动物细胞融合与单克隆抗体课件优秀PPT.ppt

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1、动物细胞融合与单克隆抗体课件第1页，本讲稿共27页一、说教材一、说教材二、说教法二、说教法 三、说学法三、说学法四、说教学过程四、说教学过程第2页，本讲稿共27页一、说教材（一）、教材的地位和作用（一）、教材的地位和作用（一）、教材的地位和作用（一）、教材的地位和作用 动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体动物细胞融合与单克隆抗体是人教版生物选修是人教版生物选修是人教版生物选修是人教版生物选修3专专题二第题二第2节动物细胞工程中第节动物细胞工程中第2小节的内容，由于细胞小节的内容，由于细胞工程是建立在细胞结构、功能、生理等研究基础上的工程是建立在细胞结构、功能

2、、生理等研究基础上的新技术，动物细胞融合又是细胞工程中基本技术之一，新技术，动物细胞融合又是细胞工程中基本技术之一，所以第所以第2 2小节教学内容是在高中必修教材基础上的深入小节教学内容是在高中必修教材基础上的深入小节教学内容是在高中必修教材基础上的深入小节教学内容是在高中必修教材基础上的深入和扩展，也是第和扩展，也是第和扩展，也是第和扩展，也是第1 1小节动物细胞培养教学后的必然及小节动物细胞培养教学后的必然及延伸，是安排在学习了免疫、遗传与基因工程的基延伸，是安排在学习了免疫、遗传与基因工程的基础上来进行教学的，学生既有一定的知识基础，又础上来进行教学的，学生既有一定的知识基础，又能为后面

3、的微生物与发酵工程的教学奠定基础，尤能为后面的微生物与发酵工程的教学奠定基础，尤其是为微生物的选种教学打下基础。其是为微生物的选种教学打下基础。第3页，本讲稿共27页（二）、教学目标（二）、教学目标 1 知识目标知识目标 掌握动物细胞融合与植物体细胞杂交的区别和联系。掌握动物细胞融合与植物体细胞杂交的区别和联系。简述动物细胞融合和单克隆抗体制备的过程。简述动物细胞融合和单克隆抗体制备的过程。了解单克隆抗体在医学实践中的应用，并说其应用实例。了解单克隆抗体在医学实践中的应用，并说其应用实例。2 能力目标能力目标 由植物体细胞杂交技术导出动物细胞融合过程，培养学生的知识迁移能力、思由植物体细胞杂交

4、技术导出动物细胞融合过程，培养学生的知识迁移能力、思维能力。维能力。让学生尝试设计单克隆抗体的制备过程，指导学生掌握获取知识和探索生物科让学生尝试设计单克隆抗体的制备过程，指导学生掌握获取知识和探索生物科学的基本方法，使学生了解生物科学认识模式以发展学生的创造性能力。学的基本方法，使学生了解生物科学认识模式以发展学生的创造性能力。3 情感目标情感目标 初步培养学生勇于探索，不断创新的精神和合作精神。初步培养学生勇于探索，不断创新的精神和合作精神。通过向学生介绍动物细胞融合与单克隆抗体技术的发展动态及一些新的研究成果，通过向学生介绍动物细胞融合与单克隆抗体技术的发展动态及一些新的研究成果，激发学

5、生学习生物的兴趣和崇尚科学的精神。激发学生学习生物的兴趣和崇尚科学的精神。第4页，本讲稿共27页（三）、教学重点、难点（三）、教学重点、难点教学重点：动物细胞融合原理和单克隆抗体的教学重点：动物细胞融合原理和单克隆抗体的 制备。制备。教学难点：单克隆抗体的制备。教学难点：单克隆抗体的制备。第5页，本讲稿共27页二、说教法二、说教法 为了发挥学生的主动性和为了发挥学生的主动性和积极性，解决重点，突破难点，达积极性，解决重点，突破难点，达到良好的效果，教学方法上可以采到良好的效果，教学方法上可以采用自学、指导、设疑、探究的模式。用自学、指导、设疑、探究的模式。达到导达到导“思思”：引导学生：引导学

