食用菌三级菌种制作技术.pptx

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1、会计学1食用菌三级菌种制作技术食用菌三级菌种制作技术第一页，编辑于星期二：十一点 二十分。有关概念有关概念n n菌种：由人工方法培育出来的纯双核菌丝体。菌种：由人工方法培育出来的纯双核菌丝体。菌种：由人工方法培育出来的纯双核菌丝体。菌种：由人工方法培育出来的纯双核菌丝体。n n母种：由孢子或者组织分离而得到的最初菌种。母种：由孢子或者组织分离而得到的最初菌种。母种：由孢子或者组织分离而得到的最初菌种。母种：由孢子或者组织分离而得到的最初菌种。n n原种：将母种扩大到新培养基上培育出来的菌丝体。原种：将母种扩大到新培养基上培育出来的菌丝体。原种：将母种扩大到新培养基上培育出来的菌丝体。原种：将母

2、种扩大到新培养基上培育出来的菌丝体。n n栽栽栽栽培培培培种种种种：由由由由原原原原种种种种再再再再扩扩扩扩大大大大接接接接种种种种一一一一次次次次培培培培养养养养而而而而得得得得。直直直直接接接接应应应应用于生产。用于生产。用于生产。用于生产。n n消毒和灭菌。消毒和灭菌。消毒和灭菌。消毒和灭菌。第1页/共71页第二页，编辑于星期二：十一点 二十分。母 种原 种第2页/共71页第三页，编辑于星期二：十一点 二十分。栽培种第3页/共71页第四页，编辑于星期二：十一点 二十分。第一节第一节 制种场地、设备等制种场地、设备等一、制种场地一、制种场地一、制种场地一、制种场地二、常用设备二、常用设备二

3、、常用设备二、常用设备三、制种用具三、制种用具三、制种用具三、制种用具四、消毒药品四、消毒药品四、消毒药品四、消毒药品第4页/共71页第五页，编辑于星期二：十一点 二十分。一、一、制种场地制种场地闲闲闲闲散散散散房房房房屋屋屋屋均均均均可可可可用用用用。新新新新建建建建时时时时选选选选择择择择场场场场地地地地要要要要注注注注意意意意：交交交交通通通通方方方方便便便便，水电齐全，周围环境要卫生。水电齐全，周围环境要卫生。水电齐全，周围环境要卫生。水电齐全，周围环境要卫生。建建建建造造造造可可可可参参参参照照照照 “”字字字字型型型型房房房房，以以以以方方方方便便便便生生生生产产产产。包包包包括括

4、括括：配配配配料料料料室室室室、灭灭灭灭菌菌菌菌室室室室、冷冷冷冷却却却却室室室室、接接接接种种种种室室室室、菌菌菌菌种种种种培培培培养养养养室室室室、销销销销售售售售室以及库房等。室以及库房等。室以及库房等。室以及库房等。第5页/共71页第六页，编辑于星期二：十一点 二十分。第6页/共71页第七页，编辑于星期二：十一点 二十分。第7页/共71页第八页，编辑于星期二：十一点 二十分。二、二、常用设备常用设备（一）（一）拌料和装料设备拌料和装料设备（二）（二）灭菌设备灭菌设备（三）（三）接种设备接种设备（四）（四）培养设备培养设备 第8页/共71页第九页，编辑于星期二：十一点 二十分。（一）（一

5、）拌料和装料设备拌料和装料设备n拌拌料料设设备备：可可人人工工拌拌料料，也也可可用用拌拌料料机机，有有桶桶式式和和开开放放式式两两种。种。n装装料料设设备备：人人工工装装料料或或用用装装瓶瓶装装袋袋两两用用机机。关关键键是是料料的的松松紧紧度度，可可3-53-5人人合合作作，约约10001000袋袋/h/h。第9页/共71页第十页，编辑于星期二：十一点 二十分。第10页/共71页第十一页，编辑于星期二：十一点 二十分。（二）（二）灭菌设备灭菌设备vv根据灭菌压力：高压灭菌设备和常压灭菌设备。根据灭菌压力：高压灭菌设备和常压灭菌设备。根据灭菌压力：高压灭菌设备和常压灭菌设备。根据灭菌压力：高压灭

6、菌设备和常压灭菌设备。vv高高高高压压压压灭灭灭灭菌菌菌菌特特特特点点点点：温温温温度度度度高高高高，灭灭灭灭菌菌菌菌速速速速度度度度快快快快，灭灭灭灭菌菌菌菌彻彻彻彻底底底底，但但但但每次灭菌量小，投资较大。每次灭菌量小，投资较大。每次灭菌量小，投资较大。每次灭菌量小，投资较大。高高高高压压压压灭灭灭灭菌菌菌菌设设设设备备备备：手手手手提提提提式式式式高高高高压压压压灭灭灭灭菌菌菌菌锅锅锅锅。立立立立式式式式高高高高压压压压灭灭灭灭菌锅。菌锅。菌锅。菌锅。卧式高压灭菌锅。卧式高压灭菌锅。卧式高压灭菌锅。卧式高压灭菌锅。第11页/共71页第十二页，编辑于星期二：十一点 二十分。第12页/共71

