细菌生理和消毒灭菌.pptx

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1、第一节第一节 细菌的理化性质细菌的理化性质细菌的化学组成：与其他生物细胞类似细菌的物理性状：光学性质 半透性表面积 带电现象渗透压第1页/共71页光学性质：细菌为半透明体，故细菌悬液呈混浊状态，菌数越多，浊度越大。比浊法/光密度计均可粗略估计细菌的数量。第2页/共71页表面积：单位体积表面积大代谢旺盛，繁殖迅速。带电现象：一般环境中（pH7.27.6）带负电（G菌pI23；G菌pI45）。渗透压 细菌体内含有高浓度的营养物质和无机盐，故处于高渗状态。低渗或等渗生存 高渗胞浆分离第3页/共71页1.细菌的营养类型自养菌：以无机物氧化，或光合作用异养菌：包括腐生菌和寄生菌，所有的病原菌均为此类型，

2、大多为寄生菌第二节 细菌的营养第4页/共71页2、细菌的营养物质a)水：菌体成分、溶酶。b)碳源：菌体成分、提供能量。病原菌主要从糖类获得碳源。c)氮源：菌体成分、参与代谢。病原菌主要利用有机氮化合物。第5页/共71页d)无机盐：e)生长因子：是指某些细菌生长必须而自身又不能合成的一类有机物质第6页/共71页第三节 细菌的生长繁殖1.生长繁殖的条件a)充足的营养物质b)适宜的温度：多数细菌37c)合适的酸碱度：多数病原菌最适pH范围为pH7.27.6a)嗜酸菌：结核分枝杆菌嗜酸菌：结核分枝杆菌pH6.56.8b)嗜碱菌：霍乱弧菌嗜碱菌：霍乱弧菌pH8.49.2第7页/共71页d)必要的气体环境

3、兼性厌氧菌：不论在有氧或无氧环境中都能生长，大多数细菌 微需氧菌：低氧压时生长较好专性需氧菌：如结核分枝菌专性厌氧菌：只在无氧的环境中进行生长。如破伤风梭菌 第8页/共71页（二）细菌个体的生长繁殖（二）细菌个体的生长繁殖繁殖方式：无性繁殖，二分裂增殖繁殖速度：大约2030min繁殖一代第9页/共71页（三）（三）群体生长及生长曲线群体生长及生长曲线以一定数量的细菌接种于液体培养基中，以培养时间为x轴，菌体数目为y轴，可以绘制细菌的生长曲线。第10页/共71页对数期迟缓期分为四期：迟缓期、对数期、稳定期、衰退期 细菌生长曲线（群体）0515202530105.56.08.58.07.57.06

4、.59.0衰退期总菌数总菌数活菌数活菌数细细菌菌数数的的对对数数小时小时稳定期第11页/共71页第四节第四节 细菌的新陈代谢和能量转换细菌的新陈代谢和能量转换能量代谢物质代谢合成代谢 anabolism分解代谢 catabolism复杂分子（有机物）简单分子+ATP+H+分解代谢酶系合成代谢酶系第12页/共71页（一）细菌的能量代谢（一）细菌的能量代谢细胞呼吸是细胞将营养物质化学键中的能量转化为ATP的过程。发酵 Fermentation需氧呼吸 Aerobic respiration 无氧呼吸 Anaerobic respiration 第13页/共71页（二）细菌的代谢产物分解代谢产物和生

5、化试验糖发酵实验第14页/共71页Indole Test 吲哚试验吲哚试验 色氨酸吲哚加入吲哚试剂玫瑰吲哚 大肠杆菌产气杆菌第15页/共71页硫化氢实验 细菌代谢含硫氨基酸产H2SH2S与Fe2+（培养基中）FeS（黑色沉淀）第16页/共71页甲基红试验（M）细菌分解葡萄糖，产生甲细菌分解葡萄糖，产生甲酸乙酸等混合酸，培养基酸乙酸等混合酸，培养基PHPH降低，使指示剂甲基红降低，使指示剂甲基红显红色。显红色。细菌分解葡萄糖，产生丙酮细菌分解葡萄糖，产生丙酮酸，脱羧生成乙酰甲基甲醇酸，脱羧生成乙酰甲基甲醇,进而氧化生成二乙酰，与胍进而氧化生成二乙酰，与胍基生成红色化合物。基生成红色化合物。VP试

