影响酶活性的因素实验设计精.ppt

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1、影响酶活性的因素实验设计第1页，本讲稿共21页唾液淀粉酶对淀粉的消化唾液淀粉酶对淀粉的消化 第2页，本讲稿共21页一、目的n1、了解酶的特异性。n2、了解温度、pH值、激活剂和抑制剂等因素对酶反应速度的影响。n3、掌握检查酶的特异性，酶的激活剂和抑制剂影响酶反应速度的方法及原理。第3页，本讲稿共21页二、原理n酶是生物体中具有催化功能的蛋白质，因此也叫生物催生剂。生物体内存在多种多样的酶，从而使生物体在温和的条件下能迅速完成复杂的生物化学反应。第4页，本讲稿共21页特异性n酶具高度的特异性。所谓特异性是指一种酶能对一种化合物或一类化合物起催化作用，而不能对别的物质发生催化反应。n淀粉和蔗糖无还

2、原性。唾液淀粉酶水解溶粉生成有还原性的麦芽糖，但不能催化蔗糖水解。蔗糖酶能催化蔗糖水解产生还原性的葡萄糖和果糖，但不能催化淀粉水解，用Benedict试剂检查糖的还原性。第5页，本讲稿共21页温度和pHn温度和pH对酶的活性有显著的影响，使反应速度达最大反应值时的温度称为某种酶作用的最适温度。使反应速度达最大反应值时的温度称为某种酶作用的最适温度。大多数动物酶的最适温度为3740，植物酶的最适温度为5060n能使酶表现其活性最高时的pH值称为该酶的最适pH值，不同酶的最适pH值不同。第6页，本讲稿共21页酶的抑制剂与激活剂 n酶的活性常受某些物质的影响，能使酶活性增加的物质称为酶的激活剂，能使

3、酶的活性降低的物质称为酶的抑制剂。n氯离子为唾液淀粉酶的激活剂，铜离子为其抑制剂。第7页，本讲稿共21页三、材料、试剂与器具第8页，本讲稿共21页（一）试剂n蒸馏水蒸馏水n1%淀粉液淀粉液n1%蔗糖液蔗糖液n0.1%尿素液尿素液n大豆尿素酶溶液大豆尿素酶溶液n0.1%CuSO4n0.1%HgCl2n0.1%NaCln1M NaOHn0.5M H2SO4n纳氏试剂纳氏试剂n班氏试剂班氏试剂n碘液碘液n各种各种pH缓冲液：缓冲液：5.0；6.8；8.0第9页，本讲稿共21页（二）器具n控温水浴锅（每个实验室控温水浴锅（每个实验室3个）个）n制冰机制冰机n电磁灶电磁灶n不锈钢锅不锈钢锅n白瓷板白瓷板

4、n试管、滴管、移液管（试管、滴管、移液管（1-2ml）第10页，本讲稿共21页四、操作步骤第11页，本讲稿共21页（一）酶的特异性第12页，本讲稿共21页管号1231%淀粉（滴）10101%蔗糖（滴）10稀释唾液（滴）55煮沸过稀释唾液（滴）5PH6.8缓冲液（滴）101010各管混匀，置37 水10minBenedicty试剂（滴）202020n取试管3支，编号，按下表进行操作第13页，本讲稿共21页将上述各试管放沸水中煮3-5min观察并记录现 象 解释结果 第14页，本讲稿共21页（二）酶的激活剂及抑制剂第15页，本讲稿共21页n取试管3支，编号，按下表进行操作管号1231%淀粉（滴）1

5、01010稀释唾液（滴）1010101%硫酸铜溶液 51%氯化钠溶液 5蒸馏水 101010各管混匀，置37 水10min碘化钾碘溶液（滴）333第16页，本讲稿共21页观察并记录现 象 解释结果 第17页，本讲稿共21页（四）pH对酶活性的影响第18页，本讲稿共21页取3支试管，按下表编号后进行实验。管号1231%淀粉（滴）101010PH5缓冲液10_PH6.8缓冲液_10_PH8.0缓冲液_10稀释唾液（滴）101010第19页，本讲稿共21页（1）摇匀后，将各管置于37水浴中处理（2）每隔1min从pH6.8的试管中取出1滴,反应液 滴于预先滴加稀碘液的白瓷板上，观察其颜色变化。（3）待颜色呈棕色时，向各管中加稀碘液1-3滴。观察各管颜色，比较各管中淀粉水解的程度，解释pH对酶活性的影响第20页，本讲稿共21页观察并记录现 象 解释结果 第21页，本讲稿共21页