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1、付兑市石事阳光实验学校【走向高考】高三生物一付兑市石事阳光实验学校【走向高考】高三生物一轮复习轮复习 1 1 基因工程练习基因工程练习一、选择题1(2015质检)抗菌肽对治疗癌症有一作用,下图表示抗菌肽合成过程。下列有关叙述错误的是()克隆目导入毕筛选甲醇诱导分离功能的基因赤酵母菌菌种抗菌肽表达纯化研究A用 PCR 克隆目的基因不需要 DNA 解旋酶B基因表达载体含有启动子和终止子C筛选菌种时用基因探针检测相关蛋白质D分离纯化的目的是获得较纯净的抗菌肽答案C解析检测相关蛋白质利用抗原抗体杂交法。2.(2014)一环状 DNA 分子,设其长度为1,已知某种限制性核酸内切酶在该分子上有 3 个酶切
2、位点,如图中A、B、C 三处。如果该 DNA 分子在 3 个酶切位点上都被该酶切断,则会产生 0.2、0.3、0.5 三种不同长度的 DNA 片段。现有多个上述 DNA 分子,若在每个分子上至少有 1 个酶切位点被该酶切断;则从理论上讲,经该酶切后,这些DNA 分子最多能产生长度不同的线状 DNA 的种类数是()A4B8C6D7答案C解析本题考查限制酶的作用,在此环状 DNA 上可以切 13 个位点,切 1 个位点得到长度为 1 的片段,切 2 个位点可以得到长度为 0.5、0.2、0.8、0.3、0.7共 5 种片段,切 3 个位点可以得到 0.2、0.3、0.5 共 3 种长度的片段,总共
3、能获得 6 种不同的 DNA 片段。3(2015质检)下列关于转基因动物的描述,不正确的是()A可将外源生长激素基因导入动物细胞内,提高动物的生长速率B可将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组,降低乳汁中乳糖的含量,进而改善畜产品的品质C可利用转基因技术制成乳腺生物反器,使哺乳动物的产奶量增加D可以利用转基因动物作为器官移植的供体答案C解析可利用转基因技术制成乳腺生物反器,使哺乳动物本身变成“批量生产药物的工厂”,选项 C 错误。4.如图表示化学方法合成目的基因的过程。据图分析下列叙述正确的是()A过程需要 DNA 连接酶B过程需要限制性核酸内切酶C目的基因的碱基序列是已知的D若某质粒能与目的基因重组,
4、则该质粒与的碱基序列相同答案C解析DNA 连接酶是将两个DNA 分子的黏性末端或平末端的”缝隙”连接起来,而过程是两条链的碱基互补配对,不需要 DNA 连接酶,A 项错误;限制性核酸内切酶是用来切割 DNA 的,而过程不需要,B 项错误;当某质粒与目的基因用限制酶切割后有互补的黏性末端,就可以形成重组 DNA 分子,D 项错误。5(2014期末)下列有关蛋白质工程的叙述,不正确的是()A收集大量的蛋白质分子结构的信息,以便分析结构与功能之间的关系B可以预测具有一氨基酸序列的蛋白质的空间结构和生物功能C根据特的生物功能,设计蛋白质的氨基酸序列和空间结构D根据人们的需要,直接对氨基酸的分子结构进行
5、重设计答案D解析蛋白质工程是按照以下思路进行的:确蛋白质的功能蛋白质有的结构蛋白质具备的折叠状态有的氨基酸序列有的碱基序列创造出自然界不存在的蛋白质,因此 A、B、C 项正确;蛋白质工程是通过对基因的改造来实现对蛋白质的改造,而不是直接对氨基酸的分子结构进行重设计,D 项错误。二、非选择题6许多大肠杆菌的质粒上含有 lacZ 基因,其编码的产物 半乳糖苷酶在 Xgal 和 IPTG 存在下,可以产生蓝色沉淀,使菌落呈现蓝色,否则菌落呈现白色。基因工程中常利用该原理从导入质粒的受体细胞中筛选出真正导入重组质粒的细胞,过程如下图所示。请据图回答:(1)基因工程中,构建基因表达载体的目的是_。(2)
6、限制酶 EcoR 的识别序列和切割位点是GAATTC,Sma 的识别序列和切割位点是CCCGGG。图中目的基因被切割下来和质粒连接之前,需在目的基因的右侧连接相的末端,连接的末端序列是_,连接过程中需要的基本工具是_。(3)转化过程中,大肠杆菌先用_处理,使其处于能吸收周围 DNA 的状态。(4)菌落颜色为白色的是_,原因是_。(5)菌落中的目的基因是否表达,可采用的检测办法是_。答案(1)使目的基因在受体细胞中稳存在,能遗传给后代,并表达和发挥作用(2)TTAADNA 连接酶(3)Ca2(4)菌落lacZ 标记基因区插入外源基因后被破坏,不能表达出 半乳糖苷酶,故菌落为白色(5)抗原抗体杂交
