《造血细胞检验》PPT课件.ppt
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1、第二章第二章造血细胞检验造血细胞检验编辑制作 侯振江 李红岩 第二章 造血细胞检验第一节 骨髓细胞形态检查 血细胞从原始细胞血细胞从原始细胞逐渐发育为成熟细胞,逐渐发育为成熟细胞,具有一定的规律性。具有一定的规律性。细胞体积细胞体积 细胞核细胞核 细胞质细胞质 核质比核质比 一、骨髓细胞形态演变规律第二章 造血细胞检验 (一)细胞体积(一)细胞体积 原始细胞随着细胞的逐步成熟,其体积逐渐变小。原始细胞随着细胞的逐步成熟,其体积逐渐变小。但巨核细胞系例外,细胞由小变大;粒细胞中,早幼但巨核细胞系例外,细胞由小变大;粒细胞中,早幼粒细胞比原始粒细胞略大。粒细胞比原始粒细胞略大。一、骨髓细胞形态演变
2、规律一、骨髓细胞形态演变规律第二章 造血细胞检验 (二)细胞核(二)细胞核 1.1.大小大小 细胞核一般由大变小,但巨核细胞由细胞核一般由大变小,但巨核细胞由小变大。小变大。2.2.核形核形 由圆形或卵圆形逐渐变为凹陷由圆形或卵圆形逐渐变为凹陷,甚至甚至分叶(粒细胞、巨核细胞),但淋巴细胞和浆细分叶(粒细胞、巨核细胞),但淋巴细胞和浆细胞变化不明显,成熟红细胞核消失。胞变化不明显,成熟红细胞核消失。3.3.核质比例核质比例 一般由大逐渐变小。一般由大逐渐变小。一、骨髓细胞形态演变规律一、骨髓细胞形态演变规律第二章 造血细胞检验 4.4.核染色质及核仁核染色质及核仁 是衡量血细胞是否处于原是衡量
3、血细胞是否处于原始和幼稚阶段的重要指标之一。始和幼稚阶段的重要指标之一。5.5.核染色质核染色质 由疏松、细致到粗糙、紧密,并由疏松、细致到粗糙、紧密,并浓缩成块,甚至脱核(红系)浓缩成块,甚至脱核(红系)6.6.核膜核膜 一般由不清楚到清楚。一般由不清楚到清楚。7.7.核仁核仁 由清晰到模糊,最后消失。由清晰到模糊,最后消失。一、骨髓细胞形态演变规律一、骨髓细胞形态演变规律第二章 造血细胞检验 (三)细胞质(三)细胞质 1.1.胞质量胞质量 由少逐渐增多,但淋巴细胞系例由少逐渐增多,但淋巴细胞系例外。外。2.2.胞质颜色胞质颜色 从深蓝色逐渐变成淡蓝或淡从深蓝色逐渐变成淡蓝或淡红色(粉红色)
4、,淋巴细胞仍保持淡蓝色(嗜红色(粉红色),淋巴细胞仍保持淡蓝色(嗜碱性)。碱性)。一、骨髓细胞形态演变规律一、骨髓细胞形态演变规律 3.3.胞质颗粒胞质颗粒 从无到有,由少到多。粒细胞从无到有,由少到多。粒细胞系的颗粒由非特异性到特异性,可分为嗜酸性、系的颗粒由非特异性到特异性,可分为嗜酸性、嗜碱性、中性三种颗粒。红细胞无颗粒。嗜碱性、中性三种颗粒。红细胞无颗粒。(四)核质比(四)核质比 一般由大变小。一般由大变小。一、骨髓细胞形态演变规律一、骨髓细胞形态演变规律第二章 造血细胞检验一、骨髓细胞形态演变规律一、骨髓细胞形态演变规律第二章 造血细胞检验血细胞发育演变规律图血细胞发育演变规律图二、
