生物安全实验室操作技术规范PPT.pptx

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1、生物安全实验室操作技术规范生物安全实验室操作技术规范实验室感染的传播链实验室感染的传播链实验室感染的传播链实验室感染的传播链个人防护装备容器中的病原体泄漏预防接种感染途径/感染剂量传播易感宿主规程/设备潜伏期医学监测规程/设备生物安全防护实验室生物安全防护实验室硬件：硬件：实验室的设计建造设备的配置个人防护装备软件：软件：严格的管理规程良好的操作规程1.1.所有操作人员必须经过所有操作人员必须经过培训培训培训培训，通过考核，获得上岗证书；，通过考核，获得上岗证书；2.2.在开始相关工作之前，在开始相关工作之前，-对所从事的病原微生物及相关操作进行对所从事的病原微生物及相关操作进行危险评估危险评

2、估危险评估危险评估，-根根据据国国家家对对于于各各种种微微生生物物操操作作的的危危险险等等级级划划分分和和防防护护要要求求以以及及危危险险评评估估的的结结果果，制制制制定定定定全全全全面面面面、细细细细致致致致的的的的标标标标准准准准操操操操作作作作规规规规程程程程和和和和程程程程序序序序文文文文件件件件，对对于于关关键键的的危危险险步步骤骤设设计计出出可可行行的的防防防防护护护护措措措措施施施施并并掌掌掌掌握握握握其细节其细节其细节其细节；3.3.熟熟熟熟悉悉悉悉各各各各级级级级生生生生物物物物安安安安全全全全实实实实验验验验室室室室运运运运行行行行的的的的一一一一般般般般规规规规则则则则，

3、掌掌掌掌握握握握各各各各种种种种仪仪仪仪器器器器、设设设设备备备备、装装装装备备备备的的的的操操操操作作作作步步步步骤骤骤骤和和和和要要要要点点点点，对对对对于于于于各各各各种种种种可可可可能能能能的的的的危危危危害害害害应应应应非非非非常常常常熟悉；熟悉；熟悉；熟悉；4.4.掌握各种感染性物质掌握各种感染性物质掌握各种感染性物质掌握各种感染性物质操作的一般准则和技术要点操作的一般准则和技术要点操作的一般准则和技术要点操作的一般准则和技术要点。生物安全意识至关重要生物安全意识至关重要实验室的生物安全规范实验室的生物安全规范 实验室的运行规范实验室的运行规范实验室的运行规范实验室的运行规范仪器设

4、备的使用规范仪器设备的使用规范仪器设备的使用规范仪器设备的使用规范针对感染性材料的操作规范针对感染性材料的操作规范针对感染性材料的操作规范针对感染性材料的操作规范个人防护用品的使用规范个人防护用品的使用规范个人防护用品的使用规范个人防护用品的使用规范 第一节第一节病原微生物实验室的生物危险病原微生物实验室的生物危险 微生物气溶胶吸入微生物气溶胶吸入刺伤、割伤刺伤、割伤皮肤、黏膜污染皮肤、黏膜污染食入食入感染的实验动物咬伤感染的实验动物咬伤 不明原因的实验室相关感染不明原因的实验室相关感染不明原因的实验室相关感染不明原因的实验室相关感染 PikePike等对等对39213921例实验室相关感染统

5、计分析：例实验室相关感染统计分析：-已知原因的实验室感染只占全部感染的已知原因的实验室感染只占全部感染的1818；-不明原因的实验室感染不明原因的实验室感染却高达却高达8282。对不明原因的实验室感染的研究表明：对不明原因的实验室感染的研究表明：大大多多数数可可能能是是因因病病原原微微生生物物形形成成的的感感染染性性生生物物气气溶溶胶胶在在空空气扩散，实验室内工作人员吸入了污染的空气感染发病。气扩散，实验室内工作人员吸入了污染的空气感染发病。分散相内含有微生物的气溶胶称之为生物气溶胶分散相内含有微生物的气溶胶称之为生物气溶胶病原微生物实验室相关感染的途径（病原微生物实验室相关感染的途径（1 1

6、）表表9-1 9-1（p.78p.78）病原微生物实验室相关感染的途径（病原微生物实验室相关感染的途径（2 2）病原微生物实验室相关感染的途径（病原微生物实验室相关感染的途径（3 3）一.实验室微生物气溶胶的种类飞沫核气溶胶飞沫核气溶胶飞沫核气溶胶飞沫核气溶胶粉尘气溶胶粉尘气溶胶粉尘气溶胶粉尘气溶胶 两两类类微微生生物物气气溶溶胶胶对对实实验验室室工工作作人人员员都都具具有有严严重重的的危危害害性性，其其程程度度取取决决于于微微生生物物本本身身的的毒毒力力、气气溶溶胶胶的的浓浓度度、气气溶溶胶胶粒粒子大小、以及当时实验室内的微小气候条件。子大小、以及当时实验室内的微小气候条件。-粒径大于粒径大

