食用菌菌种的制作与保藏-(minimizer)课件.ppt
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1、 第五章 食用菌菌种生产第一节 食用菌菌种概述第二节 食用菌制种的条件第三节 食用菌菌种分离第四节 第五节 菌种质量的鉴定第六节 菌种保藏与复壮孢子孢子孢子孢子菇体组织菇体组织菇体组织菇体组织菌丝体菌丝体菌丝体菌丝体菌菌 种种培养基质培养基质培养基质培养基质子实体子实体子实体子实体萌发萌发萌发萌发分离分离分离分离食用菌栽培一般包含几个步骤:食用菌栽培一般包含几个步骤:第一节 食用菌菌种概述一、菌种概念二、菌种类型三、优良菌种的标准返回本章一、菌种的概念一、菌种的概念 菌菌种种(广广义义):是是指指以以保保藏藏、试试验验、栽栽培培和和其其它它用用途途为为目目的的,具具有有繁繁衍衍能能力力,遗遗传
2、传特特性性相相对对稳稳定定的的孢孢子子、组组织织或或菌菌丝丝体体及及其其营营养养性性或或非营养性的载体。非营养性的载体。菌菌种种(狭狭义义):是是指指以以适适宜宜的的培培养养基基为为载载体体进进行行纯纯培培养养的的菌菌丝丝体体,也也就就是是培培养养基基质质和和菌菌丝丝体体的的联联合合体体。或或者者说说是是指指人人工工培培养养,并并供供进进一步繁殖的食用菌的纯菌丝体。一步繁殖的食用菌的纯菌丝体。返回外外外外观观观观形形形形态态态态 颗粒状菌种颗粒状菌种颗粒状菌种颗粒状菌种 片状菌种片状菌种片状菌种片状菌种 砖砖砖砖状菌种状菌种状菌种状菌种 物理性状物理性状物理性状物理性状 固化菌种固化菌种固化菌
3、种固化菌种 固体菌种固体菌种固体菌种固体菌种 液体菌种液体菌种液体菌种液体菌种 培养培养培养培养容器容器容器容器 袋装菌种袋装菌种袋装菌种袋装菌种 瓶装菌种瓶装菌种瓶装菌种瓶装菌种 菌种类型菌种类型培养基的主料培养基的主料培养基的主料培养基的主料 粪草菌种粪草菌种粪草菌种粪草菌种 谷粒菌种谷粒菌种谷粒菌种谷粒菌种 木木木木块块块块菌种菌种菌种菌种 木屑菌种木屑菌种木屑菌种木屑菌种 菌种类型菌种类型颗粒菌种颗粒菌种颗粒菌种颗粒菌种 枝条菌种枝条菌种枝条菌种枝条菌种 菌种按生产程序菌种按生产程序菌种按生产程序菌种按生产程序 一级种一级种一级种一级种(母种)母种)母种)母种)二级种二级种二级种二级种
4、(原种)(原种)(原种)(原种)三级种三级种三级种三级种(栽培种栽培种栽培种栽培种)菌种类型菌种类型返回本节生 长 势 的 区 别液体菌种固体菌种返回本节第二节第二节 食用菌制种的条件食用菌制种的条件一、食用菌制种程序二、制种的设备和条件返回本章二、制种的设备和条件 1、配料设备 2、灭菌消毒条件 3、接种条件 4、培养条件 5、菌种保藏设备 6、菌种厂的布局 返回本节切片机切片机 切切片片机机是是将将本本材材切切成成规规格格木木片片的的专专用用机机械械,是是食食用用菌菌培培养养基基质质粉粉碎碎处处理理的的预预前前工序设备。工序设备。搅拌机搅拌机是将培养料是将培养料通过搅拌使通过搅拌使其分布充
5、分其分布充分均匀的专业均匀的专业机械。机械。自动上料加水原料搅拌机自动上料加水原料搅拌机 搅拌机搅拌机 装袋机装袋机 装瓶机装瓶机 菌种袋颈圈菌种瓶返回手提式高压灭菌锅手提式高压灭菌锅 手提式高压灭菌锅手提式高压灭菌锅的容积小,适用于试管的容积小,适用于试管培养基、三角瓶或平皿、培养基、三角瓶或平皿、无菌水、少量菌种瓶及无菌水、少量菌种瓶及一些器皿的灭菌。一些器皿的灭菌。立立立立式式式式高高高高压压压压灭灭灭灭菌菌菌菌锅锅锅锅容容容容量量量量大大大大,可可可可用用用用于于于于菌菌菌菌种种种种瓶瓶瓶瓶、罐罐罐罐头头头头瓶瓶瓶瓶及及及及塑塑塑塑料料料料袋袋袋袋装培养基的灭菌。装培养基的灭菌。装培养
