分析化学综合实验优秀PPT.ppt
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1、分析化学综合实验第1页，本讲稿共45页实 验 目 的l开放实验教学，培养独立工作能力；l针对实际样品写出可行性设计实验方案；l综合运用实验技能；l培养查阅资料能力，运用知识的能力。第2页，本讲稿共45页开放式设计研究实验题目开放式设计研究实验题目大豆大豆中中钙、镁钙、镁含量测定含量测定奶粉中蛋白质奶粉中蛋白质含含量量测定测定油条等食物中铝含量的测定油条等食物中铝含量的测定第3页，本讲稿共45页资 料 来 源1.食品分析方面参考书可在超星图书馆下载2.食品科学杂志以及其他中文期刊校园网-图书馆-中国期刊网3.相关的教材分析化学实验、分析化学5.网上查阅相关资料（搜索）4.中华人民共和国国家标准第
2、4页，本讲稿共45页设计方案要求1.实验题目2.作者姓名、学号）3.前言（简单表述）4.设计原理：总体设计思想，可用框图简单表示；设计中的理论计算（方案可行性），设计报告重点部分。要求做到思路清晰，理论正确，计算准确，步骤详细，测定结果的公式表达（量化依据）要准确、规范，固体试样用质量分数表示，水质试样用质量浓度表示。（可以灵活运用表格）第5页，本讲稿共45页5.主要仪器和试剂：试剂选择要有依据，取量范围要有计算依据，配制、标定方法要有可行性操作规程。6.分析测试方法：自拟的操作规程要有切实的可操作性，越详细越好。第6页，本讲稿共45页实验报告要求 设计实验报告是在设计总体思想的指导下，具体实
3、施，取得实验成果后的具体体现。具体要求如下：1-6 同设计报告，第7页，本讲稿共45页 7.原始记录（要求齐全）。8.实验结果与数据处理：设计实验报告的重点部分，体现实验成果的部分，要求列出三线格，表序、表头、表注均表达清楚。9.参考文献 10.写出设计总结（心得体会、经验教训、误差分析、教学建议等）。第8页，本讲稿共45页奶粉中蛋白质含量的测定奶粉中蛋白质含量的测定第9页，本讲稿共45页奶粉中蛋白质含量的测定奶粉中蛋白质含量10-20%蛋白质含量测定的意义蛋白质含量的测定方法：凯氏定氮法、双缩脲法、folin酚试剂法、紫外吸收法、考马斯亮蓝法及氨基酸分析仪法第10页，本讲稿共45页实验原理双
4、缩脲法双缩脲法：双缩脲（：双缩脲（NH3CONHCONH3）是两个分子脲）是两个分子脲经经180左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。在强碱左右加热，放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中，双缩脲与性溶液中，双缩脲与CuSO4形成紫色络合物，称为双缩脲形成紫色络合物，称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能过反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键，或能过一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反应。一个中间碳原子相连的肽键，这类化合物都有双缩脲反应。紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比，而与蛋白质分子量及氨基酸成
5、分无关，故可用来测定蛋白质含量。质分子量及氨基酸成分无关，故可用来测定蛋白质含量。测定范围为测定范围为1-10mg蛋白质。干扰这一测定的物质主要蛋白质。干扰这一测定的物质主要有：硫酸铵、有：硫酸铵、Tris缓冲液和某些氨基酸等。缓冲液和某些氨基酸等。第11页，本讲稿共45页实验原理考马斯亮蓝法考马斯亮蓝法：考马斯亮蓝：考马斯亮蓝G-250（Coomassie brilliant blue G-250）测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。在游离状态）测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。在游离状态下呈红色，最大光吸收在下呈红色，最大光吸收在488nm；当它与蛋白质结合后变为青；当它与蛋白质结合后变
