植物生理学实验-组织逆境伤害程度测定.ppt

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1、植物组织逆境伤害程度的测定 电导法（-20-20C,20minC,20min冷冻材料冷冻材料 ）学生进入实验室先洗试管 逆境伤害程度的测定方法：逆境伤害程度的测定方法：1 1 紫外法：紫外法：根据渗出物质对紫外的吸收根据渗出物质对紫外的吸收2 2 电导法电导法:一、实验原理：植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着重要的作用。在正常情况下，细胞膜对物质具有选择重要的作用。在正常情况下，细胞膜对物质具有选择重要的作用。在正常情况下，细胞膜对物质具有选择重要的作用

2、。在正常情况下，细胞膜对物质具有选择透性能力。透性能力。透性能力。透性能力。逆境：高温、干旱、冻害、冷害、污染、酸雨逆境：高温、干旱、冻害、冷害、污染、酸雨逆境：高温、干旱、冻害、冷害、污染、酸雨逆境：高温、干旱、冻害、冷害、污染、酸雨 当植物受到逆境影响时，细胞膜遭到破坏，膜透当植物受到逆境影响时，细胞膜遭到破坏，膜透当植物受到逆境影响时，细胞膜遭到破坏，膜透当植物受到逆境影响时，细胞膜遭到破坏，膜透性增大，从而使细胞内的电解质外渗，如植物组织浸性增大，从而使细胞内的电解质外渗，如植物组织浸性增大，从而使细胞内的电解质外渗，如植物组织浸性增大，从而使细胞内的电解质外渗，如植物组织浸入无离子水

3、中，水的电导将因电解质的外渗而加大。入无离子水中，水的电导将因电解质的外渗而加大。入无离子水中，水的电导将因电解质的外渗而加大。入无离子水中，水的电导将因电解质的外渗而加大。电导仪测定外液的电导度增加值，求得伤害程度。电导仪测定外液的电导度增加值，求得伤害程度。电导仪测定外液的电导度增加值，求得伤害程度。电导仪测定外液的电导度增加值，求得伤害程度。膜透性增大的程度与逆境胁迫强度有关，膜透性增大的程度与逆境胁迫强度有关，也与植物抗逆性的强弱有关。因此，电导法也与植物抗逆性的强弱有关。因此，电导法目前已成为作物抗性栽培、育种上鉴定植物目前已成为作物抗性栽培、育种上鉴定植物抗逆性强弱的一个精确而实用

4、的方法。抗逆性强弱的一个精确而实用的方法。大叶黄杨叶片大叶黄杨叶片二、实验材料：材料处理材料处理：正常植物叶片正常植物叶片 -20 -20冷冻胁迫处理，处理冷冻胁迫处理，处理20min20min。三、操作步骤程序：1 1、洗刷试管、洗刷试管：2、材料处理、材料处理3、电导率测定、电导率测定4、整理数据、整理数据,结果计算结果计算(课后算课后算)三、操作步骤程序：1 1、洗刷试管、洗刷试管：试管刷沾洗涤液刷一遍试管刷沾洗涤液刷一遍自来水自来水34遍冲净遍冲净去离子水冲去离子水冲1遍遍去离子水中含有吐温去离子水中含有吐温-20-20 （洗用会出现泡沫）（洗用会出现泡沫）（洗用会出现泡沫）（洗用会出

5、现泡沫）吐温作用：吐温作用：吐温作用：吐温作用：阴离子表面活性剂，促进水分与叶阴离子表面活性剂，促进水分与叶阴离子表面活性剂，促进水分与叶阴离子表面活性剂，促进水分与叶片表面接触。片表面接触。片表面接触。片表面接触。吐温吐温吐温吐温2020聚氧乙烯聚氧乙烯聚氧乙烯聚氧乙烯(20)(20)山梨醇酐单月桂酸酯山梨醇酐单月桂酸酯山梨醇酐单月桂酸酯山梨醇酐单月桂酸酯2、材料处理操作：正常、冻害各取正常、冻害各取3 3个叶片，洗净个叶片，洗净各打取叶圆片各打取叶圆片2727个以上个以上,放到小烧杯中用去离子水冲洗放到小烧杯中用去离子水冲洗每支试管每支试管9 9个叶圆片个叶圆片,加加15ml15ml蒸馏水