6、基的灭菌。装培养基的灭菌。立式高压灭菌锅立式高压灭菌锅 卧卧式式高高压压灭灭菌菌锅锅容容量量大大、盛盛物物多多,灭灭菌菌彻彻底底,效果好。效果好。卧式高压灭菌锅卧式高压灭菌锅返回植物细胞培养及产业化应用植物细胞培养及产业化应用无菌室(接种室)无菌室(接种室)接接种种室室接种箱 接种箱是用木材与玻璃制成密闭箱。有单人式或双人对接式。接种箱前后斜面为玻璃窗,便于操作时观察,可开启,以便取放物品。玻璃窗下的木板有一对椭圆形开孔,操作孔装有白布袖套,一端固定在圆孔上,另一端套口用松紧带箍住操作者的手腕,以防杂菌进入。箱内可安装20W日光灯和30W紫外线灯管。观察窗紫外灯 操作孔接种箱返回本节A A、接
7、种针、接种针B B、接种钩、接种钩C C、接种环、接种环D D、接种铲、接种铲E E、接种锄、接种锄F F、接种耙、接种耙G G、接种刀、接种刀H H、接种勺、接种勺I I、接种镊、接种镊接种工具接种工具 固体菌种接种枪液体菌种接种枪返回培培养养室室培养架培养架 在在制制作作一一级级种种和和少少量量二二级级种种时时,可可采采用用电电热热恒恒温温箱箱或或隔隔水水式式电电热热恒恒温温箱箱,目目的的是是控控制制温温度,适温培养。度,适温培养。恒温培养箱恒温培养箱返回贮藏室远离污染源低温(48)干燥、通风、遮光 用前要严格消毒杀虫地面常撒石灰粉保藏原种、栽培种:五、菌种保藏设备保藏母种:冰箱(4)左右
8、返回六、菌种厂的布局根据菌种生产流程合理设置仓库配料室灭菌室接种室培养室办公室栽培棚门口晒料场返回一、一、菌种分离概念菌种分离概念二、二、菌种分离方法菌种分离方法三、菌种分离提纯三、菌种分离提纯四、出菇试验四、出菇试验第三节第三节 食用菌菌种分离食用菌菌种分离返回本章概念概念:将子实体的局部组织或孢子移接在斜面:将子实体的局部组织或孢子移接在斜面试管培养基上,获得纯培养菌丝的操作称为试管培养基上,获得纯培养菌丝的操作称为菌菌种分离种分离。菌种分离主要指一级种。菌种分离主要指一级种(母种母种)的分离。的分离。有些与高等植物共生的菌根菌,如红菇、有些与高等植物共生的菌根菌,如红菇、松菇以及有些要在
9、动物(如白蚁)存在下才产松菇以及有些要在动物(如白蚁)存在下才产生子实体的菌类,因营养条件复杂,在目前实生子实体的菌类,因营养条件复杂,在目前实验条件下,较难在简单的培养基上获得纯菌种。验条件下,较难在简单的培养基上获得纯菌种。一、菌种分离概念返回 菌菌 种种 分分 离离菇木分离法菇木分离法 二、菌种分离的方法二、菌种分离的方法 组织分离法组织分离法 子实体分离法子实体分离法 菌核分离法菌核分离法 菌索分离法菌索分离法 孢子分离法孢子分离法 菌褶涂抹法菌褶涂抹法 孢子印分离法孢子印分离法 孢子弹射分离法孢子弹射分离法 整菇插种法整菇插种法 钩悬法钩悬法 贴附法贴附法 单孢子分离法单孢子分离法