7、页第十三页，编辑于星期二：十一点 二十分。第13页/共71页第十四页，编辑于星期二：十一点 二十分。vv常常常常压压压压灭灭灭灭菌菌菌菌特特特特点点点点：容容容容量量量量大大大大(0.5-1(0.5-1(0.5-1(0.5-1吨吨吨吨料料料料/次次次次)，投投投投资资资资小小小小，但时间长，灭菌效果较差。但时间长，灭菌效果较差。但时间长，灭菌效果较差。但时间长，灭菌效果较差。常常常常压压压压灭灭灭灭菌菌菌菌设设设设备备备备：常常常常压压压压灭灭灭灭菌菌菌菌灶灶灶灶、灭灭灭灭菌菌菌菌室室室室或或或或灭灭灭灭菌菌菌菌包包包包（可可可可利用节能型多功能蒸汽炉或普通锅炉）利用节能型多功能蒸汽炉或普通锅

8、炉）利用节能型多功能蒸汽炉或普通锅炉）利用节能型多功能蒸汽炉或普通锅炉）。第14页/共71页第十五页，编辑于星期二：十一点 二十分。第15页/共71页第十六页，编辑于星期二：十一点 二十分。第16页/共71页第十七页，编辑于星期二：十一点 二十分。第17页/共71页第十八页，编辑于星期二：十一点 二十分。（三三）接种设备接种设备n n洁净工作台：适合接母种和少量原种。洁净工作台：适合接母种和少量原种。洁净工作台：适合接母种和少量原种。洁净工作台：适合接母种和少量原种。n n接种箱：成本低，容量较大，适合各级菌种。接种箱：成本低，容量较大，适合各级菌种。接种箱：成本低，容量较大，适合各级菌种。接

9、种箱：成本低，容量较大，适合各级菌种。n n接种帐：适于接栽培袋，但效果稍差。接种帐：适于接栽培袋，但效果稍差。接种帐：适于接栽培袋，但效果稍差。接种帐：适于接栽培袋，但效果稍差。n n接种室：与接种帐类似。接种室：与接种帐类似。接种室：与接种帐类似。接种室：与接种帐类似。n n电炉和蒸汽接种：简易，成功率电炉和蒸汽接种：简易，成功率电炉和蒸汽接种：简易，成功率电炉和蒸汽接种：简易，成功率80%80%80%80%以上。以上。以上。以上。第18页/共71页第十九页，编辑于星期二：十一点 二十分。第19页/共71页第二十页，编辑于星期二：十一点 二十分。第20页/共71页第二十一页，编辑于星期二：

10、十一点 二十分。第21页/共71页第二十二页，编辑于星期二：十一点 二十分。第22页/共71页第二十三页，编辑于星期二：十一点 二十分。（四）四）培养设备培养设备n n培培培培养养养养室室室室：要要要要清清清清洁洁洁洁卫卫卫卫生生生生，有有有有调调调调温温温温设设设设备备备备。可可可可用用用用于于于于原原原原种种种种、栽栽栽栽培培培培种种种种培培培培养养养养，要要要要做做做做一一一一些些些些培培培培养养养养架架架架，便便便便于于于于菌菌菌菌种种种种检检检检查查查查和和和和提提提提高高高高空空空空间间间间利用率。利用率。利用率。利用率。n n电热恒温培养箱：温度可调，容积小。电热恒温培养箱：温度

11、可调，容积小。电热恒温培养箱：温度可调，容积小。电热恒温培养箱：温度可调，容积小。第23页/共71页第二十四页，编辑于星期二：十一点 二十分。第24页/共71页第二十五页，编辑于星期二：十一点 二十分。第25页/共71页第二十六页，编辑于星期二：十一点 二十分。三、三、制种用具制种用具、酒精灯；、酒精灯；、酒精灯；、酒精灯；、托盘天平；、托盘天平；、托盘天平；、托盘天平；、地泵；、地泵；、地泵；、地泵；、水桶、盆、铝锅；、水桶、盆、铝锅；、水桶、盆、铝锅；、水桶、盆、铝锅；、镊子；、镊子；、镊子；、镊子；、接种钩和接种铲；、接种钩和接种铲；、接种钩和接种铲；、接种钩和接种铲；、试管、菌种瓶和菌

12、种袋；、试管、菌种瓶和菌种袋；、试管、菌种瓶和菌种袋；、试管、菌种瓶和菌种袋；、漏斗；、漏斗；、漏斗；、漏斗；、电炉或煤炉；、电炉或煤炉；、电炉或煤炉；、电炉或煤炉；n n另另另另外外外外，还还还还需需需需温温温温度度度度计计计计、湿湿湿湿度度度度计计计计、量量量量筒筒筒筒和和和和量量量量杯杯杯杯、磨磨磨磨口口口口瓶瓶瓶瓶、塑料绳、报纸以及塑料绳、报纸以及塑料绳、报纸以及塑料绳、报纸以及pHpHpHpH试纸等。试纸等。试纸等。试纸等。第26页/共71页第二十七页，编辑于星期二：十一点 二十分。第27页/共71页第二十八页，编辑于星期二：十一点 二十分。四、消毒药品四、消毒药品1.75%1.75

