感染性疾病的抗微生物治疗临床微生物学(20150911)课件.ppt

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1、1 1 临临 床床 微微 生生 物物 学学 概概 论论徐徐 晓晓 刚刚2 2感染性疾病的危害性根据世界卫生组织的统计数据l l感染性疾病导致死亡原因中居第二位感染性疾病导致死亡原因中居第二位l l在致残病因中居第一位在致残病因中居第一位 全球每年死于结核病者近全球每年死于结核病者近300300万万 世界人口的世界人口的1/31/3曾感染结核曾感染结核 中国为结核病高发区，居第二位中国为结核病高发区，居第二位 中国人中中国人中4545曾感染结核曾感染结核感染性疾病的危害性Clin Infect Dis 2008;46:S344.Table 1.Annual death rates in the

2、United States for selected infectious diseases.4 4 抗菌药物、病原微生物及 机体相互作用关系抗菌药物抗菌药物机体机体 病原微生物病原微生物耐药性耐药性药效学药效学(PD)毒性毒性药动学药动学(PK)感感 染染防防 御御6 6病原微生物的发现十九世纪德国Koch在固体培养基上分离出第一个纯培养的细菌-碳疽芽孢杆菌通过动物实验，提出了确定病原微生物的“郭霍法则（Koch postulate）”l l动物感染部位能分离到特定微生物动物感染部位能分离到特定微生物l l健康动物体内分离不到这一微生物健康动物体内分离不到这一微生物l l这一微生物接种于健康

3、动物可致病这一微生物接种于健康动物可致病l l被感染动物能再分离到这一微生物被感染动物能再分离到这一微生物7 7病原微生物与感染性疾病类型金黄色葡萄球菌引起的疖结核分枝杆菌引起的淋巴结核1882-1894年期间分离出许多重要的致病菌，被称为细菌学发展的“黄金时代”8 8感染性疾病与病原微生物?鸭子天鹅部分感染临床表现不典型1010嗜麦芽窄食单胞菌对多类药物不敏感1111金葡菌金葡菌青霉素耐药金葡菌青霉素耐药金葡菌革兰阳性菌耐药性的进化甲氧西林耐药金葡菌甲氧西林耐药金葡菌(MRSA)甲氧西林甲氧西林1970s青霉素青霉素1950s万古霉素万古霉素万古霉素耐药肠球菌万古霉素耐药肠球菌(VRE)19

4、97万古霉素中度耐药万古霉素中度耐药金葡菌金葡菌(VISA)2002 万古霉素万古霉素耐药金葡菌耐药金葡菌(VRSA)金葡菌获得了金葡菌获得了vanA最后防线 19552006年上海地区发现新型VREvanM型1515抗菌药物合用，作用不一定相加青霉素+氯霉素青霉素+红霉素青霉素+诺氟沙星青霉素+阿米卡星1616主要内容基本概念及常见病原微生物日常诊疗工作相关基础研究1818感染和感染性疾病感染(infection)：病原体突破宿主的抵御病原体突破宿主的抵御功能，侵入体内，与机体相互作用、相互斗功能，侵入体内，与机体相互作用、相互斗争的过程争的过程.感染性疾病(infectious disea

5、ses)：导致机体产生临床症状、体征或生理功能异常.1919感染和感染性疾病根据机体的免疫状态及侵根据机体的免疫状态及侵入机体的病原微生物的毒入机体的病原微生物的毒力、数量等不同可出现以力、数量等不同可出现以下结局：下结局：l l病原清除病原清除l l隐性感染隐性感染l l显性感染显性感染l l潜伏性感染潜伏性感染l l病原携带病原携带显性感染显性感染病原清除病原清除隐性感染隐性感染潜伏性感染潜伏性感染病原携带病原携带细菌bacterial需氧菌 aerobel厌氧菌 anaerobe病毒virus真菌fungi其他 othersl支原体Mycoplasmal衣原体 Chlamydial立克次