6、生“活活”学；学；导导“法法”：引导学生：引导学生“会会”学。学。第6页，本讲稿共27页三、说学法三、说学法1.学情分析学情分析 高中学生，虽然已经具备了一定的逻辑思维能力和高中学生，虽然已经具备了一定的逻辑思维能力和想象能力，兴趣广泛、个性强，但由于生活经验、阅历想象能力，兴趣广泛、个性强，但由于生活经验、阅历还不够完善，学习能力有待进一步提高，尤其是要培养还不够完善，学习能力有待进一步提高，尤其是要培养学生的创造性思维和创新能力，而且本节教学内容理论学生的创造性思维和创新能力，而且本节教学内容理论性强，所以教师的引导、指导仍不容忽视！性强，所以教师的引导、指导仍不容忽视！2.学法应用学法应

7、用（1）比较法）比较法（2）讨论法）讨论法（3）科学探究法）科学探究法第7页，本讲稿共27页四、说教学过程四、说教学过程1、情景导入、情景导入2、讲授新课、讲授新课3、反馈测试、反馈测试4、课堂小结、课堂小结第8页，本讲稿共27页1970年，有两位科学家做了一个人年，有两位科学家做了一个人鼠细胞融合的实验，以证明细胞膜上鼠细胞融合的实验，以证明细胞膜上蛋白质分子是运动的。那么，如何实现人蛋白质分子是运动的。那么，如何实现人鼠细胞的融合，以及动物细胞融合后鼠细胞的融合，以及动物细胞融合后有什么用途呢？这就是今天我们这节课要有什么用途呢？这就是今天我们这节课要学习的内容。学习的内容。返回第9页，本

8、讲稿共27页你能回忆出植物体细胞杂交的过程吗？你能回忆出植物体细胞杂交的过程吗？第10页，本讲稿共27页1.动物细胞融合动物细胞融合请阅读课本请阅读课本P52P52动物细胞融合并讨论下列问题动物细胞融合并讨论下列问题1 1 1 1、植物体细胞杂交最终得到的是完整的植物个体，动物细胞融合后能形成杂种动、植物体细胞杂交最终得到的是完整的植物个体，动物细胞融合后能形成杂种动、植物体细胞杂交最终得到的是完整的植物个体，动物细胞融合后能形成杂种动、植物体细胞杂交最终得到的是完整的植物个体，动物细胞融合后能形成杂种动物个体吗物个体吗物个体吗物个体吗?2 2 2 2、动植物细胞在结构上有何区别？这与它们杂交

9、或融合过程有什么影响？动植物细胞在结构上有何区别？这与它们杂交或融合过程有什么影响？3 3 3 3、植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法？动物细胞融合呢？、植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法？动物细胞融合呢？、植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法？动物细胞融合呢？、植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法？动物细胞融合呢？4 4、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是否相同？什么原理？、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是否相同？什么原理？5 5 5 5、为什么要用灭活的病毒？、为什么要用灭活的病毒？、为什么要用灭活的病毒？、为什么要用灭活的病毒？6 6 6 6、动物细

10、胞融合有什么意义？、动物细胞融合有什么意义？、动物细胞融合有什么意义？、动物细胞融合有什么意义？不能，只能得到杂交细胞。不能，只能得到杂交细胞。不能，只能得到杂交细胞。不能，只能得到杂交细胞。动物细胞无细胞壁，所以不须去除和再生出细胞壁。动物细胞无细胞壁，所以不须去除和再生出细胞壁。（1 1）离心、振动、电激等物理方法；）离心、振动、电激等物理方法；）离心、振动、电激等物理方法；）离心、振动、电激等物理方法；PEGPEG等化学方法。等化学方法。等化学方法。等化学方法。（2 2）除上述方法外，还可以利用灭活的病毒（生物方法）进行诱导。）除上述方法外，还可以利用灭活的病毒（生物方法）进行诱导。）除

11、上述方法外，还可以利用灭活的病毒（生物方法）进行诱导。）除上述方法外，还可以利用灭活的病毒（生物方法）进行诱导。相同，都是细胞膜的流动性。相同，都是细胞膜的流动性。病毒一般对生物体是有伤害的。病毒一般对生物体是有伤害的。病毒一般对生物体是有伤害的。病毒一般对生物体是有伤害的。仙台病毒仙台病毒仙台病毒仙台病毒物理或物理或物理或物理或化学方法化学方法化学方法化学方法丧失感染活性丧失感染活性丧失感染活性丧失感染活性保留融合活性保留融合活性保留融合活性保留融合活性突破了有性杂交方法的局限，使远源杂交成为可能。突破了有性杂交方法的局限，使远源杂交成为可能。第11页，本讲稿共27页 动物细胞融合的概念动物