6、验（V）第17页/共71页细菌分解枸橼酸盐生成碳酸盐，进而氨盐分解，产生氨，培养基变碱，显深蓝色。枸橼酸盐试验（C）第18页/共71页细菌分解培养基中尿素产氨，使培养基PH升高，指示剂酚红显酒红色尿素酶实验第19页/共71页1.热原质：是细菌合成的一种注入人或动物体内能引起发热反应的物质。G-细菌的热原质为细胞壁的细菌的热原质为细胞壁的脂多糖脂多糖G+细菌的热原质为合成的细菌的热原质为合成的多糖类物质多糖类物质耐高温、对酸碱也有一定耐受力耐高温、对酸碱也有一定耐受力应严防细菌污染注射药剂，产生热原质应严防细菌污染注射药剂，产生热原质u合成代谢产物及意义合成代谢产物及意义第20页/共71页2.毒

7、素和侵袭性酶类毒 素 内毒素（脂多糖）G-菌裂解后释放出来外毒素 G+菌和少数G-菌在代谢过程中代谢过程中分泌出有毒性作用的蛋白质。侵袭性酶 细菌产生的与致病性有关，对人体有损伤的酶。第21页/共71页3.色素水溶性色素水溶性色素 脂溶性色素脂溶性色素金黄色葡萄球菌（黄）金黄色葡萄球菌（黄）绿脓杆菌（绿）绿脓杆菌（绿）第22页/共71页4.细菌素：细菌素：某些菌株产生的一类具有抗菌某些菌株产生的一类具有抗菌作用的蛋白质，只对有近缘关系的细菌作用的蛋白质，只对有近缘关系的细菌有杀伤作用，有杀伤作用，可用于细菌的分型可用于细菌的分型5.抗生素：抗生素：由真菌、放线菌、少数细菌产由真菌、放线菌、少数

8、细菌产生，能选择性抑制或杀死其他生物细胞生，能选择性抑制或杀死其他生物细胞的物质的物质6.维生素：维生素：第23页/共71页第五节第五节 细菌的人工培养细菌的人工培养根据细菌的生理需要和繁殖规律，用人工的方式为其提供营养物质和繁殖条件，使其在短期内大量繁殖，称细菌的人工培养第24页/共71页（一）培养基概念：人工制备的用于细菌生长繁殖的营养物质制备原则：充分营养，合适酸碱，灭菌制备流程：配料、溶化、测定及矫正pH、过滤、分装、灭菌备用第25页/共71页第26页/共71页第27页/共71页1.根据物理性状分类（物理性状取决取决于所加琼脂的多少，与营养成分无于所加琼脂的多少，与营养成分无关）关）液

9、体培养基 liquid medium：增菌固体培养基 solid medium：分离 半固体培养基 semisolid medium：动力实验 液体培养基液体培养基 固体斜面培养基固体斜面培养基 半固体培养基半固体培养基第28页/共71页2.按用途分类：按用途分类：基础培养基：含有细菌生长所必须的基本营养物质，如蛋白胨水,肉汤管第29页/共71页2.按用途分类：按用途分类：营养培养基：加入某些特殊营养物质兔血培养基兔血培养基第30页/共71页鉴别培养基：区别不同类型的微生物大肠杆菌显色培养基大肠杆菌显色培养基第31页/共71页选择培养基：抑制其他细菌生长SS培养基培养基第32页/共71页厌氧培

10、养基：培养分离专性厌氧菌第33页/共71页（三）细菌在培养基中的生长现（三）细菌在培养基中的生长现象象1.液体培养基中：均匀浑浊生长、菌膜生长、沉淀生长第34页/共71页2.固体培养基中的生长固体培养基中的生长现象现象菌落（菌落（S型）型）菌苔菌苔菌落（菌落（R型）型）菌落与菌苔菌落与菌苔第35页/共71页第36页/共71页第37页/共71页第38页/共71页第39页/共71页混浊生长混浊生长沿穿刺线生长沿穿刺线生长3.3.半固体培养基中半固体培养基中不不带带鞭鞭毛毛的的细细菌菌带带有有鞭鞭毛毛的的细细菌菌第40页/共71页(四四)人工培养细菌的用途以及意人工培养细菌的用途以及意义义1.传染病