7、于100100 m m 沉降很快；沉降很快；（实验室感染的可能性小）（实验室感染的可能性小）（实验室感染的可能性小）（实验室感染的可能性小）-粒径小于粒径小于 5050 m m 在在0.4s0.4s内就扩散开；内就扩散开；-粒径大于粒径大于 5 5 m m 能够被呼吸道的粘膜捕获。能够被呼吸道的粘膜捕获。（冻干培养物（冻干培养物（冻干培养物（冻干培养物-80%-80%-80%-80%）-粒径小于粒径小于 5 5 m m 吸入后，可到达肺深部的肺泡处；吸入后，可到达肺深部的肺泡处；(搅拌器粉碎器搅拌器粉碎器搅拌器粉碎器搅拌器粉碎器-98%-98%-98%-98%、吹吸混匀、离心、超声粉碎、摔碎菌

8、液瓶、吹吸混匀、离心、超声粉碎、摔碎菌液瓶、吹吸混匀、离心、超声粉碎、摔碎菌液瓶、吹吸混匀、离心、超声粉碎、摔碎菌液瓶)二二.各种实验操作造成实验室感染的危险性各种实验操作造成实验室感染的危险性表表9-2 9-2 可产生各种严重程度微生物气溶胶的实验室操作可产生各种严重程度微生物气溶胶的实验室操作(p.80)(p.80)产生微生物气溶胶的其它因素产生微生物气溶胶的其它因素一一些些在在自自然然环环境境中中可可以以繁繁殖殖的的微微生生物物，一一旦旦进进入入实实验验室室的的空空调调或或通通风风系系统统，污污染染空空调调冷冷却却水水，可可形形成成更更广广泛泛的的微生物气溶胶污染。微生物气溶胶污染。患患

9、有有呼呼吸吸道道传传染染病病或或皮皮毛毛上上染染有有病病原原微微生生物物的的实实验验动动物物也可以产生微生物气溶胶。也可以产生微生物气溶胶。微微生生物物气气溶溶胶胶在在一一个个实实验验室室内内产产生生后后，还还可可以以通通过过气气流流转转移移到到同同一一建建筑筑物物的的其其他他地地方方，甚甚至至污污染染整整个个建建筑筑物物的的空气。空气。第二节生物安全实验室的运行规范 Laboratory Biosafety Manual 3rd edition -lab commissioning and certification -lab biosecurity conceptsBiosafety:To

10、 promote the use of safe practices in the handling of pathogenic microorganisms in the laboratory during transportation in field investigations in manufacturing facilities in health-care facilitiesLaboratory Biosafety Manual1st editionWHO Laboratory Biosafety Manual-translated into F,S,P,Ch,Ru-avail

11、able on web,CD-Rom,hard copies 1983199320032004需结合国家法规、要求和我国具体情况需结合国家法规、要求和我国具体情况一一.BSL-1和和BSL-2实验室实验室未未经经批批准准，任任何何人人不不得得进进入入实实验验室室工工作作区区域域。儿儿童童不不得得进进入入实实验验室室工工作作区区域域。可可能能增增加加获获得得性性感感染染的的危危险险性性或或感感染染后后可可能能引引起起严严重重后后果果的的人人员员不不允许进入实验室或动物房。允许进入实验室或动物房。BSL-2BSL-2实实验验室室门门上上应应标标有有国国际际通通用用的的生生物物危危害害警警告告标标志

12、志，包包括括通通用用的的生生物物危危险险性性标标志志，标标明明传传染染因因子子、实实验验室室负负责责人人或或其其他他人人姓姓名名、电电话话、以以及及进进入实验室的特殊要求。入实验室的特殊要求。实验室的门应保持关闭。实验室的门应保持关闭。工作人员进入动物房应当经过特别批准。工作人员进入动物房应当经过特别批准。与实验室工作无关的动物不得带入实验室。与实验室工作无关的动物不得带入实验室。（一）实验室的进入（一）实验室的进入（一）实验室的进入（一）实验室的进入1.1.在实验室工作时，必须穿着合适的工作服或防护服。在实验室工作时，必须穿着合适的工作服或防护服。2.2.在在进进行行可可能能接接触触到到血血

13、液液、体体液液以以及及其其他他具具有有潜潜在在感感染染性性的的材材料料或或感感染染性性动动物物的的操操作作时时，应应戴戴上上合合合合适适适适的的的的手手手手套套套套/双双双双层层层层手手套。手套用完后，应先消毒再摘除，随后必须洗手。套。手套用完后，应先消毒再摘除，随后必须洗手。3.3.在在处处理理完完感感染染性性实实验验材材料料和和动动物物后后，以以及及在在离离开开实实验验室室工工作区域前，都必须洗手。作区域前，都必须洗手。4.4.为为了了防防止止眼眼睛睛或或面面部部受受到到喷喷溅溅物物的的污污染染、碰碰撞撞或或人人工工紫紫外外线线辐辐射射的的伤伤害害，必必须须戴戴合合适适的的安安全全眼眼镜镜

