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1、第九章第九章 第五节第五节 肝脏病常用检验肝脏病常用检验陆陆 敏敏 敏敏学习目标了解血清蛋白、胆红素和酶学检查的参考范围及临床意义 熟悉血清蛋白质、胆红素和酶学检查标本采集方法与注意事项了解病毒性肝炎血清标志物和血清甲胎蛋白的参考范围及临床 意义熟悉病毒性肝炎血清标志物和血清甲胎蛋白标本采集的方法肝脏的基本功能检测肝功能状态的实验室检查称为肝功能检验参与胆红素代谢:合成、分泌并排泄胆汁参与糖、蛋白质、脂肪代谢参与激素灭活和解毒 蛋白质代谢功能检验 胆红素代谢检验 血清总胆汁酸测定 血清酶学检验 病毒性肝炎标志物检验 血清甲种胎儿蛋白测定肝脏病常用的实验室检查一、蛋白质代谢功能测定肝脏合成蛋白质
2、清蛋白某些球蛋白糖蛋白、脂蛋白纤维蛋白原及多种凝血因子等一、蛋白质代谢功能测定肝脏受损血浆蛋白的种类和数量发生变化清蛋白球蛋白纤维蛋白原(一)血清蛋白测定 血清总蛋白=血清清蛋白+血清球蛋白 serum total serum total protein,TPprotein,TP albumin,ALB albumin,ALB globulin,GLBglobulin,GLB血清球蛋白分为1、2、,包括 免疫球蛋白、补体 各种糖蛋白、脂蛋白、金属结合蛋白 酶类 标本采集方法 空腹静脉血2ml,不抗凝管 参考值(成人)血清总蛋白(TPTP):6080g/L血清清蛋白(ALB):4050g/L清蛋
3、白/球蛋白(A/G):1.52.5:1血清球蛋白(GLB):2030g/L临床意义临床意义 总蛋白 降低血液稀释、营养不良、慢性消耗性疾病、肝脏 蛋白合成功能障碍以及各种原因引起的蛋白丢失过多 增高各种原因引起的血液浓缩或蛋白合成增加 清蛋白 降低见于营养不良、各种肝脏疾病引起的肝细胞损害、蛋白质消耗增多、蛋白质丢失增多 增高见于血液浓缩、Addison病等 减低常伴-球蛋白增高 临床意义临床意义 球蛋白 血清总蛋白增高主要是球蛋白(-球蛋白)增高 增高见于慢性肝脏疾病、M蛋白血症、自身免疫性疾病 及慢性感染 减低见于婴幼儿、免疫功能抑制、先天性低-球蛋白 血症 A/G比值降低或倒置 伴总蛋白
4、降低,见于严重肝功能损害 伴总蛋白升高见于M蛋白血症(二)血清蛋白电泳 标本采集方法 空腹静脉血1ml,不抗凝管 血清蛋白由多种分子大小、等电点及所带负电荷不同的蛋白质组成。在电场中各种蛋白质泳动速度不同,得以分离。(二)血清蛋白电泳 参考值(醋酸纤维素膜法)五个区带:清蛋白:0.620.71 1球蛋白:0.030.04 2球蛋白:0.060.10 球蛋白:0.070.11 球蛋白:0.090.18 血清蛋白电泳的临床意义 肝病型 清蛋白,1、2和球蛋白,球蛋白 见于慢性肝炎、肝硬化、肝细胞癌 M蛋白血症型 清蛋白轻度,球蛋白明显,区带、区带或 与区带之间出现明显M蛋白区带 见于多发性骨髓瘤、
5、原发性巨球蛋白血症等 血清蛋白电泳的临床意义 肾病型 清蛋白及球蛋白,2及球蛋白 见于肾病综合征和糖尿病肾病 炎症型 1、2、3种球蛋白均 见于各种急、慢性炎症或应激反应 其他 结缔组织病常伴有球蛋白 先天性低球蛋白血症球蛋白(三)血氨测定 1.肠道血中尿素肠腔弥散肠菌氨蛋白质血液 1.肝脏合成尿素经肾脏排出 2.肝/肾/脑利用(需消耗ATP)3.肾脏排出 2.骨骼肌、肾脏生成的氨 血氨来源 血氨清除 标本采集方法 静脉血2ml,置于抗凝管或冰盒(0)中 防止标本溶血,需隔绝空气送检 参考值 1030mol/L 临床意义 生理性:见于剧烈运动,高蛋白饮食 病理性:见于严重肝病、上消化道出血及尿