5、骨髓细胞形态特征二、骨髓细胞形态特征原始粒细胞原始粒细胞早幼粒细胞早幼粒细胞中性分叶核粒细胞中性中幼粒中性中幼粒中性晚幼粒中性晚幼粒中性杆状核粒细胞中性杆状核粒细胞中性分叶核粒细胞中性分叶核粒细胞二、骨髓细胞形态特征二、骨髓细胞形态特征原红细胞原红细胞中幼红细胞中幼红细胞晚幼红细胞晚幼红细胞早幼红细胞早幼红细胞成熟红细胞成熟红细胞二、骨髓细胞形态特征二、骨髓细胞形态特征二、骨髓细胞形态特征二、骨髓细胞形态特征原淋巴细胞原淋巴细胞幼淋巴细胞幼淋巴细胞 淋巴细胞淋巴细胞二、骨髓细胞形态特征二、骨髓细胞形态特征原巨核细胞原巨核细胞幼巨核细胞幼巨核细胞颗粒巨核细胞颗粒巨核细胞产血小板巨核细胞产血小板巨
6、核细胞血小板血小板二、骨髓细胞形态特征二、骨髓细胞形态特征原单核细胞原单核细胞幼单核细胞幼单核细胞单核细胞单核细胞二、骨髓细胞形态特征二、骨髓细胞形态特征原浆细胞原浆细胞幼浆细胞幼浆细胞浆细胞浆细胞第二章 造血细胞检验 三、骨髓中类似细胞的鉴别 骨髓中有许多相似的细胞,分类时存在着一骨髓中有许多相似的细胞,分类时存在着一定困难,在熟练掌握各种细胞形态的基础上,重定困难,在熟练掌握各种细胞形态的基础上,重点把握它们的区别要点,才能正确划分其归属。点把握它们的区别要点,才能正确划分其归属。第二章 造血细胞检验原始粒细胞原始粒细胞原始红细胞原始红细胞胞体胞体1018微米1520微米,可见瘤状突起胞浆
7、胞浆透明,天蓝色不透名,深蓝色,有油画感,核周有淡染区染色质染色质细砂粒状,均匀平坦如薄纱粗颗粒状,不均匀核膜核膜不清楚清楚核仁核仁25个,较小,清晰12个,较大,界限不清(一)原始粒细胞与原始红细胞的鉴别(一)原始粒细胞与原始红细胞的鉴别 三、骨髓中类似细胞的鉴别第二章 造血细胞检验原始红原始红 三、骨髓中类似细胞的鉴别三、骨髓中类似细胞的鉴别第二章 造血细胞检验(二)原始粒细胞、原始淋巴细胞、原始单核细胞的鉴别原始粒细胞原始粒细胞原始淋巴细胞原始淋巴细胞原始单核细胞原始单核细胞胞体胞体1018微米,圆形较规则1018微米,圆形规则1520微米,圆形或不规则形,有伪足样突起胞浆胞浆天蓝色,透
8、明天蓝色,透明,有核周淡染区灰蓝色,不透明核型核型圆形或椭圆形圆形或椭圆形圆形或不规则形,有折叠纤细网状染色质染色质细致的砂粒状,平坦,如薄纱颗粒状,稍粗纤细网状核膜核膜不清楚核膜浓厚,界限不清不清楚核仁核仁25个,较小,清晰12个,小而明显13个,大而清晰 三、骨髓中类似细胞的鉴别三、骨髓中类似细胞的鉴别第二章 造血细胞检验原始淋巴细胞原始淋巴细胞第二章 造血细胞检验(三)单核细胞与中性中幼粒细胞的鉴别单核细胞单核细胞中性中幼粒细胞中性中幼粒细胞胞体胞体圆形或不规则形,可见伪足圆形,规则胞浆胞浆灰蓝,半透明,含无数散在粉尘样嗜天青颗粒,有时可见空泡淡红或淡蓝,透明,含中等量、大小较一致的特异
9、性中性颗粒胞核胞核不规则,可呈肾形、马蹄形、S形或分叶形,有明显的扭曲、折叠椭圆或一侧开始扁平,可出现凹陷染色质染色质粗网状,疏松聚集成索块 三、骨髓中类似细胞的鉴别三、骨髓中类似细胞的鉴别第二章 造血细胞检验 三、骨髓中类似细胞的鉴别三、骨髓中类似细胞的鉴别第二章 造血细胞检验 三、骨髓中类似细胞的鉴别三、骨髓中类似细胞的鉴别第二章 造血细胞检验 三、骨髓中类似细胞的鉴别三、骨髓中类似细胞的鉴别第二章 造血细胞检验(四)中幼红细胞、浆细胞、淋巴细胞鉴别中幼红细胞中幼红细胞浆细胞浆细胞淋巴细胞淋巴细胞胞体胞体圆形椭圆形圆形胞浆胞浆嗜多色性,不透明,无颗粒蓝色,不透明有泡沫感,有时可见红色镶边,