14、、面面罩罩（面面具具）或其他防护设备。或其他防护设备。（二）工作人员的防护要求（二）工作人员的防护要求（二）工作人员的防护要求（二）工作人员的防护要求5.5.严禁穿着实验室防护服离开实验室工作区域。严禁穿着实验室防护服离开实验室工作区域。6.6.不得在实验室内穿露脚趾的鞋。不得在实验室内穿露脚趾的鞋。7.7.禁止在实验室工作区域进食、饮水、吸烟、化妆和处理禁止在实验室工作区域进食、饮水、吸烟、化妆和处理隐形眼镜。隐形眼镜。8.8.禁止在实验室工作区域储存食品和饮料。禁止在实验室工作区域储存食品和饮料。9.9.在实验室内用过的防护服不得与日常服装放在同一柜子在实验室内用过的防护服不得与日常服装放

15、在同一柜子内。内。办公室办公室（三）有关操作的指导原则（三）有关操作的指导原则（三）有关操作的指导原则（三）有关操作的指导原则1.严禁用口吸移液管、将实验材料置于口内、或舔标签；2.所有的实验操作尽量减少气溶胶和微小液滴的形成；3.应限制使用注射针头和注射器。除了进行肠道外注射或抽取实验动物体液外，注射针头和注射器不能用于移液或用作其他用途；4.实验室应制订并执行处理溢出物的标准操作程序。-出现溢出、事故以及明显或可能暴露于感染性物质时，处理后，必须向实验室负责人报告；-实验室应如实记录有关暴露和处理情况，保存相关记录；5.污染的液体在排放到生活污水管道以前必须清除污染（采用化学或物理学方法）

16、。根据所处理的微生物因子的危险度评估结果准备专门的污水处理系统。6.只有保证在实验室内没有受到污染的文件纸张才能带出实验室（四）实验室工作区的管理原则（四）实验室工作区的管理原则1.实验室应保持清洁整齐，严禁摆放和实验无关的物品。2.每天工作结束后应清除工作台面的污染。若发生具有潜在危害性的材料溢出应立即清除污染。3.所有受到污染的材料、标本和培养物在废弃或清洁再利用之前，必须先清除污染。4.感染性材料的包装和运输应遵循国家和或国际相关规定。5.如果窗户可以打开，则应安装防止节肢动物进入的纱窗。1.1.实实验验室室负负责责人人负负责责制制订订和和采采用用生生物物安安全全管管理理计计划划以以及及

17、实实验验室室安全或安全或/和操作手册。和操作手册。2.2.实验室应能提供常规的实验室安全培训实验室应能提供常规的实验室安全培训,并建立制度。并建立制度。3.3.实实验验室室负负责责人人（或或生生物物安安全全负负责责人人）要要将将生生物物安安全全实实验验室室的的特殊危害告知实验室人员，特殊危害告知实验室人员，-阅读生物安全或阅读生物安全或/和操作手册，并遵循标准的操作程序。和操作手册，并遵循标准的操作程序。-实验室内应备有可供取阅的安全或实验室内应备有可供取阅的安全或/或操作手册。或操作手册。-所所有有实实验验室室人人员员必必须须经经过过培培训训，了了解解所所从从事事工工作作的的危危险险、掌掌握

18、握有有关关的的管管理理规规定定和和操操作作程程序序，通通过过考考核核后后方方可可从从事事相相关关实验室工作。实验室工作。（五）生物安全管理的指导原则（五）生物安全管理的指导原则4.4.应当制订节肢动物和啮齿动物的控制方案。应当制订节肢动物和啮齿动物的控制方案。5.5.如有必要，应为所有实验室人员提供适宜的医学评估、如有必要，应为所有实验室人员提供适宜的医学评估、监测和治疗，并建立健康档案。实验室人员应接受与所操作监测和治疗，并建立健康档案。实验室人员应接受与所操作生物因子或实验室内潜在的因子相关的免疫接种或检测。生物因子或实验室内潜在的因子相关的免疫接种或检测。二二.BSL-3实验室实验室1.

19、BSL-3的使用应符合病原微生物实验室生物安全管理条例的有关规定。2.张贴在实验室入口门上的国际生物危害警告标志,应注明生物安全级别以及管理实验室出入的负责人姓名，并说明进入该区域的所有特殊条件，如免疫接种状况等。3.实验室防护服应为长袖、背面开口的隔离衣或连体衣，应穿着鞋套或专用鞋。实验室防护服不能在实验室外穿着，且必须在清除污染后再清洗。最好使用一次性连体防护服。4.开启各种潜在感染性物质的操作均必须在生物安全柜或其他类似的防护设施中进行。5.有些实验室操作，或在进行感染了某些病原微生物的动物操作时，必须配备呼吸防护装备。6.实行双人工作制，严禁任何人单独在实验室内工作。7.实验记录未经可

20、靠消毒不得带出实验室。通常使用传真进行原始记录的传输。8.工作人员应开展健康监测。应收集并妥善保存工作人员的基线血清（分装、保存）、并定期体检和采集血清。9.每天早、晚测体温，有相应的体征或身体不适者不宜进入实验室工作BSL-3BSL-3实验室实验室BSL-2以上实验室的实验人员：身体状况良好以上实验室的实验人员：身体状况良好不应进入者：发热、妊娠、其他因素造成的抵抗力低下不应进入者：发热、妊娠、其他因素造成的抵抗力低下 已在实验室控制区连续工作已在实验室控制区连续工作4h以上以上 其他原因造成的疲劳状态其他原因造成的疲劳状态第三节第三节 生物安全柜的使用规范生物安全柜的使用规范 1.每次使用