6、毒症等二、胆红素代谢检验1 1幼红细胞在骨髓原位分解幼红细胞在骨髓原位分解非结合胆红素非结合胆红素2 2肌红蛋白分解肌红蛋白分解间接、直接胆红素间接、直接胆红素无胆红素无胆红素尿胆原尿胆原粪胆素粪胆素胆红素代谢的检验项目 血清总胆红素血清总胆红素(serum total bilirubin,STB)、结合胆红素结合胆红素(conjugated bilirubin,CB)和非结和非结 合胆红素合胆红素(unconjugated bilirubin,UCB)测定测定 尿内胆红素和尿胆原测定尿内胆红素和尿胆原测定 标本采集方法 参考值 静脉血2ml,不抗凝管 避光,切勿溶血、及时送检成人STB:ST
7、B:3.43.417.117.1mol/Lmol/L CB:CB:0 06.86.8mol/Lmol/LUCB:UCB:1.71.710.210.2mol/Lmol/LCB/STB:CB/STB:0.20.20.40.4血清总胆红素、结合胆红素和非结合胆红素测定临床意义STB重度黄疸:STB 342 mol/L隐性黄疸:17.1 STB34.2 mol/L轻度黄疸:34.2 STB171 mol/L中度黄疸:171 STB342 mol/L主要用于判断有无黄疸及其程度判断黄疸的类型溶血性黄疸:CB/STB0.2,STB多小于85mol/L肝细胞性黄疸:0.2 CB/STB0.5推断黄疸的原因
8、标本采集方法 新鲜晨尿2030ml,定量检测留24h尿液 清洁容器,不使用防腐剂 因尿胆原易氧化,需避光加盖,必要时冷藏(二)尿内胆红素和尿胆原测定 参考值尿内胆红素定性:阴性反应尿内尿胆原定性:阴性或弱阳性反应尿内尿胆原定量:06mol/24h(二)尿内胆红素和尿胆原测定临床意义 尿胆红素阳性 见于肝细胞性黄疸或阻塞性黄疸 尿胆原阳性 见于肝细胞性黄疸三、血清总胆汁酸测定三、血清总胆汁酸测定 胆汁酸(bile acid,BA)由肝脏合成,随胆 汁排入肠道,约95%进入肠肝循环 能反映肝细胞的合成、摄取和排泌功能及胆 道的排泄功能 总胆汁酸(total bile acid,TBA)是5种类 型
9、胆酸的总和 标本采集方法空腹或餐后2小时静脉血2ml 参考范围酶法:010mol/L临床意义临床意义 病理性增高主要见于:肝脏疾病 急性肝炎、慢性活动性肝炎、肝硬化和肝癌 胆道阻塞性疾病 胆石症、胆道肿瘤等导致肝内、肝外胆管阻塞 其他疾病 门脉分流、肠道疾病、胆结石 四、血清酶学检查肝脏病变某些酶合成增加或减少肝细胞坏死细胞膜通透性增加酶逸出入血胆道梗阻酶排出受阻血清酶的变化血清酶学检查的常用项目(一)转氨酶测定(二)碱性磷酸酶测定(三)-谷氨酰基转移酶测定(四)单胺氧化酶测定(一)转氨酶测定 丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALTALT)肝细胞(胞质中)、
10、心肌、脑和肾组织 天门冬酸氨基转移酶(aspartate aminotransfarase,ASTAST)心肌、肝脏(线粒体中)、骨骼、肾组织 轻、中度肝损时以ALT升高明显 严重肝损时以AST升高明显 标本采集方法 静脉血2ml,不抗凝管 防止标本溶血 采血前避免剧烈运动 参考值 ALT,AST 12w达高峰,35w恢复,如不能恢复或再次升高示转为慢性急性重症肝炎可有“胆酶分离”现象慢性病毒性肝炎轻度增高或正常,ALT/AST 1ALT/AST 1,示慢性肝炎转为活动期非病毒性肝炎轻度增高或正常,ALT/AST 1肝硬化转氨酶活性取决于肝细胞坏死和肝纤维化的程度胆汁淤积、急性心肌梗死(二)碱