6、体 Rickettsieael螺旋体 spirochetes2020常见病原微生物病原微生物分类球菌球菌 coccus：l革兰阳性球菌革兰阳性球菌Gram-positive coccil革兰阴性球菌Gram-negative cocci脑膜炎奈瑟菌及淋病奈瑟菌杆菌杆菌bacilli：l革兰阴性杆菌革兰阴性杆菌Gram-negative bacillil革兰阳性杆菌Gram-positive bacilli炭疽芽孢杆菌白喉棒状杆菌单核细胞增生李斯特菌分支杆菌2121临床主要病原菌2222革兰阳性球菌 Gram-positive coccci葡萄球菌属葡萄球菌属 StaphylococcusSta

7、phylococcus spp.spp.：l l金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌(金葡菌金葡菌)Staphylococcus aureusStaphylococcus aureusl l表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌(表葡菌表葡菌)S.epidermidisS.epidermidisl l腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌 (腐葡菌腐葡菌)S.saprophyticusS.saprophyticus链球菌属链球菌属 StreptococcusStreptococcus spp.spp.l l化脓性链球菌化脓性链球菌 Streptococcus pyogenesStreptococcus pyogenesl l肺炎

8、链球菌肺炎链球菌 S.pneumoniaeS.pneumoniael l草绿色链球菌草绿色链球菌 S.viridansS.viridans肠球菌属肠球菌属 EnterococcusEnterococcus spp.:spp.:l l粪肠球菌粪肠球菌 E.faecalisE.faecalisl l屎肠球菌屎肠球菌 E.faeciumE.faecium头孢噻肟 耐药2525革兰阴性杆菌Gram-negative bacilli肠杆菌科肠杆菌科 EnterobacteriaceaeEnterobacteriaceael l埃希菌属：大肠埃希菌埃希菌属：大肠埃希菌 Escherichia coliEs

9、cherichia colil l克雷伯菌属：肺炎克雷伯菌克雷伯菌属：肺炎克雷伯菌Klebsiella pneumoniaeKlebsiella pneumoniael l肠杆菌属：阴沟肠杆菌肠杆菌属：阴沟肠杆菌Enterobacter cloacaeEnterobacter cloacae、产气肠杆菌产气肠杆菌E.aerogenesE.aerogenesl l沙雷菌属：粘质沙雷菌沙雷菌属：粘质沙雷菌Serratia marcescensSerratia marcescensl l变形杆菌属：奇异变形杆菌变形杆菌属：奇异变形杆菌Proteus mirabilisProteus mirabili

10、sl l摩根菌属：摩根摩根菌摩根菌属：摩根摩根菌Morganella morganiiMorganella morganiil l枸橼酸杆菌属：弗劳地枸橼酸杆菌枸橼酸杆菌属：弗劳地枸橼酸杆菌Citrobacter freundiiCitrobacter freundiil l沙门菌属：沙寒沙门菌沙门菌属：沙寒沙门菌Salmonella typhiSalmonella typhil l志贺菌属：福氏志贺菌属志贺菌属：福氏志贺菌属Shigella flexneriShigella flexneri2626革兰阴性杆菌Gram-negative bacilli非发酵菌 Nonfermentersl

11、l假单胞菌属：假单胞菌属：铜绿假单胞菌铜绿假单胞菌P.aeruginosaP.aeruginosal l不动杆菌属：不动杆菌属：鲍曼不动杆菌鲍曼不动杆菌A.baumanniA.baumannil l窄食单胞菌：嗜麦芽窄食单胞菌窄食单胞菌：嗜麦芽窄食单胞菌S.maltophiliaS.maltophilial l产碱杆菌：粪产碱杆菌产碱杆菌：粪产碱杆菌Alcaligenes faecalisAlcaligenes faecalisl l黄杆菌属：脑膜败血黄杆菌黄杆菌属：脑膜败血黄杆菌F.meningosepticumF.meningosepticum2828革兰阴性杆菌引起的感染革兰阴性杆菌可引