11、的病原学诊断：科赫法则2.细菌学的研究：研究细菌的生理，遗传变异，致病性，免疫性和耐药性3.生物制品的制备：疫苗，类毒素，抗毒素第41页/共71页1 1、消毒：杀死物体上、消毒：杀死物体上病原微生物病原微生物的方法。的方法。2 2、灭菌：杀灭物体上、灭菌：杀灭物体上所有微生物所有微生物3 3、防腐：防止或抑制微生物生长繁殖、防腐：防止或抑制微生物生长繁殖4 4、无菌：指不存在活的微生物的意思。、无菌：指不存在活的微生物的意思。5 5、无菌操作：防止细菌进入机体或物品的操无菌操作：防止细菌进入机体或物品的操作技术。作技术。第三章 消毒灭菌第42页/共71页（一）、热力灭菌法：（一）、热力灭菌法：

12、u原理：利用高温使蛋白质凝固或者变性，原理：利用高温使蛋白质凝固或者变性，失去酶活性。失去酶活性。u包括湿热灭菌法和干热灭菌法包括湿热灭菌法和干热灭菌法u等同条件，湿热优于干热的原因：等同条件，湿热优于干热的原因：湿热中菌体蛋白吸收水分更容易变性湿热中菌体蛋白吸收水分更容易变性湿热的穿透力更强湿热的穿透力更强水由气态变为液态时释放热量水由气态变为液态时释放热量第43页/共71页1 1、干热灭菌法、干热灭菌法焚烧焚烧烧灼烧灼干烤干烤微波微波第44页/共71页（1 1）烧灼和焚烧）烧灼和焚烧 用火焰（几百摄氏度）直接杀死微生物，用火焰（几百摄氏度）直接杀死微生物，是一种是一种最彻底最彻底的杀菌方法

13、。的杀菌方法。焚烧一般用于处理废弃的污染品，烧灼可焚烧一般用于处理废弃的污染品，烧灼可用于接种环，试管口。用于接种环，试管口。第45页/共71页第46页/共71页（2）干烤利用烤箱加热至160-170，可以杀灭一切微生物，适合于耐高温物品的处理第47页/共71页（3 3）微波利用高频电磁波杀死微生物。多用于食品，餐具消毒。医院可用于非金属器械消毒第48页/共71页2 2、湿热消毒灭菌法、湿热消毒灭菌法：巴氏消毒法巴氏消毒法62306230分分72307230秒秒煮沸法煮沸法10051005分钟分钟流通蒸气消毒法、流通蒸气消毒法、间歇蒸汽灭菌法间歇蒸汽灭菌法10015-3010015-30分钟分

14、钟高压蒸气灭菌法高压蒸气灭菌法103.4kPa.121.3103.4kPa.121.315152020分钟分钟第49页/共71页（1）巴氏消毒法（pasteurization）61.162.8 30min；71.7,1530秒；秒；杀死液体中的病原菌或某些特定微生物;消毒乳制品、酒类、果汁等食品第50页/共71页（2）煮沸法一般消毒以煮沸10min10min为宜，可杀死一切微生物的繁殖体芽胞需1-21-2小时才能杀死用于一般外科器械、玻璃注射器、饮水和食具的消毒（耐高温且防水）临床已废弃此法第51页/共71页利用1个大气压下的的水蒸气进行消毒。一般温度不超过100细菌繁殖体1530min可被杀