11、性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)测定n 存在于肝(肝血窦和毛细胆管的微绒毛上)、骨 骼、肾脏、小肠n 肝脏的ALP经胆汁排入小肠n ALP增高是胆汁淤积的酶学指标n标本采集方法 静脉血2ml n参考值(磷酸硝基苯酚连续监测法(37)成人 40110U/LALP程度与梗阻程度和持续时间成正比临床意义骨骼疾病ALP可见于变形性骨炎、骨转移癌、骨折愈合期等肝内、外胆管阻塞ALP明显增高,先于黄疸出现其他佝偻病、甲状旁腺功能亢进、妊娠后期 及儿童生长期 增高正常 明显 轻度丙氨酸氨基转移酶(ALT)正常或增高较明显较明显 明显血清胆红素(STB)明显正常正常或增高 明显碱性
12、磷酸酶(ALP)肝癌溶血性黄疸肝细胞性黄疸阻塞性黄疸 ALP、ALT、胆红素同时测定有助于黄疸的鉴别诊断(三)-谷氨酰基转移酶(-glutamyl transferase,-GT)测定n 分布于肾、肝、胰,血清中-GT来源于肝胆系统n 肝内-GT分布于胆管系统n 肝内-GT合成增多或胆汁排泄受阻,血清-GTn 标本采集方法 静脉血2mln参考值50U/L胆道梗阻病毒性肝炎和肝硬化酒精性肝损害-GT可中度或明显升高,上升幅度大于转氨酶临床意义-GT与梗阻程度和持续时间成正比急性肝炎时增高慢性肝炎及肝硬化非活动期正常,活动期或病情恶化时持续升高(四)单胺氧化酶测定MAO:存在于肝、肾、脑,促进结缔
13、组织成熟n 标本采集方法 静脉血2ml n 参考值1240U/mlMAO可反映肝脏纤维化程度肝脏疾病其他疾病甲亢、结缔组织病等增高临床意义急性肝炎:正常急性重症肝炎:细胞广泛破坏时可增高中、重度慢性肝炎:近半数增高肝硬化、肝癌伴肝硬化:明显增高早期肝硬化:增高不明显五、病毒性肝炎血清标志物检查五、病毒性肝炎血清标志物检查 病毒性肝炎的病原体有甲型肝炎病毒(HAV)、乙型肝炎病毒(HBV)、丙型肝炎病毒(HCV)、丁型肝炎病毒(HDV)和戊型肝炎病毒(HEV)5种 我国以HAV、HBV、HCV感染多见 病毒性肝炎的血清标志物检测包括肝炎病毒DNA、病毒抗原和抗体的检测 甲型肝炎病毒标志物检查甲型
14、肝炎病毒标志物检查 甲型肝炎病毒 属于RNA病毒 机体感染后仅形成一个抗原抗体系统 最常用的检测指标是抗-HAV IgM和抗-HAV IgG 标本采集方法 静脉血2ml 参考范围 ELISA:阴性临床意义临床意义 抗-HAV IgM 是特异性急性甲型肝炎早期诊断指标 发病后12周内出现,6个月后转阴 抗-HAV IgM阳性提示HAV 感染期 抗-HAV IgG 为一种保护性抗体 抗-HAV IgG阳性表示过去曾感染过HAV机体感染HBV后产生3种不同的抗原抗体系统 乙型肝炎病毒表面抗原抗体 (HBsAg、HBsAb)乙型肝炎病毒核心抗原抗体 (HBcAg、HBcAb)乙型肝炎病毒e抗原抗体 (
15、HBeAg、HBeAb)HBcAg存在于肝细胞核内,不游离于血清中,不作常规检查乙型病毒性肝炎标志物检验 标本采集方法 静脉血3ml,忌溶血 参考值 均为阴性各标志物阳性的临床意义1)HBsAgn 为HBV感染的指标n 感染后12个月出现,持续数周、数月、数年,甚至终身n 本身不具传染性,如阳性可作为传染性的标志 之一HBsAg+乙型肝炎潜伏期和急性期慢性迁延性肝炎、慢性活动性肝炎、肝硬化、肝癌慢性HbsAg携带者2)抗-HBs 为一种中和抗体 在HBsAg转阴后出现,可持续多年,其滴度与保护作用相平行 阳 性曾感染过HBV,有一定的免疫力接种乙肝疫苗后被动性获得抗 HBs抗体3)HBeAg阳