12、起几乎所有脏器的感染l l血流感染血流感染l l中枢神经系统感染中枢神经系统感染l l泌尿生殖系统感染泌尿生殖系统感染l l肺部感染肺部感染l l腹腔感染腹腔感染2929正常菌群 在正常人体体表与外界相通的腔道：口腔、鼻咽在正常人体体表与外界相通的腔道：口腔、鼻咽腔、肠道、泌尿生殖道存在的多种微生物腔、肠道、泌尿生殖道存在的多种微生物.在机体免疫功能正常时对人体有益无害，因以细在机体免疫功能正常时对人体有益无害，因以细菌和真菌为主，故称菌和真菌为主，故称“正常菌群正常菌群”在正常情况下，宿主、正常菌群和外界环境相互在正常情况下，宿主、正常菌群和外界环境相互适应，保持平衡状态适应，保持平衡状态正

13、常菌群的存在是保持人体健康的重要因素正常菌群的存在是保持人体健康的重要因素l l生物拮抗生物拮抗l l免疫形成免疫形成l l产生维生素等产生维生素等3131条件致病菌（条件致病菌（opportunistic pathogenopportunistic pathogen）l l环境中通常不致病的细菌环境中通常不致病的细菌l l人类正常菌群异位人类正常菌群异位l l人类正常菌群失调人类正常菌群失调机会感染（机会感染（opportunistic infectionsopportunistic infections）当机体抵抗力降低时，原来正常寄居或致病力很低的微生当机体抵抗力降低时，原来正常寄居或致

14、病力很低的微生物可能侵入人体造成的感染物可能侵入人体造成的感染l l内源性感染内源性感染（endogenous infectionendogenous infection）当机体抵抗力降低时，原来正常寄居的微生物可能侵入当机体抵抗力降低时，原来正常寄居的微生物可能侵入人体其他易感部位造成的感染，又称自身感染人体其他易感部位造成的感染，又称自身感染条件致病菌和内源性/机会感染3232二重感染（suprainfection）临床上较长期、大量使用广谱抗菌药物杀灭了大临床上较长期、大量使用广谱抗菌药物杀灭了大量正常菌群量正常菌群耐药的致病和低度致病的病原体大量繁殖生长耐药的致病和低度致病的病原体大量

15、繁殖生长破坏了原有平衡，形成菌群失调，严重时称菌群破坏了原有平衡，形成菌群失调，严重时称菌群失调症或菌群交替症，即二重感染失调症或菌群交替症，即二重感染3333致病菌和外源性感染 致病微生物致病微生物致病微生物致病微生物(pathogen)(pathogen)：一般健康人体不携带，能引一般健康人体不携带，能引起人类疾病的微生物称为致病微生物或病原微生物起人类疾病的微生物称为致病微生物或病原微生物,细细菌、真菌则称为致病菌菌、真菌则称为致病菌.如如如如:炭疽杆菌、结核分支杆菌、炭疽杆菌、结核分支杆菌、炭疽杆菌、结核分支杆菌、炭疽杆菌、结核分支杆菌、脑膜炎奈瑟菌、白喉棒脑膜炎奈瑟菌、白喉棒脑膜炎奈

16、瑟菌、白喉棒脑膜炎奈瑟菌、白喉棒状杆菌、状杆菌、状杆菌、状杆菌、痢疾志贺菌、福氏志贺菌、宋内志贺菌，甲、痢疾志贺菌、福氏志贺菌、宋内志贺菌，甲、痢疾志贺菌、福氏志贺菌、宋内志贺菌，甲、痢疾志贺菌、福氏志贺菌、宋内志贺菌，甲、乙、丙、丁肝炎病毒等乙、丙、丁肝炎病毒等乙、丙、丁肝炎病毒等乙、丙、丁肝炎病毒等外源性感染（外源性感染（外源性感染（外源性感染（exogenous infectionexogenous infection）：指由外界的致指由外界的致病微生物进入正常人的人体组织，与宿主相互作用、相病微生物进入正常人的人体组织，与宿主相互作用、相互斗争的过程；引起宿主组织损伤和功能障碍者则称为