10、边缘不规则,近核处有淡染区,常有空泡,可见颗粒天蓝色,透明,有核周淡染区,可见颗粒胞核胞核圆形,居中圆形或椭圆形,常偏位圆形,常偏一侧,有切迹染色质染色质粗密成块,如打碎的墨砚,中间有明显空隙,无色泽极粗密,凝成大块,似车轮状,中间有明显空隙,有色泽呈大块状,块与块之间无明显界限,有均匀光滑感 三、骨髓中类似细胞的鉴别三、骨髓中类似细胞的鉴别第二章 造血细胞检验中幼红细胞中幼红细胞淋巴细胞淋巴细胞 三、骨髓中类似细胞的鉴别三、骨髓中类似细胞的鉴别第二章 造血细胞检验(五五)形态上不典型细胞的划分形态上不典型细胞的划分 造血细胞的发育是连续不断的过程,其阶段造血细胞的发育是连续不断的过程,其阶段
11、划分是人为的,可见到介于两个阶段之间的划分是人为的,可见到介于两个阶段之间的“过过渡型渡型”细胞。细胞。通常细胞质和细胞核的发育是彼此同步的,但通常细胞质和细胞核的发育是彼此同步的,但有时也可能速度不同,称为有时也可能速度不同,称为“核浆发育不平衡核浆发育不平衡”。三、骨髓中类似细胞的鉴别三、骨髓中类似细胞的鉴别第二章 造血细胞检验一般认为无论胞核或胞质,凡出现下一阶一般认为无论胞核或胞质,凡出现下一阶段特征的细胞,应归为较成熟阶段的细胞。段特征的细胞,应归为较成熟阶段的细胞。极难鉴别介于两个系统之间的细胞,在正极难鉴别介于两个系统之间的细胞,在正常情况下如介于浆细胞与幼稚红细胞之间的细常情况
12、下如介于浆细胞与幼稚红细胞之间的细胞,可划分为红细胞系;介于淋巴细胞与幼稚胞,可划分为红细胞系;介于淋巴细胞与幼稚红细胞之间的细胞,在骨髓中归为红细胞系,红细胞之间的细胞,在骨髓中归为红细胞系,在外周血则归为淋巴细胞。在外周血则归为淋巴细胞。三、骨髓中类似细胞的鉴别三、骨髓中类似细胞的鉴别第二章 造血细胞检验对于实在难以确定类型的细胞,可列入对于实在难以确定类型的细胞,可列入“分分类不明细胞类不明细胞”,出现较多时,可通过电镜、细胞,出现较多时,可通过电镜、细胞化学染色、免疫学等方法鉴别。化学染色、免疫学等方法鉴别。血细胞的形态受涂片制备和染色的影响较大,血细胞的形态受涂片制备和染色的影响较大
13、,在识别细胞时须与同一张涂片上的其他细胞比较,在识别细胞时须与同一张涂片上的其他细胞比较,切不可把单个细胞孤立起来,或机械地与图谱上切不可把单个细胞孤立起来,或机械地与图谱上典型的细胞进行比较,应根据细胞各方面的特征典型的细胞进行比较,应根据细胞各方面的特征全面综合分析,不可单凭个别特征下结论全面综合分析,不可单凭个别特征下结论。三、骨髓中类似细胞的鉴别三、骨髓中类似细胞的鉴别第二章 造血细胞检验第二节 骨髓细胞形态学检查骨髓象骨髓象检查检查一、概述一、概述(一)适应证和禁忌证(一)适应证和禁忌证 .适应证适应证 包括贫血、出血、白血病;包括贫血、出血、白血病;全血细胞减少、白细胞增多伴有幼稚