6、蒸馏水塑料纱网用去离子水漂洗一下，塑料纱网用去离子水漂洗一下，放入试管放入试管(距液面距液面1-2cm)1-2cm)抽气抽气15min(15min(不盖塞不盖塞)，取出纱网，取出纱网抽气作用？抽气作用？抽气作用？抽气作用？纱网作用纱网作用纱网作用纱网作用?防止抽气时叶圆片被抽出。防止抽气时叶圆片被抽出。防止抽气时叶圆片被抽出。防止抽气时叶圆片被抽出。防止高防止高防止高防止高COCOCOCO2 2 2 2气源和口中呼出的气源和口中呼出的气源和口中呼出的气源和口中呼出的COCOCOCO2 2 2 2进入试管进入试管进入试管进入试管 放置到塑料烧杯中放置到塑料烧杯中放置到塑料烧杯中放置到塑料烧杯中(

7、不盖塞子不盖塞子不盖塞子不盖塞子)，统一抽气，统一抽气，统一抽气，统一抽气1010101015min15min15min15min。（设置空白（设置空白（设置空白（设置空白1 1 1 1只试管）只试管）只试管）只试管）3、电导率测定：抽气后材料室温摇动抽气后材料室温摇动20min20min，测定初电导值测定初电导值S1S1(设一空白设一空白)沸水浴沸水浴10min10min杀死组织，杀死组织，自来水冷却自来水冷却用力摇用力摇1-2min1-2min后，后，测定终电导测定终电导S2S2DDS-307型电导率仪操作规程型电导率仪操作规程打开预热打开预热30min30min仪器校准：仪器校准：将将“

8、选择选择”旋钮指向旋钮指向“检查检查”档，调节档，调节常数常数补偿补偿旋钮到旋钮到“1”“1”刻度线，调节刻度线，调节温度补偿温度补偿旋钮到旋钮到“25”“25”刻度线，然后调节刻度线，然后调节“校准校准”旋钮，旋钮，使仪器显示使仪器显示100.0S/cm100.0S/cm，校准完毕，校准完毕样品测定：样品测定：将将“选择选择”旋钮旋钮于适合的量程，测定样品。于适合的量程，测定样品。当测定时显示值熄灭时，说明测量值超出当测定时显示值熄灭时，说明测量值超出量程范围，应将量程范围，应将选择旋钮选择旋钮置于高一档量程置于高一档量程按照电极上标明的电极常数，调节常数补偿按照电极上标明的电极常数，调节常

9、数补偿按照电极上标明的电极常数，调节常数补偿按照电极上标明的电极常数，调节常数补偿旋钮，使仪器显示值与电极所标常数一致旋钮，使仪器显示值与电极所标常数一致旋钮，使仪器显示值与电极所标常数一致旋钮，使仪器显示值与电极所标常数一致测定时电极完全浸测定时电极完全浸测定时电极完全浸测定时电极完全浸没到溶液中。如果没到溶液中。如果没到溶液中。如果没到溶液中。如果试管口小，电极不试管口小，电极不试管口小，电极不试管口小，电极不能全部浸没，可全能全部浸没，可全能全部浸没，可全能全部浸没，可全部试管加去离子水部试管加去离子水部试管加去离子水部试管加去离子水至至至至20ml20ml20ml20ml每测一个样品，

10、每测一个样品，用去离子水冲洗用去离子水冲洗电极，滤纸吸干电极，滤纸吸干电极表面水份，电极表面水份，再测下个样品再测下个样品结果计算:（按课本）按课本）相对电导度（相对电导度（L）=(S1-(S1-空白空白)/(S2-)/(S2-空白）空白）冻害的伤害度（）冻害的伤害度（）=Lt冻害处理的相对电导度冻害处理的相对电导度 Lck室温对照的相对电导度室温对照的相对电导度实实实实验验验验材材材材料料料料空空空空白白白白电电电电导导导导值值值值处处处处理理理理初电导值初电导值初电导值初电导值(S)(S)(S)(S)终电导值终电导值终电导值终电导值(S)(S)(S)(S)相相相相对对对对电电电电导导导导度度度度(L)(L)(L)(L)伤伤伤伤害害害害度度度度(%)(%)(%)(%)重复重复重复重复平平平平均均均均重复重复重复重复平平平平均均均均室室室室温温温温-20202020植物组织逆境伤害程度的测定记载表植物组织逆境伤害程度的测定记载表 结果记录：记载表老师签字 用品洗刷干净，检查摆放整齐、齐全 报告老师，经检查同意可离去下一个实验：地点：B124#植物组织中硝态氮含量的定量测定植物组织中硝态氮含量的定量测定(实验实验12)