12、细胞融合的概念 动物细胞融合也称细胞杂交，是动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞形成一个细指两个或多个动物细胞形成一个细胞的过程胞的过程动物细胞融合动物细胞融合融合后形成的融合后形成的单核单核细胞称为细胞称为杂交杂交细胞细胞第12页，本讲稿共27页动物细胞融合动物细胞融合杂种细胞杂种细胞愈伤组织愈伤组织杂种植株杂种植株植物细胞植物细胞A植物细胞植物细胞B 原生质体原生质体A原生质体原生质体B植物体细胞杂交植物体细胞杂交去壁去壁融合融合组培组培物理法物理法化学法化学法生物法：生物法：灭活的病毒灭活的病毒动物细胞动物细胞A动物细胞动物细胞B杂种细胞杂种细胞第13页，本讲稿共27页动物细

13、胞融合与植物体细胞杂交动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较：的比较：比较比较项目项目细胞融合细胞融合的原理的原理细胞融合细胞融合的方法的方法诱导手段诱导手段用法用法植物植物体细体细胞杂胞杂交交细胞膜的流细胞膜的流动性动性去壁后诱导去壁后诱导原生质体融原生质体融合合物理法（离物理法（离心、振动、心、振动、电激）化学电激）化学法（聚乙二法（聚乙二醇醇获得获得杂种杂种植株植株动物动物细胞细胞融合融合细胞膜的流细胞膜的流动性动性使细胞分散使细胞分散后诱导细胞后诱导细胞融合融合除以上方法，除以上方法，还有生物法还有生物法制备制备单克单克隆抗隆抗体体第14页，本讲稿共27页1.1.抗体是由何种细胞产生的？抗

14、体是由何种细胞产生的？2.2.抗体是如何产生的？抗体是如何产生的？单克隆抗体单克隆抗体第15页，本讲稿共27页产量少、纯度低、特异性差产量少、纯度低、特异性差单克隆抗体单克隆抗体、传统制备抗体的缺点是？如何、传统制备抗体的缺点是？如何改进改进？3 3、传统制备抗体的方法是？、传统制备抗体的方法是？第16页，本讲稿共27页B淋巴细胞淋巴细胞v动物在免疫过程中产生的抗体种类可达百动物在免疫过程中产生的抗体种类可达百万种万种v每一个淋巴细胞只分泌一种特异性抗体每一个淋巴细胞只分泌一种特异性抗体但是：但是：一个一个B淋巴细胞在体外不能无限增殖淋巴细胞在体外不能无限增殖.第17页，本讲稿共27页、如何获

15、得化学性质单一、特异性强的抗体？、如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？单克隆抗体单克隆抗体问题讨论问题讨论提示：提示：1.1.什么样的细胞可以产生抗体？什么样的细胞可以产生抗体？2.2.什么样的细胞可以无限增殖？什么样的细胞可以无限增殖？、瘤细胞和癌细胞有何区别？、瘤细胞和癌细胞有何区别？共同点：两者都有无限增殖的能力共同点：两者都有无限增殖的能力不同点：瘤细胞不能转移不同点：瘤细胞不能转移第18页，本讲稿共27页设计方案：设计方案：一个一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体淋巴细胞只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖小鼠骨髓瘤细胞能无限增殖杂种细胞杂种细胞单克隆抗体单克隆抗体第19页，

16、本讲稿共27页动物细胞动物细胞A动物细胞动物细胞B杂种细胞杂种细胞用动物细胞融合的方法制备单克隆抗体用动物细胞融合的方法制备单克隆抗体试一试试一试聚乙二醇或灭活的病毒聚乙二醇或灭活的病毒杂交瘤细胞杂交瘤细胞细胞培养细胞培养提取抗体提取抗体效应细胞效应细胞肿瘤细胞肿瘤细胞第20页，本讲稿共27页单单克克隆隆抗抗体体制制备备过过程程示示意意图图第21页，本讲稿共27页 注意：注意：对小鼠做何处理？对小鼠做何处理？细胞融合后，培养液中共有几种细胞？细胞融合后，培养液中共有几种细胞？有几种融合细胞？有几种融合细胞？杂交瘤细胞的特点：既能大量杂交瘤细胞的特点：既能大量 ，又能产生又能产生 。注射特定的抗

