细胞质膜翟中和细胞生物学.pptx

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1、细胞质膜曾称细胞膜：是指围绕在细胞最外层，由脂质和蛋白质组成的生物膜。生物膜：真核细胞内部存在着由膜围绕构建的各种细胞器。细胞内的膜系统与细胞膜统称为生物膜。第1页/共31页第一节第一节 细胞质膜的结构模型细胞质膜的结构模型 一、生物生物膜的结构模型膜的结构模型 二、二、膜脂膜脂 三、三、膜蛋白膜蛋白 第2页/共31页一、生物膜的结构模型一、生物膜的结构模型戈特戈特(Gorter)和格兰戴尔和格兰戴尔(Grendel)(1925年年),脂双层模型脂双层模型 戴夫森戴夫森(Davson)和丹尼利和丹尼利(Daniellie)(1935年年),三明治模型三明治模型罗伯逊(Robertson)(19

2、59年年),单位膜单位膜模型模型辛格(Singer)和和尼科尔森(Nicolson)(1972年年),流动镶嵌模型流动镶嵌模型脂筏模型脂筏模型:在生物膜上富含胆固醇,形成有序的脂相，如同“脂筏”一样,并载有各种蛋白。研究简史第3页/共31页目前对生物膜结构的认识可归纳如下：(1)膜脂主要由磷脂分子构成,磷脂分子具有极性头部和非极性尾部。在水相中以疏水性非极性尾部相对、极性头部朝向水相自发形成磷脂双分子层的封闭的膜系统。(2)蛋白分子以不同的方式镶嵌在脂双层分子中或结合在其表面，蛋白的类型、分布的不对称性及其与脂分子的协同作用赋予生物膜具有各自的特性与功能。(3)在膜蛋白与膜脂之间、膜蛋白与膜蛋

3、白之间以及膜蛋白与膜两侧其他生物大分子之间的相互作用，在不同程度上限制了膜蛋白和膜脂的流动性。第4页/共31页二、膜 脂、成成 分分 膜脂是生物膜的基本组成成分。主要包括：磷脂、糖脂和胆固醇三种类型。、膜脂的运动方式膜脂的运动方式、脂质体脂质体第5页/共31页、膜脂成分1、磷脂磷脂：膜脂的基本成分，占整个膜质的：膜脂的基本成分，占整个膜质的5050以上。以上。1.1 1.1 类型类型:分为甘油磷脂和鞘磷脂二类分为甘油磷脂和鞘磷脂二类甘油磷脂甘油磷脂磷脂酰胆碱（卵磷脂PC）磷脂酰乙醇胺（脑磷脂PE）磷脂酰丝氨酸(PS)磷脂酰肌醇（PI）鞘磷脂鞘磷脂磷脂磷脂第6页/共31页 1.2 1.2 主要特

4、征主要特征 具有一个极性头和两个非极性的尾具有一个极性头和两个非极性的尾(脂肪酸链脂肪酸链)（心磷脂心磷脂双双磷脂酰甘油（DPGDPG）除外）；除外）；脂肪酸碳链碳原子为偶数脂肪酸碳链碳原子为偶数,多数碳链由多数碳链由16,1816,18或或2020个组成；个组成；除饱和脂肪酸外，还常含有 不饱和脂肪酸(如油酸)，不饱 和脂肪酸多为顺式，顺式双键 在烃链中产生约30弯曲。第7页/共31页2、糖脂（Sphingolipid）：普遍存在于原核和真核细胞膜上,占膜脂的5%以下；如脑苷脂、神经节苷脂和人的ABO血型抗原。（由糖残基与神经酰胺连接）、膜脂成分第8页/共31页、膜脂成分 3 3、胆固醇、胆