13、%酒精酒精酒精酒精 2.40%2.40%甲醛高锰酸钾甲醛高锰酸钾甲醛高锰酸钾甲醛高锰酸钾3.3.汽雾消毒剂汽雾消毒剂汽雾消毒剂汽雾消毒剂 4.4.高锰酸钾（高锰酸钾（高锰酸钾（高锰酸钾（0 0.1%-0.2%.1%-0.2%）5.5%5.5%石炭酸石炭酸石炭酸石炭酸(苯酚苯酚苯酚苯酚)6.)6.1%-2%1%-2%来苏儿来苏儿来苏儿来苏儿7.2%-5%7.2%-5%漂白粉漂白粉漂白粉漂白粉 8.8.硫磺硫磺硫磺硫磺n n各种药品最好轮换使用，以防产生抗药性。各种药品最好轮换使用，以防产生抗药性。各种药品最好轮换使用，以防产生抗药性。各种药品最好轮换使用，以防产生抗药性。第28页/共71页第二十

14、九页，编辑于星期二：十一点 二十分。第二节第二节 三级菌种制作技术三级菌种制作技术一、母种制作技术一、母种制作技术一、母种制作技术一、母种制作技术（一）（一）（一）（一）母种培养基制备母种培养基制备母种培养基制备母种培养基制备 （二）组织分离法（二）组织分离法（二）组织分离法（二）组织分离法（三）母种的扩大（三）母种的扩大（三）母种的扩大（三）母种的扩大二、原种制作技术二、原种制作技术二、原种制作技术二、原种制作技术（一）原种培养基的制备（一）原种培养基的制备（一）原种培养基的制备（一）原种培养基的制备 （二）原种的制作（二）原种的制作（二）原种的制作（二）原种的制作三、栽培种制作技术三、栽培

15、种制作技术三、栽培种制作技术三、栽培种制作技术（一）栽培种培养基制备（一）栽培种培养基制备（一）栽培种培养基制备（一）栽培种培养基制备 （二）栽培种的制作（二）栽培种的制作（二）栽培种的制作（二）栽培种的制作四、菌种污染的原因及防止措施四、菌种污染的原因及防止措施四、菌种污染的原因及防止措施四、菌种污染的原因及防止措施第29页/共71页第三十页，编辑于星期二：十一点 二十分。一、母种制作技术一、母种制作技术n培养基的概念培养基的概念n常用的母种培养基配常用的母种培养基配方方n母种培养基的制作母种培养基的制作（一）母种培养基的制备（一）母种培养基的制备第30页/共71页第三十一页，编辑于星期二：

16、十一点 二十分。1.1.培养基的概念培养基的概念培养基是按照食用菌生长繁殖所培养基是按照食用菌生长繁殖所需要的各种营养，用人工方法配需要的各种营养，用人工方法配制而成的营养基质。制而成的营养基质。第31页/共71页第三十二页，编辑于星期二：十一点 二十分。2.2.母种培养基配方母种培养基配方(g/1000ml)除配方除配方1 1，其它均需加入，其它均需加入KHKH2 2POPO4 43 3克，克，MgSOMgSO4 4克，克，VBVB1 12 2片。片。编号土豆棉籽皮木屑发酵料麸皮葡萄糖琼脂蛋白胨120020202200202031001005020202-104100100502020552

17、0020205-10第32页/共71页第三十三页，编辑于星期二：十一点 二十分。3.3.母种培养基的制作母种培养基的制作PDAPDAPDAPDA培养基的制作过程：培养基的制作过程：培养基的制作过程：培养基的制作过程：煮煮煮煮土土土土豆豆豆豆，取取取取滤滤滤滤液液液液。开开开开锅锅锅锅后后后后，文文文文火火火火煮煮煮煮30303030minminminmin，适适适适当当当当搅搅搅搅拌拌拌拌，使营养充分溶出。使营养充分溶出。使营养充分溶出。使营养充分溶出。补补补补足足足足水水水水，加加加加药药药药品品品品溶溶溶溶化化化化。琼琼琼琼脂脂脂脂溶溶溶溶解解解解较较较较慢慢慢慢并并并并易易易易溢溢溢溢锅

18、锅锅锅，烧开后减小火力并搅拌烧开后减小火力并搅拌烧开后减小火力并搅拌烧开后减小火力并搅拌1min1min1min1min左右。左右。左右。左右。第33页/共71页第三十四页，编辑于星期二：十一点 二十分。分分分分装装装装试试试试管管管管。常常常常用用用用试试试试管管管管为为为为1818mmmm 180mm180mm，每每每每管管管管约约约约装装装装培培培培养基养基养基养基8-108-10mlml。加棉塞后。加棉塞后。加棉塞后。加棉塞后3 3个一把绑好。个一把绑好。个一把绑好。个一把绑好。kg/cmkg/cm2 2压压压压力力力力下下下下灭灭灭灭菌菌菌菌30-4030-40minmin。灭灭灭灭