17、原蛋白注射特定的抗原蛋白五种（五种（B淋巴细胞、骨髓瘤细胞、淋巴细胞、骨髓瘤细胞、B-B、骨骨、杂交瘤细胞）、骨骨、杂交瘤细胞）其中三种融合细胞。其中三种融合细胞。繁殖繁殖专一的抗体专一的抗体第22页，本讲稿共27页诊断疾病诊断疾病（识别作用，如（识别作用，如同位素标记单克隆抗体，同位素标记单克隆抗体，可诊断肿瘤、心血管畸形可诊断肿瘤、心血管畸形等）等）单克隆抗体的应用单克隆抗体的应用优点：优点：准确、高效、简易、快速准确、高效、简易、快速用于治疗疾病和运载药物（用于治疗疾病和运载药物（主主要用于癌症治疗，也可运载药物，要用于癌症治疗，也可运载药物，如如“生物导弹生物导弹”）（导向作用，导向作

18、用，作为载体，作为载体，生物导弹生物导弹=单单克隆抗体克隆抗体+药物，药物，治疗肿瘤）治疗肿瘤）（位置准确、疗效高、副作用小）（位置准确、疗效高、副作用小）（位置准确、疗效高、副作用小）（位置准确、疗效高、副作用小）返 回第23页，本讲稿共27页v1、从母羊甲的体细胞中取出细胞核，注入到母羊乙去掉核、从母羊甲的体细胞中取出细胞核，注入到母羊乙去掉核的卵细胞中，融合后的细胞经卵裂形成早期胚胎，再植入的卵细胞中，融合后的细胞经卵裂形成早期胚胎，再植入到另一只母羊丙的子宫内，出生小羊的大多数性状到另一只母羊丙的子宫内，出生小羊的大多数性状()A.难以预测难以预测B.像甲像甲C.像乙像乙D.像丙像丙v

19、2（2004年，全国）用动物细胞工程技术获取单克隆抗年，全国）用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（体，下列实验步骤中错误的是（）vA将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细淋巴细胞胞vB用纤维素酶处理用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞vC用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合与小鼠骨髓瘤细胞融合vD筛选杂交资金积累细胞，并从中选出能产生所需抗筛选杂交资金积累细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体体的细胞群，培养

20、后提取单克隆抗体BB第24页，本讲稿共27页v3.动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（）v诱导融合的方法完全相同诱导融合的方法完全相同所用的技术手段不相同所用的技术手段不相同所采用的原理完全相同所采用的原理完全相同都能形成杂种细胞都能形成杂种细胞vA.B.C.D.v4.单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（种培养基上不能存活增殖的细胞是（）v淋巴细胞淋巴细胞小鼠骨

21、髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞B淋巴细胞自淋巴细胞自身融合细胞身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞vABvCD CA第25页，本讲稿共27页创新应用训练创新应用训练5右图为某同学根据杂交瘤技右图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。据图回答：菌抗体的实验方案。据图回答：（1）该方案能达到预期）该方案能达到预期效果吗？效果吗？。原因是。原因是 。（2）图中）图中为为过程，过程，常用常用作为诱导剂。该作为诱导剂。该细胞继承了细胞继承了 ，因此不仅能分泌因此不仅能分泌 ，还有还有 本领。本领。（3）该方案的

22、目的是）该方案的目的是。不能不能 没有将抗原注入小鼠体内，无法获得没有将抗原注入小鼠体内，无法获得产生单一抗体的产生单一抗体的B淋巴细胞淋巴细胞.细胞融合细胞融合 灭活病毒灭活病毒 双亲细胞的遗传物质双亲细胞的遗传物质 特异性抗体特异性抗体 在体外培养条件下大量增殖在体外培养条件下大量增殖 制备单克制备单克隆抗体隆抗体 返返回回第26页，本讲稿共27页课堂小结课堂小结两个过程两个过程动物细胞培养过程动物细胞培养过程单克隆抗体制备过程单克隆抗体制备过程三个三个“一一”一个诱导细胞融合的新方法一个诱导细胞融合的新方法 灭活病毒灭活病毒一个新细胞一个新细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞一个优势一个优势单克隆抗体特异性单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势强、灵敏度高的优势第27页，本讲稿共27页