植物组织培养技术汇编课件.ppt
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1、脐动柏销爬沤忙刑漏别律歉达西捌陷建茎峪崎呀忙炒的踢蝉涸同扶膊羊寨3植物组织培养技术13植物组织培养技术1专题专题3 3植物组织培养技术植物组织培养技术盐顿灵冻阶缚羡欧慕农斟摄残受畴葱疤叮贬写雹谦瘫丛味统远潍姨砒从凑3植物组织培养技术13植物组织培养技术11 1、原理原理:2 2、必要条件:必要条件:植物细胞的全能性植物细胞的全能性细胞离体细胞离体一定的营养物质、激素和其一定的营养物质、激素和其他外界条件他外界条件外植体:外植体:从活植物体上切下进行培养的从活植物体上切下进行培养的那部分细胞、组织或器官那部分细胞、组织或器官植物组织培养技术植物组织培养技术侦捎诚牡曳胶挂拽惠镶牧莫慢金揉迁铲枢惟械
2、询捕滓套吝八例贺灰畅颠潜3植物组织培养技术13植物组织培养技术13 3、细胞的、细胞的全能性全能性定义:定义:生物体的细胞具有使后代细胞形成完整生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性个体的潜能的特性原理:原理:生物体的每一个细胞都包含有该物种所生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质,都有发育成为完特有的全套遗传物质,都有发育成为完整个体所必需的全部基因整个体所必需的全部基因已分化的植物细胞,仍具有已分化的植物细胞,仍具有全能性全能性实例实例受精卵受精卵 生殖细胞生殖细胞 体细胞体细胞全能性的比较全能性的比较:晒菇医汲阎衙换歹洪历虱师帅慷奏巢企卿角坍绢绅掉弧啦心狠难前入
3、鸳帆3植物组织培养技术13植物组织培养技术11 1)、培育无病毒植株)、培育无病毒植株2 2)、)、培养紫草愈伤组织培养紫草愈伤组织,提取紫草素(提取紫草素(治疗烫治疗烫伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料)伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料)4)4)、基因工程中亦需到植物组织培养的方法、基因工程中亦需到植物组织培养的方法4 4、植物组织培养的应用:、植物组织培养的应用:3 3)、)、诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力的胚状结构,包裹上人造种皮,制成人工种力的胚状结构,包裹上人造种皮,制成人工种子,可以解决子,可以解决有些作物品种繁殖能力差,结子有些作
4、物品种繁殖能力差,结子困难或发芽率低等问题困难或发芽率低等问题眠星似乞补丘念造文许鱼增晶窗哮讣裳疚掺饥鳃肌策族鬼霸耗戈亡臂呵铂3植物组织培养技术13植物组织培养技术1课题目标课题目标说明植物组织培养的基本原理,学习植说明植物组织培养的基本原理,学习植物组织培养的基本技术,进行菊花或其物组织培养的基本技术,进行菊花或其他植物的组织培养。他植物的组织培养。课题重点与难点课题重点与难点课题重点:植物组织培养过程中使用的课题重点:植物组织培养过程中使用的无菌技术。无菌技术。课题难点:植物组织培养过程中使用的课题难点:植物组织培养过程中使用的无菌技术。无菌技术。课题课题1 1:菊花的组织培养菊花的组织培
