皮肤性病科皮肤试验技术操作规范.docx

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1、皮肤性病科皮肤试验技术操作规范一、斑贴试验二、划破试验.三、皮内试验.四、挥发性变应原(空气播散)试验.五、变应原检测体外试验皮肤变应原检测是通过皮肤反应来确定过敏性疾病患者的致敏物质，有助于 指导患者预防和治疗过敏性疾病，特别是对明确职业性皮肤病的致病原因具有重 要意义。常用的变应原检测方法包括:斑贴试验、划破试验、皮内试验和变应原 检测体外试验等。一、斑贴试验斑贴试验(patch test)用于测定迟发型变态反应。【适应证】L接触性皮炎。2 .职业性皮肤病。3 .化妆品皮炎。4 .湿疹等。【禁忌证】L皮炎急性期。5 .孕妇。【操作方法及程序】1 .受试部位一般取上背部脊柱两侧的正常皮肤。若

2、皮脂过多，可用75%乙 醇轻轻擦拭，然后用生理盐水清洗待干。2 .去除斑试器的保护纸，将变应原按顺序置于惰性聚乙烯塑料或铝制斑试器 内。排列顺序为自上至下，自左至右，并做标记。3 .将加有变应原的斑试器胶带自上至下贴敷在受试部位，并用手掌轻压，以 排除空气。4 .观察结果。于48h去除斑试器，待30mm后观察结果，贴敷后72h再次观 察结果，必要时于贴敷后1周进行第3次观察。【结果判定】1 .(-)阴性(无反应)2 . ( 士 可疑阳性(仅有轻度红斑)3 .(+)弱阳性(红斑、浸润、可有少量丘疹)4 .( + + )中阳性(红斑、浸润、丘疹、水疱)5 .( + + + )强阳性 (红斑、浸润、

3、丘疹、大疱)【注意事项】L须嘱受试者，如发生强烈剌激反应，应及时去除斑试器。2 .受试前2周和受试期间不要内服皮质类固醇，受试前3d和受试期间应停 用抗组胺类药物。3 .受试期间不宜洗澡、饮酒，避免搔抓斑试部位，尽量减少出汗，减少日光 照射。4 .应保持斑试器在皮肤上48h,尽量不要过早去除斑试器。受试部位要有标 记。贴敷牢固、紧密，避免出现假阴性。5 .应对患者的实际接触致敏物进行斑贴试验。6 .如果在贴敷后72h至贴敷后1周内斑试部位出现红斑、瘙痒等情况，应及 时来医院检查。7 .注意区分变态反应与刺激反应，排除假阳性和假阴性。二、划破试验戈ij破试验(scratch test)用于测试速

4、发型变态反应。【适应证】1 .各型尊麻疹2 .特应性皮炎3药疹4 .过敏性鼻炎5 .哮喘等【禁忌证】L高敏体质者6 .有过敏性休克史者【操作方法及程序】1 . 一般选择前臂屈侧为受试部位，局部清洁消毒。2 .用消毒的种痘刀或针尖，轻轻划数条长0.3-0. 5cm的划痕，两个受试部位 间要有4-5cm距离，深度以无明显出血为宜。3 .在划痕上滴生理盐水1滴，然后将受试物涂于划痕上，混合均匀，留一划 痕仅滴生理盐水，作阴性对照。4 .20min后，用消毒蒸储水洗净划痕上受试物，观察反应变化。【结果判定】1 .(-)阴性 (无变化，与阴性对照一致)2 . ()可疑阳性(红斑或风团直径V5rmn,与阴

5、性对照稍有差别)3 .( + )弱阳性(红斑或风团直径=5mm,与阴性对照有明显差别)4 .( + + ) 阳性(红斑或风团直径510mm,并有明显红晕)5 .( + + +)强阳性(红斑或风团直径有明显红晕及伪足)【注意事项】L必须先测定受试者皮肤有无皮肤划痕症。6 .所用的受试物应清洁、无刺激性。7 .结果为阴性时，应继续观察3s4d。必要时，34周后重复试验。8 .应排除由原发性刺激引起的假阳性反应。9 .应准备肾上腺素注射液，抢救可能发生的过敏性休克。10 受试前2d应停用抗组胺类药物。三、皮内试验皮内试验(intracutaneous test)主要用于测试速发型变态反应。原理同划破