21、前检查2.不打开观察窗3.列出工作所需物品的清单，以减少双臂进入破坏气流4.打开风机5-10min5.窗式报警器、气流报警器任何造成安全柜内气流紊乱的不良操作都会危及操作者任何造成安全柜内气流紊乱的不良操作都会危及操作者的安全的安全一一.操作准备操作准备二二.物品摆放与污染措施物品摆放与污染措施1.尽量少放少放仪器和物品2.不要阻塞阻塞气口的空气流通3.废物容器/袋置安全柜内 密封 消毒4.安全柜内洁净物品/污染物品分开放置分开放置（消毒巾的垫置）（消毒巾的垫置）5.操作尽量工作台中央，注意动作对定向气流的影响6.工作用纸不允许放在生物安全柜内7.尽量减少操作者背后人员的走动、快速开关实验室的

22、门减少操作者背后人员的走动、快速开关实验室的门（进入时，敲门提醒正在操作的人员）8.禁止使用本生灯禁止使用本生灯/酒精灯，紫外灯不是必需的酒精灯，紫外灯不是必需的洁净物与污染物分开放置生物安全柜内感染性材料溢洒的处理生物安全柜内感染性材料溢洒的处理当当发发生生少少量量溢溢洒洒时时，应应用用吸吸收收纸纸巾巾立立即即处处理理，并并立立即即用用浸浸满满消消毒毒液液的的毛毛巾巾或或纱纱布布对对生生物物安安全全柜柜及及其其内内部部的的所所以以物物品品进进行行擦擦洗洗。工工作作面面消消毒毒后后应应更更换换手手套套，不不论论是是摘摘下下手手套套还还是更换手套都要消毒洗手。是更换手套都要消毒洗手。若若发发生生

23、大大量量溢溢洒洒，液液体体会会通通过过生生物物安安全全柜柜前前面面或或后后面面的的格格栅栅流流到到下下面面去去，生生物物安安全全柜柜内内所所有有的的物物品品都都应应该该进进行行表表面面消消毒毒并并拿拿出出生生物物安安全全柜柜，在在确确保保生生物物安安全全柜柜的的排排水水阀阀被被关关闭闭后后，可可将将消消毒毒液液倒倒在在工工作作台台面面上上，使使液液体体通通过过格格栅栅流流到到排排水水盘盘上上。所所有有接接触触溢溢出出物物品品的的材材料料都都要要进进行行消消毒毒和和/或或高高压灭菌处理。压灭菌处理。生物安全柜污染的清除（1）在实验结束时，包括仪器在内的生物安全柜里的所有物品应清除表面污染后，才能

24、移出安全柜；在每次使用前后清除生物安全柜内表面的污染，工作台工作台面和内壁要用消毒剂进行擦拭（杀灭任何微生物），面和内壁要用消毒剂进行擦拭（杀灭任何微生物），但不但不包括送风滤器的扩散板包括送风滤器的扩散板；在每天实验结束时，应擦拭生物安全柜的工作台面、四周以及玻璃的内外侧等部位以清除表面的污染。在对目标生物体有效时，可以采用漂白剂溶液或70%酒精来消毒。在使用如漂白剂等腐蚀性消毒剂后，还必须用无菌水再次进行擦拭。研究试剂溢漏或泼洒后，立即清除污染物及污染的表面在更换HEPA过滤器或内部维修之前，必须对已用于感染性材料工作的生物安全柜进行消毒在生物安全柜维护、更换过滤器、以及性能测试或重新安置

25、之前，必需消毒最普通的气体消毒方法：甲醛熏蒸推荐将安全柜一直维持运行状态。如果要关闭的话，则应在关机前运行5min以净化内部的气体。生物安全柜污染的清除（2）禁用非必需工作台面和内壁要用消毒工作台面和内壁要用消毒剂进行擦拭剂进行擦拭不要擦拭送风滤器的扩散不要擦拭送风滤器的扩散板板！第四节第四节实验室仪器设备的使用规范实验室仪器设备的使用规范 仪器使用中的相关危险仪器使用中的相关危险 干燥器干燥器爆裂、瓶子碎片和感染性物质飞出爆裂、瓶子碎片和感染性物质飞出培养物搅拌器，混合器，搅拌器培养物搅拌器，混合器，搅拌器产生气溶胶、喷溅和溢出产生气溶胶、喷溅和溢出皮下注射针头皮下注射针头意外接种意外接种产

26、生气溶胶或感染性物质溢出产生气溶胶或感染性物质溢出离心机离心机产生气溶胶、溅出和管子破裂产生气溶胶、溅出和管子破裂超速离心机超速离心机管子破裂管子破裂高速搅拌器，组织匀浆器高速搅拌器，组织匀浆器飞沫、渗漏和容器破裂飞沫、渗漏和容器破裂超声波破碎机、超声波清洁器超声波破碎机、超声波清洁器产生气溶胶、听力受损、皮炎产生气溶胶、听力受损、皮炎冻干机（冷冻干燥机）冻干机（冷冻干燥机）产生气溶胶、直接接触污染产生气溶胶、直接接触污染水浴水浴微生物生长，叠氮化钠和一些金属形成爆微生物生长，叠氮化钠和一些金属形成爆炸复合物炸复合物1.为防止感染，严禁用嘴吸液。应使用机械移液装置。2.所有的吸管都应该有棉塞以