19、菌菌菌菌程程程程序序序序：kg/cmkg/cm2 2时时时时，排排排排出出出出冷冷冷冷空空空空气气气气，关关关关闭闭闭闭放放放放气气气气阀阀阀阀。压压压压力力力力上上上上去去去去后后后后记记记记时时时时，维维维维持持持持所需时间。所需时间。所需时间。所需时间。第34页/共71页第三十五页，编辑于星期二：十一点 二十分。第35页/共71页第三十六页，编辑于星期二：十一点 二十分。kg/cmkg/cm2 2以以以以下下下下时时时时，缓缓缓缓慢慢慢慢放放放放气气气气，气气气气排排排排尽尽尽尽后后后后取取取取出出出出试试试试管管管管，趁热摆斜面，趁热摆斜面，趁热摆斜面，趁热摆斜面，4040以下即可凝固

20、。以下即可凝固。以下即可凝固。以下即可凝固。第36页/共71页第三十七页，编辑于星期二：十一点 二十分。母母种种培培养养基基制制作作流流程程第37页/共71页第三十八页，编辑于星期二：十一点 二十分。（二）菌种组织分离法（二）菌种组织分离法n组织分离的概念、种类和组织分离的概念、种类和特点特点n组织分离的方法组织分离的方法 第38页/共71页第三十九页，编辑于星期二：十一点 二十分。1.1.组织分离的概念、组织分离的概念、种类和特点种类和特点vv概概概概念念念念：是是是是指指指指在在在在双双双双核核核核菌菌菌菌丝丝丝丝的的的的组组组组织织织织上上上上切切切切取取取取一一一一块块块块组组组组织织

21、织织，使使使使其其其其在在在在培培培培养养养养基基基基上上上上萌萌萌萌发发发发而而而而获获获获得得得得纯纯纯纯双双双双核核核核菌菌菌菌丝丝丝丝体体体体的的的的方方方方法法法法。称称称称作原始母种。作原始母种。作原始母种。作原始母种。vv种种种种类类类类：据据据据切切切切取取取取组组组组织织织织的的的的来来来来源源源源，分分分分为为为为子子子子实实实实体体体体组组组组织织织织分分分分离离离离、菌核、菌索组织分离和基内菌丝组织分离。菌核、菌索组织分离和基内菌丝组织分离。菌核、菌索组织分离和基内菌丝组织分离。菌核、菌索组织分离和基内菌丝组织分离。vv特点：特点：特点：特点：简单易行；为无性繁殖。简单

22、易行；为无性繁殖。简单易行；为无性繁殖。简单易行；为无性繁殖。第39页/共71页第四十页，编辑于星期二：十一点 二十分。2.2.平菇子实体组织分离方法平菇子实体组织分离方法n n培养基制备。培养基制备。培养基制备。培养基制备。n n种种种种菇菇菇菇选选选选择择择择：是是是是指指指指用用用用来来来来进进进进行行行行组组组组织织织织分分分分离离离离的的的的子子子子实实实实体体体体。要要要要选选选选择择择择适适适适宜宜宜宜出出出出菇菇菇菇期期期期出出出出菇菇菇菇早早早早、出出出出菇菇菇菇整整整整齐齐齐齐、形形形形态态态态正正正正常常常常、无无无无病病病病虫虫虫虫害害害害、产产产产量量量量高高高高的的

23、的的栽栽栽栽培培培培袋袋袋袋，从从从从上上上上选选选选择择择择肥肥肥肥大大大大、肉肉肉肉厚、厚、厚、厚、6 6 6 6成熟的幼嫩子实体，切去多余菌柄。成熟的幼嫩子实体，切去多余菌柄。成熟的幼嫩子实体，切去多余菌柄。成熟的幼嫩子实体，切去多余菌柄。n n接种场地消毒。接种场地消毒。接种场地消毒。接种场地消毒。第40页/共71页第四十一页，编辑于星期二：十一点 二十分。n n种菇处理：表面消毒。种菇处理：表面消毒。种菇处理：表面消毒。种菇处理：表面消毒。n n接接接接种种种种过过过过程程程程：双双双双手手手手表表表表面面面面消消消消毒毒毒毒，把把把把种种种种菇菇菇菇带带带带入入入入接接接接种种种种

24、箱箱箱箱，点点点点燃燃燃燃酒酒酒酒精精精精灯灯灯灯，种种种种菇菇菇菇表表表表面面面面消消消消毒毒毒毒后后后后从从从从中中中中间间间间纵纵纵纵向向向向撕撕撕撕开开开开，用用用用无无无无菌菌菌菌小小小小镊镊镊镊子子子子夹夹夹夹取取取取菌菌菌菌柄柄柄柄、菌菌菌菌盖盖盖盖交交交交界界界界处处处处的的的的菌菌菌菌肉肉肉肉，迅迅迅迅速速速速放放放放入入入入培培培培养养养养基基基基上上上上，塞塞塞塞上上上上棉棉棉棉塞塞塞塞。特特特特殊殊殊殊种种种种类类类类：灵灵灵灵芝芝芝芝、金针菇、鸡腿菇等。金针菇、鸡腿菇等。金针菇、鸡腿菇等。金针菇、鸡腿菇等。第41页/共71页第四十二页，编辑于星期二：十一点 二十分。n

