体液中酶的生物化学检验ppt课件.ppt
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1、1 1、掌握掌握临床诊断中常用酶与同工酶的检测临床诊断中常用酶与同工酶的检测方法、参考区间及临床意义方法、参考区间及临床意义2 2、熟悉熟悉酶及同工酶的基本概念、分类与特征酶及同工酶的基本概念、分类与特征n本章教学要求:本章教学要求:1第一节第一节 概述概述2一、基本概念一、基本概念酶(酶(E):):具有催化作用的生物大分子,在具有催化作用的生物大分子,在生命进程中发挥着重要作用。除少数酶是生命进程中发挥着重要作用。除少数酶是核酸外,绝大多数酶是核酸外,绝大多数酶是蛋白质蛋白质酶的底物(酶的底物(S):):酶所催化的反应物酶所催化的反应物酶的产物(酶的产物(P):):酶促反应的生成物酶促反应的
2、生成物酶的活性:酶的活性:酶的催化能力的大小酶的催化能力的大小3二、酶的分类二、酶的分类单纯酶单纯酶结合酶结合酶 酶蛋白(蛋白质部分)酶蛋白(蛋白质部分)辅助因子辅助因子 辅酶(非共价键结合)辅酶(非共价键结合)辅基(共价键结合)辅基(共价键结合)1、酶分子的组成、酶分子的组成42、催化的反应性质、催化的反应性质1.氧化还原酶氧化还原酶2.转移酶转移酶3.水解酶水解酶4.裂合酶或裂解酶裂合酶或裂解酶5.异构酶异构酶6.合成酶或连接酶合成酶或连接酶酶的命名采用酶的命名采用系统命名法系统命名法临床常用酶的名称与编号临床常用酶的名称与编号ECEC编号编号习惯用名习惯用名英语缩写英语缩写ECEC编号编
3、号习惯用名习惯用名英语缩写英语缩写1.1.1.271.1.1.27乳酸脱氢酶乳酸脱氢酶LDLD、LDHLDH2.7.3.22.7.3.2肌酸激酶肌酸激酶CKCK、CPKCPK1.1.1.371.1.1.37苹果酸脱氢酶苹果酸脱氢酶MDMD、MDHMDH3.1.1.33.1.1.3脂肪酶脂肪酶LPSLPS1.1.1.411.1.1.41异柠檬酸脱氢酶异柠檬酸脱氢酶ICDICD、ICDHICDH3.1.1.83.1.1.8胆碱酯酶胆碱酯酶CHECHE1.1.1.491.1.1.496-6-磷酸葡萄糖脱氢酶磷酸葡萄糖脱氢酶G6PDHG6PDH3.1.3.13.1.3.1碱性磷酸酶碱性磷酸酶ALPAL
4、P、AKPAKP1.4.1.31.4.1.3谷氨酸脱氢酶谷氨酸脱氢酶GLDGLD、GLDHGLDH3.1.3.23.1.3.2酸性磷酸酶酸性磷酸酶ACPACP1.4.3.41.4.3.4单氨氧化酶单氨氧化酶MODMOD3.1.3.53.1.3.55-5-核苷酸酶核苷酸酶5-NT5-NT2.1.3.32.1.3.3鸟氨酸氨甲酰基转移酶鸟氨酸氨甲酰基转移酶OCTOCT3.2.1.13.2.1.1-淀粉酶淀粉酶AMYAMY、AMSAMS2.3.2.22.3.2.2-谷氨酰基转移酶谷氨酰基转移酶-GT-GT、GGTGGT3.2.1.303.2.1.30-N-N-乙酰乙酰(基基)-)-D D氨基葡萄糖苷
5、酶氨基葡萄糖苷酶NAGNAG2.4.1.12.4.1.1糖原磷酸化酶糖原磷酸化酶GPGP3.2.1.513.2.1.51-L-L-岩藻糖苷酶岩藻糖苷酶-FU-FU、AFUAFU2.5.1.182.5.1.18谷胱甘肽转移酶谷胱甘肽转移酶GSTGST3.4.23.13.4.23.1亮氨酸氨基肽酶亮氨酸氨基肽酶LAPLAP2.6.1.12.6.1.1门冬氨酸氨基转移酶门冬氨酸氨基转移酶ASTAST、GOTGOT4.1.2.134.1.2.13果糖二磷酸醛缩酶果糖二磷酸醛缩酶ALDALD2.6.1.22.6.1.2丙氨酸氨基转移酶丙氨酸氨基转移酶ALTALT、GPTGPT56三、同工酶三、同工酶同工