15、灭。但芽胞不会被杀死。（3）流通蒸气法第52页/共71页（4）间歇蒸气灭菌法 本法是利用本法是利用反复多次反复多次的流通蒸汽灭菌，的流通蒸汽灭菌，以达到灭菌的目的。以达到灭菌的目的。可用于可用于不耐热不耐热（100100以内）以内）的营养物的营养物质，质，如某些营养培养基的灭菌。如某些营养培养基的灭菌。第53页/共71页（5 5）高压蒸汽灭菌法（效果最好）高压蒸汽灭菌法（效果最好）压力:0.14Mpa 温度：121.3时间：1520min 效果：杀死一切微生物，包括细菌芽胞耐高热、不怕潮湿的物品：一般培养基、生理盐水、手术敷料、工作服等，也可用于玻璃器皿的灭菌。第54页/共71页第55页/共7

16、1页（二）辐射杀菌法（二）辐射杀菌法1.日光与紫外线第56页/共71页第57页/共71页紫外线紫外线干扰细菌干扰细菌DNADNA的复制的复制，导致细菌，导致细菌的变异与死亡。的变异与死亡。但是紫外线穿透力很弱，不能穿过但是紫外线穿透力很弱，不能穿过纸张，玻璃，只能作用于物体表面。纸张，玻璃，只能作用于物体表面。常用于物体表面和空间的消毒。常用于物体表面和空间的消毒。第58页/共71页方法：方法：结果：结果：紫外线杀菌实验紫外线杀菌实验UV30分钟覆盖三角形纸片覆盖三角形纸片37 18-24小时小时揭揭去去纸纸片片第59页/共71页2.电离辐射高速电子具有强穿透性和较高能量，对细菌有致死作用。常

17、用于大量一次性塑料注射器和导管等医用塑料制品的消毒，也可用于食品消毒局限性：设备昂贵，且辐射对人体有害第60页/共71页（三）过滤除菌法（三）过滤除菌法利用物理阻留的方式将液体或气体中得细菌除去，以达到无菌的目的。主要用于一些不耐热的血清、毒素、抗生素、药液等除菌。第61页/共71页三、化学消毒灭菌法 定义：是用化学药品进行消毒的方法。1、化学消毒剂作用机制：使菌体蛋白质变性或凝固；使微生物细胞成分氧化、水解破坏细菌的酶系统和代谢；改变细菌细胞壁或细胞膜的通透性第62页/共71页2、化学消毒剂的分类，按杀菌能力分为三大类（1）、高效消毒剂：可杀灭包括细菌芽胞在内的所有微生物。如含氯消毒剂，过氧

18、化物消毒剂，醛类消毒剂等（2）、中效消毒剂：不能杀灭细菌芽胞，但可杀死细菌繁殖体、真菌和大部分病毒。如，含碘消毒剂，醇类消毒剂等（3）、低效消毒剂：可杀灭多数细菌繁殖体，但对抵抗力较强的细菌、真菌和病毒不起作用。如，季铵盐类消毒剂，氯已定，高锰酸钾等第63页/共71页厕所、病人排泄物与分泌物：厕所、病人排泄物与分泌物：5%5%石炭酸、石炭酸、2%2%来苏、来苏、生石灰、漂白粉生石灰、漂白粉皮肤：皮肤：2.5%2.5%碘酒、碘酒、75%75%乙醇、乙醇、2%2%红汞、红汞、0.2%0.2%过氧乙过氧乙酸浸泡、酸浸泡、1%1%龙胆紫龙胆紫粘膜：眼结膜粘膜：眼结膜1%1%硝酸银、硝酸银、2%2%蛋白银；蛋白银；口腔口腔3%3%过氧化过氧化氢；泌尿生殖道氢；泌尿生殖道0.01%0.01%0.1%0.1%洗必泰、洗必泰、0.1%0.1%高锰酸钾高锰酸钾饮水：饮水：氯气、漂白粉氯气、漂白粉空气：空气：甲醛熏蒸法、过氧乙酸熏蒸法甲醛熏蒸法、过氧乙酸熏蒸法 消毒剂的应用第65页/共71页2 2、影响消毒剂消毒灭菌效果的因素、影响消毒剂消毒灭菌效果的因素、消毒剂的性质、浓度和作用时间；、消毒剂的性质、浓度和作用时间；、细菌的种类与生活状态；、细菌的种类与生活状态；、PHPH、温度温度、有机物、有机物、材料性质、材料性质第66页/共71页第70页/共71页感谢您的观看！第71页/共71页