5、固醇v分布：分布：胆固醇存在于动物细胞和少数植物细胞质膜上（30%以下），细菌质膜不含有胆固醇，但某些细菌的膜脂中含有甘油脂等中性脂类。v功能：功能：调节膜的流动性，增加膜的稳定性，降低水溶性物质的通透性第9页/共31页第10页/共31页、膜脂的运动方式1.沿膜平面的侧向运动 其扩散系数为10-8cm2/s,相当于每秒移动2m的距离。由于侧向运动产生分子间的换位，其交换频率在106次/s以上。侧向运动是膜脂分子的基本运动方式，具有重要的生物学意义。2.脂分子围绕轴心的自旋运动 3.脂分子尾部的摆动 脂肪酸链靠近极性头部的摆动较小，尾部摆动较大。X射线衍射分析显示，在距头部第9个碳原子以后的脂肪

6、酸链已由较为有序变成无序状态。4双层脂分子之间的翻转运动 一般情况下翻转运动极少发生。但在细胞某些膜系统中发生的频率很高，特别是在内质网膜上，新合成的磷脂分子经几分钟后，将有半数从双层脂分子的一侧通过翻转运动转向另一侧。脂分子的运动不仅与脂分子的类型有关，也与脂分子同膜蛋白及膜周围的生物大分子之间的相互作用以及温度等环境条件有关。第11页/共31页、脂 质 体 脂质体脂质体是根据磷脂分子可在水是根据磷脂分子可在水相中形成稳定的脂双层膜的趋相中形成稳定的脂双层膜的趋势而制备的人工膜。势而制备的人工膜。脂质体的类型脂质体的类型 脂质体的应用脂质体的应用第12页/共31页脂质体的类型单层脂分子铺展在

7、水面上时，其极性端插入水相而非极性尾部面向空气界面。搅单层脂分子铺展在水面上时，其极性端插入水相而非极性尾部面向空气界面。搅动后形成乳浊液，即形成极性端向外而非极性端在内部的脂分子团动后形成乳浊液，即形成极性端向外而非极性端在内部的脂分子团(a)(a)或形成双或形成双层脂分子的球形脂质体层脂分子的球形脂质体(b)(b)。球形脂质体直径为。球形脂质体直径为251000nm不等，控制形成条不等，控制形成条件可获得大小均一的脂质体，同样的原理还可以制备平面的脂质体膜件可获得大小均一的脂质体，同样的原理还可以制备平面的脂质体膜(c)。用于用于疾病治疗的脂质体的示意图疾病治疗的脂质体的示意图(d）。）。

8、第13页/共31页脂质体的应用研究膜脂与膜蛋白及其生物学性质；脂质体中裹入DNADNA可用于基因转移；在临床治疗中,脂质体作为药物或酶等载体第14页/共31页三、膜三、膜 蛋蛋 白白、膜蛋白的类型膜蛋白的类型、内在膜蛋白与膜脂结合的方式内在膜蛋白与膜脂结合的方式、去垢剂去垢剂(detergent)(detergent)第15页/共31页外在(外周)膜蛋白：水溶性蛋白,靠离子键或其它弱键与膜表面的膜蛋白分子或膜脂分子极性头部非共价结合，易分离。内在（整合）膜蛋白：水不溶性蛋白，形成跨膜螺旋，与膜结合紧密,需用去垢剂使膜崩解后才可分离。脂锚定蛋白：通过与之共价相连的脂分子插入膜的脂双分子中，从而锚

9、定在细胞质膜上。、膜蛋白的类型、膜蛋白的类型第16页/共31页、内在膜蛋白与膜脂结合的方式内在膜蛋白与膜脂结合的方式膜蛋白的跨膜结构域与脂双层分子的疏水核心的相互作用。跨膜结构域两端携带正电荷的氨基酸残基与磷脂分子带 负电的极性头形成离子键，或带负电的氨基酸残基通过 CaCa2+2+、MgMg2+2+等阳离子与带负电的磷脂极性头相互作用。某些膜蛋白在细胞质基质一侧的半胱氨酸残基上共价结 合脂肪酸分子,插入脂双层之间,进一步加强膜蛋白与脂 双层的结合力,还有少数蛋白与糖脂共价结合。第17页/共31页内在膜蛋白跨膜结构域是与膜脂结合的主要内在膜蛋白跨膜结构域是与膜脂结合的主要部位，具体作用方式如下