25、培培养养。适适宜宜条条件件下下，2-3天天组组织织块块上上即即萌萌发发出出菌菌丝丝，8-10天天可可长长满满。期期间间要要检检查查，从从中中选选留留无无污污染染、菌菌丝洁白浓密、长速正常的菌种。丝洁白浓密、长速正常的菌种。基基内内菌菌丝丝组组织织分分离离以以及及菌菌核核和和菌菌索索的的组组织织分分离离过过程类似，只是所取部位不同。程类似，只是所取部位不同。原始母种还可转接扩繁原始母种还可转接扩繁3-4次，以增加母种量。次，以增加母种量。长满后暂时不用的母种要置于长满后暂时不用的母种要置于2-5下冷藏。下冷藏。第42页/共71页第四十三页，编辑于星期二：十一点 二十分。第43页/共71页第四十四

26、页，编辑于星期二：十一点 二十分。第44页/共71页第四十五页，编辑于星期二：十一点 二十分。（三）母种的扩大（三）母种的扩大n n培养基的制备（同前）培养基的制备（同前）培养基的制备（同前）培养基的制备（同前）n n接种场地的消毒灭菌（同前）接种场地的消毒灭菌（同前）接种场地的消毒灭菌（同前）接种场地的消毒灭菌（同前）n n母种的扩大母种的扩大母种的扩大母种的扩大n n培养培养培养培养第45页/共71页第四十六页，编辑于星期二：十一点 二十分。3.3.母种的扩大母种的扩大qq要要要要严严严严格格格格无无无无菌菌菌菌操操操操作作作作。母母母母种种种种试试试试管管管管表表表表面面面面消消消消毒毒

27、毒毒，然然然然后后后后靠靠靠靠近近近近灯灯灯灯焰焰焰焰用用用用接接接接种种种种钩钩钩钩将将将将母母母母种种种种横横横横切切切切成成成成若若若若干干干干份份份份，再再再再用用用用接接接接种种种种铲铲铲铲将将将将横横横横切切切切的的的的母母母母种种种种分分分分成成成成2-32-32-32-3份份份份，取取取取一一一一份份份份带带带带1 1 1 1 2mm2mm2mm2mm厚厚厚厚的的的的培培培培养养养养基基基基放放放放入入入入新新新新的培养基斜面上。的培养基斜面上。的培养基斜面上。的培养基斜面上。第46页/共71页第四十七页，编辑于星期二：十一点 二十分。4.4.培培 养养qq在在在在适适适适宜宜

28、宜宜条条条条件件件件下下下下培培培培养养养养。2-32-32-32-3天天天天后后后后，检检检检查查查查菌菌菌菌丝丝丝丝的的的的生生生生长长长长及及及及杂杂杂杂菌菌菌菌污污污污染染染染情情情情况况况况，若若若若在在在在接接接接种种种种块块块块或或或或培培培培养养养养基基基基表表表表面面面面上上上上出出出出现现现现独独独独立立立立的的的的小小小小菌菌菌菌落落落落或或或或奶奶奶奶油油油油状状状状小小小小点点点点，即即即即为为为为污污污污染染染染，应应应应立即淘汰。立即淘汰。立即淘汰。立即淘汰。第47页/共71页第四十八页，编辑于星期二：十一点 二十分。二、原种制作技术二、原种制作技术（一）原种培养

29、基的制备（一）原种培养基的制备（二）原种的制作（二）原种的制作第48页/共71页第四十九页，编辑于星期二：十一点 二十分。（一）原种培养基的制备（一）原种培养基的制备（一）原种培养基的制备（一）原种培养基的制备1.1.1.1.常用原种培养基配方常用原种培养基配方常用原种培养基配方常用原种培养基配方(%)(%)(%)(%)麦粒预处理：麦粒预处理：冷水浸泡冷水浸泡1212小时后水煮，开锅后文火小时后水煮，开锅后文火2020minmin左右，麦粒煮左右，麦粒煮透，胀而不破，用水冷却后沥干表面水分，拌入石膏即可。透，胀而不破，用水冷却后沥干表面水分，拌入石膏即可。编号编号 麦粒麦粒 棉子皮棉子皮木屑木

30、屑麸皮麸皮玉米面玉米面蔗糖蔗糖石膏石膏1982265332377-8720-1012482105125414115126821512第49页/共71页第五十页，编辑于星期二：十一点 二十分。2.2.原种培养基制备原种培养基制备n n选定配方。分别称取各物质。选定配方。分别称取各物质。选定配方。分别称取各物质。选定配方。分别称取各物质。n n加加加加水水水水拌拌拌拌料料料料。含含含含水水水水量量量量约约约约60%60%65%65%，料料料料水水水水比比比比约约约约1:1.31:1.31.51.5。关关关关键键键键是是是是拌拌拌拌匀匀匀匀，用用用用量量量量少少少少的的的的水水水水溶溶溶溶性性性性物