17、互斗争的过程；引起宿主组织损伤和功能障碍者则称为感染性疾病感染性疾病.如：炭疽病、结核病、脑膜炎、白喉、细菌性痢疾、如：炭疽病、结核病、脑膜炎、白喉、细菌性痢疾、如：炭疽病、结核病、脑膜炎、白喉、细菌性痢疾、如：炭疽病、结核病、脑膜炎、白喉、细菌性痢疾、病毒性肝炎等病毒性肝炎等病毒性肝炎等病毒性肝炎等3434 微生物 致病微生物 病原微生物3535 苛苛 养养 菌菌肺炎链球菌嗜血流感杆菌l l是是一类生长需要特殊营养物质的细菌，与许多一类生长需要特殊营养物质的细菌，与许多一类生长需要特殊营养物质的细菌，与许多一类生长需要特殊营养物质的细菌，与许多感染性疾病有关，其分离培养较为困难感染性疾病有关

18、，其分离培养较为困难感染性疾病有关，其分离培养较为困难感染性疾病有关，其分离培养较为困难3636苛苛 养养 菌菌营养要求高营养要求高 肺炎链球菌肺炎链球菌 培养基内要加入血或血清培养基内要加入血或血清 流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌 XX、VV因子因子比较脆弱比较脆弱 对干燥、对寒冷的抵抗力低对干燥、对寒冷的抵抗力低培养条件培养条件 5 51010COCO2 2、3535培养培养 2424 48h48h呼吸道其他快生长细菌的覆盖使分离率非常低呼吸道其他快生长细菌的覆盖使分离率非常低3737临床标本的采集和检测标本类型呼吸道标本呼吸道标本 深部咳出痰深部咳出痰 支气管灌洗液支气管灌洗液 咽拭子咽拭子

19、鼻气管吸出液鼻气管吸出液 尿液尿液 血液血液 脑脊液脑脊液伤口、脓液伤口、脓液其它体液其它体液 胸水胸水 心包液心包液 引流液引流液 腹水腹水 滑囊液滑囊液3838标本的采集抗菌药物使用前正确的部位正确的时间足够的数量无菌的容器特殊要求应在化验单上注明咳痰标本：阴性杆菌被标本中抗生素抑制咳痰标本：阴性杆菌被标本中抗生素抑制咳痰标本：阴性杆菌被标本中抗生素抑制咳痰标本：阴性杆菌被标本中抗生素抑制抑制区抑制区抑制区抑制区例1.培养前抗生素使用的证据例例2.经验用药后，经验用药后，24h内送检痰标本内送检痰标本涂片示大量涂片示大量涂片示大量涂片示大量WBCWBCWBCWBC伴行大量伴行大量伴行大量伴

20、行大量G+G+G+G+形似肺炎链球菌细菌形似肺炎链球菌细菌形似肺炎链球菌细菌形似肺炎链球菌细菌培养仅生长少量肺炎链球菌（菌落形态不典型）及非致病奈培养仅生长少量肺炎链球菌（菌落形态不典型）及非致病奈培养仅生长少量肺炎链球菌（菌落形态不典型）及非致病奈培养仅生长少量肺炎链球菌（菌落形态不典型）及非致病奈瑟菌瑟菌瑟菌瑟菌血平板上标本涂布原始区见明显抑制肺炎链球菌生长现象血平板上标本涂布原始区见明显抑制肺炎链球菌生长现象血平板上标本涂布原始区见明显抑制肺炎链球菌生长现象血平板上标本涂布原始区见明显抑制肺炎链球菌生长现象肺链生长抑制区肺链生长抑制区涂片同前一份标本涂片同前一份标本培养仅生长少量奈瑟菌，

21、肺炎链球菌未见生长培养仅生长少量奈瑟菌，肺炎链球菌未见生长非致病奈瑟菌非致病奈瑟菌肺链同一病人经验用药后，同一病人经验用药后，24h24h后送检痰标本后送检痰标本4242标本的处理涂片光镜检查分离培养和鉴定免疫学检查动物接种4343涂片光镜检查各种标本均应制成涂片，行革兰染色或特殊染色各种标本均应制成涂片，行革兰染色或特殊染色（抗酸或墨汁染色），直接形态学检查（抗酸或墨汁染色），直接形态学检查诊断很多感染性疾病病原的最基本和快速的方法诊断很多感染性疾病病原的最基本和快速的方法痰涂片和革兰染色白细胞白细胞（WBCWBC）25/LPF25/LPF鳞状上皮细胞鳞状上皮细胞（SECSEC）10/LPF