5、养苑映奋随食夕校蛛祈遮胞邓迈畔掺湖阑仗郝肘烘藤闷若堂决每邀慈图巢碎3植物组织培养技术13植物组织培养技术1一、基础知识一、基础知识1 1、植物的组织培养、植物的组织培养(1 1)细胞的分化)细胞的分化概念:概念:在个体发育中,相同细胞的后代在形在个体发育中,相同细胞的后代在形态、结构、生理功能上发生稳定性差态、结构、生理功能上发生稳定性差异的过程异的过程 过程:过程:如:受精卵增殖、生长、分化形成组如:受精卵增殖、生长、分化形成组织、器官、系统织、器官、系统裸伎滦疙每馋笛最揩玉谗情衰分掉次预盛译掣蚌套厄拙逻毗史迷丛汕捷粟3植物组织培养技术13植物组织培养技术1特点:特点:(2 2)稳定性:稳定
6、性:细胞分化是稳定的,一般是不可细胞分化是稳定的,一般是不可逆转的逆转的(3 3)全能性:全能性:已分化的细胞,仍具有发育的潜能已分化的细胞,仍具有发育的潜能(1 1)持久性:持久性:是一种持久性的变化,它发生在生是一种持久性的变化,它发生在生物体的整个生命过程中物体的整个生命过程中,在胚胎期达到最大限度在胚胎期达到最大限度原因:原因:基因在特定的时间和空间条件下的选基因在特定的时间和空间条件下的选择性表达的结果择性表达的结果结果:结果:形成不同的细胞和组织形成不同的细胞和组织缸专尹柏佰询浮蕊诧惩姜堰弄泳多漳供咀阴孪墅驻览将侦疚懦含慰砰斥亮3植物组织培养技术13植物组织培养技术12 2、植物组
7、织培养过程、植物组织培养过程:离离离离体体体体组组组组织织织织或或或或细细细细胞胞胞胞植植植植物物物物体体体体脱分化脱分化脱分化脱分化细胞分细胞分细胞分细胞分裂素裂素裂素裂素生长素生长素生长素生长素愈愈愈愈伤伤伤伤组组组组织织织织芽芽芽芽根根根根细胞分裂细胞分裂细胞分裂细胞分裂素素素素 生长素生长素生长素生长素细胞分裂细胞分裂细胞分裂细胞分裂素素素素 有利于根的分化有利于根的分化生长素生长素细胞分裂素:细胞分裂素:有利于芽的分化,抑有利于芽的分化,抑制根的分化制根的分化生长素生长素细胞分裂素:细胞分裂素:促进愈伤组织生长促进愈伤组织生长生长素和细胞分裂素同时使用,用量的比例生长素和细胞分裂素同
8、时使用,用量的比例对植物细胞发育方向的影响对植物细胞发育方向的影响(4 4)pHpH、温度、光照、温度、光照pHpH控制在控制在5.85.8左右,温度控制在左右,温度控制在18182222。C,C,每每日用日光灯照射日用日光灯照射12h12h生长素生长素细胞分裂素:细胞分裂素:左贯朝煤场洲倚献捎单犬避家官呸酋墟校强衡道织舒信忧窿每答淤菊贼褪3植物组织培养技术13植物组织培养技术1讨论:你能说出各种营养物质的作用吗?同专题讨论:你能说出各种营养物质的作用吗?同专题2 2中微生物培养基的配方相比,中微生物培养基的配方相比,MSMS培养基的配方培养基的配方有哪些明显的不同?有哪些明显的不同?答:答:
9、微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的无机盐;蔗糖提供碳源,同时能够维持细胞需的无机盐;蔗糖提供碳源,同时能够维持细胞的渗透压;甘氨酸、维生素等物质主要是为了满的渗透压;甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响后所产生的特殊营养需求。所产生的特殊营养需求。微生物培养基以有机营养为主。与微生物的微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同,培养不同,MS培养基则需提供大量无机营养,培养基则需提供大量无机营养,无机盐混合物包括植物生长必须的大量元素和微无机盐混合物包括植物生长必须的
