细胞凝集反应.pptx

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1、实验四实验四 细胞凝集反应细胞凝集反应第1页/共6页实验原理实验原理 细胞膜细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构是双层脂镶嵌蛋白质结构,脂脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被枝状糖外被.目前认为目前认为:细胞间的联系细胞间的联系,细胞的细胞的生长和分化生长和分化,免疫反应和肿瘤发生都和细胞表免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分枝状糖分子有关面的分枝状糖分子有关.凝集素凝集素(lectin)是一类含糖的是一类含糖的(少数少数例外例外)并能与糖专一结合的蛋白质并能与糖专一结合的蛋白质,它具有凝它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用集细胞和刺激细胞分裂的作用.凝

2、集素使细胞凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接,在细在细胞间形成胞间形成”桥桥”的结果的结果,加入与凝集素互补的加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集糖可以抑制细胞的凝集.第2页/共6页实验用品实验用品1、土豆块茎、土豆块茎.2、显微镜、显微镜,粗天平粗天平,载玻片载玻片,滴管滴管2支支,离心管离心管2支支.3、PBS缓冲液缓冲液 称取称取NaCl 7.2g,Na2HPO4，1.48g,KH2PO4 0.43g,加蒸馏水加蒸馏水,定容至定容至1000ml,调调pH值到值到7.2.4、2%的红细胞的红细胞 以无菌方法抽取兔子静脉血液以无菌方法抽取兔子静

3、脉血液(加抗加抗凝剂凝剂),用生理盐水洗用生理盐水洗5次次,每次每次2000r/min,离离心心5min,最后按压积红细胞体积用生理盐水最后按压积红细胞体积用生理盐水配成配成2%红细胞液红细胞液.第3页/共6页实验方法实验方法1、称取土豆去皮块茎、称取土豆去皮块茎2g,加加10mlPBS缓冲液浸泡缓冲液浸泡2h,浸出的粗提液中含有可溶性浸出的粗提液中含有可溶性土豆凝集素土豆凝集素.2、用滴管吸取土豆凝集素和、用滴管吸取土豆凝集素和2%红细胞液各一滴红细胞液各一滴,置载玻片上置载玻片上,充分混匀充分混匀,静置静置20min后于低倍镜下观察血球凝集现象后于低倍镜下观察血球凝集现象.3、以、以PBS液加液加2%血细胞液作对照实验血细胞液作对照实验.第4页/共6页实验结果与思考题实验结果与思考题简图表示红细胞的凝集过程。简图表示红细胞的凝集过程。简述血细胞凝集原理简述血细胞凝集原理.:生理盐水生理盐水:0.85%-0.9%NaCl,适用于哺乳动物适用于哺乳动物 0.75%NaCl适用于鸟类和无脊椎动适用于鸟类和无脊椎动物物 0.65%NaCl适用于两栖类适用于两栖类 抗凝剂抗凝剂 ACD：(柠檬酸柠檬酸0.48g,柠檬酸钠柠檬酸钠1.32g,葡葡萄糖萄糖1.47g,加水至加水至1000ml),每每6ml新鲜血液加新鲜血液加1ml ACD液液.第5页/共6页感谢您的观看！第6页/共6页