22、10/LPF合格痰标本必须具备的条件，如不符合上述指标，合格痰标本必须具备的条件，如不符合上述指标，检验科有责任通知临床重新采样检验科有责任通知临床重新采样Konemans Color Atlas and Textbook of Diagnostic Microbiology.2006.6th ed.4545尿液检查未离心的尿液镜检未离心的尿液镜检 10 WBC/mm10 WBC/mm3 3尿沉渣镜检尿沉渣镜检 5WBC/HPF5WBC/HPF清洁中段尿培养和菌落计数：清洁中段尿培养和菌落计数：10104 4-10-105 5菌落菌落/毫升毫升上皮细胞：上皮细胞：33.9/ul上皮细胞：上皮细

23、胞：4.6/ul14:31:3109:19:30白细胞：白细胞：8.2/ul白细胞白细胞:38/ul病原微生物生化反应鉴定微量化病原微生物生化反应鉴定微量化根据纯分细菌的形态、菌落特征，特征性的生化反应，根据纯分细菌的形态、菌落特征，特征性的生化反应，选择合适的选择合适的APIAPI鉴定系统鉴定系统:l l肠杆菌科细菌：肠杆菌科细菌：API 20EAPI 20El l非发酵革兰阴性杆菌：非发酵革兰阴性杆菌：API 20NEAPI 20NEl l葡萄球菌属：葡萄球菌属：Slidex Staph PlusSlidex Staph Plus API Staph API Staphl l链球菌属：链球

24、菌属：Slidex Strepto KitSlidex Strepto Kit API Strep API Strepl l奈瑟菌属、嗜血杆菌属：奈瑟菌属、嗜血杆菌属：API NHAPI NHl l厌氧菌：厌氧菌：API 20AAPI 20A4747菌种鉴定鉴定到种首先须涂片镜检临床的要求临床的要求l l尿中的抗酸杆菌尿中的抗酸杆菌l l流感嗜血杆菌杆菌，副流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌杆菌，副流感嗜血杆菌科研的要求科研的要求l l谷氨酸棒状杆菌谷氨酸棒状杆菌G+G+变变多杀巴斯德菌多杀巴斯德菌G-G-l l流感嗜血杆菌杆菌与副流感嗜血杆菌流感嗜血杆菌杆菌与副流感嗜血杆菌4848菌种鉴定鉴定到种简称

25、：药敏试验 测定抗菌药物在体外抑制病原微生物生长能力的试验,称细菌对药物的敏感性试验，亦称抗菌药物对细菌的抑菌试验。4949抗感染药物的敏感性试验供临床医师选用抗菌药物时的参考细菌耐药性监测和耐药性变迁评价新抗菌药物的药效学特征细菌耐药谱分析和分型有助某些菌种的鉴定作为医院感染流行病学调查的手段之一5050药敏试验的目的稀释法l l试管稀释法（肉汤稀释法）试管稀释法（肉汤稀释法）l l平板稀释法（琼脂稀释法）平板稀释法（琼脂稀释法）扩散法（纸片法）l lKirby-baure(K-B)Kirby-baure(K-B)法法E-Test联合药敏5151药物敏感性试验测定的方法 原理：以一定浓度的抗

26、菌药物与含有被测菌株的培养基进行一系列的对倍稀释经培养后，观察最低抑菌浓度（Minimal inhibitory concentration MIC）。5252稀释法105 cfu/ml350C，18-24h 64 32 16 8 4 2 1 5353试管稀释法MIC12864321684210.50.25545412864321684210.50.25最低杀菌浓度最低杀菌浓度Minimum Bactericidal Concentration,MBCMinimum Bactericidal Concentration,MBC取菌液、涂板、进行菌落计数在体外能够使细菌总数减少(杀灭)99.9%