6、酶:同工酶:催化的化学反应相同,但酶蛋白催化的化学反应相同,但酶蛋白的分子结构、理化性质乃至免疫学性质不同的分子结构、理化性质乃至免疫学性质不同的一组酶。的一组酶。根据同工酶的来源和结构不同,从基因角根据同工酶的来源和结构不同,从基因角度可将其分为单基因决定的同工酶、复等位度可将其分为单基因决定的同工酶、复等位基因同工酶、多基因决定的同工酶和修饰同基因同工酶、多基因决定的同工酶和修饰同工酶四类。工酶四类。78四、血清酶四、血清酶血浆特异酶(血浆固有酶):血浆特异酶(血浆固有酶):凝血酶、纤凝血酶、纤溶酶、胆碱酯酶、铜氧化酶(铜蓝蛋白)、溶酶、胆碱酯酶、铜氧化酶(铜蓝蛋白)、脂蛋白酯酶等脂蛋白酯
7、酶等非血浆特异酶:非血浆特异酶:外分泌酶和细胞酶外分泌酶和细胞酶(一)分类(一)分类9(二)影响血清酶的因素(二)影响血清酶的因素1、生理变化、生理变化性别性别年龄年龄饮食饮食运动运动妊娠妊娠102、病理变化、病理变化(1)酶合成异常:大多数酶在肝脏合成)酶合成异常:大多数酶在肝脏合成(2)酶释放增加:酶从病变(或损伤)细)酶释放增加:酶从病变(或损伤)细胞中释放增加是疾病时大多数酶增高的原因胞中释放增加是疾病时大多数酶增高的原因(3)酶清除异常:同酶的半寿期以及其他)酶清除异常:同酶的半寿期以及其他一些因素有关一些因素有关血清酶的半寿期(血清酶的半寿期(T1/2):):指酶失活至原来活指酶失
8、活至原来活性一半时所需要的时间。半寿期长的酶,在性一半时所需要的时间。半寿期长的酶,在血清中持续时间长。血清中持续时间长。1112第二节第二节 临床诊断中常用的酶与同工酶临床诊断中常用的酶与同工酶一、丙氨酸氨基转移酶(一、丙氨酸氨基转移酶(ALT)也称也称谷丙转氨酶(谷丙转氨酶(GPT)一种参与人体蛋白一种参与人体蛋白质新陈代谢的酶,起加快体内蛋白质氨基酸质新陈代谢的酶,起加快体内蛋白质氨基酸在体内转化的作用,它广泛存在于人体各种在体内转化的作用,它广泛存在于人体各种组织、器官、肌肉、骨骼中,以组织、器官、肌肉、骨骼中,以肝细胞肝细胞的细的细胞浆中最多。胞浆中最多。13(一)检测方法(一)检测
9、方法连续监测法连续监测法可在可在340nm处连续监测处连续监测NADH的消耗量,从而的消耗量,从而计算出计算出ALT活性浓度。活性浓度。L-丙氨酸丙氨酸+-酮戊二酸酮戊二酸 -丙酮酸丙酮酸+L-谷氨酸谷氨酸 ALT-丙酮酸丙酮酸+NADH+H+乳酸乳酸+NAD+LD14(二)参考区间(二)参考区间男性:男性:9-50U/L 女性:女性:7-40U/L(三)临床意义(三)临床意义1、活性增高、活性增高(1)肝胆疾病:传染性肝炎、肝癌、中毒性)肝胆疾病:传染性肝炎、肝癌、中毒性肝炎、脂肪肝、胆管炎等肝炎、脂肪肝、胆管炎等(2)心血管疾病:心梗、心肌炎、脑出血等)心血管疾病:心梗、心肌炎、脑出血等(
