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1、2019/8/26脱落细胞学固定方法:带湿固定干燥固定固定时间:1530min(四)涂片的染色目的:使细胞结构清晰显示;应用各种染色使细胞浆与 核恰当显示不同颜色;使细胞透明度高,结构清晰。方法:常规染色为巴氏染色,酉己合HE、Giemsa特染等。1巴氏染色法 固定好的涂片一 80%、70%、50%乙醇一蒸水化:馋水 各Imin苏木素染3s5min1%盐酸中数秒,水洗 置饱和碳酸锂溶液中Imin,水洗染核:50%、70%、80%、95%乙醇各Imin 染浆:置于橘黄 分色:G液中染2s4min-95%乙醇洗2次一置于. 林EA36染液中4 s5min化: 脱水:95%、无水乙醇各l2min一二
2、甲苯透明2s3 min X2封片:中性树胶封固结果判定:胞核呈紫蓝“色,核仁红色,底层 细胞、中层细胞和表层角化前细胞为淡蓝色, 不全角化细胞(角化前细胞)呈粉红色,角 化细胞呈桔黄色。适用于上皮细胞染色和阴道涂片观察女性 激素的影响优点:细胞具有多色性缺点:染色程序较复杂注意事项*染液要充分溶解苏木素要染前月余配制,用时每 天过滤1次,加新液。室温低时不易着色,可v50C加热盐酸分化前镜下观察以确定分化时间涂片在橘黄液中不宜过长EA36染液配制和使用前应用滤纸调试2 HE染色:透明度好、核浆对比鲜明、染 色效果稳定,核紫蓝色、浆淡玫瑰红色。 步骤简单,适用于痰涂片。3瑞氏一吉姆萨染色:多用于
3、血液、骨髓细 胞学检查巴氏1020%标本移至玻片干固定制片技术不稳定,不能重 复易受血黏液炎性渗出物覆细胞分布不均匀,易重叠常规巴氏制片与液基薄层制片比较液基薄层制片100%标本收集至保存液中湿固定土古术珞g亩管去除血黏液和大量炎性遮盖物III镜下观察费力,易漏诊镜下观察省力,不易漏诊成本较 高细胞分布均匀集中,不易重叠染色一、瑞特染色法(WrighP s)特点:固定和染色合并在一起?手续简便,染色时间短, 对白细胞特异性颗粒着色较好,但对技的着色差.1.瑞氏染料:由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成有复 合染孚L亚备蓝(M+)为四甲基硫堇染料,有对酿型和邻酿型两种 尊构。通常理氯盐,里氯伐裴蓝
4、,其有色部分为阳离子,卖 色部分为阴离子。加美盘容易氧化为一、二、三甲基硫堇等 次级染料。市售美蓝中部分已被氧化为天青。伊红(E)通常为秘:11 色部分为阳离子,其粒色部分为阴离子,无伊红和亚甲蓝混合后,产生一种憎液性胶佐伊红化美蓝 图嘱雅里瑞特染/手?萨醇即瑞鞋染液)。me弟一早脱落细胞检查技术和临床应用评价 脱落细胞学:是对人体各部位特别是管腔器官 表面的脱落细胞,或对病变组织通过细针吸 取的方法获得的细胞染色并在显微镜下观察 作出诊CM断,又称诊断细胞学。标本来源:自然排出物体腔抽出液细针穿刺吸取液第一节 标本采集和涂片制作一、标本采集原则:尽量减少受检者的痛苦,取得合 作;方法简便、实
5、用、经济;尽量取得 足 够供诊断的细胞成分;及时快速送检立刻 制片;绝对避免污染;标本号标记清楚。途径:细针穿刺;脱落细胞学检查常用方法:直视采集法:直接用刮片刮取、吸管吸取、 刷洗自然分泌液采取法:痰涂片、尿液涂片、前 列腺液涂片、乳头溢液涂片灌洗法:空腔器官、盆腔或腹腔摩擦法:鼻咽、食管、胃针穿抽吸法:浆膜腔关节腔积液,淋巴结、软组织、甲状腺、肝浆膜腔积液的处理:抽出应立即送检(4。(3保存,24h内处理完 标本)对检查影响较大的是过多成熟的红细胞和 标本的严重凝固,需处理,淋巴细胞分离液 或低渗方法可去除红细胞凝固的积液将凝 块吸出,剩余液体离心涂片。2019/8/26:、涂片制作(-)要求:1标本要新鲜2操作要轻柔:细胞分布均匀;薄厚适当 勿挤压摩擦,以免细胞损伤变形;3玻片要清洁4涂片要牢固5涂片数量卜6标号准确:)涂片制备方法推片法涂抹法压拉涂片法吸管推片法喷射法印片法后行标刮燥进体的(三)涂片的固定目的:保才新胞形*结构,防止其自溶。固定液:首选95%酒精,乙醇乙醍,氯仿乙醇注意事项:巴氏染色,涂片勿在空气中干 染色;固定时间不短于15分钟(48h内 巴氏染色);固定液要达到90%以上;液 本昌心后涂片,待潮干后再固定,宫颈片、痰涂片、拉网涂片、内窥镜的刷片、针 吸涂片应立即固定。
限制150内