27、减少对移液器或吸球的污染。建议使用带有滤芯的吸头。在BSL-2及以上级别实验室中，最好避免使用玻璃吸管避免使用玻璃吸管。3.对于感染性材料不能用吸管吹打来达到混匀的目的，操作时吸管应放入操作液面下的三分之二处，以防止产生气泡和气溶胶。从吸管吹出液体时也不要太用力，吸管内的液体应自动流出，不要强制性排出预留液。4.污染的吸管应立即浸没在含有适宜的消毒剂的防破碎的容器里。在处理之前，应浸泡足够长的时间。盛装废弃吸管的容器（不锈钢盒子）应放在生物安全柜里5.严禁用带有注射针头的注射器吸液6.为防止从吸管滴落的感染性物质发生扩散，工作台表面应放一块具有吸收性能的材料，使用后应按感染性废弃物予以处理。一

28、一一一.吸管和移液器的使用吸管和移液器的使用吸管和移液器的使用吸管和移液器的使用二二.离心机的使用离心机的使用离心分类离心分类 转头转速（转头转速（rpm）微速离心微速离心 15,00 0 低低/高速离心高速离心 2,00020,000 超速离心超速离心 120,000 离心可能造成的伤害途径离心可能造成的伤害途径-离心机机械故障离心机机械故障-实验器材故障，如离心管等实验器材故障，如离心管等-产生气溶胶；产生气溶胶；-操作者失误。操作者失误。1.所有离心机应处于正常工作状态/合格机械性能，根据厂家说明书进行操作。2.离心机位于适宜位置和高度，工作人员能看见离心桶，便于进行各项操作。3.离心管

29、和标本容器根据厂家要求选用，最好使用塑料制品，使用前应检查有无破损。必须在安全柜内打开盖子必须在安全柜内打开盖子。4.使用转头时应注意转头盖与转头型号是否匹配。离心桶的装载、平衡、密封和打开必须在生物安全柜内进行。空空离离心心桶桶配配平平时时应应该该用用蒸蒸馏馏水水或或7070乙乙醇醇、异异丙丙醇醇，不应使用盐水和次氯酸盐溶液。离心管内液面水平距管口应留出一定空隙，以确保离心过程中液体不会溢出，尤其是使用角转头时更要注意。（密封的离心桶/安全杯）5.应该每天检查在特定的转速下，离心杯的内表面有无污物。离心转头和离心桶应每天检查有无腐蚀点以及极细的裂缝，以确保安全。离心桶、转头和离心机腔每次用后

30、都应该消毒。每次用后，应该把离心桶倒放，以排净离心配平的液体。对于高致病性病原微生物，必须要高度警惕离心过程中产生的气溶胶风险。大型离心机上应加装负压罩，以及时吸出离心机排出的气体，并排至实验室的过滤通风系统，在BSL-3及以上级别实验室尤其要注意。所有的离心管必须带盖密封，其开启应在安全柜内进行。微型离心机则可放在安全柜内离心，但要注意其对安全柜气流的影响。如果不能在安全柜内离心也无负压罩，则必须将密封的转头在安全柜内打开。三三三三.搅拌器、振荡器、混匀器和超声波破碎仪的使用搅拌器、振荡器、混匀器和超声波破碎仪的使用搅拌器、振荡器、混匀器和超声波破碎仪的使用搅拌器、振荡器、混匀器和超声波破碎

31、仪的使用1.1.使使用用的的管管子子、盖盖子子、杯杯子子或或瓶瓶子子都都应应该该保保持持完完好好，无无裂裂隙隙、无无变变形形。盖盖子子、垫圈应恰好配套，保持完好。垫圈应恰好配套，保持完好。2.2.在在混混匀匀、振振荡荡和和超超声声波波破破碎碎过过程程中中，器器皿皿内内的的压压力力会会增增大大，含含有有感感染染性性材材料料的的气气溶溶胶胶可可能能会会从从容容器器和和盖盖子子间间的的空空隙隙逸逸出出。推推荐荐使使用用塑塑料料的的，特特别别是是聚四氟乙烯（聚四氟乙烯（PTFEPTFE）器皿，因为玻璃可能会破裂。）器皿，因为玻璃可能会破裂。3.3.当当使使用用匀匀浆浆器器、振振荡荡器器和和超超声声波波

32、破破碎碎仪仪时时，应应有有防防护护装装置置，在在生生物物安安全全柜柜里里操操作作。使使用用涡涡旋旋振振荡荡器器时时，必必须须在在生生物物安安全全柜柜内内操操作作，操操作作的的容容器器必必须须为密闭的，以避免产生气溶胶和发生液体溅洒。为密闭的，以避免产生气溶胶和发生液体溅洒。4.4.在操作结束后，应在生物安全柜里开启容器。在操作结束后，应在生物安全柜里开启容器。5.5.操作人员使用超声波破碎仪时，应有耳部听力保护装置。操作人员使用超声波破碎仪时，应有耳部听力保护装置。四四四四.组织研磨器的使用组织研磨器的使用组织研磨器的使用组织研磨器的使用使使用用玻玻璃璃的的研研磨磨器器时时，应应戴戴上上手手套