31、物物物质质质质要要要要先先先先溶溶溶溶于水，再拌入料中。于水，再拌入料中。于水，再拌入料中。于水，再拌入料中。第50页/共71页第五十一页，编辑于星期二：十一点 二十分。n装装瓶瓶。常常用用容容器器为为750ml罐罐头头瓶瓶或或菌菌种种瓶瓶，每每瓶瓶装装干干料料3两两。料料要要装装匀匀，松松紧紧适适度度，装装至至瓶瓶肩肩下下1cm处，料面压平。处，料面压平。n打打洞洞封封口口。擦擦净净瓶瓶口口，中中央央打打直直径径2cm的的孔孔至至瓶瓶底底。用用两两层层报报纸纸和和一一层层聚聚丙丙烯烯膜膜封封口口。打打洞洞可可增加料底透气性。增加料底透气性。第51页/共71页第五十二页，编辑于星期二：十一点

32、二十分。第52页/共71页第五十三页，编辑于星期二：十一点 二十分。n n灭菌：高压灭菌或常压灭菌。灭菌：高压灭菌或常压灭菌。灭菌：高压灭菌或常压灭菌。灭菌：高压灭菌或常压灭菌。n n常常常常压压压压灭灭灭灭菌菌菌菌：视视视视灭灭灭灭菌菌菌菌量量量量，需需需需8 81010h h以以以以上上上上。注注注注意意意意：一一一一是是是是培培培培养养养养料料料料量量量量要要要要适适适适中中中中，物物物物品品品品排排排排列列列列合合合合理理理理，保保保保证证证证蒸蒸蒸蒸汽汽汽汽流流流流通通通通。二二二二是是是是大大大大火火火火猛猛猛猛烧烧烧烧，防防防防止止止止压压压压力力力力忽忽忽忽高高高高忽忽忽忽低低

33、低低。三三三三是是是是灭灭灭灭菌菌菌菌后后后后闷闷闷闷4 46h6h再出锅。再出锅。再出锅。再出锅。n n高高高高压压压压灭灭灭灭菌菌菌菌：2 2压压压压力力力力下下下下灭灭灭灭1.51.52 2h h，压压压压力力力力不不不不稳稳稳稳或或或或压压压压力力力力低时要延时。低时要延时。低时要延时。低时要延时。高压灭菌应注意高压灭菌应注意高压灭菌应注意高压灭菌应注意：第53页/共71页第五十四页，编辑于星期二：十一点 二十分。n n灭菌锅内冷空气必须排尽。否则会产生假蒸汽压。灭菌锅内冷空气必须排尽。否则会产生假蒸汽压。灭菌锅内冷空气必须排尽。否则会产生假蒸汽压。灭菌锅内冷空气必须排尽。否则会产生假

34、蒸汽压。n n培养基必须排放有序，蒸汽畅通。培养基必须排放有序，蒸汽畅通。培养基必须排放有序，蒸汽畅通。培养基必须排放有序，蒸汽畅通。n n灭灭灭灭菌菌菌菌完完完完毕毕毕毕应应应应缓缓缓缓慢慢慢慢减减减减压压压压。自自自自然然然然降降降降温温温温或或或或缓缓缓缓慢慢慢慢排排排排气气气气，防防防防止液体突然沸腾弄脏瓶塞，或瓶、袋胀破。止液体突然沸腾弄脏瓶塞，或瓶、袋胀破。止液体突然沸腾弄脏瓶塞，或瓶、袋胀破。止液体突然沸腾弄脏瓶塞，或瓶、袋胀破。n n棉棉棉棉塞塞塞塞防防防防湿湿湿湿。灭灭灭灭菌菌菌菌时时时时棉棉棉棉塞塞塞塞不不不不能能能能接接接接触触触触锅锅锅锅壁壁壁壁，并并并并盖盖盖盖报报报

35、报纸纸纸纸或或或或防防防防水水水水纸，防止冷凝水打湿棉塞。纸，防止冷凝水打湿棉塞。纸，防止冷凝水打湿棉塞。纸，防止冷凝水打湿棉塞。第54页/共71页第五十五页，编辑于星期二：十一点 二十分。第55页/共71页第五十六页，编辑于星期二：十一点 二十分。（二）原种的制作（二）原种的制作vv场地消毒：将料瓶和用具放入接种箱熏场地消毒：将料瓶和用具放入接种箱熏场地消毒：将料瓶和用具放入接种箱熏场地消毒：将料瓶和用具放入接种箱熏2h2h。vv接接接接种种种种：母母母母种种种种表表表表面面面面消消消消毒毒毒毒后后后后带带带带入入入入接接接接种种种种箱箱箱箱，点点点点燃燃燃燃酒酒酒酒精精精精灯灯灯灯，再再再