10、：部位，具体作用方式如下：(1)跨膜结构域形成螺旋，其外部疏水侧链通过范德华力与脂双层分子脂肪酸链相互作用。(2)某些螺旋既具有极性侧链又具有非极性侧链，螺旋的外侧是非极性链，内侧是极性链，形成特异极性分子的跨膜通道。(3)某些跨膜蛋白(如大肠杆菌外膜上的孔蛋白和线粒体内膜上的孔蛋白)，其跨膜结构域常常仅有1012个氨基酸残基，形成折叠片结构。螺旋中相邻二个氨基酸残基的轴向距离为0.15nm，而在折叠片中为0.35nm。反向平行的折叠片相互作用形成非特异的跨膜通道，可允许相对分子质量小于104的小分子自由通过。第18页/共31页、去垢剂、去垢剂去去垢垢剂剂是是一一端端亲亲水水、另另一一端端疏疏

11、水水的的两两性性小小分分子子,是是分分离与研究膜蛋白的常用试剂。离与研究膜蛋白的常用试剂。离子型去垢剂(十十二二烷烷基基磺磺酸酸钠钠SDS)SDS)：它可使细胞膜崩解，与膜蛋白疏水部分结合使其分离，还可破坏蛋白内部非共价键，甚至改变亲水部分的构象。非离子型去垢剂（Triton Triton X-100X-100）：也可使细胞膜崩解，但对蛋白作用较温和，用于膜蛋白的分离与纯化，也用于除去细胞膜系统，以便对细胞骨架蛋白和其他蛋白进行研究。第19页/共31页第二节 生物膜结构的特征与功能膜的膜的流动性流动性：生物膜的基本特征之一：生物膜的基本特征之一,细胞进行生命活动的必要条件。细胞进行生命活动的必

12、要条件。膜的膜的不对称性不对称性第20页/共31页一、膜的流动性、膜脂的流动性膜脂的流动性膜膜脂脂的的流流动动性性主主要要指指脂脂分分子子的的侧侧向向运运动动，它它主主要要是是由脂分子本身的性质决定的由脂分子本身的性质决定的 。脂肪酸链越短脂肪酸链越短,不饱和程度越高不饱和程度越高,膜脂的流动性越大。膜脂的流动性越大。温温度度对对膜膜脂脂的的运运动动有有明明显显的的影影响响。在在细细菌菌和和动动物物细细胞胞中中常常通通过过增增加加不不饱饱和和脂脂肪肪酸酸的的含含量量来来调调节节膜膜脂脂的的相变温度以维持膜脂的流动性。相变温度以维持膜脂的流动性。在在动动物物细细胞胞中中，胆胆固固醇醇对对膜膜的的

13、流流动动性性起起重重要要的的双双向向调节作用。调节作用。第21页/共31页一、膜的流动性、膜蛋白的流动性膜蛋白的流动性荧光抗体免疫标记实验荧光抗体免疫标记实验 成成斑斑现现象象(patching)(patching)或或成成帽帽现现象象(capping)(capping)膜膜的的流流动动性性受受多多种种因因素素影影响响；细细胞胞骨骨架架不不但但影影响响膜膜蛋蛋白白的的运运动动，也也影影响响其其周周围围的的膜膜脂脂的的流流动动。膜膜蛋蛋白白与与膜膜脂脂分分子子的的相相互互作作用用也也是是影影响响膜膜流动性的重要因素。流动性的重要因素。第22页/共31页、荧光漂白恢复技术 程序：用荧光素标记膜蛋白

