艾滋丙肝梅毒的临床意义及实验室诊断-课件.pptx

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1、Science&Technology Serve Human Health艾滋丙肝梅毒艾滋丙肝梅毒临床意义及实验室诊断临床意义及实验室诊断1 1Science&Technology Serve Human Health传染性疾病检测输血和手术前传染性疾病筛查疑似病例筛查或确诊输血前传染性疾病感染国内现状国内相关研究Science&Technology Serve Human Health时间时间例数例数HBsAgHBsAg阳性率阳性率Anti-HIVAnti-HIV阳性率阳性率Anti-HCVAnti-HCV阳性率阳性率Anti-TPAnti-TP阳性率阳性率20102010年年112112月

2、月5005006060（12.012.0）0 0（0.00.0）3 3（0.60.6）3 3（0.60.6）20112011年年112112月月5005005858（11.611.6）1 1（0.20.2）4 4（0.80.8）5 5（1.01.0）20122012年年112112月月5005006262（12.412.4）2 2（0.40.4）3 3（0.60.6）8 8（1.61.6）合计合计15001500180180（12.012.0）3 3（0.20.2）1010（0.670.67）1616（1.11.1）1500例输血前患者的HBsAg、Anti-HCV、Anti-HIV、Anti

3、-TP阳性率例（%）HBsAg：乙型肝炎病毒表面抗原 Anti-HCV：丙型肝炎病毒抗体Anti-HIV：艾滋病病毒抗体 Anti-TP：梅毒螺旋体抗体Science&Technology Serve Human Health输血及术前传染性疾病筛查的重要性血源性疾病传播的主要途径输血和手术有利于对感染者进行早期干预避免医源性感染 避免医疗纠纷输血和术前感染筛查国内相关规范Science&Technology Serve Human Health根据2000年国家卫生部颁发的临床输血技术规范附件中要求，受血者在输血前须进行以下检查：ALT、乙型肝炎、丙型肝炎、艾滋病、梅毒的相关检查01Scie

4、nce&Technology Serve Human Health02HIV检测03丙型肝炎检测梅毒检测01Science&Technology Serve Human HealthHIV检测Science&Technology Serve Human HealthHIV流行病学 中国我国处于低流行区Science&Technology Serve Human Health数据来源于：中国疾病预防控制中心CDCHIV流行病学 中国Science&Technology Serve Human Health 传播途径Science&Technology Serve Human Health我国重点

5、省份的母婴传播（MTCT）率母婴传播不容忽视！Science&Technology Serve Human Health应该进行HIV检测的人群我国在世界范围内处于低流行地区，WHO推荐在低流行地区以下人群应进行HIV Ab检测及咨询：具有HIV感染症状或体征者；HIV感染者的配偶，应每6个月12个月检测一次；有指示病例的家庭成员；重点人群：注射吸毒人群、男性同性恋、变性人群及性工作者；孕妇；婴儿及18月的幼儿；有HIV感染症状或体征的儿童，或者有感染HIV的家庭成员的儿童；重点人群中的青少年。Science&Technology Serve Human Health认识HIV/AIDSHIV

6、HIV感染疾病进程、临床表现及结局感染疾病进程、临床表现及结局 急性HIV 感染期 无症状HIV 感染期（潜伏期）艾滋病期（晚期）发热、头痛、全身不适，部分淋巴肿大等无临床症状，少数可查全身淋巴肿大长期发热、持续淋巴肿大、神经系统症状等HIV感染的临床结局HIV感染的典型进展者（平均存活810年）25年内快速进展者（病毒载量维持高水平）长期存活者（存活15年以上）临床表现Science&Technology Serve Human HealthHIV的实验室检测HIV感染包括免疫学检测和病原学检测 免疫学检测主要检测人体产生的特异性HIV抗体，是目前HIV/AIDS诊断中最常用的方法 HIV抗

7、体检测 确认是否感染的依据我国艾滋病诊疗指南（2011版）指出：HIV Ab 是HIV感染诊断的金标准！Science&Technology Serve Human HealthHIV感染后血液中各种物质出现的顺序机体感染HIV：核酸 P24抗原 IgM、IgA IgG 上图为上图为HIVHIV感染后血液中病毒核酸、感染后血液中病毒核酸、P24P24抗原和抗体出现的顺序抗原和抗体出现的顺序1、检测原理Science&Technology Serve Human Health迈克生物HIV检测试剂盒产品特点1、检测原理代数代数年代年代方法学方法学窗口期窗口期特点特点第一代第一代19851985间

