食品卫生微生物学检验菌落总数检查操作程序(共4页).doc
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1、精选优质文档-倾情为你奉上菌落总数检查操作程序1 实验前准备1.1 稀释水、刻度吸管、平皿稀释水:瓶装PH值7.0无菌生理盐水,塞上胶塞,按高压蒸气灭菌操作程序,121湿热灭菌30分钟。取0.2ml、1ml、5ml、10ml刻度吸管、平皿置于金属容器中,140干热灭菌2小时。1.1.1 培养基准备:平板计数琼脂培养基以上实验所需干粉培养基均由中检所提供,分别按说明加适量水加热溶解后,塞上胶塞,湿热灭菌30分钟备用。1.1.2 无菌衣将无菌衣、头罩、口罩、乳胶手套叠好,置于无菌衣袋中,湿热灭菌30分钟。1.2 无菌室及操作台的准备用0.1%的新洁尔灭溶液或75%乙醇溶液将操作台,天花板,墙壁,地
2、面擦洗一遍,同时将操作台用0.1%新洁尔灭溶液或75%乙醇溶液擦洗一遍。将实验所需物品通过传递窗移入无菌室,打开空气净化系统,打开紫外灯,杀菌0.5-1个小时。2 实验操作2.1 进入无菌室更衣间,用0.1%新洁尔灭溶液或75%乙醇溶液消毒手及腕部至少一分钟,戴上头罩、口罩,穿好无菌衣及无菌手套后,进入无菌室,开始实验操作。菌落总数操作程序选择2-3个适宜稀释度的样品匀液,各取1ml分别放入无菌皿内检样25g(ml)样品225ml稀释液,均质10倍系列稀释选择2-3个适宜稀释度的样品匀液,各取1ml分别放入无菌皿内每皿中加入15-20ml平板计数琼脂培养基,混匀培养计算菌落总数报告计数各平板菌
3、落数2.2 供试液的稀释及操作2.2. 1 固体:取供试品25g,加无菌生理盐水225ml,溶解混匀,作为1:10的供试液。2.2.2 液体:取供试品25 ml,加无菌生理盐水225ml,溶解混匀,作为1:10的供试液。2.2.3 用1ml无菌吸管或微量移液器吸取1:10样品匀液1 ml,沿管壁缓慢注于盛有9 ml稀释液的无菌试管中,振摇试管或换用1支无菌吸管反复吹打使其混合均匀,制成1:100的样品匀液。2.2.4 按以上操作程序,制备10倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次,换用1次1 ml无菌吸管或吸头。2.2.5 根据对样品污染状况的估计,选择2-3个适宜稀释度的样品匀液(液体样品可包括
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