脱落细胞学检查技术及基本知识.pptx
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1、2023/2/181第一章 脱落细胞检查技术和临床应用评价 脱落细胞学:是对人体各部位特别是管腔器官表面的脱落细胞,或对病变组织通过细针吸取的方法获得的细胞染色并在显微镜下观察作出诊断,又称诊断细胞学。标本来源:自然排出物 体腔抽出液 细针穿刺吸取液第1页/共110页2023/2/182第一节 标本采集和涂片制作一、标本采集原则:尽量减少受检者的痛苦,取得合作;方法简便、实用、经济;尽量取得足够供诊断的细胞成分;及时快速送检立刻制片;绝对避免污染;标本号标记清楚。途径:细针穿刺;脱落细胞学检查第2页/共110页2023/2/183常用方法:直视采集法:直接用刮片刮取、吸管吸取、刷洗自然分泌液采
2、取法:痰涂片、尿液涂片、前列腺液涂片、乳头溢液涂片灌洗法:空腔器官、盆腔或腹腔摩擦法:鼻咽、食管、胃针穿抽吸法:浆膜腔关节腔积液,淋巴结、软组织、甲状腺、肝第3页/共110页2023/2/184浆膜腔积液的处理:抽出应立即送检(4保存,24h24h内处理完标本)对检查影响较大的是过多成熟的红细胞和标本的严重凝固,需处理,淋巴细胞分离液或低渗方法可去除红细胞,凝固的积液将凝块吸出,剩余液体离心涂片。第4页/共110页2023/2/185二、涂片制作(一)要求:1 标本要新鲜 2 操作要轻柔:细胞分布均匀;薄厚适当 勿挤压摩擦,以免细胞损伤变形;3 玻片要清洁 4 涂片要牢固 5 涂片数量 6 标
3、号准确 第5页/共110页2023/2/186(二)涂片制备方法推片法涂抹法压拉涂片法吸管推片法喷射法印片法第6页/共110页2023/2/187(三)涂片的固定目的:保持细胞形态结构,防止其自溶。固定液:首选95酒精,乙醇乙醚,氯仿乙 醇 注意事项:巴氏染色,涂片勿在空气中干燥后染色;固定时间不短于15分钟(48h内进行巴氏染色);固定液要达到90以上;液体标本离心后涂片,待潮干后再固定,宫颈的刮片、痰涂片、拉网涂片、内窥镜的刷片、针吸涂片应立即固定。第7页/共110页2023/2/188固定方法:带湿固定 干燥固定固定时间:1530min(四)涂片的染色 目的:使细胞结构清晰显示;应用各种
4、染色使细胞浆与核恰当显示不同颜色;使细胞透明度高,结构清晰。方 法:常 规 染 色 为 巴 氏 染 色,配 合 HE、Giemsa、特染等。第8页/共110页2023/2/1891 巴氏染色法 水化:固定好的涂片80、70、50乙醇蒸馏水 各1min 染核:苏木素染35min 分色:1盐酸中数秒,水洗 蓝化:置饱和碳酸锂溶液中1min,水洗 脱水:50、70、80、95乙醇各1min 染浆:置于橘黄G液中染24min95乙醇洗2次置于 EA36染液中45min 脱水:95、无水乙醇各12min二甲苯透明2 3min 2 封片:中性树胶封固第9页/共110页2023/2/1810结果判定:胞核呈
5、紫蓝色,核仁红色,底层细胞、中层细胞和表层角化前细胞为淡蓝色,不全角化细胞(角化前细胞)呈粉红色,角化细胞呈桔黄色。适用于上皮细胞染色和阴道涂片观察女性激素的影响优点:细胞具有多色性缺点:染色程序较复杂第10页/共110页2023/2/1811注意事项:染液要充分溶解苏木素要染前月余配制,用时每天过滤1次,加新液。室温低时不易着色,可20的假阴性的假阴性 2 具体部位难确定具体部位难确定 3 肿瘤分型困难肿瘤分型困难 4 非肿瘤性疾病诊断研究少非肿瘤性疾病诊断研究少细胞诊断学与病理诊断的关系细胞诊断学与病理诊断的关系 细胞学诊断准确性低于病理组织学诊断,因细胞学诊断准确性低于病理组织学诊断,因