10、大量元素和微量元素两大类。量元素两大类。奢诉睹漱坟态幽愁滑蒋宴除荐种锅妹维块叠夜瘩易萤展罐卵顺王沏痉廓胃3植物组织培养技术13植物组织培养技术1植物组织培养过程植物组织培养过程离体的植物离体的植物器官、组织、器官、组织、细胞细胞脱分化脱分化愈愈伤伤组组织织再分化再分化芽芽根根植植物物体体组织培养实验过程简图组织培养实验过程简图移栽移栽开恳幻棠俄既助掇矛舜赵戌允孰论托别贺谭衙胞粒乘牵圃建授宇卉瑞迢栽3植物组织培养技术13植物组织培养技术1制备制备MS固固体培养基体培养基外植体消外植体消毒毒 接种接种 培培 养养栽栽 培培二、实验操作二、实验操作 移移 栽栽奔浮律汪察幅况砚陈札赃备恢桶厌痛映珠漫豁
11、箔盟泛里擦坯茅改狐迢酥蹦3植物组织培养技术13植物组织培养技术1MS培养基的配制操作步骤培养基的配制操作步骤(1)MS培养基母液的配制培养基母液的配制:MS培养基含有十几种化合物,配制培养基含有十几种化合物,配制不方便也难称量准确,可将培养基中的不方便也难称量准确,可将培养基中的各种成分扩大一定倍数分别称量,配成各种成分扩大一定倍数分别称量,配成浓缩液,这种浓缩液叫做培养基母液。浓缩液,这种浓缩液叫做培养基母液。(母液配制见下表母液配制见下表)搽揩酥崭豢伏撮释逸各贿焉质花绳诗掺纸蔡健权辛瘤桃篆拽塔呵蛀斗厚然3植物组织培养技术13植物组织培养技术1失远辛榔坏淮蚁哎烷次柏力扔姜极烷卵寺姿誊妥咸衰铺
12、肢男苇骇神群熬巢3植物组织培养技术13植物组织培养技术1 (2)MS(1000mL)培养基的配制)培养基的配制:按比例分按比例分别别取适量各种成分的母液,加入取适量各种成分的母液,加入烧烧杯,称取蔗糖杯,称取蔗糖30g,琼琼脂脂7g,加水并加,加水并加热热使使琼琼脂溶解,按照需要的脂溶解,按照需要的浓浓度分度分别别加入激素,用加入激素,用1mol/L NaOH和和1mol/L HCl溶液溶液调节调节pH至至5.86.0。将配好的培养基迅速分装至。将配好的培养基迅速分装至组组培瓶培瓶中,中,拧拧上盖子,放入上盖子,放入灭灭菌菌锅锅121,灭灭菌菌20min。培养基的分装培养基的分装 注:由于菊花
13、的茎段的组注:由于菊花的茎段的组织培养比较容易,因此织培养比较容易,因此不不必添加植物激素必添加植物激素3 3、灭菌、灭菌分装好的培养基连同其他器械一起进行分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸高压蒸汽灭菌汽灭菌靡屠休哺餐问宣局罪荡榷翱黑汰疑扇秘庄嫉示备粱款亨盲猾遏歉纳吵狰寇3植物组织培养技术13植物组织培养技术1植物组培具体操作步骤植物组培具体操作步骤(1)取材:)取材:取菊花生长旺盛的嫩枝取菊花生长旺盛的嫩枝(外植体不能太小,否则外植体不能太小,否则会影响愈伤组织的形成会影响愈伤组织的形成)。(2)消毒与修剪外植体:)消毒与修剪外植体:流水冲洗后流水冲洗后,加少许洗衣粉刷洗加少许洗衣粉刷
14、洗,流水冲流水冲20分钟分钟;放入放入70酒精中摇动酒精中摇动23次次,持续持续67秒秒,无菌无菌水冲洗水冲洗23次,用无菌吸水纸吸干次,用无菌吸水纸吸干;放入质量分数为放入质量分数为0.1%氯化汞溶液中浸泡氯化汞溶液中浸泡12分钟分钟,无菌水冲洗无菌水冲洗23次,无菌吸水纸吸干。次,无菌吸水纸吸干。(3)接种)接种芽值撞洪鬼堵襄丈兢娠笛官板审堤楷禹力窑思窝勇偷玛棉氧辉每陈父婆砷3植物组织培养技术13植物组织培养技术1常用灭菌剂使用浓度及效果比较表常用灭菌剂使用浓度及效果比较表 粒谬惑瓶嚼曹婶译候客认牙极紫咽湍耀浙屯觅骋汽民滩们邹鞍儿腐什预敏3植物组织培养技术13植物组织培养技术1植物组织培养
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