8、接法间接法6-86-8周周对细胞培养蛋白质有交叉反应，特异性差，血清对细胞培养蛋白质有交叉反应，特异性差，血清需高度稀释，敏感性低。需高度稀释，敏感性低。第二代第二代19891989间接法间接法4-54-5周周减少细胞蛋白质导致的假阳性，非特异性反应降减少细胞蛋白质导致的假阳性，非特异性反应降低，但只能检测低，但只能检测IgGIgG抗体。抗体。第三代第三代19921992夹心法夹心法13-2513-25天天调整了反应体系，使灵敏度、特异性均在调整了反应体系，使灵敏度、特异性均在99%99%以以上，可检测上，可检测IgGIgG、IgMIgM、IgAIgA等。等。第四代第四代19981998夹心法

9、抗体捕获夹心法抗体捕获6-146-14天天可检测抗体，同时能检测可检测抗体，同时能检测P24P24抗原。抗原。Science&Technology Serve Human HealthHIV抗体的免疫学检测方法化学发光或免疫荧光试验酶联免疫吸附试验（ELISA）快速检测（RT）及其它检测试验 明胶颗粒凝集试验（PA）免疫渗滤试验 免疫层析试验 吉阳涛等通过HIV感染的国际学清盘和HIV急性感染者样品对三种不同方法学（化学发光法、电化学发光法、酶联免疫吸附法）筛查试剂进行了检测窗口期评价，发现：化学发光法和电化学发光法窗口期基本一致，且优于酶联免疫吸附法。参考文献：吉阳涛等参考文献：吉阳涛等.三

10、种四代三种四代HIVHIV筛查试剂检测窗口期的差异研究筛查试剂检测窗口期的差异研究【J J】.中华检验医学杂志，中华检验医学杂志，2014,37:613-616.2014,37:613-616.Science&Technology Serve Human HealthHIV的实验室检测流程摘自全国艾滋病检测技术规范摘自全国艾滋病检测技术规范 （20092009年修订版）年修订版）Science&Technology Serve Human HealthHIV检测结果解释 临床案例（一）孕妇XX，29岁，婚检时发现丈夫HIV抗体初筛阳性（经疾控中心确认实验室确认为阳性），该孕妇在此次婚检时才发现

11、已经怀孕51天，HIV抗体为阴性。对于这个阴性报告应该如何向患者解释？Science&Technology Serve Human Health孕妇XX，29岁，婚检时发现丈夫HIV抗体初筛阳性（经疾控中心确认实验室确认为阳性），该孕妇在此次婚检时才发现已经怀孕51天，HIV抗体为阴性。对于这个阴性报告应该如何向患者解释？阴性结果处理要点：阴性结果说明可能没有感染HIV；结合HIV感染途径，评估是否有危险行为；若孕妇有危险行为，分析是否在“窗口期”，若不排除“窗口期”3-6月后 再次检测HIV 抗体，且建议性伴也要做相关检测并进行治疗；孕晚期重复检测HIVHIV检测结果解释 临床案例（一）Sc

12、ience&Technology Serve Human HealthHIV检测结果解释 临床案例（二）孕妇XX，32岁，孕38+3周，因见红、不规律腹痛9小时入院。孕期仅行B超2次，入院后行HIV快诊（金标法）阳性。对于这个阳性报告应该如何向患者解释？Science&Technology Serve Human HealthHIV检测结果解释 临床案例（二）快筛阳性结果处理要点：对临床孕妇为防止漏检，应首选高敏感性试剂检测，阴性反应报告HIV抗体阴 性，阳性则用高特异性试剂进行复检，同时继续母婴传播预防用药；快筛阳性：说明不能排除HIV感染的可能；要明确HIV感染需确诊，有待省市疾控中心的H

13、IV确认报告，而这需要一个时 间过程；应告知产时或产后可能存在母婴传播的风险并采取相应措施，如安全助产，人工喂养等；解释产后若确认结果排除HIV感染，产时ART对产妇和新生儿不会产生影响；ART：需书面知情同意书，征求产妇意见是否告知其家属；排除HIV感染后立即停止干预措施，若确认感染，维持后续PMTCT（母婴传 播预防）措施。02Science&Technology Serve Human Health丙型肝炎检测Science&Technology Serve Human Health丙型肝炎的流行病学2014年世卫组织（WHO）发布的最新丙型肝炎诊治指南中指出：5千万！l据统计，全球有1