14、或膜质，然后用激光束照射细胞表面某一区域，使被照射区的荧光淬灭变暗。由于膜的流动性，变暗区域的亮度逐渐增加，最后恢复到与周围的荧光强度相等。根据荧光恢复的速度可推算出膜蛋白或膜脂扩散速度。一、膜的流动性研研究究膜膜蛋蛋白白或或膜膜脂脂流流动动性性的的基基本本实实验验技技术之一。术之一。第23页/共31页、细胞质膜各部分名称与细胞外环境接触的膜面称质膜的细胞外表面(ES)与细胞质基质接触的膜面称质膜的原生质表面(PS)。冷冻蚀刻技术制样过程中，膜结构常常从双层脂分子疏水端断裂，这样又产生了质膜的细胞外小页断裂面(EF)和原生质小页断裂面(PF)。二、膜的不对称性第24页/共31页、膜脂的不对称性

15、膜质的不对称性：指同一种膜脂分子在膜的脂双层中呈不均匀分布。糖脂仅存在于质膜的ES面，是完成其生理功能的结构基础。磷脂分子不对称分布的生物学意义还不清楚，有人推测可能与其合成部位有关，还有可能与膜蛋白的不对称分布有关。磷脂在红细胞质膜上的分布SM：鞘磷脂；PC:卵磷脂；PS：磷脂酰丝氨酸；PE：磷脂酰乙醇胺；PI：磷脂酰肌醇；CI：胆固醇二、膜的不对称性质膜外小页质膜外小页质膜内小页质膜内小页占占膜膜质质总总量量的的百百分分数数第25页/共31页二、膜的不对称性、膜蛋白的不对称性、膜蛋白的不对称性 膜蛋白的不对称性是指每种膜蛋白分子在细胞膜上都具有确定的方向性；例如：糖蛋白糖残基均分布在质膜的

16、ES面；膜蛋白的不对称性是生物膜完成复杂的在时间与空间上 有序的各种生理功能的保证。第26页/共31页三、细胞质膜的功能 为细胞的生命活动提供相对稳定的内环境;选择性的物质运输,包括代谢底物的输入与代谢产物的排除,其中伴随着能量的传递;提供细胞识别位点,并完成细胞内外信息跨膜转导;为多种酶提供结合位点,使酶促反应高效而有序地进行;介导细胞与细胞、细胞与胞外基质之间的连接;参与形成具有不同功能的细胞表面特化结构；膜蛋白的遗传与某些遗传病、恶性肿瘤，甚至神经退行性疾病相关，很多膜蛋白可作为疾病治疗的药物靶标。第27页/共31页第三节 膜骨架 细胞质膜常常与膜下结构(主要是细胞骨架系统)相互联系、协

17、同作用,并形成细胞表面的某些特化结构以完成特定的功能。一、膜骨架膜骨架的概念指细胞质膜下与膜蛋白相连的由纤维蛋白组成的网架结构,它参与维持细胞质膜的形状并协助质膜完成多种生理功能。二、红细胞的生物学特性三、红细胞质膜蛋白及膜骨架第28页/共31页哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核和内膜系统，细胞膜既有良好的弹性又有较高的强度，并且细胞膜和膜骨架的蛋白比较容易纯化、分析。当细胞经低渗处理后，质膜破裂，同时释放出血红蛋白和胞内其他可溶性蛋白。这时红细胞仍然保持原来的形状和大小，这种结构称为红细胞影（又称血影）。因此红细胞为研究质膜的结构及其与膜骨架的关系提供了理想的材料。二、红细胞的生物学特性第29页/共31页 红细胞膜蛋白红细胞膜蛋白 (包括膜骨架蛋白包括膜骨架蛋白)SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析显示约有15种主要的蛋白带:三、红细胞质膜蛋白及膜骨架血影蛋白血影蛋白血型糖蛋白血型糖蛋白A带带3蛋白蛋白 锚蛋白锚蛋白肌动蛋白肌动蛋白带带4.1蛋白蛋白第30页/共31页感谢您的观看！第31页/共31页