14、细胞、考虑血液全血细胞减少、白细胞增多伴有幼稚细胞、考虑血液寄生虫病(如黑热病、疟疾等)、骨髓转移瘤和异常蛋白寄生虫病(如黑热病、疟疾等)、骨髓转移瘤和异常蛋白血症等;血症等;不明原因的发热,肝、脾、淋巴结肿大,胸骨压痛、恶不明原因的发热,肝、脾、淋巴结肿大,胸骨压痛、恶病质。病质。凡遇上述情况之一,都可进行骨髓穿刺,以前三种最为常见。凡遇上述情况之一,都可进行骨髓穿刺,以前三种最为常见。第二章 造血细胞检验一、概述一、概述.禁忌证禁忌证 严重出血的血友病患者,禁忌作骨髓穿刺;严重出血的血友病患者,禁忌作骨髓穿刺;晚期孕妇慎做;晚期孕妇慎做;小儿及不合作者不宜作胸骨穿刺。小儿及不合作者不宜作胸
15、骨穿刺。第二章 造血细胞检验一、概述一、概述第二章 造血细胞检验二、标本采集(一)骨髓取材的部位(一)骨髓取材的部位 首选髂骨,其次是胸骨、棘突首选髂骨,其次是胸骨、棘突 。由于胸骨穿。由于胸骨穿刺有一定的危险性,故首选髂前或髂后上棘。刺有一定的危险性,故首选髂前或髂后上棘。2 2岁以下小儿主张用胫骨粗隆穿刺。岁以下小儿主张用胫骨粗隆穿刺。必必要要时时应应多多部部位位取取材材,以以便便全全面面了了解解骨骨髓髓的的造血情况。造血情况。二、标本采集(二)(二)常见骨髓穿刺部位的特点常见骨髓穿刺部位的特点 穿刺部位特 点髂后上棘此部位骨质薄,进针容易,骨髓液丰富,被血液稀释的可能性小,故髂后上棘为临
16、床上首选的穿刺部位髂前上棘此部位骨质硬、骨髓腔小,易导致穿刺失败,所以髂前上棘常用于翻身困难、需多部位穿刺等患者胸骨胸骨是人体骨髓造血功能最旺盛的部位,但胸骨后有重要脏器,故临床上不常用。当其他常规部位穿刺取材不佳时,可考虑胸骨穿刺,但必须由操作经验丰富的人员来做其他部位小于2岁患者还可选择胫骨头内侧。其他还包括腰椎棘突穿刺、定位穿刺。定位穿刺临床上常用于骨髓转移癌、浆细胞瘤等第二章 造血细胞检验例:骼后上棘穿刺术例:骼后上棘穿刺术 患患者者侧侧卧卧,其其上上面面的的腿腿向向胸胸部部弯弯曲曲,下下面面的的腿腿伸伸直直,使使腰腰骸骸部部向向后后突突出出,髂髂后后上上棘棘明明显显突突出出于于臀臀部
17、部之之上上。也也可可在在相相当当于于第第5 5腰腰椎椎水水平平,向向上上约约3 3cmcm,用用手手触触摸摸其其钝钝圆圆形形突突起处。此处骨密质薄,骨髓腔大,容易刺入。起处。此处骨密质薄,骨髓腔大,容易刺入。用用碘碘酒酒、酒酒精精消消毒毒局局部部,戴戴消消毒毒手手套套,将将孔孔布布的的孔孔口对准并盖于已消毒的穿刺部位。口对准并盖于已消毒的穿刺部位。注注射射2%2%的的普普鲁鲁卡卡因因1 12 2m1m1,麻麻醉醉局局部部皮皮肤肤、皮皮下下组组织并深至骨膜,揉摩注射处,使药液扩大麻醉范围。织并深至骨膜,揉摩注射处,使药液扩大麻醉范围。二、标本采集 以以左左手手拇拇指指和和食食指指将将穿穿刺刺部部
18、位位的的皮皮肤肤压压紧紧固固定定,右右手手持持穿穿刺刺针针与与骨骨棘棘面面垂垂直直,旋旋转转刺刺入入髂髂后后上上棘棘,达达骨骨髓髓腔腔时有空松感,深度约为针头达骨膜后再刺入时有空松感,深度约为针头达骨膜后再刺入l cml cm左右。左右。拔拔出出针针芯芯,接接l0 l0 mlml干干燥燥注注射射器器,轻轻轻轻负负压压抽抽取取,抽抽取骨髓液不超过取骨髓液不超过0.20.2mlml,立即置载玻片上,并涂片。立即置载玻片上,并涂片。必必要要时时再再取取骨骨髓髓液液0.50.52 2m1m1,置置肝肝素素抗抗凝凝管管内内,作作有核细胞计数等项检查。有核细胞计数等项检查。拔出穿刺针,压迫伤口,敷以消毒纱