14、.85亿人感染过丙型肝炎，其中大部分的人都没有意识到已感染丙肝。l全球每年有35万人死于丙肝。Adapted from Mohd Hanafiah et al.,2013Science&Technology Serve Human Health丙型肝炎疾病病程Science&Technology Serve Human Health丙型肝炎疾病病程急性丙肝慢性丙肝肝硬化肝癌痊愈痊愈死亡Science&Technology Serve Human Health丙型肝炎感染的特点丙肝起病隐匿，是容易被忽视的疾病一旦感染丙肝，仅20-30%感染者自发清除病毒慢性丙型肝炎患者有70-80%无明显症状隐

15、匿的丙肝患者会成为危险的传染源没有“病毒携带者”，有“毒”就要考虑治疗疾病发展越后期，越难治愈逐渐发展成肝硬化、肝癌等终末期肝病带来越来越沉重的疾病负担目前没有疫苗预防Science&Technology Serve Human HealthHCV的实验室检测HIV感染包括核酸检测（NAT）和免疫学检测 免疫学检测主要检测人体产生的特异性HCV抗体，是目前丙型肝炎诊断中最常用的方法HCV免疫学检测方法化学发光法（CLIA）酶联免疫（EIA）快速检测Science&Technology Serve Human HealthHCV在不同分类中的实验室诊断指标分类分类实验室诊断指标实验室诊断指标急性

16、丙型肝炎急性丙型肝炎Anti-HCVAnti-HCV、HCV RNAHCV RNA、肝功、肝功慢性丙型肝炎慢性丙型肝炎Anti-HCVAnti-HCV、HCV RNAHCV RNA、肝功、肝功Anti-HCV 做为筛查指标，结合肝功，若其阳性应高度怀疑为急/慢性丙型肝炎；HCV RNA 做为确诊指标。Science&Technology Serve Human Health丙型肝炎的实验室分析路径高S/CO临床疑似HCV感染取样（多为血液）Anti-HCV筛选试验（CLIA法）有反应性无反应性低S/COHCV确认试验（目前为条带免疫法）阳性阴性HCV RNA检测或其基因型分型，以HCV基因型确

17、定治疗方案Science&Technology Serve Human Health国家标准WS/T 453-2014丙型病毒性肝炎筛查及管理规定HCV感染高危人群 1、有静脉药瘾史者;2、有职业或其他原因（纹身、穿孔、针灸等）所致的针刺伤史者；3、有医源性暴露史者，包括手术、透析、不洁口腔诊疗操作、器官或组 织移植者；4、有高危性行为史，如多个性伴侣。应该进行HCV筛查的人群Science&Technology Serve Human Health国家标准WS/T 453-2014丙型病毒性肝炎筛查及管理规定HCV感染高危人群应及早筛查；进行特殊或侵入性医疗操作（包括手术）前；长期注射用药者

18、需要定期筛查；维持性血液透析患者每半年筛查一次。转换血液透析中心或透析过程中出现不明原因ALT升高者应及时筛查；HCV感染母亲分娩的婴儿，应在出生18个月后检测Anti-HCV，也可在出生1月后检测HCV RNA；暴露于HCV的人群有医院传播危险的，如医务人员被污染的针具或锐气刺伤，应立即检测Anti-HCV，2周4周检测HCV RNA，12周和24周应检测Anti-HCV和肝脏生化；急诊有创检测前，宜立即检测Anti-HCV。应该进行HCV筛查的时间Science&Technology Serve Human Health丙型肝炎实验室检测的结果判读HCVHCV病原学指标病原学指标临床意义临

19、床意义Anti-HCVAnti-HCVHCV RNAHCV RNA-无无HCVHCV感染感染+-既往感染既往感染HCVHCV已自行恢复已自行恢复；经治疗病毒已清除者经治疗病毒已清除者；自身免疫性患者偶可出现，但自身免疫性患者偶可出现，但HCV RNAHCV RNA始终为始终为”+”+。”-+HCVHCV感染早期感染早期或慢性或慢性HCVHCV感染；感染；处于严重免疫抑制状态（如处于严重免疫抑制状态（如HIVHIV）；接受血液透析的患者可出现接受血液透析的患者可出现。+HCVHCV现症感染现症感染03Science&Technology Serve Human Health梅毒的检测Scienc