6、此细胞学诊断有赖于病理组织学诊断的证实。此细胞学诊断有赖于病理组织学诊断的证实。第27页/共110页2023/2/1828 辅助检查组织化学免疫组化流式细胞仪DNA分析染色体倍体分析电镜第28页/共110页2023/2/1829第二章 脱落细胞检查的基本知识 第一节 细胞诊断学的基本概念一、细胞增生活跃 细胞体积增大,核明显增大,核染色质增多,颗粒 增粗,核仁增大增多,核浆比例失常,胞浆蓝染(巴氏),可伴核分裂像。二、组织修复细胞 组织损伤或修复过程中从新生上皮脱落下来的细胞 特征:细胞多成片出现,似合体细胞,排列规则;细胞稍增大,胞核也增大,核不深染,胞浆尚丰富,深染;核仁明显增大或增多;可
7、能出现核分裂像。第29页/共110页2023/2/1830组织修复细胞第30页/共110页2023/2/1831三、细胞化生 1 未成熟的鳞状上皮化生细胞的特征:似正常上皮外底层细胞大小;多成群出现,可呈铺砖式排列;细胞呈圆或卵圆形,边缘有小突起;胞浆常有小空泡使胞浆透亮。2 成熟的鳞状上皮化生细胞的特征:细胞似正常鳞状上皮中层细胞大小;多成群出现,细胞呈多边形,有锐角突起,形态多样;胞浆中常见小空泡。胞浆少,排列紧密,无细胞间桥。第31页/共110页2023/2/1832鳞状化生第32页/共110页2023/2/1833第33页/共110页2023/2/1834第34页/共110页2023/
8、2/1835四、储备细胞增生 储备细胞是柱状上皮细胞下的一层具有分化潜能的幼稚细胞(或未分化细胞)。形态特征:细胞小,似鳞状上皮内底层细胞大小;圆或卵圆形,胞浆有小突起;胞浆淡染可见小空泡;核偏位,可能大小稍不一致;核染色质匀细,可见核仁和几个大小一致的核粒;细胞常成群,有时彼此相连;其周围常伴化生细胞。第35页/共110页2023/2/1836成团增生的基底细胞支气管黏膜支气管黏膜第36页/共110页2023/2/1837五、细胞增生细胞分裂增强,数目增多,体积可增大,形态可出现异常。细胞大,核大,核染色质增多、增粗,双核或多核,核仁明显,核膜增厚,甚至轻度不规则。可分为轻度和重度增生。六、
9、细胞分化从幼稚细胞发育成具有完备结构和功能的成熟细胞的过程。上皮细胞分化的形态表现:1 细胞体积由小到大2 胞浆量由少到多3 核浆比由大到小4 饱和由大到小5 染色质排列由疏松到致密6 核仁由大到小,由多到少 第37页/共110页2023/2/1838增生柱状上皮混杯状细胞第38页/共110页2023/2/1839七、细胞核分裂像 病理性分裂像应与核碎裂鉴别(核染色质呈大小不 等的块状)八、细胞退行性变 细胞退变包括变性和坏死,涂片中二者鉴别较困难,统称退变。1 人工引起的退变 原因:标本放置过久,细胞自溶;细胞置于高渗或低渗溶液中;固定液浓度或时间不适合,过湿或过干 形态特征:细胞呈大片结构
10、不清,细胞均增大或均缩小,胞浆多呈红染,各种类型细胞退变形式一致。第39页/共110页2023/2/1840核分裂像第40页/共110页2023/2/18412 细胞自然退变 原因:细胞脱落过久,细胞营养不良,炎症、放疗、化疗的影响,肿瘤表面供血不足,细胞生理性衰老 类型:(1)肿胀性退变细胞及胞核肿大,染色质模糊、断裂并淡染,核内有空泡。胞浆空泡状、蜂窝状或网孔状,胞界不清胞膜消失。(2)固缩性退变细胞及胞核缩小,胞浆红染、橘黄、淡黄或多彩,常出现核周晕,核固缩,染色质致密,核碎裂核膜消失。第41页/共110页2023/2/1842脱落细胞肿胀性退变过程第42页/共110页2023/2/18
11、43细胞退行性变第43页/共110页2023/2/1844细胞退行性变第44页/共110页2023/2/1845第二节 正常脱落细胞形态 一、上皮细胞(一)复层鳞状上皮 由底层到表层分为:基底层、中层、表层 1 基底层细胞:(1)内底层细胞:单层立方或柱状,很 少脱落。(2)外底层细胞:23层第45页/共110页2023/2/18462中层细胞 3表层细胞 (1)角化前细胞 (2)不全角化细胞 (3)完全角化细胞第46页/共110页2023/2/1847第47页/共110页2023/2/1848第48页/共110页2023/2/1849第49页/共110页2023/2/1850储储备备细细胞胞
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