33、套，手手里里再再垫垫上上一一块块柔软的纱布后操作。塑料（柔软的纱布后操作。塑料（PTFEPTFE）的研磨器更安全。）的研磨器更安全。组织研磨器应该在生物安全柜里操作和开启。组织研磨器应该在生物安全柜里操作和开启。五五五五.冰箱和速冻器的使用和保养冰箱和速冻器的使用和保养冰箱和速冻器的使用和保养冰箱和速冻器的使用和保养1.1.冰箱、低温冰箱和固体干冰盒要定期除霜和清扫。冰箱、低温冰箱和固体干冰盒要定期除霜和清扫。及及时时去去除除在在贮贮存存过过程程中中已已破破裂裂安安瓿瓿、冻冻存存管管。在在清清扫扫的的过过程程中中应应注注意意防防护护,配配戴戴面面部部保保护护装装置置并并戴戴手手套套。清清扫扫后

34、后进行消毒处理。进行消毒处理。2.2.保保存存在在冰冰箱箱里里的的容容器器等等，都都应应有有清清楚楚的的标标签签，标标注注内内容容物物的的科科学学命命名名、贮贮存存日日期期和和贮贮存存人人姓姓名名。无无标标签签的的和和过过期期的的材材料料应应高高压压灭灭菌菌后后丢丢弃弃。对对于于冰冰箱箱内内的的储储存存物物应应有有详细的目录。详细的目录。3.3.除除非非有有防防爆爆措措施施，严严禁禁将将易易燃燃液液体体保保存存在在冰冰箱箱里里，冰冰箱箱的门上应张贴这方面的注意事项。的门上应张贴这方面的注意事项。六六.冻干机的使用冻干机的使用1.1.对对于于高高致致病病性性病病原原微微生生物物应应在在BSL-3

35、BSL-3或或以以上上级级别别实实验验室室进进行冻干。行冻干。2.2.冻冻干干机机排排出出的的气气体体要要经经过过HEPAHEPA过过滤滤并并将将排排出出管管道道插插入入装装有消毒液的容器中。有消毒液的容器中。3.3.对对于于冻冻干干高高致致病病性性病病原原微微生生物物产产生生的的冷冷凝凝水水应应收收集集入入消消毒毒液容器中并高压灭菌处理。液容器中并高压灭菌处理。4.4.冻干机的机舱恢复到室温后用适宜的消毒液擦拭。冻干机的机舱恢复到室温后用适宜的消毒液擦拭。表表9-3 9-3 可能产生危害的微生物操作相关仪器设备可能产生危害的微生物操作相关仪器设备和消除和消除/降低危险的办法降低危险的办法第五

36、节感染性材料的操作与防护规范 一一.实验室内标本的安全操作实验室内标本的安全操作（一）标本容器（一）标本容器（一）标本容器（一）标本容器1.1.用用于于装装盛盛感感染染性性标标本本的的容容器器可可以以是是玻玻璃璃的的，但但为为了了保保证证安安全，最好采用塑料制品（根据实际需要而定）。全，最好采用塑料制品（根据实际需要而定）。2.2.标标本本的的容容器器应应当当坚坚固固，不不易易破破碎碎，盖盖子子或或塞塞子子盖盖好好后后不不应应有液体渗漏。所有的标本都应存放在容器内。有液体渗漏。所有的标本都应存放在容器内。3.3.容容器器应应正正确确地地贴贴上上标标签签以以利利于于识识别别，标标签签上上应应有有

37、样样品品名名称称、采集日期、编号等必要的信息。采集日期、编号等必要的信息。4.4.样样品品的的有有关关表表格格和和/或或说说明明不不要要绑绑在在容容器器外外面面，而而应应单单独独放在防水的袋子里，以防止发生污染而影响使用。放在防水的袋子里，以防止发生污染而影响使用。（二）标本的实验室内运输（二）标本的实验室内运输（二）标本的实验室内运输（二）标本的实验室内运输 为为防防止止发发生生意意外外渗渗漏漏或或溢溢出出，在在实实验验室室内内运运输输标标本本时时，应应使使用用金金属属的的或或塑塑料料材材质质的的第第二二层层容容器器（如如盒盒子子）。-第第二二层层容容器器中中应应该该有有标标本本容容器器的的

38、支支架架，将将标标本本容容器器固固定定在支架上，以使其保持直立；在支架上，以使其保持直立；-第第二二层层容容器器应应耐耐高高压压或或者者能能抵抵抗抗化化学学消消毒毒剂剂的的腐腐蚀蚀，以以便定期清除污染。便定期清除污染。-容器封口处最好有一个衬圈，以防止发生渗漏。容器封口处最好有一个衬圈，以防止发生渗漏。（三）标本的接收（三）标本的接收（三）标本的接收（三）标本的接收1.1.大规模接收标本的实验室应在专用的房间或区域进行。大规模接收标本的实验室应在专用的房间或区域进行。2.2.对对于于病病原原已已知知的的按按国国家家规规定定可可在在BSL-2BSL-2操操作作的的病病原原微微生生物物或或未未知知