19、布。拔出穿刺针,压迫伤口,敷以消毒纱布。二、标本采集 第二章 造血细胞检验 骨髓取材满意的指标:骨髓取材满意的指标:(1)(1)抽吸骨髓时,病人有特殊的酸痛感。抽吸骨髓时,病人有特殊的酸痛感。(2)(2)骨髓液抽取应在骨髓液抽取应在0.20.2mlml以内,否则易于稀释。以内,否则易于稀释。(3)(3)骨髓涂片中含有骨髓小粒或脂肪滴。骨髓涂片中含有骨髓小粒或脂肪滴。(4)(4)显显微微镜镜检检查查,可可见见骨骨髓髓的的特特有有细细胞胞,如如巨巨核核细细胞胞、浆浆细细胞胞、组组织织细细胞胞、组组织织嗜嗜碱碱细细胞胞、成成骨骨细细胞、破骨细胞等。胞、破骨细胞等。(5)(5)髓髓细细胞胞分分类类,中
20、中性性杆杆状状核核粒粒细细胞胞与与分分叶叶核核粒粒细胞之比大于血涂片。细胞之比大于血涂片。二、标本采集 第二章 造血细胞检验 取材失败取材失败 部部分分稀稀释释:骨骨髓髓有有核核细细胞胞减减少少,成成熟熟细细胞胞比例增加。比例增加。完全稀释:无骨髓成分,与血片一样。完全稀释:无骨髓成分,与血片一样。二、标本采集 第二章 造血细胞检验骨髓穿刺一般由临床医生操作,其注意事项如下:骨髓穿刺一般由临床医生操作,其注意事项如下:.严严格格无无菌菌,预预防防感感染染。初初诊诊患患者者于于治治疗疗前前作作骨骨髓髓穿穿刺刺以以明明确确诊诊断断。死死亡亡病病例例需需检检查查时时,应应在在死死亡亡半半小小时时内内
21、进进行。行。.抽抽吸吸骨骨髓髓液液时时动动作作要要缓缓慢慢,吸吸取取量量以以0.10.10.20.2m1m1为为宜宜,抽抽吸吸骨骨髓髓液液用用力力过过大大、过过快快,易易使使骨骨髓髓抽抽吸吸量量过过多多(0.20.2m1m1)造造成成稀稀释释。需需做做有有核核细细胞胞计计数数、细细菌菌培培养养、造造血血细细胞胞培培养养、红红斑斑狼狼疮疮细细胞胞检检查查时时,再再抽抽吸吸0.50.52.0 2.0 m1m1骨髓液肝素抗凝送检。骨髓液肝素抗凝送检。(三)(三)标本采集的质量保证标本采集的质量保证二、标本采集 第二章 造血细胞检验 .多多部部位位穿穿刺刺可可提提高高某某些些疾疾病病的的诊诊断断率率。
22、如如慢慢性性再再障障、恶恶性性组组织织细细胞胞病病等等,多多发发性性骨骨髓髓瘤瘤、转转移移癌癌等等宜宜在在X X线线检检查查发发现现有有病病变变或或有有骨骨压压痛痛的的部部位位穿穿刺刺,可提高阳性率。可提高阳性率。二、标本采集 第二章 造血细胞检验干抽(干抽(dry tapdry tap)是指非技术操作或穿刺不是指非技术操作或穿刺不当而抽不出骨髓液或只抽到少量血液。常见于:当而抽不出骨髓液或只抽到少量血液。常见于:.原发性和继发性骨髓纤维化症。原发性和继发性骨髓纤维化症。.骨骨髓髓极极度度增增生生,细细胞胞过过于于紧紧密密结结实实,如如白白血病、真性红细胞增多症等。血病、真性红细胞增多症等。.