27、以上的最低药物浓度5555肉汤微量法5656琼脂稀释法2g/ml1g/ml0.5g/ml5757若干常用指标oMIC(最低抑菌浓度 minimal inhibitory concentration)n在体外能够抑制细菌生长的最低药物浓度 oMBC(最低杀菌浓度 minimal bactericidal concentration)n在体外能够使细菌总数减少(杀灭)99.9%以上的最低药物浓度。oMIC50、MIC90n在一批实验中能抑制50%或90%受试菌所需的MIC。oMBC50 MBC90n在一批实验中能使50%或90%受试菌的活菌数减少99.9%所需的MBC。o临界浓度/折点（break

28、point）n根据抗菌药物抑制细菌生长所需要的MIC，结合常用剂量时该药所能达到的血药浓度，划定细菌对各种抗菌药物敏感或耐药的界限。扩散法 原理：将浸有抗菌药原理：将浸有抗菌药物的纸片贴在涂有细物的纸片贴在涂有细菌的琼脂平板上，抗菌的琼脂平板上，抗菌药物在琼脂内向四菌药物在琼脂内向四周扩散，因此敏感细周扩散，因此敏感细菌在纸片周围一定距菌在纸片周围一定距离内的生长受到抑制，离内的生长受到抑制，根据抑菌圈的大小即根据抑菌圈的大小即可推知该药物的最低可推知该药物的最低抑菌浓度（抑菌浓度（MICMIC）。）。5858耐药中敏 高敏100株临床菌株 100对MIC和DD 负相关（r=-0.9）原理：基

29、本同扩散法，原理：基本同扩散法，即浓度呈连续梯度的抗即浓度呈连续梯度的抗菌药物从塑料纸条中向菌药物从塑料纸条中向药敏琼脂中扩散，在试药敏琼脂中扩散，在试条周围浓度范围内检测条周围浓度范围内检测菌的生长被抑制，从而菌的生长被抑制，从而形成透明的抑菌圈。形成透明的抑菌圈。E-testE-test综合了稀释法和综合了稀释法和扩散法的原理和特点，扩散法的原理和特点，直接定量测出药物对测直接定量测出药物对测试菌的最低抑菌浓度试菌的最低抑菌浓度（MICMIC）。）。5959E-试验（E-Test）o菌液，药敏平板 同K-B法oE-Test条 宽5mm，长60mm S 敏感 I 中介 R 耐药 临床意义？6

30、060如何阅读药敏试验报告pp即常规用药时达到的平均血浓度超过对某种细菌MIC的5倍以上pp该细菌引起的感染，用这种药物常用剂量治疗有效，即称细菌对该药敏感6161 敏感 Spp常规用药时达到平均血浓度，一般相当于常规用药时达到平均血浓度，一般相当于或略高于对细菌的或略高于对细菌的MICMICpp当细菌引起的感染，仅在应用高剂量抗菌当细菌引起的感染，仅在应用高剂量抗菌药物时才有效，或者细菌处于体内抗菌药药物时才有效，或者细菌处于体内抗菌药物浓缩部位，如尿液，胆汁等才被抑制，物浓缩部位，如尿液，胆汁等才被抑制，称细菌对该药呈中度敏感。称细菌对该药呈中度敏感。ppSDDSDD（susceptibl

31、e-dose dependentsusceptible-dose dependent）剂量依赖的敏感性 6262中介 I药物对某一细菌的MIC高于药物在血或体液中可能达到的浓度有时细菌能产生灭活抗菌药物的酶，则不论其MIC值大小如何，仍应判定该菌为耐药6363耐药 R6464二、日常诊疗工作相关基础研究动物及其他体外模型研究分子生物学研究l l生物信息学研究生物信息学研究l l快速诊断技术快速诊断技术6565 动物实验与感染6666动物模型与感染病诊治6767其他体外模型与感染病诊治6868感染病诊治与其他体外模型血药浓度变化杀菌曲线6969感染病与分子生物学研究7070解答了一些令人费解的问

32、题磺胺药物的选择压力会导致：l l头孢类耐药性传播吗？头孢类耐药性传播吗？l l氨基糖苷类耐药性传播吗？氨基糖苷类耐药性传播吗？l l磷霉素耐药性传播吗？磷霉素耐药性传播吗？7171耐药菌株极少xx耐药菌株为主耐药菌株为主抗生素暴露抗生素暴露xxxxxxxxxx抗菌药物的选择性压力7272qnrA is located on complex sul1-type class 1 integronsWang M,et al.AAC 2003;47:22427373抗菌药物的选择压力具有交叉性（JAC 2008;62:JAC 2008;62:12521252）复杂的多重耐药质粒全长67850bp包含

