细胞形态与记数.pptx

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1、目的与要求1.初步掌握临时制片技术和显微绘图的方法；初步掌握临时制片技术和显微绘图的方法；2.熟悉光镜下动、植物细胞的基本形态、结构；熟悉光镜下动、植物细胞的基本形态、结构；3.掌握活细胞计数的使用方法。掌握活细胞计数的使用方法。4.掌握显微测微尺的使用方法。掌握显微测微尺的使用方法。第1页/共21页临时制片方法及细胞形态的观察第2页/共21页（一）人口腔黏膜上皮细胞制片与观察1.取一载玻片，夹持载玻片两端，用清洁纱布擦净；2.在载玻片中央滴1滴0.5%次甲基蓝染液；3.用消毒牙签的钝端轻轻刮取颊部内侧的口腔黏膜上皮细胞；4.将牙签在载玻片的染液中来回滚动数次；5.染色2-3分钟，盖上盖玻片，

2、注意不要有气泡产生；6.观察。先低倍，再高倍。细胞核被染成深蓝色。第3页/共21页（二）洋葱表皮细胞的制片与观察1.取一擦净的载玻片，滴1滴1%碘液；2.将洋葱嫩茎用小刀切成小块，取1块肉质鳞叶，用镊子在其内表面轻轻撕下一小块表皮，再用剪刀剪成小块，置于载玻片的染液中铺平；3.染色2-3分钟，盖上盖玻片；4.先低倍，再高倍。细胞核被染成深黄色。第4页/共21页第5页/共21页细 胞 计 数第6页/共21页细胞计数的原理 细胞计数时，先将培养细胞或血细胞稀释成细胞悬液，然后将细胞悬液滴入细胞计数板内，计数计数板上计数室四大格内的细胞数。根据计数室的容积及稀释倍数，即可计算出细胞浓度。第7页/共2

3、1页1.制备血细胞悬液取1只乙醚麻醉过的蟾蜍，心脏取血1ml，用Ringer液稀释一定倍数制成细胞悬液；同时用蟾蜍血制备血涂片，室温晾干备用；第8页/共21页第9页/共21页2.熟悉血细胞计数板血细胞计数板呈长方形，有2个计数室。每个计数室分为9个大正方格，每个大格边长1 mm,计数室的底与盖玻片间的距离为0.1mm，即每大格的容积为1mm1mm 0.1mm=0.1mm3四角的每个大格被分为16个中格；中央的大格被分为25个中格，每个中格被分为16个小格。第10页/共21页第11页/共21页3.滴片将盖玻片擦净，盖在血球计数板槽上，取制备好的蟾蜍血细胞悬液1滴滴于血球计数板的盖玻片一侧边缘，让

4、细胞悬液自然流入计数室内。注血细胞悬液不可滴得过多，如溢出或盖玻片内有气泡必须重做，否则将影响计数结果。第12页/共21页4.计 数在低倍镜下数出计数板上计数室四角大格中的细胞数，如细胞压在格线上时，数上不数下，数左不数右。第13页/共21页5.细胞浓度计算将四大格的细胞总数除以4，得出平均每大格的细胞数，每大格的容积为0.1mm3，乘以10000即为1000mm3（1ml）。不同稀释倍数细胞悬液的细胞浓度可用下式计算：细胞浓度（细胞数/ml)=(四大格的细胞数/4）10000 稀释倍数第14页/共21页 应用显微镜的成像原理，同时借助显微镜的镜台测微尺和目镜测微尺，两尺配合使用，进行测量和运

5、算，得出细胞的大小显微测量的原理物镜测微尺目镜测微尺第15页/共21页测微尺的使用操作1.卸下目镜的上透镜，将目镜测微尺有刻度一面向下装在目镜镜面上，再旋上目镜的上透镜。2.将镜台测微尺有刻度一面朝上放在载物台上夹好，使测微尺刻度位于视野中央。调焦至看清镜台测微尺的刻度。3.小心移动镜台测微尺和目镜测微尺(如目镜测微尺刻度模糊，可转动目镜上透镜进行调焦)，使两尺左边的“0”点一直线重合，然后由左向右找出两尺另一次重复的直线(图)。4.记录两条重合线间目镜测微尺和镜台测微尺的格数。按下式计算目镜测微尺每格的长度等于多少m目镜测微尺每格的长度/m=镜台测微尺的格数/目镜测微尺的格数 第16页/共2

6、1页第17页/共21页目镜测微尺量测倍率比照表目镜测微尺量测倍率比照表 第18页/共21页细胞生物学实验绘图方法与要求1在仔细观察的基础上，选择典型结构进行描绘，要求真实、准确（注意各部结构的比例关系）。2用铅笔绘图，线条要明确清晰，图的深浅明暗一律以点的疏密来表示，点要圆而一致，不得用涂暗影或进行其他美术加工。3各部结构名称要在一侧引直线注明。各引线要平行不得交叉。4每幅图的大小、位置在纸面上必须安排得当并注意纸面的清洁。第19页/共21页实验报告在低倍镜下数出计数板四角四大格中血细胞数，然后取下盖玻片，将血细胞记数板冲洗干净，重新滴片、记数，共三次。取3次记数的平均数代入公式计算出结果。一、分别求出使用低倍镜(10X)，高倍镜(40X)时目镜测微尺每格代表的长度：低倍镜：目镜测微尺每格代表的长度=XlO(m)=m 高倍镜：目镜测微尺每格代表的长度=XlO(m)=m 二、分别绘制所观察的高倍镜下人口腔黏膜上皮细胞并注明基本结构。三、用测微尺测量不同材料各种细胞的大小后，制表格表示测量结果四、计算蟾蜍红细胞的核质比例。计算细胞、细胞核体积的公式：圆 形 V=4/3r 3(r为半径)椭圆形 V=4/3ab2(a、b为长、短半径)核质比 ND=Vn(VcVn)(Vn为核的体积，Vc是细胞质的体积)第20页/共21页感谢您的观看！第21页/共21页