36、再次次次次对对对对试试试试管管管管外外外外壁壁壁壁消消消消毒毒毒毒。在在在在灯灯灯灯焰焰焰焰范范范范围围围围内内内内，用用用用接接接接种种种种钩钩钩钩将将将将母母母母种种种种分分分分成成成成4 46 6份份份份，取取取取一一一一份份份份放放放放入入入入料料料料面面面面中中中中部部部部，封封封封口口口口。两两两两人人人人合合合合作作作作既既既既好好好好又快。又快。又快。又快。vv培培培培养养养养：在在在在适适适适宜宜宜宜条条条条件件件件下下下下培培培培养养养养。定定定定期期期期检检检检查查查查。菌菌菌菌丝丝丝丝长长长长满后，再继续培养满后，再继续培养满后，再继续培养满后，再继续培养3 35 5天

37、。天。天。天。第56页/共71页第五十七页，编辑于星期二：十一点 二十分。第57页/共71页第五十八页，编辑于星期二：十一点 二十分。三、栽培种制作技术三、栽培种制作技术（一）（一）（一）（一）栽培种培养基的制备栽培种培养基的制备栽培种培养基的制备栽培种培养基的制备n n培养基配方：与原种培养基可以相同。培养基配方：与原种培养基可以相同。培养基配方：与原种培养基可以相同。培养基配方：与原种培养基可以相同。1.1.菌菌菌菌种种种种袋袋袋袋规规规规格格格格：选选选选用用用用聚聚聚聚丙丙丙丙烯烯烯烯或或或或高高高高密密密密度度度度聚聚聚聚乙乙乙乙烯烯烯烯塑塑塑塑料料料料袋袋袋袋。1732cm1732

38、cm，一一一一端端端端开开开开口口口口，每每每每袋袋袋袋装装装装干干干干料料料料6 6两两两两。1717 4 40cm0cm，两端开口，每袋装干料两端开口，每袋装干料两端开口，每袋装干料两端开口，每袋装干料1 1斤。斤。斤。斤。第58页/共71页第五十九页，编辑于星期二：十一点 二十分。n n拌料装袋，注意：拌料装袋，注意：拌料装袋，注意：拌料装袋，注意：n料松紧度适宜；袋壁光滑。料松紧度适宜；袋壁光滑。n料面要平，中间打孔，以利通气。料面要平，中间打孔，以利通气。n绳绳要要绑绑紧紧，尽尽量量排排除除袋袋内内空空气气，防止涨袋。防止涨袋。n n灭菌：与原种相同。灭菌：与原种相同。灭菌：与原种相

39、同。灭菌：与原种相同。第59页/共71页第六十页，编辑于星期二：十一点 二十分。（二）栽培种的制作（二）栽培种的制作n n场地消毒：同前。场地消毒：同前。场地消毒：同前。场地消毒：同前。n n接接接接种种种种方方方方法法法法：双双双双手手手手表表表表面面面面消消消消毒毒毒毒后后后后进进进进入入入入接接接接种种种种箱箱箱箱；原原原原种种种种表表表表面面面面消消消消毒毒毒毒，放放放放于于于于三三三三角角角角架架架架或或或或空空空空瓶瓶瓶瓶上上上上，瓶瓶瓶瓶口口口口表表表表面面面面消消消消毒毒毒毒、火火火火焰焰焰焰灭灭灭灭菌菌菌菌；用用用用镊镊镊镊子子子子把把把把菌菌菌菌种种种种扒扒扒扒成成成成1-

40、2cm1-2cm小小小小块块块块，均均均均匀匀匀匀接于料面，绑口。接于料面，绑口。接于料面，绑口。接于料面，绑口。第60页/共71页第六十一页，编辑于星期二：十一点 二十分。第61页/共71页第六十二页，编辑于星期二：十一点 二十分。n接种时注意：接种时注意：n接种过程应在酒精灯旁进行。接种过程应在酒精灯旁进行。n每每瓶瓶原原种种接接栽栽培培种种1015袋袋(两两头头接接种种)或或50瓶瓶左左右。右。n接种用具使用前表面消毒，火焰灭菌。接种用具使用前表面消毒，火焰灭菌。n接完种后，据接种量确定封口松紧度。接完种后，据接种量确定封口松紧度。n培养：同原种。培养：同原种。第62页/共71页第六十三

41、页，编辑于星期二：十一点 二十分。三级菌种生产的工艺流程三级菌种生产的工艺流程第63页/共71页第六十四页，编辑于星期二：十一点 二十分。四、菌种污染原因及防止措施四、菌种污染原因及防止措施（一一一一）常常常常见见见见杂杂杂杂菌菌菌菌种种种种类类类类：细细细细菌菌菌菌、酵酵酵酵母母母母菌菌菌菌、放放放放线线线线菌菌菌菌和和和和霉菌。霉菌。霉菌。霉菌。第64页/共71页第六十五页，编辑于星期二：十一点 二十分。第65页/共71页第六十六页，编辑于星期二：十一点 二十分。（二）污染原因及防止措施（二）污染原因及防止措施vv培培培培养养养养基基基基灭灭灭灭菌菌菌菌不不不不彻彻彻彻底底底底。表表表表现