7、解析(1)基因工程中,构建基因表达载体的目的是使目的基因在受体细胞中稳存在,能遗传给后代,并表达和发挥作用。(2)根据限制酶 EcoR 和 Sma 的识别序列和切割位点和图解判断,图中目的基因被切割下来和质粒连接之前,需在目的基因的右侧连接相的末端,连接的末端序列是TTAA,连接过程中需要的基本工具是 DNA 连接酶。(3)转化过程中,大肠杆菌先用 Ca2处理,使其处于能吸收周围 DNA 的状态。(4)由于 lacZ 标记基因区插入外源基因后被破坏,不能表达出半乳糖苷酶,故菌落为白色菌落。(5)可采用抗原抗体杂交的办法检测菌落中的目的基因是否表达。7根据基因工程的有关知识,回答下列问题:(1)
8、限制性内切酶切割 DNA 分子后产生的片段,其末端类型有_和_。(2)质粒运载体用 EcoR切割后产生的片段如下:AATTCGGCTTAA为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA 除可用 EcoR切割外,还可用另一种限制性内切酶切割,该酶必须具有的特点是_。(3)按其来源不同,基因工程中所使用的DNA 连接酶有两类,即_DNA 连接酶和_DNA 连接酶。(4)反转录作用的模板是_,产物是_。若要在体外获得大量反转录产物,常采用_技术。(5)基因工程中除质粒外,_和_也可作为运载体。(6)若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是_。答案(1)黏性
9、末端平末端(2)切割产生的 DNA 片段末端与 EcoR切割产生的相同(3)大肠杆菌T4(4)mRNA(或 RNA)cDNA(或 DNA)PCR(5)噬菌体的衍生物动植物病毒(6)未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源 DNA)的能力极弱解析(1)DNA 分子经限制性内切酶切割产生的 DNA 片段末端通常有两种形式,即黏性末端末端。(2)若用不同的酶切割目的基因,形成的末端一要与 EcoR I切割运载体产生的末端相同,这样才能相互互补连接。(3)根据酶的来源,可将DNA 连接酶分为大肠杆菌 DNA 连接酶和 T4DNA 连接酶两类。(4)以 mRNA 为模板,合成互补的 DNA,称为反转录;通过 PC
10、R 技术,可以在短时间内大量扩增目的基因。(5)基因工程中常用的运载体有质粒、噬菌体的衍生物和动植物病毒。(6)大肠杆菌细胞外有细胞壁和细胞膜,能阻止其他物质的进入,只能通过Ca2处理细胞,使细胞处于能吸收周围环境中 DNA 分子的生理状态,这种细胞称为感受态细胞。8(2015质检)如图为某种质粒表达载体简图,小箭头所指分别为限制性核酸内切酶 EcoR、BamH 的酶切位点,ampR 为青霉素抗性基因,tetR 为四环素抗性基因,P 为启动子,T 为终止子,ori 为复制原点。已知目的基因的两端分别有包括 EcoR、BamH在内的多种酶的酶切位点。据图回答:(1)将含有目的基因的 DNA 与质
11、粒表达载体分别用 EcoR酶切,酶切产物用 DNA连接酶进行连接后,其中由两个 DNA 片段之间连接形成的产物有_、_、_三种。(2)用上述 3 种连接产物与无任何抗药性的原核宿主细胞进行转化。之后将这些宿主细胞接种到含四环素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是_;若接种到含青霉素的培养基中,能生长的原核宿主细胞所含有的连接产物是_。(3)目的基因表达时,RNA 聚合酶识别和结合的位点是_,其合成的产物是_。(4)在上述中,为了防止目的基因和质粒自身环化,酶切时选用的酶是_。答案(1)目的基因载体连接物载体载体连接物目的基因目的基因连接物(2)载体载体连接物目的基因载体连接物、载
12、体载体连接物(3)启动子mRNA(4)EcoR和 BamH(不能只答一种酶)解析将含有目的基因的 DNA 与质粒表达载体分别用 EcoR酶切,所产生的黏性末端相同,用 DNA 连接酶处理后,不同的片段随机结合,由两个 DNA 片段之间连接可形成 3 种不同的产物。将这 3 种连接产物导入受体菌后,可根据不同连接产物所携带抗性基因的差异选择不同的选择培养基进行筛选。由图示和题目中提供的信息可知,同时用 EcoR和 BamH进行酶切可有效防止目的基因和质粒自身环化。9(2015)如图表示基因工程中目的基因的获取示意图,请据图回答下列问题:(1)图中表示_,表示用_切割,表示_。(2)构建基因文库时