16、 性是病毒复制、传染性强的指标急性肝炎者,若持续阳性,易转变为慢性肝炎HBeAg和HBsAg阳性的孕妇可将乙肝病毒垂直传播给新生儿4)抗-HBe-不是中和抗体-出现于急性感染的恢复期,持续时间较长-是HBV复制减少的标志,传染性可能较前减弱 见于HBeAg转阴者,示病毒复制减少,传染性减低 部分慢性乙型肝炎、肝硬化和肝癌患者阳性5)抗-HBc 不是中和抗体 是HBV对肝细胞损害程度的标志 主要检测抗-HBc IgM和抗-HBc IgG(1)抗-HBc IgM 感染后最早出现阳性急性乙肝,可用于判断病毒复制和传染性慢性活动性肝炎(2)抗-HBc IgG 感染后1个月开始升高,持续时间长 高滴度表
17、明患者正在感染 低滴度表示既往曾感染过HBV 6)乙型肝炎病毒DNA(HBV-DNA)HBV-DNA定性和定量测定是乙型肝炎的直接诊断 证据 用于抗病毒药物治疗乙肝的疗效评价、筛检献血 员、防止乙肝病毒输血后感染、监测血制品的传染 性和乙肝疫苗的安全性 HBsAg抗-HBsHBeAg抗-HBe抗-HBc+急、慢乙肝,高传+急、慢乙肝、慢性表抗携带者+急趋慢或恢复,弱传+恢复期、曾感,有免疫力+康复期,弱传+急“窗口期”或曾感+疫苗接种后或康复+康复开始产免疫力丙型肝炎病毒标志物检查丙型肝炎病毒标志物检查 丙型肝炎病毒 为单链正股RNA 丙肝病毒易发生变异 易转为慢性 临床上诊断HCV感染的主要
18、依据为抗-HCV IgM、抗-HCV IgG 和HCV-RNA测定 丙型肝炎病毒抗体测定丙型肝炎病毒抗体测定 标本采集方法 静脉血2ml 参考范围 ELISA法:阴性 临床意义 抗-HCV 阳性结果是诊断HCV感染的重要依据 抗-HCV IgM 阳性见于急性HCV感染 诊断丙肝的早期敏感指标 抗-HCV IgG 阳性表明体内有HCV感染 阴性不能完全排除HCV感染丙型肝炎病毒丙型肝炎病毒RNARNA定性和定量测定定性和定量测定 是HCV感染最直接,最灵敏和最特异的检测指标 标本采集方法 静脉血3ml 参考范围 阴性 临床意义 HCV-RNA定性 阳性提示HCV复制活跃,传染性强 HCV-RNA
19、和抗-HCV同时阳性,提示活动性感染 HCV-RNA阴性而抗-HCV IgG阳性提示既往感染可能性大 HCV-RNA定量对判断病情、监测药物疗效及血制品安全有重要意义 n AFP:胎儿发育早期由肝脏和卵黄囊合成的一种 血清糖蛋白,出生后不久即逐渐消失n 肝细胞或生殖腺胚胎组织发生恶变:血AFP可增高n 检测血AFP浓度对肝脏及滋养细胞恶性肿瘤有重 要的诊断价值六、血清甲胎蛋白测定 标本采集方法静脉血3ml,不抗凝管 参考值定量300 g/有诊断意义其他 急性或慢性活动性肝炎AFP一般为20-200 g/睾丸癌、畸胎瘤、卵巢癌:AFP可升高 妊娠三个月后AFP可升高,但300 g/,分娩后3周后恢复思考题1.血清总蛋白、ALB、GLB、A/G的参考值是多少?2.在肝硬化时,血清蛋白电泳会发生怎样的变化?3.梗阻性黄疸时,血清STB、CB、CB/STB会如何变化?4.ALT、AST在病毒性肝炎时会怎样变化?5.乙型肝炎病毒标志物有哪几对?6.大三阳和小三阳分别指什么?7.如何鉴别阻塞性黄疸和溶血性黄疸?参考文献1汤之明.诊断学.第1版.北京:高等教育出版社,20062刘人伟.检验与临床.第1版.北京:化学工业出版 社,现代生物技术与医药科技出版中心,2002.3.袁汉尧.临床检验诊断学.第1版.广州:广东科技 出版社,2002.谢谢
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