23、骨髓增生减低,如再生障碍性贫血。骨髓增生减低,如再生障碍性贫血。.肿肿瘤瘤骨骨髓髓浸浸润润,包包括括恶恶性性淋淋巴巴瘤瘤、多多发发性性骨髓瘤、骨髓转移癌。骨髓瘤、骨髓转移癌。(四)干抽(四)干抽二、标本采集 第二章 造血细胞检验当发生干抽时,有时在针头中可有少量骨髓当发生干抽时,有时在针头中可有少量骨髓组织,如用针心将其推出,可制作一张涂片供检组织,如用针心将其推出,可制作一张涂片供检查。一般可更换部位再行穿刺,部分病例(如骨查。一般可更换部位再行穿刺,部分病例(如骨髓纤维化)必须作骨髓活检。髓纤维化)必须作骨髓活检。二、标本采集 第二章 造血细胞检验 三、骨髓涂片、染色及其质量保证 骨髓涂片
24、及染色方法,与血涂片基本相同,骨髓涂片及染色方法,与血涂片基本相同,但含有骨髓小粒和脂肪,有核细胞数量多,较血但含有骨髓小粒和脂肪,有核细胞数量多,较血液浓稠,推片时角度要略小,速度要慢,涂片过液浓稠,推片时角度要略小,速度要慢,涂片过厚可影响细胞形态观察。厚可影响细胞形态观察。第二章 造血细胞检验 骨髓涂片和染色的注意事项:骨髓涂片和染色的注意事项:1.1.载玻片要洁净。载玻片要洁净。2.2.推玻片与载玻片之间成推玻片与载玻片之间成3030角为宜,角度越小,推片速角为宜,角度越小,推片速度越慢,骨髓涂片越薄。度越慢,骨髓涂片越薄。3.3.抽取骨髓液后应立即制备骨髓涂片。选择含骨髓小粒多抽取骨
25、髓液后应立即制备骨髓涂片。选择含骨髓小粒多的标本作涂片效果更佳。的标本作涂片效果更佳。4.4.涂片一般不用抗凝剂。涂片一般不用抗凝剂。5.5.体积较大的特殊细胞多在片尾和边缘。体积较大的特殊细胞多在片尾和边缘。6.6.涂片制成后,应在空气中快速摇动或扇干,不能用火烤。涂片制成后,应在空气中快速摇动或扇干,不能用火烤。三、骨髓涂片、染色及其质量保证 第二章 造血细胞检验7.7.骨髓中有核细胞较多,涂片固定和染色时间骨髓中有核细胞较多,涂片固定和染色时间较血涂片稍长,以保证幼稚细胞着色均匀,结构清较血涂片稍长,以保证幼稚细胞着色均匀,结构清晰。染色时间的长短与气温、染料的性质有关。晰。染色时间的长
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