33、70种基因19种与基因移动有关9种耐药基因7474金葡菌金葡菌青霉素耐药金葡菌青霉素耐药金葡菌如何应对万古霉素耐药金葡菌?甲氧西林耐药金葡菌甲氧西林耐药金葡菌(MRSA)甲氧西林甲氧西林1970s青霉素青霉素1950s万古霉素万古霉素万古霉素耐药肠球菌万古霉素耐药肠球菌(VRE)1997万古霉素中度耐药万古霉素中度耐药金葡菌金葡菌(VISA)2002 万古霉素万古霉素耐药金葡菌耐药金葡菌(VRSA)金葡菌获得了金葡菌获得了vanA最后防线 1955如何应对万古霉素耐药金葡菌?76Ox(8 mg/L)Vm(8 mg/L)VmTeOxVmOxVmOxVanA-type MRSA:Combinati

34、on of vancomycin and oxacillinEmPeSpVmTeOxEmPeSpVmTeOxEmPeSpPrichon and Courvalin.2006,Antimicrob.Agents Chemother.7777满足临床医生的急迫需求快速提供病原学诊断依据35天至数周7878病原诊断现状病原诊断现状病原诊断滞后，抗菌治疗针对性差，严重影响疗效病原诊断滞后，抗菌治疗针对性差，严重影响疗效病原诊断滞后，抗菌治疗针对性差，严重影响疗效病原诊断滞后，抗菌治疗针对性差，严重影响疗效传统方法传统方法传统方法传统方法l l一般细菌（培养药敏）一般细菌（培养药敏）一般细菌（培养药敏）

35、一般细菌（培养药敏）3 3 3 35 5 5 5日日日日l l厌氧菌厌氧菌厌氧菌厌氧菌5 5 5 57 7 7 7日日日日l l衣原体、支原体、军团菌衣原体、支原体、军团菌衣原体、支原体、军团菌衣原体、支原体、军团菌2 2 2 24 4 4 4周周周周l l结核分枝杆菌结核分枝杆菌结核分枝杆菌结核分枝杆菌4 4 4 4周周周周重症感染重症感染重症感染重症感染l l针对病原治疗针对病原治疗针对病原治疗针对病原治疗病死率病死率病死率病死率17.717.717.717.7l l未针对病原治疗未针对病原治疗未针对病原治疗未针对病原治疗病死率病死率病死率病死率40404040606060607979分子

36、生物学检测方法病原特征性病原特征性耐药基因耐药基因 传统方法传统方法血及其他体液标本血及其他体液标本培养培养18-48小时小时细菌鉴定细菌鉴定24-48小时小时细菌药敏细菌药敏细菌耐药谱报告细菌耐药谱报告制订抗菌治疗方案，制订抗菌治疗方案，用于临床用于临床18-24小时小时分子生物学方法分子生物学方法病原特征性病原特征性基因检出基因检出血及其他体液标本血及其他体液标本直接检测直接检测细菌检出细菌检出耐药谱测定耐药谱测定细菌耐药谱报告细菌耐药谱报告制订抗菌治疗方案制订抗菌治疗方案,用于临床用于临床68h35d8080金黄色葡萄球菌细菌通用探针葡萄球菌通用探针金葡菌探针8181mecA基因基因mecA基因探针8282肺炎支原体的分离、培养试验肺炎支原体的分离、培养试验需耗时数周需耗时数周8383Real-time PCR快速检测肺支23小时完成检测84842008年上海地区耐药性监测不同类型标本细菌分离情况不同细菌对常用药物敏感性8585本章节主要掌握的内容临床常见的病原菌什么是药物敏感性试验？有哪些方法？MIC、MIC50、MIC90、MBC、MBC50、MBC90临界浓度/折点（breakpoint)敏感、中介、耐药、谢 谢！