39、的的感感染染性性材材料料，最最低低应应在在一一个个专专用用区区域域或或房房间间接接受受，并并在在生生物物安安全全柜柜内内打打开开外外包包装装，操操作作人人员员应应穿穿防防水水的的防防护护服，戴生物安全专用口罩和眼罩、手套。服，戴生物安全专用口罩和眼罩、手套。3.3.按按国国家家规规定定需需要要在在BSL-3BSL-3或或以以上上级级实实验验室室操操作作的的病病原原微微生生物物或或标标本本，应应按按国国家家规规定定的的防防护护等等级级，在在相相应应级级别别的的实实验验室的安全柜内打开，并采取相应的防护措施为保证安全。室的安全柜内打开，并采取相应的防护措施为保证安全。4.4.不应在普通的不应在普通

40、的BSL-1BSL-1实验室接受标本。实验室接受标本。（四）标本包装的打开（四）标本包装的打开（四）标本包装的打开（四）标本包装的打开1.1.1.1.接接接接收收收收并并并并打打打打开开开开标标标标本本本本包包包包装装装装的的的的人人人人员员员员应应应应受受受受过过过过防防防防护护护护培培培培训训训训（尤尤尤尤其其其其是是是是处处处处理理理理破破破破裂裂裂裂的的的的或或或或渗渗渗渗露露露露的的的的容容容容器器器器）并并并并应应应应知知知知道道道道所所所所操操操操作作作作标标标标本本本本的的的的潜潜潜潜在在在在的的的的健健健健康康康康危害，操作时要采取合适的防护措施。危害，操作时要采取合适的防护

41、措施。危害，操作时要采取合适的防护措施。危害，操作时要采取合适的防护措施。2.2.2.2.所所所所有有有有标标标标本本本本应应应应该该该该在在在在生生生生物物物物安安安安全全全全柜柜柜柜里里里里打打打打开开开开包包包包装装装装，同同同同时时时时备备备备有有有有消消消消毒毒毒毒剂剂剂剂以以以以便便便便随随随随时时时时处处处处理理理理可可可可能能能能出出出出现现现现的的的的标标标标本本本本泄泄泄泄漏漏漏漏。打打打打开开开开包包包包装装装装前前前前应应应应先先先先仔仔仔仔细细细细检检检检查查查查每每每每个个个个容容容容器器器器的的的的外外外外观观观观、标标标标签签签签是是是是否否否否完完完完整整整整

42、，标标标标签签签签、送送送送检检检检报报报报告告告告与与与与内内内内容容容容物物物物是是是是否否否否相相相相符符符符，是是是是否否否否有有有有污污污污染染染染以以以以及及及及容容容容器器器器是是是是否否否否有有有有破破破破损损损损等等等等，要要要要登记详细的报告单并记录处置方法。登记详细的报告单并记录处置方法。登记详细的报告单并记录处置方法。登记详细的报告单并记录处置方法。3.3.3.3.接受标本应由接受标本应由接受标本应由接受标本应由2 2 2 2人进行。人进行。人进行。人进行。二二.避免感染性物质扩散的方法避免感染性物质扩散的方法1.1.为为避避免免接接种种物物从从接接种种环环上上脱脱落落

43、，微微生生物物接接种种环环直直径径应应为为2 23mm3mm并并且且完完全全闭闭合合，柄柄的的长长度度不不应应超超过过6cm6cm以以最最大大限限度度减减少抖动。少抖动。2.2.应应该该使使用用密密闭闭的的微微型型电电加加热热灭灭菌菌接接种种环环，（不不用用本本生生灯灯）。最好使用一次性的、无需灭菌的接种环。最好使用一次性的、无需灭菌的接种环。3.3.小心操作干燥的痰标本，以免产生气溶胶。小心操作干燥的痰标本，以免产生气溶胶。4.4.要要高高压压灭灭菌菌和和/或或丢丢弃弃的的废废弃弃的的标标本本及及培培养养物物应应放放在在防防渗渗漏漏的的容容器器里里，如如实实验验室室用用的的医医疗疗废废物物专

44、专用用袋袋，这这些些袋袋子子是是耐高压的。耐高压的。高高压压消消毒毒后后放放入入废废弃弃物物容容器器前前，标标本本的的顶顶部部应应标标明明是是安安全全的（如用高压标签）。的（如用高压标签）。5.5.应对实验室进行定期的消毒。应对实验室进行定期的消毒。三三.避免感染性物质吸入或接触的规范避免感染性物质吸入或接触的规范1.1.在在微微生生物物学学的的实实验验操操作作中中释释放放的的较较大大颗颗粒粒和和小小液液滴滴（直直径径大大于于5m5m）会会很很快快落落在在操操作作台台表表面面以以及及操操作作者者的的手手上上，为为了了避避免免污污染染，操操作作者者应应戴戴一一次次性性手手套套。实实验验人人员员做

