皮肤性病科梅毒螺旋体检查技术操作规范.docx

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1、皮肤性病科梅毒螺旋体检查技术操作规范一、梅毒螺旋体检查【适应证】早期梅毒。【禁忌证】无特殊禁忌。【操作方法及程序】1 .暗视野显微镜检查(1)多取材于硬下疳溃疡面、扁平湿疣及黏膜斑表面、淋巴结抽出液。先用无菌生理盐水清洗皮损处，用钝刀刮除皮损表面组织，擦净，挤压 周围组织，使血清及组织液渗出，吸取液体涂片，在暗视野显微镜下检查。(3)结果以查见梅毒螺旋体为阳性。2 .免疫荧光染色检查(1)上述取材后，用已知抗梅毒螺旋体抗血清，加非致病性螺旋体培养物进 行吸收，再用异硫氟酸荧光素(FITC)标记，文寸梅毒螺旋体染色。(2)荧光显微镜下见到亮绿色螺旋体为阳性。3 .组织切片染色用改良的莱瓦弟(Le

2、voaditis)镀银染色，可显示皮肤及内脏器 官中梅毒螺旋体，呈黑褐色。二、梅毒血清学检查(-)非梅毒螺旋体抗原试验【适应证】1 .临床可疑人群常规检查；大量人群筛选检查。2 .定量指标观察疗效，是否再发，是否再感染。3 .发现潜伏梅毒感染者。【禁忌证】无特殊禁忌。【试验方法】1 .性病研究实验室试验(venereal disease research laboratory test, VDRL)用心 磷脂、磷脂酰胆碱(卵磷脂)及胆固醇为抗原，与机体产生的反应素发生颗粒凝集 和沉淀反应。可稀释做定量反应。2 .不加热血清反应素试验(unheated serum reagin test?USR

3、)用改良的VDRL抗 原，血清可不必加热灭活，抗原不必每天配制。3 .快速血浆反应素环状卡片试验(r apid plasma reagin c i rcle card t est, R P R)基本原理与USR相同，但在抗原中加入药用炭(活性炭)颗粒，判定结果 可在肉眼下进行。也可稀释做定量反应。【结果判定】( + + + + )有大块状的颗粒和聚合团块(+ + + )有中块状的颗粒和聚合团块(+)有小块状的颗粒聚合物(+-)有小块聚合颗粒，均匀分布 颗粒细小、混悬，无聚合现象定量用生理盐水按1:8、1:16、1:32稀释，判定阳性标准同上。(二)梅毒蝶旋体抗原试验【适应证】诊断梅毒有高敏感性

4、和高特异性，常被用作梅毒的确证试验。应注意到：梅 毒患者该类拭验呈阳性反应后，约有9 5%的患者虽经足量治疗，其血清阳性 反应终生不变，因此不能作为疗效观察、复发或再感染的判定指征。【禁忌证】无特殊禁忌。【试验方法】L荧光密螺旋体抗体吸收试验用间接免疫荧光技术检测血清中抗梅毒螺旋 体抗体。有高敏感性和高特异性。4 .梅毒螺旋体血球凝集试验是以梅毒螺旋体为抗原的间接血球凝集试验， 是一种特异性和敏感性均较高而且操作较简单的方法。目前有两种试验：一种即 T P H A ,另一种为梅毒螺旋体颗粒凝集试验(treponema pallidum particle agglutination test,

5、TP- P A )。两种方法都用超声波粉碎的N i c h o I株螺旋体悬 液为抗原，前者用甲醛处理的羊红细胞作抗原载体，后者用纯化的明胶颗粒作 抗原载体。5 .梅毒螺旋体停动试验(treponema pallidum immobilization test, TPI)梅毒患者血清中含有一种在补体存在时能使螺旋体停动的抗体。该试验阳性 结果出现得早，但应注意在一期梅毒的晚期、二期梅毒的早期和中期血清峰值 开始下降。【注意事项】梅毒螺旋体检杳阳性对梅毒的诊断提供了重要依据，但确诊梅毒常需要接 触史、临床症状、实验室检查综合判定。梅毒血清试验可能出现技术性假阳性和 生物学假阳性反应，特别是非梅毒螺旋体抗原试验。