6、 试验，反应结果较划破试验阳性率高，较准确，但偶可发生过敏性休克。【适应证】L各型尊麻疹。2 .特应性皮炎。3 .药疹。4 .过敏性鼻炎、哮喘等。【禁忌证】1 .高敏体质者。2 .有过敏性休克史者。3 .5岁以下儿童。【操作方法及步骤】1 .一般选择前臂屈侧为受试部位，局部清洁消毒。2 .将欲试抗原以无菌生理盐水适当稀释，以皮试注射器分别吸取0. 1mL注 射于受试部位皮内。同时注射多种抗原时，应在注射部位做标记。3 .另取一注射器吸取0.1ml无菌生理盐水，注射于对侧前臂屈侧相应注射部 位，或同臂原注射部位的下方465cm处，作为阴性对照。4 .注射后20-30min观察速发型反应24s48

7、h后观察迟发型反应，必要时连 续观察工周。【结果判定】1 .速发型反应 注射后20s30min,局部出现直径11. 5cm的红斑或风团为 阳性。2 .迟发型反应注射后开始出现红斑或凤团，至24h达最高峰，或24s48h 或更长时间后开始出现此种反应。麻风菌素的迟发反应可达21do3 .阴性反应局部无变化，与阴性对照一致。【注意事项】L若出现过敏性休克，应立即皮下注射0.1%肾上腺素0.5ml立即吸氧，静 滴皮质类固醇，并根据情况采取其他急救措施。4 .阴性对照处应无变化，否则应重做。若结果为阴性而有可疑者，可增加欲 试抗原浓度，重复试验。5 .观察结果时，应注意假阳性及假阴性反应。四、挥发性变

8、应原（空气播散）试验用于检测挥发性变应原。适应证漆性皮炎等【操作方法及步骤】L将受试物质的原液或稀释于不同浓度挥发性溶媒中的稀释液，盛于小瓶或 试管中。6 .试验时用管口或瓶口接触受试者皮肤，以胶布固定。7 .经过1020min去除小瓶或试管，观察结果。【结果判定】L阳性反应受试处皮肤有红肿现象。8 .阴性反应受试处皮肤无明显变化。【注意事项】L避免受试液沾染皮肤。9 .观察结果时，应注意假阳性及假阴性反应。10 应注意由原发性刺激引起的假阳性反应。五、变应原检测体外试验于体外对人血清或血浆中的变应原特异性IgE抗体进行定性检测，较上述在 体试验安全、痛苦小、特异性高、操作简便。可通过放射性免

9、疫吸附法、酶免疫 分析法和金标法检测受试者血液中的特异性IgE抗体。【适应证】1 .各型琴麻疹。2 .特应性皮炎。3 .药疹。4 .过敏性鼻炎。5 .哮喘等。【操作方法及步骤】L标本的收集和预处理取静脉血，分离血清或血浆。2 .严格按照所选用试剂盒说明书的步骤进行加样、反应和显色。3 .根据显色的速度和强度观察结果。【结果判定】颜色从浅到深的变化速度与颜色的深度和患者血清标本中IgE抗体或免疫球 蛋白的滴度成比例。1 .强变态反应 在5min内很快出现较深的颜色。2 .弱变态反应出现颜色变化的时间5min。3 .阴性反应 颜色同阴性对照。【注意事项】1 .不能使用大量溶血和严重高血脂的血液标木。避免标本中有颗粒性物质。2 .不能凭任何单个实验结果作出最终临床诊断，只有临床医师在所有的临床 特征和实验结果的基础上才能作出最后的诊断。3 .患者摄人胆固醇后可影响血清抗体的测定水平。4 .寄生虫病患者可产生IgE抗体，使血清中的滴度升高，出现假阳性。5 .本试验为筛选试验，阴性结果并不能排除受试者对其他变应原的敏感性。