45、做实实验验时时要避免触摸嘴、眼和面部。要避免触摸嘴、眼和面部。2.2.严禁在实验室里吃东西、喝东西以及储存食品和饮料。严禁在实验室里吃东西、喝东西以及储存食品和饮料。3.3.实验室内不许咬笔、嚼口香糖。实验室内不许咬笔、嚼口香糖。4.4.实验室内不许化妆和配戴隐形眼睛。实验室内不许化妆和配戴隐形眼睛。5.5.在在任任何何可可能能导导致致潜潜在在的的传传染染性性物物质质溅溅出出的的操操作作过过程程中中，应应该保护面部、眼睛和嘴。该保护面部、眼睛和嘴。四四.避免传染性物质接种的规范避免传染性物质接种的规范1 1.要要尽尽力力避避免免由由破破裂裂的的或或有有缺缺口口的的玻玻璃璃器器皿皿引引起起的的传

46、传染染性性物物质质的的意意外外感感染染。尽尽量量以以塑塑料料器器皿皿代代替替玻玻璃璃器器皿皿。应用塑料吸管替代玻璃吸管。应用塑料吸管替代玻璃吸管。2.2.锐锐器器皿皿如如皮皮下下接接种种针针（针针头头）、玻玻璃璃吸吸管管和和碎碎玻玻璃璃可可导致实验人员感染，因此锐器要小心操作。导致实验人员感染，因此锐器要小心操作。3.3.为为减减少少注注射射器器和和针针头头造造成成的的意意外外事事故故，应应尽尽量量少少用用注注射射器器和和针针头头（可可以以用用简简单单的的工工具具开开启启瓶瓶塞塞，这这样样就就可可以以用用吸吸管管代代替替注注射射器器和和针针头头）。必必须须使使用用注注射射器器和和针针头时，要采

47、用锐器保护装置。头时，要采用锐器保护装置。注射器的使用规范注射器的使用规范不要用注射器代替移液管不要重新给针头盖帽或夹针头。使用针头锁定型注射器，以防针头和注射器分离，或者使用一体的一次性注射器。运用正确的实验室技术，如：吸液时要小心，尽量减少吸液体时产生气泡 避免使用注射器混匀感染性的液体；如果使用，保证针的端部在容器的液面下，并且不要太用力 从胶塞瓶中拔出针管前，要用适当的抗感染材料浸湿的脱脂棉包裹针头和塞子。不允许向空气中直接排放注射器的气泡，将多余的液体或气泡推入用抗感染材料浸湿的脱脂棉或有脱脂棉小瓶中。感染性材料的所有操作都要在生物安全柜中进行。对动物进行接种时要固定。滴鼻或者口腔接

48、种时，使用钝的针头或套管，并在生物安全柜中操作。使用后用专用容器收集高压灭菌，妥善处理。五五.血清分离的实验技术规范血清分离的实验技术规范1.1.1.1.操作时要戴手套及配戴眼睛和粘膜保护装置。操作时要戴手套及配戴眼睛和粘膜保护装置。操作时要戴手套及配戴眼睛和粘膜保护装置。操作时要戴手套及配戴眼睛和粘膜保护装置。2.2.2.2.只只只只有有有有良良良良好好好好的的的的实实实实验验验验室室室室技技技技术术术术才才才才能能能能避避避避免免免免溅溅溅溅出出出出和和和和气气气气溶溶溶溶胶胶胶胶产产产产生生生生，或或或或将将将将这这这这种种种种可可可可能能能能性性性性降降降降至至至至最最最最低低低低。吸

49、吸吸吸取取取取血血血血液液液液及及及及血血血血清清清清时时时时要要要要小小小小心心心心，不不不不要要要要倾倾倾倾倒。严禁用嘴吸液。倒。严禁用嘴吸液。倒。严禁用嘴吸液。倒。严禁用嘴吸液。3.3.3.3.吸吸吸吸管管管管用用用用后后后后应应应应完完完完全全全全浸浸浸浸没没没没在在在在适适适适当当当当的的的的消消消消毒毒毒毒液液液液里里里里，并并并并且且且且在在在在处处处处理理理理之之之之前前前前，或洗刷及灭菌再利用前要浸泡足够长的时间。或洗刷及灭菌再利用前要浸泡足够长的时间。或洗刷及灭菌再利用前要浸泡足够长的时间。或洗刷及灭菌再利用前要浸泡足够长的时间。4.4.4.4.带带带带有有有有血血血血凝凝

50、凝凝块块块块的的的的废废废废弃弃弃弃标标标标本本本本管管管管等等等等，加加加加盖盖盖盖后后后后应应应应当当当当放放放放到到到到适适适适当当当当的的的的、防防防防渗漏的容器中，以备高压和渗漏的容器中，以备高压和渗漏的容器中，以备高压和渗漏的容器中，以备高压和/或焚烧。或焚烧。或焚烧。或焚烧。5.5.5.5.应备有合适的消毒液，用以随时清除溅出物及溢出物。应备有合适的消毒液，用以随时清除溅出物及溢出物。应备有合适的消毒液，用以随时清除溅出物及溢出物。应备有合适的消毒液，用以随时清除溅出物及溢出物。六六.开启含冻干传染性物质安瓿的技术规范开启含冻干传染性物质安瓿的技术规范1.1.1.1.首先消毒安瓿