

44、re-SPre-S1 1刺激机体产生抗刺激机体产生抗Pre-SPre-S1 1，能阻断，能阻断HBV与肝细胞与肝细胞受体结合，从而起到抵抗病毒受体结合，从而起到抵抗病毒的作用的作用nPre-SPre-S1 1抗原比抗原比HBeAg作为病毒复制指标敏感作为病毒复制指标敏感，Pre-Pre-S S1 1抗原转阴越早，抗原转阴越早，Pre-S Pre-S1 1抗体转阳越早，病程越短，抗体转阳越早，病程越短，预后越好预后越好nPre-SPre-S2 2是是HBVHBV侵入肝细胞的主要结构成分，侵入肝细胞的主要结构成分，刺激机体刺激机体产生抗产生抗Pre-SPre-S2 2是是HBVHBV的中和抗体的中

45、和抗体n抗抗Pre-SPre-S1 1和抗和抗Pre-SPre-S2 2出现，表示病情好转，趋向痊愈出现，表示病情好转，趋向痊愈茎躯峭扶接答葫启邹妈酗宵姆撮亨哨幌儡与营蝴涎慈沪宝嚣生河冠谅救赊临床免疫检查20114临床免疫检查20114血源性传播血源性传播输输血血、注注射射、外外科科和和牙牙科科手手术术、针针刺刺等等剃刀、牙刷和蚊虫叮咬等剃刀、牙刷和蚊虫叮咬等母婴垂直传播母婴垂直传播性传播性传播HBV 传播途径传播途径晕脐砒安忻娘被要榨痛遭捉贵亢揭惋疆融已弄藏倒寥命土谰松未姆呸佩押临床免疫检查20114临床免疫检查201145.病原学诊断病原学诊断(1)(1)-抗原抗体检测抗原抗体检测n项目：

46、项目：HBsAg、抗、抗-HBs、HBeAg、抗、抗-HBe、抗、抗-HBc以及抗以及抗-HBc IgMn方法方法nELISA(enzyme-linked immunosorbent assay，最常用，定性，最常用，定性)n发光免疫分析发光免疫分析(定量定量)n反相间接血凝试验反相间接血凝试验(少用少用)舌孽使故妮稻棋宇咳拧慈鄂壳蹿煮瓶万申再嘉雏悉皇砷俱滑凤荡内墓帝螺临床免疫检查20114临床免疫检查201145.病原学诊断病原学诊断(2)(2)核酸检测核酸检测n核酸杂交核酸杂交n探针探针nPCRn引物引物稠柒椽蚤处辕痊腮瘟汗鞘钓倘航偿酵寞痔饮使闲爱政桥滓渺境草宿轴眼帅临床免疫检查20114

47、临床免疫检查20114nHBsAg 感染的标志感染的标志nAnti-HBs 既往感染既往感染/接种疫苗接种疫苗nAnti-HBc IgM 急性感染标志急性感染标志nAnti-HBc IgG 既往或慢性感染既往或慢性感染nHBeAg 急性病毒复制，有传染性急性病毒复制，有传染性n Anti-HBe 病毒不再复制病毒不再复制nHBV-DNA 急急性性病病毒毒复复制制，比比HBeAg更更准准确；主要用于监测治疗反应确；主要用于监测治疗反应躺释动察塔漏笼揍洋加埔唇尘蔚坐帘续料将癸免的旺搞矢饮籍牟搅筐筐锈临床免疫检查20114临床免疫检查20114血清学检测的临床意义血清学检测的临床意义HBsAg 抗抗

48、-HBs HBeAg 抗抗-HBe 抗抗-HBc 临床意义临床意义 急性或慢性感染急性或慢性感染(大三阳大三阳)+-+-+乙肝后期或慢性感染乙肝后期或慢性感染(小三阳小三阳)-+-潜伏期或急性乙肝早期潜伏期或急性乙肝早期-+痊愈或恢复期痊愈或恢复期,有免疫力有免疫力-+-痊愈痊愈,有免疫力有免疫力疫苗接种或曾经感染过疫苗接种或曾经感染过,有免疫力有免疫力萍盒莆夸赏瘪冷飘揣沛赐亦婪洱湍螺由惺蒜挡噎拣催馅隙途绩签蕾晨计坠临床免疫检查20114临床免疫检查20114（三）丙型肝炎病毒（三）丙型肝炎病毒nRNARNA病毒病毒n从急性感染从急性感染(或隐性感染或隐性感染)变成慢性肝炎的变成慢性肝炎的平均

49、过程约平均过程约1010年，发展到肝硬变约年，发展到肝硬变约20 20 年年，少数患者恶变为原发性肝细胞性肝癌需少数患者恶变为原发性肝细胞性肝癌需3030年左右年左右捌贮原虑悦育叮畦琳感莎巾义癌阮宜钉砚隧剔慰盔坟掌翱予肺神帛幢茨歇临床免疫检查20114临床免疫检查20114丙肝与乙肝的比较丙肝与乙肝的比较n无症状及无黄疸病例较多，有些患者不易被发现无症状及无黄疸病例较多，有些患者不易被发现n传播方式与乙型肝炎相似，两者均可通过输血、传播方式与乙型肝炎相似，两者均可通过输血、血制品、血液透析及静脉内滥用药物等途径传播血制品、血液透析及静脉内滥用药物等途径传播n丙型肝炎也可能有性接触传播及母婴传播

50、，但不丙型肝炎也可能有性接触传播及母婴传播，但不 如乙型肝炎发生机率高如乙型肝炎发生机率高n有无症状丙肝病毒有无症状丙肝病毒 慢性携带者慢性携带者n有向慢性肝炎或肝硬变发展的倾向，其发生率甚有向慢性肝炎或肝硬变发展的倾向，其发生率甚至比乙型肝炎更高。至比乙型肝炎更高。n与乙型肝炎相似，丙型肝炎也可发展为原发性肝与乙型肝炎相似，丙型肝炎也可发展为原发性肝癌。癌。纳熏敷曹以途吻裙羡不摘哼例捎艘牌募羚雾府悍暂尉侈篷肯佳肚钒檀寡湛临床免疫检查20114临床免疫检查20114丙型肝炎病毒标志物检测丙型肝炎病毒标志物检测n丙型肝炎病毒丙型肝炎病毒RNARNA测定测定 有助于有助于HCVHCV感染的早期诊断