10、3)药物和毒物)药物和毒物2、活性降低:、活性降低:磷酸吡哆醛缺乏症磷酸吡哆醛缺乏症15二、天冬氨酸氨基转移酶二、天冬氨酸氨基转移酶(AST)也称也称谷草转氨酶(谷草转氨酶(GOT),AST和和ALT是是人体内糖和蛋白质相互转变所需的酶。人体内糖和蛋白质相互转变所需的酶。AST广泛分布于全身各组织,尤其以广泛分布于全身各组织,尤其以心脏心脏、骨骼肌、肝脏、肾脏中最为丰富,在细胞骨骼肌、肝脏、肾脏中最为丰富,在细胞内定位于线粒体(内定位于线粒体(ASTm)和胞质)和胞质(ASTs)中,)中,70%为为ASTm16(一)检测方法(一)检测方法连续监测法连续监测法可在可在340nm处连续监测处连续监
11、测NADH的消耗量,从而的消耗量,从而计算出计算出AST活性浓度。活性浓度。L-天冬氨酸天冬氨酸+-酮戊二酸酮戊二酸 草酰乙酸草酰乙酸+L-谷氨酸谷氨酸 AST草酰乙酸草酰乙酸+NADH+H+L-苹果酸苹果酸+NAD+MD17(二)参考区间(二)参考区间8-40U/L (三)临床意义(三)临床意义活性增高活性增高(1)AST在在心肌细胞心肌细胞中含量最高,心中含量最高,心肌梗死时活性增高肌梗死时活性增高(2)各种肝病)各种肝病(3)肌炎、胸膜炎、肾炎、肺炎)肌炎、胸膜炎、肾炎、肺炎18三、三、-谷氨酰转移酶(谷氨酰转移酶(GGT)是一种含巯基的线粒体酶,参与体内谷胱甘是一种含巯基的线粒体酶,参
12、与体内谷胱甘肽的代谢。肾脏、肝脏和胰腺中含量丰富,肽的代谢。肾脏、肝脏和胰腺中含量丰富,但血清中但血清中GGT主要来自主要来自肝胆系统肝胆系统。GGT在肝在肝脏中广泛分布于肝细胞的毛细胆管一侧和整脏中广泛分布于肝细胞的毛细胆管一侧和整个胆管系统,因此肝内合成亢进或胆汁排出个胆管系统,因此肝内合成亢进或胆汁排出受阻时,血清中受阻时,血清中GGT升高。升高。19(一)检测方法(一)检测方法碱性条件下碱性条件下GCNA与甘氨酰甘氨酸反应的方法与甘氨酰甘氨酸反应的方法(二)参考区间(二)参考区间男性:男性:11-50U/L 女性:女性:7-32U/L 20(三)临床意义(三)临床意义1、肾脏疾病:、肾
13、脏疾病:血清中血清中GGT活性升高不明显活性升高不明显2、肝脏疾病:、肝脏疾病:(1)诊断恶性肿瘤肝转移和肝癌术后复发情况,阳性)诊断恶性肿瘤肝转移和肝癌术后复发情况,阳性率可达率可达90%(2)GGT同工酶同工酶II与与AFP联合检测可原发性肝癌的检联合检测可原发性肝癌的检测阳性率明显升高测阳性率明显升高3、嗜酒或长期服用某种药物、嗜酒或长期服用某种药物21四、肌酸激酶(四、肌酸激酶(CK)CK能催化高能磷酸键在肌酸和能催化高能磷酸键在肌酸和ATP之间转之间转换。为二聚体结构,由换。为二聚体结构,由M和和B两个亚基构成,两个亚基构成,可组成三种同工酶,可组成三种同工酶,CK-MM(主要存在于
14、(主要存在于骨骼肌中)、骨骼肌中)、CK-BB(脑、平滑肌)、(脑、平滑肌)、CK-MB(心肌)。(心肌)。22(一)检测方法(一)检测方法酶偶联法酶偶联法(二)参考区间(二)参考区间男性:男性:38-174U/L 女性:女性:26-140U/L 23(三)临床意义(三)临床意义1、心肌梗死:、心肌梗死:AMI发生后发生后4-8h,CK开始升高,开始升高,12-48h达高峰,可达正常上限的达高峰,可达正常上限的10-12倍,倍,2-4天后天后降至正常。降至正常。CK-MB是目前公认的诊断是目前公认的诊断AMI较有价较有价值的生化指标。值的生化指标。2、病毒性心肌炎、病毒性心肌炎3、皮肌炎、肌营
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