10、平板稀释法平板稀释法 连续稀释法连续稀释法 返回空中孢子捕捉法空中孢子捕捉法(一)孢子分离法(一)孢子分离法 无菌操作条件下使孢子在适宜的培养基上无菌操作条件下使孢子在适宜的培养基上萌发,长成菌丝体而获得纯菌种的方法称为孢萌发,长成菌丝体而获得纯菌种的方法称为孢子分离法。子分离法。特特 点点 菌丝菌龄短,因是有性菌丝菌龄短,因是有性繁殖产物,其菌丝生命力强。繁殖产物,其菌丝生命力强。侵染病毒的菌类可用孢侵染病毒的菌类可用孢子分离法脱毒。子分离法脱毒。种菇的选择种菇的选择 在生产中必在生产中必须选择优良品系须选择优良品系中的优良个体作中的优良个体作分离材料。分离材料。选取八、九选取八、九分成熟的
11、,健壮分成熟的,健壮无杂的第一或第无杂的第一或第二茬的子实体。二茬的子实体。(一)孢子分离法(一)孢子分离法 返回1 1、孢子弹射分离法、孢子弹射分离法 它是利用孢子能自动它是利用孢子能自动弹射出子实体层的特弹射出子实体层的特性来收集孢子。性来收集孢子。(1 1)整菇插种法)整菇插种法 孢子收集器孢子收集器来收集孢子来收集孢子 2-32-3天天后后孢孢子子散散落落在在培培养养皿皿中中,加加入入无无菌菌水水,用用针针筒筒吸吸取取孢孢子子液液,接接种种在在斜斜面面培培养养基基中中央央,置置于于22-2622-26恒恒温温箱箱中中培培养即可。养即可。(1 1)整菇插种法)整菇插种法 在生产上,采集木
12、耳、银在生产上,采集木耳、银耳孢子常用此法,伞菌也可采耳孢子常用此法,伞菌也可采用此法。用此法。先将新鲜成熟的耳片用无先将新鲜成熟的耳片用无菌水冲洗,然后用无菌纱布将菌水冲洗,然后用无菌纱布将水吸干,取一小片挂在灭菌的水吸干,取一小片挂在灭菌的钩子上钩子上(伞菌消毒后挂上),伞菌消毒后挂上),钩子的另一端挂在三角瓶口。钩子的另一端挂在三角瓶口。(2 2)钩悬法)钩悬法 瓶内装有培养基,在瓶内装有培养基,在2525下,培养下,培养24h24h。孢子落到。孢子落到培养基上后,取出耳片,塞上棉塞继续培养,然后再培养基上后,取出耳片,塞上棉塞继续培养,然后再转入试管中培养转入试管中培养。(2 2)钩悬
13、法)钩悬法 取取一一小小块块成成熟熟的的菌菌褶褶或或小小块块菌菌盖盖,用用溶溶化化的的琼琼脂脂或或胶胶水水、浆浆糊糊(需需先先灭灭菌菌)贴贴附附在在试试管管斜斜面面的的上上方方或或培培养养皿皿皿皿盖盖上上,经经6612h12h,待待孢孢子子落落下下后后,立立即即将将试试管管或或培培养养皿皿中中的的培培养养基基移移到到另另一一消消毒毒过过的的空空试试管管或或培培养皿中进行培养。养皿中进行培养。(3 3)贴附法)贴附法 返回2 2、菌褶涂抹法、菌褶涂抹法 将伞菌子实体用将伞菌子实体用7575酒精表面消毒,按无菌操作酒精表面消毒,按无菌操作用接种环直接插入两片菌褶之间,轻轻地抹过褶片表用接种环直接插
14、入两片菌褶之间,轻轻地抹过褶片表面,然后用划线法涂抹于试管培养基上。面,然后用划线法涂抹于试管培养基上。3 3、孢子印分离法、孢子印分离法 取成熟子实体经表面消毒后,切去菌柄,将菌褶取成熟子实体经表面消毒后,切去菌柄,将菌褶向下放置于灭过菌的有色纸上,在向下放置于灭过菌的有色纸上,在20-2420-24静置一天,静置一天,大量孢子落下形成孢子印,然后移少量孢子在试管培大量孢子落下形成孢子印,然后移少量孢子在试管培养基上培养。养基上培养。返回4 4、单孢子分离法、单孢子分离法 进行单孢子分离后,在人工控制的条件下,使两个优良品进行单孢子分离后,在人工控制的条件下,使两个优良品系的单孢子进行杂交,
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