13、,需要将 cDNA 或一大小范围的 DNA 片段分别与_连接起来,导入_储存。(3)若获取的目的基因相同,则图中基因组文库_(填“小于”、“于”或“大于”)cDNA 文库。(4)除图中所示方法外,目的基因还可以通过_的方法获取。答案(1)反转录限制性核酸内切酶(或限制酶)PCR 扩增(2)载体受体菌的群体中(3)大于(4)人工合成解析(1)mRNA 是通过反转录形成 cDNA 的。切割 DNA 的酶是限制性核酸内切酶。无论是cDNA还是从生物材料中获取的DNA分子都可以通过PCR技术获得大量的目的基因。(2)将某生物的 cDNA 或一大小范围的 DNA 分子分别与载体连接起来,导入受体菌的群体
14、中储存,各个受体菌中含有这种生物的不同基因,这个受体菌群体组成了基因文库。(3)由图示可知,mRNA 是 DNA 上的基因选择性转录获得的产物,因此二者对的文库大小情况是基因组文库大于 cDNA 文库。(4)目的基因可以从自然界已有的物种中分离出来,也可以通过人工合成的方法获取。10(2015)如图是从酵母菌中获取棉株需要的某种酶基因的流程,结合所学知识及相关信息回答下列问题。(1)图中 cDNA 文库_(填“大于”、“于”或者“小于”)基因组文库。(2)过程提取的 DNA 需要_的切割,B 是_过程。(3)为在短时间内大量获得目的基因,可用_扩增的方法,其原理是_。(4)农杆菌中的 Ti 质
15、粒上的 TDNA 具有_的特点。目的基因能否在棉株体内稳遗传的关键是_,可以用_技术进行检测。(5)如果要想使该酶活性更高或具有更强的耐受性,需要对现有蛋白质进行改造,这要利用基因工程的延伸蛋白质工程。首先要设计预期的_,再推测有的氨基酸序列,找到相对的_。答案(1)小于(2)限制酶反转录(3)PCR 技术DNA 双链复制(4)可转移至受体细胞并且整合到受体细胞染色体的 DNA 上目的基因是否整合到植物细胞染色体的 DNA 上DNA 分子杂交(5)蛋白质结构脱氧核苷酸序列解析(1)一个基因组文库中包含了一种生物所有的基因,而一个 cDNA 文库中只包含了一种生物的一基因,故 cDNA 文库小于
16、基因组文库。(2)从酵母菌中提取目的基因,需用限制性核酸内切酶;以 mRNA 为模板合成 cDNA 的过程属于反转录。(3)PCR 技术是一项在生物体外复制特 DNA 片段的核酸合成技术,其依据的原理是 DNA 双链复制。(4)农杆菌中的 Ti 质粒上 TDNA 具有可转移至受体细胞并且整合到受体细胞染色体的 DNA 上的特点。目的基因能否在棉株体内稳遗传的关键是目的基因是否整合到植物细胞染色体的 DNA 上,可以用 DNA 分子杂交技术进行检测。(5)蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种的蛋白质,以满足人类
17、的生产和生活的需求。11生物技术并不是各自的,而是相互联系、相互渗透的。下图表示利用乳腺生物反器生产某种动物蛋白的流程示意图,请分析回答;(1)该生产流程中用到的生物技术有_、_。(写出其中两种)(2)图中 A、B 分别表示_、_。(3)为提高培育率,进行过程之前,对早期胚胎的处理是取其细胞用目的基因探针进行_检测,对受体动物的处理是用_进行同期发情处理。(4)蛋白质工程中,要对蛋白质结构进行设计改造,必须通过基因修饰或基因合成来完成,而不直接改造蛋白质,原因是_。答案(1)蛋白质工程基因工程胚胎移植技术(任写两种)(2)推测有的氨基酸序列基因表达载体(3)DNA(核酸)分子杂交相关激素(4)改造后的基因能够遗传(且改造基因易于操作)解析(1)由图分析知该生产流程中用到的生物技术有蛋白质工程、基因工程、胚胎移植技术。(2)图中 A、B 分别表示推测有的氨基酸序列、基因表达载体。(3)为提高培育率,进行过程之前,对早期胚胎的处理是取其细胞用目的基因探针进行 DNA 分子杂交,对受体动物的处理是用相关激素进行同期发情处理。(4)由于改造后的基因能够遗传(且改造基因易于操作),因此蛋白质工程中,要对蛋白质结构进行设计改造,必须通过基因修饰或基因合成来完成,而不直接改造蛋白质。
限制150内