2023年果蔬菜中农药残留测定实验报告.docx

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1、实验四果蔬菜中农药残留测定环境工程李婷婷一、实验目的1、 练习使用农药残留快速检测仪，掌握其操作过程；2、 掌握酶克制法的实验原理。二、实验原理本实验采用酶克制法，有机磷或氨基甲酸酯类农药能抑酶活性, 使本可以由酶参与的显色反映而失去颜色，呈白色。可用比色法定量 克制限度。克制率是有机磷或氨基甲酸酯类农药克制酶能力的强弱。在一定条件下，有机磷和氨基甲酸脂类农药对胆碱脂酶正常功能 有克制作用,其克制率与农药的浓度呈正相关。正常情况下，酶催化神经传导代谢产物(乙酰胆碱)水解，其水解产 物与显色剂反映。产生黄色物质，用分光光度计在4 12nm处测定吸 光度随时间的变化值，计算出克制率。通过克制率可以

2、判断出样品中 是否具有高剂量有机磷和氨基甲酸酯类农药的存在。三、实验环节1参数设立2校准测量：选择校准菜单后，取2.5 ml试剂一移入比色瓶 后，各取l()()ul试剂二和试剂三倒入比色瓶中，盖紧摇匀，放入比色 槽中放置1（）m i n,按校准键,仪器显示正在预热，仪器发出嘀嘀嘀三 声后，表达校准完毕。3空白测量：接上步，按空白测量键，仪器显示正在预热，发出 嘀嘀嘀三声后，提醒加入试剂四，取出比色瓶加入10 0 ul试剂四，盖 好摇匀，放入比色瓶中，按回车继续，仪器显示正在测量，倒计时三分 钟，结束后同样发出嘀嘀嘀三声。并显示吸光度值A 1 ,A2。4样品测量4. 1样品制备：选取有代表性的果

3、蔬样品，擦去表面泥土， 叶菜用叶菜取样器取叶片部分，果实蔬菜可切割。然后切成1cm 左右的见方碎片，称取2.0g样品。4.2样品中农药的提取:将6个样品提取瓶放在支架上,各放入2 . 0g样品，各加lO.ml 试剂一，用搅拌针使样品所有浸入液体 中，放入提取仪中萃取6分钟。之后放回支架，取2.5ml注入比 色瓶中。4.3样品测量：选择测量键，各加1 0 0 u 1试剂二和试剂三 混合摇匀。按确认键进行测量,预热结束后。仪器显示正在培养。 10分钟后结束，发出嘀嘀嘀三声。提醒加入试剂四。加入后，按确 认键三分钟后，屏幕显示结果。四、实验结果与分析1克制率公式：E (%) =(A2-A1)- (

4、A4-A3 ) /(A2-Al) X 100%E :克制率Al:空白测量3分钟前的吸光度值A2:空白测量3分钟后的吸光度值A3：样品测量3分钟前的吸光度值A4:样品测量3分钟后的吸光度值2结果鉴定:当被测样品的克制率在50 %以上时，表达被测样品 中有高剂量有机磷和氨基甲酸酯类农药存在，样品为阳性结果，阳性 结果的样品需要检测两次以上。对阳性结果的样品，可用其他方法进 一步拟定农药品种的含量，并报有关部门解决。实验所测样品为豆角，经实验测得：A1-0. 0 29, A 2=0. 61 7,A2-A1=O. 6460.300,所以空白有效。A3=0.3 2 9,A 4=1. 11 7 1.8,所

5、以此样品检测有效。克制率为4.1%,小于50%,所以样品检 测一次即可。五、问题与讨论本次实验中应注意的问题有以下几点：1、试剂二用量：若A 2 A 1小于0.300,此空白无效，需要重新 检测，若多次测定后，仍小于0.3 0 0,则需要增长试剂二的用量，直到 大于为止。2、吸光度确认：在样品测量结束后。若A 4大于1.80,则此样 品检测无效，需重新检测，多次测量后仍大于1.80,为果蔬色素干扰, 需要对被测样品进行整株提取，不要剪碎样品。3、注意时间间隔：提醒加入试剂四时应当在嘀嘀嘀三声后加入 （空白和样品）。且做空白和样品时加入试剂四的时间间隔应一致。加 入试剂四后，轻轻摇匀后，放入比色槽后，应立即测量。4、注意移液器的操作:移液器有两个档，吸取时应用第一个档，排 除液体时下推至第二个档。