20、e&Technology Serve Human Health梅毒在我国的流行情况2008年全国梅毒发病地图法定传染病报告2012年梅毒报告病例数410074例2013年梅毒报告病例数444952例Science&Technology Serve Human Health认识梅毒早期神经梅毒感染TP期梅毒硬下疳形成感染后1090天期梅毒硬下疳出现后410周早期潜伏性梅毒无症状，感染后1年内晚期潜伏性梅毒无症状，感染1年后期梅毒此期通过性接触或母婴传播感染此期通过母婴传播感染此期无感染性心血管梅毒（10%）感染后2030年发病梅毒树胶肿（15%）感染后146年发病晚期神经梅毒麻痹性痴呆（2%5%

21、）感染后230年发病脊髓痨（2%9%）感染后350年发病复发（24%）无症状有症状（5%）脑膜炎，颅神经炎，视觉损害，脑膜血管疾病中枢神经系统受侵袭（25%60%）Science&Technology Serve Human Health梅毒的实验室检测暗视野显微镜镜检梅毒螺旋体脑脊液检查梅毒螺旋体血清学检测分子生物学梅毒检查 TP-DNAp非梅毒螺旋体抗原血清学实验（NTrAT）p梅毒螺旋体抗原血清学实验（TrAT）梅毒螺旋体血清学检测Science&Technology Serve Human Health分类分类方法方法中文名称中文名称非梅毒螺旋体抗原血清学实验非梅毒螺旋体抗原血清学实验

22、（NTrATNTrAT）RPRRPR快速血浆反应素（环状卡片实验）快速血浆反应素（环状卡片实验）VDRLVDRL性病研究实验室实验性病研究实验室实验TRUSTTRUST甲苯胺红不加热血清实验甲苯胺红不加热血清实验梅毒螺旋体抗原血清学实验梅毒螺旋体抗原血清学实验（TrATTrAT）TPPATPPA密螺旋体颗粒凝集实验密螺旋体颗粒凝集实验TPHATPHA密螺旋体血凝实验密螺旋体血凝实验FTA-ABSFTA-ABS荧光密螺旋体抗体吸附实验荧光密螺旋体抗体吸附实验TP-CLIATP-CLIA化学发光梅毒螺旋体抗体检测化学发光梅毒螺旋体抗体检测TP-ELISATP-ELISA酶联免疫梅毒螺旋体抗体检测酶

23、联免疫梅毒螺旋体抗体检测TP-WBTP-WB免疫印迹法（确认试验）免疫印迹法（确认试验）梅毒的血清学检测方法Science&Technology Serve Human Health梅毒在我国的检测流程国家标准（国家标准（GB15974-1995GB15974-1995）规定：）规定：非梅毒螺旋体抗原血清学实验（如：TRUST/RPR）为筛查实验梅毒螺旋体抗原血清学实验（如：CLIA/ELISA/TPPA）为证实实验Science&Technology Serve Human Health梅毒检测 因此，CLIA-TP用于筛查实验时，RPR/TRUST用于证实实验；RPR/TRUST用于筛查实

24、验时，CLIA-TP可用于证实实验！非特异性抗原实验（RPR/TRUST）除了可用于筛查以外，还可用于观察疗效、复发和再感染的情况。因CLIA的高灵敏度，使用CLIA检测梅毒螺旋体抗体可提高筛查 效率，减少漏检！Science&Technology Serve Human Health梅毒实验室检查的临床意义RPRRPRTRUSTTRUSTTPPATPPATP-CLIATP-CLIA临床意义临床意义-排除梅毒排除梅毒 （一期梅毒的早早期）（一期梅毒的早早期）+现症梅毒现症梅毒 (梅毒孕妇所生的婴儿除外梅毒孕妇所生的婴儿除外)+-生物学假阳性生物学假阳性-+早期梅毒经治疗后早期梅毒经治疗后 （早

25、期梅毒）（早期梅毒）p 检测结果阳性，临床无症状和体征，否认感染史的人群，可能存在隐 性感染和既往感染，少数存在非特异性抗体干扰，如老年人群。p 对于检测结果阴性，承认有高危性行为的人群，建议随访复查。Science&Technology Serve Human HealthHIV检测结果解释 临床案例（一）案例一肿瘤患者入院治疗需要进行手术，进行术前8相检测，结果TP-ELISA和RPR阳性请问该病例是否需要立即报告梅毒Science&Technology Serve Human HealthHIV检测结果解释 临床案例（二）案例二某门诊病例，有非婚接触史，以前从未诊断或治疗过梅毒，现无任何症状或体征，RPR检测+，滴度1：4认为该患者不是梅毒Thanks!Science&Technology Serve Human Health4444