6、为青色，蛋白质色，蛋白质-色素结合物在色素结合物在595nm波长下有最大光吸收。其光波长下有最大光吸收。其光吸收值与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质的定量测定。吸收值与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质的定量测定。蛋白质与考马斯亮蓝蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合在结合在2min左右的时间内达到平左右的时间内达到平衡，完成反应十分迅速；其结合物在室温下衡，完成反应十分迅速；其结合物在室温下1h内保持稳定。内保持稳定。该法是该法是1976年年Bradford建立，试剂配制简单，操作简便快建立，试剂配制简单，操作简便快捷，反应非常灵敏，灵敏度比捷，反应非常灵敏，灵敏度比Lowry法还高法还高4倍
7、，可测定微倍，可测定微克级蛋白质含量，测定蛋白质浓度范围为克级蛋白质含量，测定蛋白质浓度范围为01 000g/mL，最小可测，最小可测2.5g/mL蛋白质，是一种常用的微量蛋白质快速测蛋白质，是一种常用的微量蛋白质快速测定方法。定方法。第12页，本讲稿共45页实验原理紫外吸收法紫外吸收法：蛋白质组成中长含有酪蛋白和色氨酸等芳：蛋白质组成中长含有酪蛋白和色氨酸等芳香族氨基酸，在紫外光香族氨基酸，在紫外光280nm波长处有最大吸收峰，一波长处有最大吸收峰，一定浓度范围内其浓度与吸光度成正比，故可用紫外分光定浓度范围内其浓度与吸光度成正比，故可用紫外分光光度计通过比色来测定蛋白质的含量。光度计通过比
8、色来测定蛋白质的含量。由于核酸在由于核酸在280nm波长处也有光吸收，对蛋白质测定波长处也有光吸收，对蛋白质测定有一定的干扰作用，但核酸的最大吸收峰在有一定的干扰作用，但核酸的最大吸收峰在260nm处。处。如同时测定如同时测定260nm的光吸收，通过计算可以消除其对蛋白的光吸收，通过计算可以消除其对蛋白质测定的影响。因此如溶中存在核酸时必须同时测定质测定的影响。因此如溶中存在核酸时必须同时测定280nm及及260nm的吸光度，方可通过计算测得溶液中的蛋的吸光度，方可通过计算测得溶液中的蛋白质浓度。白质浓度。第13页，本讲稿共45页提供以上三种测试方法供选择；设计实验注意：A）根据所选测试方法，
9、估算样品处理与称量的量；B)主要试剂及用量；C）实验步骤；D）配制标准蛋白溶液大致的浓度范围第14页，本讲稿共45页大豆大豆中中钙、镁钙、镁含量测定含量测定第15页，本讲稿共45页人体需要营养素，提供生长、发育、生命活动的需要。营养素：蛋白质、糖、脂类、维生素、无机盐、水六大物质。无机盐（Ca、Mg、Fe 、K、P等）又称矿物质，人体内无机盐有60多种，含量很少，占人体重（成人）的4%。其中有11种是主要的:C、H、O、N、S、P、Cl、K、Ca、Mg、Fe它是维持正常生理机能不可缺少的物质。第16页，本讲稿共45页1.钙人体从食物中摄取钙主要是氯化钙、磷酸钙、草酸钙、脂肪酸钙等等。其中只有氯
10、化钙溶于水，其余都较难溶于水，不易被人体吸收。Ca存在什么组织内？人体中的钙99%存在于骨骼和牙齿中。Ca在人体中的作用功能？能促进骨、牙齿的正常生长。钙是血液凝固的必须要素，是许多酶的致活剂。钙能调节心脏和神经功能，维持肌肉的紧张力。第17页，本讲稿共45页 缺钙症状我国膳食多以含钙低的谷物和植物性食物为主，造成了全民缺钙，缺钙会导致骨质疏松、增生、四肢麻木、抽筋、高血压、糖尿病、儿童发育迟缓、挑食、盗汗、青少年生长痛等疾病。钙的来源：钙来源较丰富。动物性食物中奶类含量丰富，每100g里含有120mg钙。虾皮（2000mg/100g）、蟹、蛤蜊和蛋类含钙也较多。植物性食物绿叶菜和豆类也是钙的
11、重要来源第18页，本讲稿共45页 钙的吸收情况食物中的钙虽然较多，但由于各种因素的影响，大部分不能吸收。其影响因素有：1体内缺乏维生素D 2草酸和植酸过多，与钙生成难溶性正磷酸钙，不利于钙的吸收和利用。（人体中钙与磷的比例：成人：11.5，儿童：11）第19页，本讲稿共45页 人体日需钙量：成人：600mg/日，儿童：600800mg/日，青少年：10001200mg/日。每天的食物中是否能满足呢？自己可估算一下。第20页，本讲稿共45页2.镁 镁是人体必需的微量元素之一。对心脏血管具有重要的保护作用，有“心血管卫士”之称。人体如果缺镁，可导致心动过速、心律不齐及心肌坏死和钙化。把镁称为生命活
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