42、现现现为为为为瓶瓶瓶瓶壁壁壁壁和和和和袋袋袋袋壁壁壁壁上上上上出出出出现现现现杂杂杂杂菌菌菌菌菌菌菌菌落落落落。原原原原因因因因：灭灭灭灭菌菌菌菌压压压压力力力力或或或或时时时时间间间间不不不不足足足足，或或或或者者者者高高高高压压压压灭灭灭灭菌菌菌菌时时时时锅锅锅锅内空气没有排尽。内空气没有排尽。内空气没有排尽。内空气没有排尽。措施措施措施措施：锅内空气排尽；保证灭菌压力和时间。：锅内空气排尽；保证灭菌压力和时间。：锅内空气排尽；保证灭菌压力和时间。：锅内空气排尽；保证灭菌压力和时间。第66页/共71页第六十七页，编辑于星期二：十一点 二十分。v菌种带杂菌。表现为菌种块周围首先污染。菌种带杂

43、菌。表现为菌种块周围首先污染。措施：选用纯正菌种。措施：选用纯正菌种。n接接种种操操作作中中污污染染。污污染染点点常常分分散散在在培培养养基基表表面面。原原因因：接种时无菌操作不严格。接种时无菌操作不严格。措措施施：接接种种场场所所及及工工具具消消毒毒、灭灭菌菌要要彻彻底底，接接种种操操作在灯焰形成的无菌区进行，并要敏捷迅速。作在灯焰形成的无菌区进行，并要敏捷迅速。第67页/共71页第六十八页，编辑于星期二：十一点 二十分。n n培培培培养养养养室室室室环环环环境境境境污污污污染染染染。培培培培养养养养室室室室环环环环境境境境不不不不卫卫卫卫生生生生，或或或或通通通通风风风风不不不不良良良良、

44、潮湿等导致棉塞等封口材料受潮而污染。潮湿等导致棉塞等封口材料受潮而污染。潮湿等导致棉塞等封口材料受潮而污染。潮湿等导致棉塞等封口材料受潮而污染。措施：选择清洁、高燥的场地作菌种培养室。措施：选择清洁、高燥的场地作菌种培养室。措施：选择清洁、高燥的场地作菌种培养室。措施：选择清洁、高燥的场地作菌种培养室。n n破破破破口口口口污污污污染染染染。灭灭灭灭菌菌菌菌操操操操作作作作或或或或运运运运输输输输中中中中不不不不小小小小心心心心，使使使使容容容容器器器器破破破破裂裂裂裂或出现微孔而污染。或出现微孔而污染。或出现微孔而污染。或出现微孔而污染。措措措措施施施施：灭灭灭灭菌菌菌菌操操操操作作作作或或

45、或或运运运运输输输输中中中中要要要要轻轻轻轻拿拿拿拿轻轻轻轻放放放放，所所所所用用用用器器器器具具具具不不不不能带毛刺。能带毛刺。能带毛刺。能带毛刺。结结 束束第68页/共71页第六十九页，编辑于星期二：十一点 二十分。本章重点本章重点 n n菌种的本质，三级菌种的概念。菌种的本质，三级菌种的概念。菌种的本质，三级菌种的概念。菌种的本质，三级菌种的概念。n n三级菌种的制作方法以及制作过程中应注意三级菌种的制作方法以及制作过程中应注意三级菌种的制作方法以及制作过程中应注意三级菌种的制作方法以及制作过程中应注意的问题。的问题。的问题。的问题。n n常用的消毒、灭菌方法。常用的消毒、灭菌方法。常用

46、的消毒、灭菌方法。常用的消毒、灭菌方法。结结 束束第69页/共71页第七十页，编辑于星期二：十一点 二十分。复习思考题复习思考题 n n什么是菌种？什么是菌种？什么是菌种？什么是菌种？n n什么是三级菌种？为什么要制作三级菌种？什么是三级菌种？为什么要制作三级菌种？什么是三级菌种？为什么要制作三级菌种？什么是三级菌种？为什么要制作三级菌种？n n消毒和灭菌的概念？常用消毒、灭菌方法有哪些？消毒和灭菌的概念？常用消毒、灭菌方法有哪些？消毒和灭菌的概念？常用消毒、灭菌方法有哪些？消毒和灭菌的概念？常用消毒、灭菌方法有哪些？n n如何提高制种的成功率和菌种质量？如何提高制种的成功率和菌种质量？如何提高制种的成功率和菌种质量？如何提高制种的成功率和菌种质量？n n菌种制备过程中常见的污染原因及防止措施有哪些？菌种制备过程中常见的污染原因及防止措施有哪些？菌种制备过程中常见的污染原因及防止措施有哪些？菌种制备过程中常见的污染原因及防止措施有哪些？第70页/共71页第七十一页，编辑于星期二：十一点 二十分。